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乳酶生片中乳酸菌的分离鉴定及其增殖培养条件优化苑园园$,龚建刚王子娇&,郭凯元7,孙 炜&,封龙宽&，季明月&(1.衡水学院生命科学学院，河.衡水053000/2.河.农业大学食品科技学院，河.保定071001;3.天津市红桥区市场监督管理局，天津300131)摘要:该研究采用传统培养分离法从乳酶生片中分离乳酸菌,通过形态观察、生理生化试验及分子生物技术对其进行鉴定,并采用单因素 其殖 进 化。
结果表明，从乳酶生片中分得到一株乳酸菌Y1,经 为屎肠球菌(Enterococcus faecivrn),其最适培养条件为初始pH &0,生长温度37 !，接种量1%,最优增殖培养基为乳糖11 g/L ,乳清粉10 g/L ,酵母浸粉22g/L ,硫酸/0.28 g/L ,硫酸00.18g/L o 用此培养基培^e\E. faecium \1的活菌数为2.90x 109CFU/mL ,比优化前活菌数提高了80.12%。
关键词：乳酶生；乳酸菌;分离；；殖； 化；中图分类号：TS201.3文章编号：0254-5071 (2021)05-0147-06doi:10.11882j.issn.0254-5071.2021.05.027引文格式:苑园园，龚建刚,王子娇，等.乳酶生片中乳酸菌的分离鉴定及其增殖培养条件优化[J].中国酿造,2021,40⑸：147-152.Isolation, identification and enrichment culture condition optimization of lactic acid bacteria in lactasin tabletYUAN Yuanyuan 1, GONG Jiangang 2*, WANG Zijiao 2, GUO Kaiyuan 3, SUN Wei 2, FENG Longkuan 2, JI Mingyue 2收稿日期：2020-10-13修回日期：2021-01-10基金项目:衡水学院2020年度校级课题(2020ZR03)；河北省2019年重点研发计划项目(19227305D )作者简介:苑园园(1985-),女，讲师，硕士，研究方向为食品微生物。
乳品中乳酸菌的分离鉴定与发酵性能评价在乳品加工过程中，乳酸菌是一类重要的微生物，具有良好的发酵性能和健康益处。
因此，对乳品中的乳酸菌进行分离、鉴定和评价其发酵性能是十分必要的。
一、乳酸菌的分离鉴定乳酸菌是一类厌氧菌，广泛存在于自然界的各种环境中，包括土壤、水体和植物表面等。
在乳品中，乳酸菌是一类重要的有益菌群，具有促进消化、增强免疫力等益生作用。
为了分离出乳酸菌，首先需要选择适宜的培养基。
常见的培养基有MRS培养基、M17培养基等，这些培养基中含有适宜乳酸菌生长的营养成分，并能抑制其他菌群的生长。
从乳品中分离乳酸菌的步骤一般包括：制备样品的稀释液、在选择的培养基上涂布样品、进行培养和筛选。
分离出的单菌落需要进行单菌株的纯化，通过反复传代培养可获得纯系的乳酸菌菌株。
对分离出的乳酸菌菌株进行鉴定是非常重要的。
常见的鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性测试、16S rRNA基因序列分析等。
其中，16S rRNA基因序列分析是目前最常用的方法，可以准确鉴定细菌的种属。
二、乳酸菌的发酵性能评价乳酸菌作为发酵剂广泛应用于乳品工业中，因此对其发酵性能的评价非常重要。
乳酸菌的发酵性能包括发酵速度、产酸能力、抗菌活性等指标。
发酵速度是评价乳酸菌发酵性能的一个重要指标。
乳酸菌能够将乳糖转化为乳酸，因此通过测定乳糖消耗速度可以评价乳酸菌的发酵速度。
一般来说，发酵速度较快的乳酸菌对应的产品品质也较好。
产酸能力是评价乳酸菌发酵性能的另一个重要指标。
通过测定发酵产物中的乳酸含量可以评价乳酸菌的产酸能力。
产酸能力强的乳酸菌可以更好地发挥酸奶等乳品的保质期延长和营养价值的提升。
