ABO血型鉴定66405

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项一.原理根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。

可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。

所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或抗—B。

二.试剂和材料1．抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清（制备方法见本节附注）2．5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3．受检者血清；4．受检者5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。

三.方法1．试管法(1)取洁净小试管3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。

分型血清各l滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。

(2)另取洁净小试管3支，分别标明A、B和O细胞。

用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。

(3)立即以1000r／min离心1min。

(4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。

如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

(5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。

(6)凝集强度判断标准凝集强度判断标准4+红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。

3+红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。

2+红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。

1+肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细+-胞混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝MF集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。

-表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。

2.玻片法（1）取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。

ABO 血型鉴定操作规程1. 原理根据红细胞上和血清(或者血浆)中有无 A 抗原和(或者)B 抗原及其抗体，将血型分为A 型、B 型、AB 型及O 型。

可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO 血型。

正定型是指用已知抗正定型-A、抗-B 血清来检测受检红细胞上有无相应的 A 抗原和(或者) B 抗原；反定型是指用已知反定型A1 型、B 型红细胞来检测受检血清 (或者血浆) 中有无相应的抗-A 和(或者)抗-B。

2. 原始样品要求5 mL 静脉全血。

3. 样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂真空试管，EDTA.K2 抗凝/普通试管，不抗凝。

4. 检测环境要求检测环境要求检测环境要求检测环境要求温度：18℃~27℃，湿度：30%~70%。

5. 所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备5.1 设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。

5.2 材料抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水(NS)、干净空试管。

6. 检测操作过程检测操作过程检测操作过程检测操作过程6.1 将受检标本以1000g 离心5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用NS 洗涤三次后，配成3%~5%红细胞悬液。

6.2 取6 支小试管，分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。

6.3 在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各50 μL ，其余管加入受检血浆/血清各100 μL 。

6.4 在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者3%~5%红细胞悬液各50 μL ，摇匀。

6.5 在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入A1、B、O 红细胞试剂各50 μL ，摇匀。

6.6 1000g 离心15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。

6.7 根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在4℃、37℃下观察结果。

试管法ABO血型鉴定（最终定稿）第一篇：试管法ABO血型鉴定试管法ABO血型鉴定1.检验目的鉴定供受血者ABO血型，保证临床输血安全。

2．检验方法试管法 2.1.试管法 2.1.1.实验原理ABO血型鉴定，是根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原，同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM 类抗A或（和）抗B。

2.1.2.标本要求静脉EDTA抗凝血2.0～3.0ml，以3000r/min离心3分钟，分离上清液。

2.1.3.试剂单克隆或多克隆抗A、抗B试剂，3-5% A、B及O型试剂标准红细胞悬液。

2.1.4.器材离心机，4℃冰箱、显微镜，12×70mm试管(以下称“小试管”),滴管，10mm×60mm透明的玻璃试管或塑料试管。

2.1.5.操作步骤2.1.5．1．正定型（查抗原）：取试管2支，分别标明抗A、抗B，加入抗A和抗B分型血清各2滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混匀。

2.1.5．2.反定型（查抗体）：取试管3支，分别标明A型、B型和O型细胞。

用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B、O型5%试剂红细胞悬液1滴，混匀。

2.1.5．3.立即以3000r/min离心10秒。

（离心时间为离心机校准时间）。

2.1.5．4.轻轻摇动试管，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象,如肉眼观察不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜下观察有无凝集。

2.1.5．5.凝集强度判断标准＋＋＋＋：红细胞凝集成一大片或几片，仅有少数单个游离红细胞，血清清晰透明。

＋＋＋：红细胞凝集成数个大颗粒凝块，有少数单个游离红细胞，血清透明。

＋＋：红细胞凝成数个小颗粒凝块，游离红细胞＜1/2。

＋：红细胞凝成数个小颗粒凝块，游离红细胞＞1/2。

红细胞ABO血型（正定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。

二、方法采用试管法检测红细胞ABO血型（正定型）。

三、原理用已知抗A、抗B标准血清（单克隆抗体）测定被检者红细胞上有无相应的A或B抗原，结合反定型结果判断ABO血型。

四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(正定型)确认。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限责任公司；3、批准文号：国药准字S1*******；4、包装规格：抗A、抗B试剂各1支， 10ml /支；5、贮藏条件；2-8℃避光保存。

6、有效期：自检定合格之日起2年；7、试剂性能：试剂单克隆抗体效价：抗A效价≥128；抗B效价≥128；特异性试验合格。

七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管2支，分别标明抗A、抗B，用滴管分别加入受检者5%红细胞悬液1滴于试管，再分别在对应管中加入抗A、抗B标准血清1滴。

