真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒(显色法)产品技术要求kehe

1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒，人ELISA试剂盒说明书1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒，人ELISA试剂盒说明书供应商：上海乔羽生物有限公司ELISA试剂盒规格：(1) 规格：96T 可以测90个样，5个标准孔，1个空白孔(2) 规格：48T 可以测42个样，5个标准孔，1个空白孔1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒，人ELISA试剂盒说明书calculation：The standard concentration as the abscissa, the OD value for the vertical, draw the standard curve on coordinate paper, according to the sample OD value by standardThe calculation value of the linear regression equation of the corresponding concentration curve, multiplied by the dilution factor, or the standard concentration and the standard valueThe value of the curve in the sample is in the equation, the sample density is calculated, and the dilution factor is the actual concentration of the sample.1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒，人ELISA试剂盒说明书试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存elisa试剂盒价格，elisa试剂盒说明书，elisa检测试剂盒1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒，人ELISA试剂盒说明书试剂的准备：按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。

1.1包装规格：12人份/盒1.2主要组成成分：校准曲线：二维码。

质控范围批特异，详见标签。

2.1外观试剂盒完整无破损，试剂盒内各组分齐全、无破损、渗透；盒上印刷的标识以及瓶签、盒签上的字迹清晰完整，易识别。

2.2装量试剂盒的液体试剂净含量应不低于标示量。

2.3溯源性根据GB/T21415规定了校准曲线的溯源过程，溯源至企业工作校准品。

2.4准确度回收率应在80%～120%的范围内。

2.5检出限检出限应不高于40pg/mL。

2.6线性试剂盒在浓度为[50,50000]pg/mL的线性范围内，相关系数（r）应不低于0.9900。

2.7重复性测定高、低两个浓度水平的样本，测定结果的变异系数CV（％）值应不大于10%。

2.8特异性与浓度分别为50ng/mL的曲霉菌半乳甘露聚糖、念珠菌甘露聚糖、革兰阴性菌脂多糖均无交叉反应，检测结果均应不超过检出限。

2.9批间差用3个不同批号的试剂盒分别检测两个浓度水平的样本，3个批次试剂盒之间的批间变异系数CV（％）应不大于15％。

2.10质控品赋值有效性重复测定试剂盒内质控品各3次，每次测定结果均应在质控品测定值允许的范围内。

2.11质控品批内瓶间差取同一批号10支质控冻干品进行检测，所有瓶内重复性检测结果的变异系数CV（%）值应不大于10%。

2.12稳定性2.12.1效期稳定性试剂盒按要求在2℃～8℃放置，有效期12个月，取效期末的试剂盒进行检测，各项指标仍符合2.4～2.8的要求。

2.12.2质控品复溶稳定性质控品溶解后置2℃～8℃保存14天后，取质控品进行检测，结果应符合2.10、2.11的要求。

声明本产品属精密光学仪器，在日常使用中，应严格按照我公司出具的操作流程进行试验操作，并确保工作环境正常。

本试验的操作者必须为经我公司培训合格的微生物实验室检验人员，如需更换操作者，请做好交接工作，确保新的操作者了解仪器特性、熟悉操作流程。

为避免试验结果不准确，请操作者认真阅读操作注意事项及操作流程，并严格遵守。

如有任何疑问，请联系我公司售后服务部。

售后服务部电话：400-811-9958北京金山川科技发展有限公司真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定1.目的建立真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测标准操作规范，保证实验结果的准确性。

2.授权操作人经培训合格的微生物实验室检验人员。

3.实验原理（1-3）-β-D葡聚糖检测原理：真菌（1-3）-β-D葡聚糖激活酶反应主剂中的G因子后形成凝固蛋白，根据其所引起的浊度变化对真菌（1-3）-β-D葡聚糖浓度进行定量测定。

（1-3） -D-Glucan活化因子G 因子G凝固酶原凝固酶凝固蛋白原凝固蛋白（凝胶）4．产品性能指标4.1 灵敏度最小检出值5pg/ml5．实验组成5.1实验仪器及器具：MB-80微生物快速动态检测系统、洁净工作台、低速离心机、恒温仪， 20~200ul 加样器、100~1000ul加样器、旋涡混合器、定时器。