除了乳酸的产酸能力，乳酸菌还具有抗菌活性。
乳酸菌能够分泌有抑制其他有害菌生长的物质，对于维持肠道菌群平衡具有重要作用。
因此，评价乳酸菌的抗菌活性也是一项重要的指标。
综上所述，乳品中乳酸菌的分离鉴定和发酵性能评价是乳品加工过程中不可或缺的一环。
通过合理的分离鉴定方法和科学的评价指标，能够筛选出优良的乳酸菌菌株，并确保乳品的品质和安全。
东北酸菜发酵液中耐低温乳酸菌的分离及抑菌性研究徐伟;陈翠婷;马婷婷;柴丽娜【摘要】从东北地区低温(10～15℃)贮藏的酸菜发酵液中分离出25株乳酸菌,获得在10℃能良好生长的菌株CCT-1,经形态、生理生化和16S rDNA鉴定,该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum).分别将MRS固体培养基与LB、查氏、牛肉膏蛋白胨和YPD半固体培养基组成双层平板,对大肠杆菌(Esch erich ia coli)、黑曲霉(Aspergillus niger)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及啤酒酵母(S.cerevisiae)4种指示菌进行抑菌性研究,结果显示:CCT-1对4种指示菌均有抑菌作用.利用牛津杯法研究菌液的最低抑菌浓度,测得CCT-1菌悬液稀释3倍时,细胞浓度为3.4×106 cfu/mL,此时还存在抑菌作用,啤酒酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉的抑菌圈直径分别为10,9.8,9,8.5 mm,该研究可为冷藏食品的保藏提供生物防腐菌株.【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2019(044)001【总页数】5页(P67-70,77)【关键词】植物乳杆菌;双层平板法;菌株鉴定【作者】徐伟;陈翠婷;马婷婷;柴丽娜【作者单位】哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨 150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨 150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨 150076;哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨 150076【正文语种】中文【中图分类】TS255.54来源于低温环境的微生物，其可在0～5 ℃生长繁殖，最高生长温度在20 ℃ 以上，被称为耐冷微生物[1]。
目前对中温型乳酸菌的研究较多，而对低温乳酸菌的研究尚少。
其能适应低温环境的主要原因是，在长期的生物进化过程中，形成了细胞膜的生物功能、能量产生及传递系统、蛋白质的生物合成、酶类和营养物质的转运系统等一系列复杂的冷适应机制[2]。
乳酸菌的分离与纯化实验报告一、实验目的：1. 掌握乳酸菌的分离与纯化方法；2. 学习乳酸菌的形态特征及生长特性；3. 熟悉微生物实验室操作规范和安全注意事项。
二、实验原理：乳酸菌属于革兰氏阳性细菌，可以利用革兰染色方法进行初步鉴定。
乳酸菌的形态特征有很大差异，有的呈短杆状、短圆柱状，有的呈梭形或球形。
乳酸菌的培养基选择要根据实验目的而定，一般常用的是MRS培养基。
常规乳酸菌分离方法有两种：血漂白法和渐进稀释法。
血漂白法是用过氧化氢或次氯酸钠等对血液进行漂白处理后加入培养基进行分离，由于血液中含有多种抑菌物质，故需漂白处理后方能使用。
渐进稀释法则是将混菌液逐步稀释后按一定比例接种于选定的培养基上，经过多次传代，可得到单一的菌落。
三、实验步骤：1. 取适量样品加入1ml生理盐水中，充分摇匀。
2. 再从上述稀释液中取出1ml加入9ml生理盐水中，得到10-2悬液。
3. 再抽取1ml悬液加入9ml生理盐水中，得到10-3悬液。