2、摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s或室温静臵1小时。

3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。

如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

4、ABO血型（正定型）表现型反应格局表受检者血型受检者红细胞+试剂标准血清抗A 抗BA + -B - +O - -AB + +5、红细胞ABO血型（正定型）结果凝集强度判断对照表红细胞凝集反应描述凝集强度混合凝集外观镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分布溶血，上清液中有游离血红蛋白溶血红细胞凝集成一大块，血清清晰透明4+红细胞凝集成数小块，血清尚清晰3+红细胞凝块分散成许多小块，周围可见到游离红细胞2+肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞1+镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞±镜下未见凝集，红细胞均匀分布阴性九、质量控制1、对新进批号的试剂应作抗体效价验定。

abo血型的鉴定原理
Abo血型的鉴定原理。

Abo血型系统是人类红细胞表面抗原的一种分类，主要包括A、B、AB和O 四种血型。

血型的鉴定对于输血、器官移植等医疗行为至关重要。

下面我们将介绍Abo血型的鉴定原理。

首先，Abo血型的鉴定是通过血清凝集法进行的。

该方法利用抗A和抗B血清与待测血液中的A、B抗原发生凝集反应来进行鉴定。

在实验室中，通常会使用抗A和抗B的特异性抗体来进行血型的鉴定。

其次，Abo血型的鉴定原理基于血清中的抗体与红细胞表面的抗原之间的特异性反应。

当抗A抗体与A抗原相遇时，会发生凝集反应；当抗B抗体与B抗原相遇时，同样会发生凝集反应。

而在O型血液中，既不含有A抗原，也不含有B抗原，因此不会与抗A或抗B抗体发生凝集反应。

另外，对于AB型血液来说，其红细胞表面同时含有A和B抗原，因此在与抗A和抗B抗体相遇时，都会发生凝集反应。

这也是AB型血液被称为“普通受体”的原因之一。

除了血清凝集法外，还可以利用分子生物学方法进行Abo血型的鉴定。

通过PCR技术可以检测A和B基因的存在与否，从而确定个体的Abo血型。

这种方法具有高度的特异性和灵敏性，可以有效地避免人为操作误差。

总的来说，Abo血型的鉴定原理主要是基于血清凝集法和分子生物学方法。

这些方法不仅可以准确地鉴定个体的血型，还可以帮助医疗工作者进行输血和器官移植等医疗操作。

因此，对Abo血型的鉴定原理有深入的了解，对于医学领域具有重要的意义。

实验8 ABO血型鉴定及分析
1 实验原理
血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型，其分类的依据是红细胞表面是否存在某些可遗传的抗原物质。

若将血型不相容的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合，则红细胞可凝集成簇，这一现象称为红细胞凝集。

造成凝集的机制是抗原-抗体反应。

红细胞表面还有特异性糖蛋白抗原物质统称为凝集原（Agglutinogen）。

在血浆中则含有与之相应的特异性抗体，称为凝集素
在凝集反应中被称为凝集原。

能与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为凝集素。

凝集素为γ-球蛋白，存在于血浆中。

发生抗原-抗体反应时，由于每个抗体上具有2～10个抗原结合位点，因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞之间形成桥梁，使它们聚集成簇，从而发生凝血。

根据红细胞膜上是否存在A抗原和B抗原可将血液分为四种ABO血型：红细胞膜上只含有A抗原者为A型；只含B抗原者为B型；含有A与B两种抗原者为AB型；A和B两种抗原均无者为O型。

不同血型的人的血清中含有不同的抗体，但不会含有与自身红细胞抗原相对应的抗体。

在A型血的
血清中，只含有抗B抗体；B型血的血清中只含有抗A抗体；AB型血的血清中没有抗A和抗B抗体；而O型血的血清中则含有抗A和抗B两种抗体。

表1 ABO血型中的抗原和抗体
血型红细胞膜上所含的抗
原
（凝集原）血清中所含的抗体（凝集素）
A A 抗B
B B 抗A AB A、B 无
O 无抗A、抗B。

实验8 ABO血型鉴定及分析
1 实验原理
血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型，其分类的依据是红细胞表面是否存在某些可遗传的抗原物质。

若将血型不相容的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合，则红细胞可凝集成簇，这一现象称为红细胞凝集。

造成凝集的机制是抗原-抗体反应。

红细胞表面还有特异性糖蛋白抗原物质统称为凝集原（Agglutinogen）。

在血浆中则含有与之相应的特异性抗体，称为凝集素
在凝集反应中被称为凝集原。

能与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为凝集素。

凝集素为γ-球蛋白，存在于血浆中。

发生抗原-抗体反应时，由于每个抗体上具有2～10个抗原结合位点，因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞之间形成桥梁，使它们聚集成簇，从而发生凝血。

根据红细胞膜上是否存在A抗原和B抗原可将血液分为四种ABO血型：红细胞膜上只含有A抗原者为A型；只含B抗原者为B型；含有A与B两种抗原者为AB型；A和B两种抗原均无者为O型。

不同血型的人的血清中含有不同的抗体，但不会含有与自身红细胞抗原相对应的抗体。

在A型血的
血清中，只含有抗B抗体；B型血的血清中只含有抗A抗体；AB型血的血清中没有抗A和抗B抗体；而O型血的血清中则含有抗A和抗B两种抗体。

表1 ABO血型中的抗原和抗体
血型红细胞膜上所含的抗
原
（凝集原）血清中所含的抗体（凝集素）
A A 抗B
B B 抗A AB A、B 无
O 无抗A、抗B。