5.2实验耗材：200ul无热原吸头、1000ul无热原吸头、无热原平底试管、无热原真空采血管。

5.3试剂盒组成：真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测试剂盒（光度法）：试剂盒包括反应主剂和样品处理液。

6．工作环境相对湿度：20%~80%；温度控制：10~30℃；电源电压：220V±10%，50Hz±2%。

7．标本采集、处理及保存7.1检测样本：血液、肺泡盥洗液、胸腔积液、腹水、脑脊液、尿液（无菌取中段尿或穿刺尿）7.2采集要求：采样过程要求无菌操作，用专用的无热原真空采血管（肝素类抗凝）。

常规病人早上用药治疗前空腹采血/取样（血透患者透析前采血）。

真菌(1-3)- -D 葡聚糖检测反应机理目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用, 其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势, 而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低, 且检测周期长, 不能适应临床治疗诊断的要求, 因此迫切需要快速、准确的检测方法. 因此对血液中的早期(1-3)- -D 葡聚糖快速定量检测, 将对临床对症治疗具有很深的现实意义。

人体血浆中(1-3)- -D 葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。

该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)- -D 葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应, 通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)- -D 葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测, 将对临床对症治疗具有很深的现实意义。

人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。

反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶, 通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。

在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。

早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。

早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。

真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒（显色法）适用范围：用于体外定量测定人血清样本中真菌(1-3)-β-D葡聚糖的含量。

1.1 规格24人份/盒、48人份/盒1.2 主要组成成分校准品靶值批特异，详见靶值单质控范围批特异，详见靶值单2.1 外观反应主剂为白色冻干块状物，样品处理液、溶解液和主剂复溶液为无色透明液体。

2.2 装量处理液、溶解液和主剂复溶液装量不小于标示量。

2.3 准确度试剂盒的回收率须在85%～115%范围内。

2.4 重复性检测浓度为125pg/mL的溶液，重复检测10次，其变异系数（CV）值应不大于10％。

2.5 线性2.5.1在浓度[31.25,500]pg/mL范围内，其线性相关系数的绝对值r≥0.990;2.5.2在浓度[31.25 ,125）pg/mL范围内，其线性绝对偏差的绝对值不大于12.5 pg/mL；在浓度[125 ,500]pg/mL范围内，其线性相对偏差的绝对值不大于10%。

2.6 空白限试剂盒的空白限不大于16 pg/mL。

2.7 溯源性根据GB/T21415的有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定等内容，溯源至企业工作校准品。

2.8 质控品赋值有效性检测质控品，检测结果应在质控范围内。

2.9 批内瓶间差同一批号的10个待检试剂盒对浓度为250pg/mL的标准溶液进行测试，重复10次，瓶间差的变异系数不得大于10%。

2.10 批间差3个批号的试剂盒检测结果的变异系数应不大于15％。

2.11 稳定性2.11.1 2℃～8℃保存，有效期12个月，取过有效期3个月以内的试剂盒进行测定，应符合2.3、2.3、2.5、2.6、2.7、2.8的要求；2.11.2校准品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.3的要求；2.11.3质控品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.8的要求；2.11.4反应主剂溶解后，立即冻存至-20℃保存7天后进行测定，应符合2.3、2.5的要求。

真菌（1-3）-β-D-葡聚糖质控品
适用范围：与本公司生产的真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测试剂盒配套使用，用于真菌检测项目的室内质量控制。

1.1 产品规格：
16测试/盒
1.2 划分说明
本公司产品16测试/盒是根据试剂盒内质控冻干品的数量和可测试的数量而定，每盒共4支质控冻干品，每支质控冻干品复溶后可以测试4次。

1.3 主要组成成分
目标靶点浓度范围：160-420pg/mL；复溶体积和质控范围见外包装盒；不同批号试剂盒中各组分不可以互换。

2.1 外观
包装盒完整无破损，试剂盒内各组分无破损、渗透；盒上印刷的标识以及瓶签、盒签上的字迹清晰完整，易识别；质控品为淡黄色至白色冻干品，质控品溶解液为无色透明液体。