4. 分别取适量的10-2和10-3悬液接种于MRS培养基上，并分别转移多次，培养时间一般为24-48小时，必要时可延长到72小时。
5. 分离菌落后进行鉴定。
四、结果及分析：实验结果显示，经过分离培养，从10-2和10-3悬液中分别分离出了多个菌落，经过重复转移，逐步稀释，最终获得了单一的菌落，可见分离培养方法的有效性和行之有效的可行性。
鉴定乳酸菌的一般方法包括形态学鉴定、生化特性鉴定和分子生物学鉴定等。
形态学鉴定包括形态、大小、形状和染色等方面；生化特性鉴定则主要包括代谢途径、酸产生量和果糖发酵能力等；分子生物学鉴定则是通过特异性引物扩增菌株中的核酸，进行分子水平鉴定。
五、实验心得：本次实验通过乳酸菌分离、培养和鉴定的过程，使我对乳酸菌的形态特征、生长特性和鉴定方法有了更深入的了解。
同时，要时刻注意实验室的操作规范和安全问题，确保实验顺利进行。
在今后的实验中，我将更加重视实验操作的规范性和安全性。
乳酸菌菌种的分离筛选原理乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的益生菌，广泛应用于食品、饲料、医药等领域。
乳酸菌菌种的分离筛选是乳酸菌应用研究中的重要一环，其目的是从大量的混合菌群中筛选出具有优良特性的菌株。
乳酸菌菌种的分离筛选原理主要包括以下几个方面：1. 选择合适的培养基：乳酸菌菌种对营养要求较高，因此选择适宜的培养基是分离筛选的首要步骤。
常用的培养基有MRS培养基、DC培养基等，它们含有适宜乳酸菌生长的营养成分，能提供所需能量和营养物质。
2. 适宜的培养条件：乳酸菌对培养环境的温度、pH、氧气和二氧化碳等条件有一定要求。
通常情况下，乳酸菌分离筛选需要在适宜的温度（一般为30-40）下进行，pH值保持在4.5-7.0之间，氧气和二氧化碳含量适中。
3. 分离方法：乳酸菌菌种的分离常采用传统的分离培养技术，如层析法、稀释平板法、摇瓶培养法等。
其中，层析法是一种常用的快速分离方法，通过将混合菌群在筛选培养基上涂抹或刺激，使不同菌株在筛选培养基上形成分离的菌落。
4. 鉴定鉴别：乳酸菌菌种的筛选与鉴定是不可分割的一步，只有确定菌株的种属和特性才能真正确认其乳酸菌的菌种类型。
目前，常用的鉴定方法包括形态学观察、生理和生化特性检测、分子生物学方法（如PCR技术、16S rDNA序列分析）等。
在乳酸菌菌种的分离筛选过程中，还需要注意以下几个问题：1. 选择样品：样品的选择对于乳酸菌菌种的分离筛选至关重要。
通常情况下，从乳制品、肠道、土壤等环境中寻找潜在的乳酸菌菌种，可以提高分离到优良菌株的几率。
2. 优化培养条件：对于特殊的乳酸菌菌种，可能需要优化培养条件，如调整温度、添加特定的营养成分等，以促进其生长和繁殖。
3. 评价筛选结果：乳酸菌菌种的分离筛选结果需要综合考虑其特性和应用价值。
如菌株的酸奶生产能力、耐酸碱能力、抗菌能力、抗氧化能力等。
总结起来，乳酸菌菌种的分离筛选原理主要包括选择合适的培养基和培养条件、采用适当的分离方法和鉴定鉴别技术。
乳酸菌的分离与筛选具体实验流程1. 引言1.1 背景介绍乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的细菌，它们能够以乳酸为代谢产物进行无氧发酵，并且在食品工业、农业和医学领域具有重要的应用价值。
乳酸菌不仅能够促进食品品质的改善和保鲜，还对人体健康具有积极影响。
然而，目前市面上存在许多商业化的乳酸菌制剂，其有效成分及效果并不尽相同。
因此，研究和筛选出优质活性的乳酸菌种类，具有重要意义和广阔前景。
1.2 研究意义本研究旨在通过分离与筛选方法得到高活性的乳酸菌。
通过该研究可以加深我们对乳酸菌及其作用机制的理解，并为特定领域如食品工业、农业等提供先进的技术支持和解决方案。
此外，筛选出具有优良特性的乳酸菌株也将为开发新型功能性食品、生物农药等领域的产品提供重要支持。
因此，本研究对于推动食品工业、农业发展具有积极意义。
1.3 实验目的本实验主要目的如下：- 收集和处理样品：收集富含乳酸菌的样品，并经过适当处理以提高分离效果。
