初始污染菌检验规程知识讲解

成品初始污染菌检测操作规程1、目的：对产品初始污染菌检测的方法做出指导，正确操作以保证实验结果的可靠性和准确性。

检验依据：GB/T 19973.1 EN ISO 11737-12、试用范围：用于检测产品的成品、半成品、部件、原材料、及其内包装袋上的活菌数。

3、职责：实验室操作人员负责操作。

4、试验前准备4.1 按包装说明营养琼脂培养基的配制；4.2与供试液接触的所有器具及制备好的营养琼脂培养基一并放入高压蒸汽灭菌器115℃持续30min,待灭菌器冷却后连同抽取的供试品一并放入无菌室内,启动工作台风机,开紫外线灯30min.5.供试液制备及接种5.1内腔供试液制备：气管插管、喉罩气道导管、鼻氧管、呼吸回路管等管路：在无菌条件下向每套管路的内腔注入浸提介质各20ml,作为供试液,反复荡洗5次,然后将每套管路内腔内的供试液汇集到一无菌具塞试剂瓶内,待混匀后在从瓶内各抽取1ml供试液分别加入10个无菌的空平皿内,最后在将灭了菌凉至45℃的熔化营养琼脂培养基倾注于已加入供试液的平皿中,每平皿中加入培养基量为15-20ml。

作为1：1的供试液。

注气筒：每支注射器抽取灭菌生理盐水至公称容量，振摇5次，汇集到一无菌具塞试剂瓶内,待混匀后在从瓶内各抽取1ml供试液分别加入10个无菌的空平皿内,最后在将灭了菌凉至45℃的熔化营养琼脂培养基倾注于已加入供试液的平皿中,每平皿中加入培养基量为15-20ml。

作为1：1的供试液。

5.2外部供试液制备：按产品外表面积每10cm2用1mL的灭菌生理盐水冲洗，作为1：1的供试液。

用棉拭子在待检产品表面往返涂抹10次后，将棉试子放入10ml灭菌生理盐水的试管中,将试管震打80次混匀作为供试液,然后再分别取1ml供试液放入2个无菌的空平皿内,最后在将灭了菌凉至45℃的熔化营养琼脂培养基倾注于已加入供试液的平皿中,每平皿中加入培养基量为15-20ml.将所取10套供试品分别按上述方法进行供试液制备及接种。

初始污染菌检验规程初始污染菌检验规程1、准备工作1）与供试液接触的所有器具应采用可靠方法灭菌，置压力蒸汽灭菌器内121℃30min。

2）采样数量：每批产品随机抽取10件样品.3）检测标准《GB 15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准》：≤100cfu/件次。

4）洗脱液、稀释液采用0.9％无菌氯化钠溶液。

2、试验步骤：1）用无菌手续取出10个样品，分别放入10支装有10ml0.9％无菌氯化钠溶液的试管中，将每个采样管震打80次，混匀，分别吸取1ml放入灭菌平皿，用普通琼脂培养基作倾注培养，置37℃温箱培养48±2h观察结果。

2）用肉眼直接计数，然后用5-10倍放大镜检查，有否遗漏。

若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辩时仍以2个或2个以上菌落计数。

3）计算公式为：菌数/件次=平均菌数×稀释倍数/件次。

阴性对照试验：将使用的0.9％无菌氯化钠溶液吸取1ml放入无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。