2.2 装量
试剂盒的液体试剂净含量应不低于标示值。

2.3 质控品赋值有效性
检测结果应在质控范围内。

2.4 均一性
检测结果的变异系数CV（%）值应不大于15%。

2.5 稳定性
试剂盒2-8℃储存有效期36个月，贮存期末的分析性能应符合2.3-2.4的要求。

附件25真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定试剂注册审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定（Fungus（1-3）-β-D-glucan）试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。

本指导原则是对真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中的具体内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特征对注册申报资料的内容进行充实和细化。

本指导原则是供申请人和审查人员适用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。

应在遵循相关法规、国家标准、行业标准的前提下使用本指导原则。

本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。

一、适用范围本指导原则适用于以分光光度法体外定量测定人血清、血浆样本中真菌（1-3）-β-D葡聚糖浓度的试剂盒。

本指导原则不适用于：1.拟用于单独销售的真菌（1-3）-β-D葡聚糖校准品和真菌（1-3）-β-D葡聚糖质控品；2.化学发光等免疫法的真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定试剂。

3.定性检测试剂可参照本指导原则中的适用部分。

二、注册审查要点（一）监管信息应按《体外诊断试剂注册申报资料要求及说明》的要求提交申请表、术语缩写词列表、产品列表、关联文件、申报前与监管机构的联系情况和沟通记录、符合性声明以及其它相关信息。

1.产品名称产品名称一般由三部分组成。

第一部分：被测物名称；第二部分：用途，如测定试剂盒；第三部分：方法或者原理，如显色法等，本部分应当在括号中列出。

2.分类依据根据《体外诊断试剂分类子目录》，真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定试剂管理类别为二类，分类编码为6840。

真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测试剂盒（光度法）适用范围：与本公司生产的微生物快速动态检测系统配套使用，用于体外定量测定人血清中真菌(1-3)-β-D 葡聚糖的含量。

1.1 产品规格GKT-1M：20人份/盒；GKT-5M：50人份/盒；GKT-10M：50人份/盒；GKT-20M：60人份/盒。

1.2 主要组成成分GKT-1MGKT-5MGKT-10MGKT-20M2.1 外观反应主剂为白色冻干粉末，样品处理液为无色透明液体，反应主剂溶解液为无色透明液体。

2.2装量样品处理液为0.9ml/支；GKT-5M反应主剂溶解液0.6ml/支；GKT-10M反应主剂溶解液为1.2ml/支；GKT-20M反应主剂溶解液为2.4ml/支，其中装量不小于标称值。

2.3 准确性试剂盒对真菌（1-3）-b-D葡聚糖的回收率为75％～125％。

2.4 重复性试剂盒重复检测结果的CV（％）值应不大于10％。

2.5线性在浓度1 pg/ml～625 pg/ml范围内，其线性相关系数的绝对值r≥0.980，在1 pg/ml～93.75 pg/ml范围内，绝对偏差为±14.06pg/ml；在93.75pg/ml～625 pg/ml范围内，相对偏差≤15%。

2.6空白检测限真菌（1-3）-b-D葡聚糖浓度的空白检测限为1pg/ml。

2.7反应特征曲线反应主剂的特征反应曲线应为近似直线的反S形。

2.8原始吸光度酶反应主剂以适当水稀释后，在（270±5）nm波长处应有单一吸收峰。

2.9批间差不同批号的试剂盒检测结果的相对偏差应不大于10％。

2.10稳定性试剂盒2-8℃储存有效期36个月，贮存期末的分析性能应符合2.1～2.8的要求。

2.11特异性浓度为100pg/ml革兰阴性菌脂多糖溶液，对（1-3）-b-D葡聚糖检测结果的交叉反应率不大于2%。

附1真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测标准操作规程1.目的规范真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测的操作规程，保证结果准确性。