- 选择与制备分离培养基：根据乳酸菌的特性选择适合的培养基并进行制备。
- 设定分离培养条件：通过调控温度、pH值等参数，确定适宜的乳酸菌分离培养条件。
- 鉴定活性乳酸菌指标：确定评价乳酸菌活性和质量的指标，并进行相关试验和检测。
- 设计与实施筛选试验：根据所选指标设计筛选试验，并在实验中采用相应方法进行实施。
- 可行性评估与结果分析：对筛选试验结果进行评估和分析，并总结可行性及相关优化建议。
通过以上实验流程，我们旨在深入了解乳酸菌的特点及其在不同领域中应用潜力，并为进一步研究和开发具有市场竞争力的乳酸菌产品提供理论和实践基础。
2. 乳酸菌的分离方法2.1 样品收集与处理在乳酸菌的分离研究中，样品的选择和处理十分重要。
我们可以选择不同来源的样品，如发酵食品、生态环境等。
收集样品后，需要进行适当的处理以消除非目标微生物对于乳酸菌生长和筛选的干扰。
常见的样品处理方法包括冷藏、过滤、稀释等。
2.2 分离培养基选择与制备为了促进乳酸菌的分离和生长，在实验中需要选择适宜的分离培养基。
耐低温乳酸菌的筛选与六种原料青贮中的应用针对青海省饲草料短缺、高原寒冷气候不利于青贮调制。
从本地青贮饲料中分离出耐低温乳酸菌，对该菌在低温环境下对青贮添加作用的研究，为该菌在青海省青贮饲料添加剂的开发与应用提供理论基础，对解决牧区饲草料短缺，减轻草原放牧压力，保护生态环境具有现实意义。
从全株玉米青贮以及新鲜泡菜中分离得到5株乳酸菌，其中3株为杆菌、2株为球菌。
通过初筛和复筛获得一株生长繁殖和产酸能力较强的耐低温乳酸菌L2，其稳定期菌体浓度最大，为6.30lgCFU·mL-1。
对5中乳酸菌进行形态学观察和生理生化鉴定，对照伯杰式手册确定5种乳酸菌分别是R1、R2：乳明串珠菌；L1：德氏乳杆菌；L2、L3：植物乳杆菌。
通过单因素试验和响应面分析确定该菌在MRS培养液中最佳培养条件为：接种量3.1%、初始pH6.4、培养温度18.4℃。
这三个因素单独对L2乳酸菌菌体浓度均有显著影响（p﹤0.05），但三者彼此之间交互作用不明显（p﹥0.05）。
六种原料青贮试验表明：除鹅观草外，添加L2乳酸菌（C组）青贮粗蛋白损失较自然青贮（B组）少，其中在麦鬓草中表现最为明显：青贮30天，C组粗蛋白几乎没有损失，而B组损失1.35%；添加L2乳酸菌有利于提高青贮粗脂肪含量，其中全株油菜C组较B组高1.08%，差异显著；两种青贮处理NDF呈下降趋势，C组总体下降幅度较B组大；C组ADF含量及粗灰分含量总体较B组低；而总P含量C组总体高于B组，Ca含量两组之间无显著差异。
体外产气试验结果表明：自然青贮和添加L2乳酸菌的青贮均能提高六种原料的消化率，且后者效果优于前者。
生物保鲜乳酸菌的筛选鉴定及培养条件的优化的开题报告
一、研究背景
乳制品是不可或缺的食品之一，其中酸奶、酸乳饮料等属于乳酸菌发酵制品。
乳酸菌可以在发酵食品中发挥各种有益的作用，如改善食品品质、增强抵抗力、促进肠道健康等。
因此，生物保鲜乳酸菌的筛选鉴定及培养条件的优化对于酸奶等食品的开发具有重要意义。
二、研究目的
本研究旨在从不同来源的样品中分离筛选出生物保鲜乳酸菌，并对其进行鉴定和评价，最终优化其培养条件，以提高其生产效率和质量。
三、研究内容和方法
1. 生物保鲜乳酸菌的分离筛选：选取不同来源的样品，如土壤、酸奶等，采用扩散分离培养基分离出潜在的生物保鲜乳酸菌，进行初步筛选。
2. 生物保鲜乳酸菌的鉴定：通过形态学、生理生化等手段对初步筛选出的生物保鲜乳酸菌进行鉴定和分类。
3. 生物保鲜乳酸菌的评价：对鉴定出的生物保鲜乳酸菌进行功能评价，如抗菌活性、发酵性能等。
4. 生物保鲜乳酸菌的培养条件优化：通过设计不同的培养条件，如菌落形态、温度、培养时间等，优化生物保鲜乳酸菌的产率和质量。
四、预期成果
本研究预期可以筛选出多个来源、多个功效的生物保鲜乳酸菌，并对其进行鉴定和评价，最终优化生物保鲜乳酸菌的培养条件，为乳制品工业提供多种选择，增强其竞争力和市场占有率。
同时，也可为生物保鲜菌制剂的开发提供借鉴和参考。