制备2个平板均不得有菌生长。

3、注意事项：1）在无菌操作台上做试验，防止环境对样品的再次污染，采取一切措施防止人为对样本的污染。

2）由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀的区别，必要时用显微镜鉴别。

编制：审核：批准：ZC-14-8初始污染菌监测操作规程1范围适用于对刚包装好的外科手套和检查手套的初始污染菌的监测和对新购进的小包装（接触手套的小包装）的监测。

第一个月每周进行一次监测，如果监测结果是稳定的以后每个月监测一次，如果3个月都稳定，监测周期改为每季度一次。

2职责质管部负责取样、按ISO 11737进行试验、如试验结果初始污染菌超过6 cfu/cm2,要及时查找原因，提出改进措施，包括工艺中产品防护和进行环境消毒。

3生物负载测定方法A.1概要A.1.1生物负载测定，可使用不同的方法内容。

初始污染菌检测指导书一、引言在日常生活和工业生产中，微生物污染是一个不可忽视的问题。

特别是在食品加工、制药、卫生保健和医疗设施等领域，微生物污染可能对人体健康造成严重影响。

因此，对于这些领域中的设施和设备进行初始污染菌检测至关重要。

本指导书旨在提供一份详细的指南，以帮助进行有效的初始污染菌检测。

二、定义1. 初始污染菌：指在设施和设备投入使用之前，存在于环境中的微生物菌群，可能对人体健康产生影响的细菌、真菌、病毒等。

2. 初始污染菌检测：是通过采集、分离和鉴定设施和设备表面的微生物来评估其是否受到初始污染的检测方法。

三、初始污染菌检测的步骤1. 准备工作在进行初始污染菌检测之前，需要做好以下准备工作：- 确定检测的目标区域：根据需要，确定需要检测的设施和设备区域。

- 收集必要的工具和材料：包括培养基、采样棉签、橡胶手套、消毒剂等。

- 清洁检测区域：确保待检测的区域清洁整齐，以减少外界污染的干扰。

2. 采样- 选择合适的采样方法：根据不同的设施和设备，选择合适的采样方法，常见的包括印迹法、刷子法、划线法等。

- 采样过程中的注意事项：确保采样过程中的卫生条件，佩戴橡胶手套，并在每个采样点上更换新的采样棉签，以避免交叉污染。

- 采样点的选择：根据设施和设备的特点，选择具有代表性的采样点，如接触频繁的表面、接口和难以清洁的区域。

3. 分离与鉴定- 样品处理：将采集到的样品，按照合适的程序进行处理，包括加入适量的培养基，进行可行菌总数的分析。

- 培养与鉴定：将样品在适当的温度和湿度条件下进行培养，待细菌或真菌生长形成菌落后，再通过各种常见鉴定方法（如形态学观察、生化试验、分子生物学技术等）来鉴定菌落的种类。