2.原理实验条件下，来源于某些真菌细胞壁的(1-3)-β-D葡聚糖能够特异性地激活本试剂盒反应试剂的酶促凝集系统，使反应溶液的透光度发生变化。

利用(1-3)- β-D葡聚糖标准品建立β-D-葡聚糖生物效应与透光度变化关系的标准曲线，便可定量地测定人血液的(1-3)- β-D葡聚糖含量。

3.试剂真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测试剂盒，湛江安度斯生物有限公司。

试剂盒包装规格：20人份/盒。

复溶后的试剂溶液应在10分钟内使用。

若当次试验有剩余，可将剩余的试剂溶液置-20℃以下冷冻保存，一周内使用。

不能反复冻融试剂溶液。

4.检测设备：LKM动态试管检测仪。

5.实验用具：250 μl无热原吸头、20-200 μl移液器、75℃试管恒温仪、旋涡混合器、塑料试管架、无热原真空采血管（肝素抗凝剂）。

6.标本采集及送检要求6.1标本采集要求6.1.1采集过程要求无菌操作，用指定的肝素类抗凝、无菌、无β葡聚糖采血管；6.1.2常规住院病人早上用药前空腹采血，血透患者透析前采血。

6.2标本的送检和保存要求标本采集后应在半小时内离心，4小时内检测完。

若当日不能及时检测的标本应将离心后的血浆转移至无β葡聚糖的容器内-20℃以下冷冻保存，一周内使用。

7.实验操作7.1在试验开始前，先开启LKM动态试管检测仪，预热，一段时间后发出哔的一声，试管仪温度达到37℃，待用；7.2取本试剂盒所配的无热原真空采血管取受试者静脉血1～2 ml，以400 g离心10分钟；7.3取富含血小板的血浆100 μl，加到样品稀释瓶中，在旋涡混合器上轻轻混匀，然后插入75℃试管恒温仪中加热10分钟；7.4加热10分钟后，将样品稀释瓶从75℃试管恒温仪中取出，使其降至室温即可，即为1:10稀释的样品供试溶液；7.5取β-G试剂1支，开启；7.6取β-G试剂复溶液1支，开启后用移液器取0.25 ml加入β-G试剂中，轻轻摇匀，澄清后得试剂溶液备用；7.7打开检测软件连接LKM动态试管检测仪，进入临床检查采集数据界面，点击“开始”按钮，使检测软件进入待采集状态；7.8取本试剂盒所配的专用反应试管，先取已制备好的样品供试溶液100 μl加入反应试管中，然后加入50 μl试剂溶液，每个样品供试品溶液平行两管；7.9加样完毕，依次拿起试管在旋涡混合器上轻点一下，使试管中的溶液均匀混合，然后把各试管逐一插到LKM动态试管仪中，反应开始，37℃反应75分钟，在反应结束前填写试验相关的信息；7.10反应完毕，检测软件将自动处理数据，计算出样品供试溶液中的（1-3）-β-G葡聚糖测量值，进入“临床检查数据报告”可查看检验结果，进入“临床检查数据分析”可查看反应曲线。

真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定规范操作1.目的建立真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测标准操作规范，保证实验结果的准确性。

2.授权操作人经培训合格的微生物实验室检验人员。

3.实验原理（1-3）-β-D葡聚糖检测原理：真菌（1-3）-β-D葡聚糖激活酶反应主剂中的G因子后形成凝固蛋白，根据其所引起的浊度变化对真菌（1-3）-β-D葡聚糖浓度进行定量测定。

4．产品性能指标4.1 灵敏度10pg/ml4.2 精密度批间CV≤10% 。

4.3 准确性回收率75-125%。

4.4 标准曲线相关系数r绝对值≥0.9805．实验组成5.1实验仪器及器具：MB-80微生物快速动态检测系统、洁净工作台、低速离心机、恒温仪，20~200µl加样器、100~1000µl加样器、旋涡混合器、定时器。

5.2实验耗材：200µl无热原吸头、1000µl无热原吸头、无热原平底试管、无热原真空采血管。

5.3试剂盒组成：真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测试剂盒（光度法）：试剂盒包括反应主剂和样品处理液。

6．工作环境相对湿度：20%~80%；温度控制：10~30℃；电源电压：220V±10%，50Hz±2%。

7．标本采集及保存7. 1检测样本：血液、脑脊液、胸腹水、肺泡灌洗液等。

7.2采集要求：采样过程要求无菌操作，用专用的无热原真空采血管（肝素类抗凝）。

常规病人早上用药治疗前采血/取样（血透患者透析前采血）。

7.3样本保存：样本采集后应在3000转/分进行离心，若不能及时检测，应将血浆转移至无热原转移管内，在-20℃冰箱中冷冻保存，一周内使用。

8．操作程序8.1 打开MB-80微生物快速动态检测系统主机、电脑及恒温仪预热30min。

8.2 打开MB-80微生物快速动态检测系统软件，录入病人信息、样本种类及检测项目等信息后点击采集。

8.3 血液前处理过程，无菌操作，用专用无热原真空采血管（肝素类抗凝）抽取静脉血4ml轻轻混匀，按转速3000r/min进行离心1分钟，得到富含血小板血浆。

2 .
2.1外观与性状
目测检查，试剂盒包装与内部组分应完整无损，反橱璃羯审跳书繭待 、注册专用章7
2.2检测范围
试剂盒的线性检测范围应为10-10000pg/ml,其相关系数I r 丨>0.98 =
2.3分析灵敏度
试剂盒最低检测限应为10 pg/m 1。

2.4分析特异性
制剂：处理液均为无色透明液体，无沉淀和悬浮物。

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试剂盒对含浓度为5EU/m】的内毒素标准样应无干扰: 2.5测定准确性
试剂盒的平均回收率应为80%-120% =
2.6批内不精密度
同批试剂盒对同一标本进行检测，CV<10%o
2.7批间不精密度
连续三批试剂盒对同一标本进行检测，CVW10%。

附1真菌(1-3）—β-D葡聚糖检测标准操作规程1.目的规范真菌（1-3)-β-D葡聚糖检测的操作规程,保证结果准确性.2.原理实验条件下，来源于某些真菌细胞壁的(1—3)-β-D葡聚糖能够特异性地激活本试剂盒反应试剂的酶促凝集系统，使反应溶液的透光度发生变化。

利用（1—3)—β-D葡聚糖标准品建立β—D—葡聚糖生物效应与透光度变化关系的标准曲线，便可定量地测定人血液的(1—3)- β—D葡聚糖含量。

3.试剂真菌（1-3)-β—D葡聚糖检测试剂盒,湛江安度斯生物有限公司。

试剂盒包装规格：20人份/盒。

复溶后的试剂溶液应在10分钟内使用。

若当次试验有剩余，可将剩余的试剂溶液置-20℃以下冷冻保存，一周内使用.不能反复冻融试剂溶液。

4.检测设备: LKM动态试管检测仪。

5.实验用具：250 μl无热原吸头、20—200 μl移液器、75℃试管恒温仪、旋涡混合器、塑料试管架、无热原真空采血管（肝素抗凝剂)。

6.标本采集及送检要求6.1标本采集要求6.1.1采集过程要求无菌操作，用指定的肝素类抗凝、无菌、无β葡聚糖采血管;6.1.2常规住院病人早上用药前空腹采血，血透患者透析前采血.6.2标本的送检和保存要求标本采集后应在半小时内离心,4小时内检测完。

若当日不能及时检测的标本应将离心后的血浆转移至无β葡聚糖的容器内-20℃以下冷冻保存，一周内使用。

7.实验操作7.1在试验开始前,先开启LKM动态试管检测仪，预热，一段时间后发出哔的一声，试管仪温度达到37℃,待用;7.2取本试剂盒所配的无热原真空采血管取受试者静脉血1～2 ml,以400 g离心10分钟；7.3取富含血小板的血浆100 μl，加到样品稀释瓶中，在旋涡混合器上轻轻混匀，然后插入75℃试管恒温仪中加热10分钟；7.4加热10分钟后,将样品稀释瓶从75℃试管恒温仪中取出，使其降至室温即可，即为1：10稀释的样品供试溶液；7.5取β—G试剂1支,开启；7.6取β—G试剂复溶液1支，开启后用移液器取0。