- 数据记录与分析：将分离鉴定得到的数据记录下来，进行统计和分析，了解初始污染的菌群组成和水平。

四、初始污染菌检测结果的评估与应对1. 结果评估根据初始污染菌检测结果，可以对设施和设备的初始污染情况进行评估。

初始污染菌检测指导书
一、引言
污染菌是指存在于环境中、能够引起食品、水、土壤等特定物质污染的微生物菌种。

这些污染菌对人类健康和环境质量构成潜在威胁。

为了保障公众健康和环境平安，进行初始污染菌检测是必要的。

二、目的
本指导书的目的是提供一个简明的初始污染菌检测流程，以确保检测结果的准确性和可靠性。

通过采用合理的检测方法和技术，有助于及早发现并控制可能存在的污染源，以保护公众的健康和环境的可持续发展。

三、检测方法
1. 样品采集
a. 样品采集前，请确保操作者严格遵守个人卫生要求，包括洗手、穿戴一次性手套等，并准备好干净的采样容器。

b. 根据具体的检测目的和样品类型，选择合适的采集方法。

例如，对于食品样品，可以使用无菌勺子、无菌容器等进行采集。

c. 采集样品时，应避免污染，尽量避免触摸容器内壁，同时避免与外界环境接触。

2. 样品处理和制备
a. 样品采集后，尽快将样品送至实验室进行处理和制备。

b. 根据具体的检测要求，进行样品的预处理，如去除杂质、负离子等。

c. 样品制备过程中，请注意避免交叉污染，使用一次性无菌工具、器皿等进行操作。

3. 检测方法选择
a. 根据检测目标，选择适当的检测方法。

常见的初始污染菌检测方法包括培养法、荧光定量PCR法等。

b. 对于食品等需要进行快速检测的样品，可以选择快速检测方法，如基于抗原-抗体反应原理的快速检测方法等。

初始污染菌检验规程
背景介绍：
在实验室实验过程中，初始污染菌检验是非常重要的步骤。

初始污染菌指的是
空气、水、试剂或其他材料中存在的微生物。

检验规程的制定能够帮助实验室准确检测和控制初始污染菌的存在，确保实验结果的准确性和可靠性。

检验标准：
初始污染菌检验应符合国家相关标准要求，例如《实验室建设与管理规范》中
对于实验室环境洁净度的规定。

检验过程中应注意保持环境清洁，严格按照检验程序进行操作，确保检测结果的准确性。

检验步骤：
1.准备工作：检验前应检查所需试剂、工具和设备是否齐全，确保实
验室环境干净整洁。

2.取样：根据检验对象的不同，采取相应的取样方法，避免外界污染
的介入。

3.样品处理：对样品进行适当处理，如过滤、稀释等，以便得到合适
的实验样品。

4.培养：将样品接种在适当的培养基上，并在合适的环境条件下培养，
观察细菌的生长情况。

5.检测分析：通过显微镜观察细菌的形态特征，或进行生物学、生化
等相关检测，确定是否存在初始污染菌。

6.记录结果：将检验结果详细记录，包括检测方法、结果数据、存在
问题等，便于回顾和分析。

结论与建议：
初始污染菌检验是确保实验室环境洁净度和实验结果准确性的重要步骤。

在检
验过程中，应严格按照规程操作，保持实验样品的完整性和准确性。

实验室应建立健全的质量管理体系，加强对初始污染菌的监测和控制，不断优化检验方法，提高检测效率和准确性，确保实验室的质量与信誉。

初始污染菌检验操作规程1.目的测定样品细菌总数可用来判明样品细菌污染的程度，以及生产单位工具设备、工艺流程、生产人员的卫生状况，是对样品进行卫生学评价的综合依据，确定灭菌前产品中微生物的数量和性质，为下一步灭菌提供参考依据。

2.适用范围适用于所有需要消毒灭菌前的产品、洁净车间3．作业条件：3.1无菌检测在洁净度为100级单向流空气区域内进行，严格遵守无菌操作，避免污染。

3.2超净台及工作台面，必须进行洁净度验证。

4．作业方法与步骤4．1制作营养琼脂培养基（参见《培养基制作作业指导书》），培养基需按要求培养16-18H 后，检查无菌生长方可使用。

4．2无菌室洁净度验证4．2．1取3只培养皿在超净工作台平均位置打开上盖，暴露30min后盖好置30～35℃培养48h后检查，3只培养皿上生长的菌落数平均应不超过1个4．3产品采集与样品处理（制备供试液）4.3.1用无菌手续称取10g可以破坏性类供试品,放入100ml灭菌生理盐水中充分振荡，保温于45℃水浴中5～10min，不时振摇。

作为1：10供试液。

4.3.2对供试品不能采用破坏性取样可用浸有无菌生理盐水拭子涂抹采样，被采表面积100cm2.加入灭菌生理盐水100ml。

保温于45℃水浴中5～10min，不时振摇。

作为1：10的供试液。

4.3.3采样数量：各类产品每批随机抽取10件样品。

4.3.4供试液10倍递减稀释4.3.5待上述供试液自然沉降后取上清液1ml，加入9ml生理盐水，制备1：100的供试液。

制备过程中尽量避免碎片等杂物的混入。

4.4接种检验4.4.1取上述供试液上清液作初始污染菌数检测，取4个培养皿，每个稀释级各吸取1ml至每个灭菌平皿，每个稀释级注2个平皿。

4.4.2经灭菌完毕的营养琼脂培养基冷却至45-50 ℃时，倾注上述各个平皿15ml，另倾注一个不加样品灭菌空平皿作空白对照。

以顺时针或逆时针方向快速转动平皿，使供试液与培养基充分混匀。