药物代谢动力学实验讲义
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药物代谢动⼒学实验讲义实验⼀药酶诱导剂及抑制剂对戊巴⽐妥钠催眠作⽤的影响【⽬的】以戊巴⽐妥钠催眠时间作为肝药酶体内活性指标,观察苯巴⽐妥及氯霉素对戊巴⽐妥钠催眠作⽤的影响,从⽽了解它们对肝药酶的诱导及抑制作⽤。
【原理】苯巴⽐妥为肝药酶诱导剂,可诱导肝药酶活性,使戊巴⽐妥钠在肝微粒体的氧化代谢加速,药物浓度降低,表现为戊巴⽐妥钠药理作⽤减弱,即催眠潜伏期延长,睡眠持续时间缩短。
⽽氯霉素则为肝药酶抑制剂,能抑制肝药酶活性,导致戊巴⽐妥钠药理作⽤增强,即催眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长。
【动物】⼩⽩⿏8只,18~22g【药品】⽣理盐⽔、0.75%苯巴⽐妥钠溶液、0.5%氯霉素溶液、0.5%戊巴⽐妥钠溶液【器材】天平、⿏笼、秒表、注射器1 ml×4、5号针头×4【⽅法与步骤】⼀、药酶诱导剂对药物作⽤的影响1、取⼩⿏4只,随机分为甲、⼄两组。
甲组⼩⿏腹腔注射0.75%苯巴⽐妥钠溶液0.1 ml/10g,⼄组⼩⿏腹腔注射⽣理盐⽔0.1 ml/10g,每天1次,共2天。
2、于第三天,给各⼩⿏腹腔注射0.5%戊巴⽐妥钠溶液0.1 ml/10g,观察给药后⼩⿏的反应。
记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间,计算戊巴⽐妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
⼆、药酶抑制剂对药物作⽤的影响1、取⼩⿏4只,随机分为甲、⼄两组。
甲组⼩⿏腹腔注射0.5%氯霉素溶液0.1 ml/10g;⼄组⼩⿏腹腔注射⽣理盐⽔0.1ml/10g。
2、30分钟后,给各⼩⿏腹腔注射0.5%戊巴⽐妥钠溶液0.1 ml/10g,观察给药后⼩⿏的反应。
记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间,计算戊巴⽐妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
【统计与处理】以全班结果(睡眠持续时间,分)作分组t检验,检验⽤药组与对照组有⽆显著性差异。
(参见“数理统计在药理学实验中的应⽤”)【注意事项】1、催眠潜伏期为开始给药到动物翻正反射消失的间隔时间,睡眠持续时间为翻正反射消失⾄恢复的间隔时间。
药物代谢动力学实验
药物代谢动力学实验是一种用于研究药物在体内的药代动力学特征的实验方法。
药物代谢是指药物在体内发生的化学转化过程,通过代谢,药物可以转化成活性代谢物,也可以被转化为无活性的代谢产物,进而影响药物的药效和药物的药代动力学特性。
药物代谢动力学实验通常包括以下几个方面的研究内容:
1. 药物的消除速率:研究药物在体内消除的速率,即药物从体内被排除的速度。
常用的实验方法包括测量药物的消除半衰期和清除率。
2. 药物的代谢途径:研究药物在体内的代谢途径和代谢产物。
通过分析药物在体内的代谢产物,可以了解药物的代谢途径和代谢酶的类型。
3. 药物的代谢酶:研究参与药物代谢的酶的类型和功能。
常用的实验方法包括测定药物代谢酶的活性和测定酶的表达水平。
4. 药物的药代动力学参数:研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄等动力学过程,计算药物的药代动力学参数,包括AUC(面积下曲线)、Cmax(峰浓度)、Tmax(峰时间)等。
药物代谢动力学实验可以为药物研发和临床应用提供重要的参考数据,可以帮助科学家了解药物的代谢途径和消除速率,指
导药物剂量的选择,预测药物的药效和毒性,优化药物的治疗效果。
实验三 尿药法测定核黄素片剂消除速度常数【实验目的】1、 熟悉尿药法在生物药剂实验中的应用2、 掌握尿药法计算消除速度常数等动力学参数的方法【实验原理】药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄等过程既有区别,又有联系,观察一个方面的变化,常可间接地认识到另一方面的情况,所以药物在体内的速度过程变化规律,既可用血药法来估算,也可用尿药法来估算。
在多数情况下,尿药浓度高于血药浓度,定量分析精密度好,测定方法较易建立,而且取样方便,受试者可免收多次抽血的痛苦。
因此,在体内药物大部分以原形从尿中排除条件下,通常可用尿药法估算消除速度常数、生物半衰期等动力学参数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度,可用下列微分式表示:X K dtdX e u= (1) Ke 为表观一级排泄速度速度,Xu 为t 时间尿中原形药物的累计排泄量,X 为t 时间体内存有的药量。
在静脉给药时,体内药量的经时过程可由下式表示:kt o e X X -= (2)Xo 为给药剂量,K 为表观一级消除速度常数。
将(2)式中X 值代入(1)式后得:kt o e e X K dtdXu-= (3) 两边取对数得:303.2log logKtX K dt dX o e u -= (4) 由(4)式可见,原形药物排泄速度得对数对时间作图为一直线,其斜率为-K/2.303,与血药浓度的对数对时间作图所求的斜率相同。
(4)式适用于静脉给药后求算消除速度常数。
若口服给药,则体内药量经时过程可由下式表示:)(t K Kta o a a e e KK F X K X ----=(5)Ka 为表观一级吸收速度常数。
尿中原形药物的瞬时排泄速度可由(5)式代入(1)式得:)(t K Kta o a e u a e e KK FX K K dt dX ----= (6) 当Ka>K ,t 充分大时,则e -Kat →0,(5)式简化为:Kta o a e u e KK FX K K dt dX --= (7) 两边取对数得:303.2log logKtK K FX K K dt dX a o a e u --= (8) 由上述关系式可见,若以logXu/dt 对t 作图,可得到一条二项指数曲线,从其后段直线得斜率可求出一级消除速度常数K 。
药物代谢动力学研究的实验方法药物代谢动力学是药物研究领域中的一个重要分支,是对药物在体内的代谢过程进行研究,以便更好地了解药物的药效和毒性。
药物代谢动力学研究的实验方法是进行药物代谢动力学研究的基础,本文将对该领域的实验方法进行介绍。
1. 基本概念药物代谢动力学研究的实验方法是指对药物在体内产生的代谢过程进行研究的方法,主要包括体内样品收集、样品处理和检测等方面。
药物代谢动力学研究的实验方法广泛应用于药物代谢动力学研究、新药开发、药物治疗和毒理学等领域。
2. 实验方法2.1 体内样品收集药物代谢动力学研究的实验方法中,体内样品收集是最为重要的一项实验工作。
体内样品收集的主要目的是获得体内药物及其代谢产物的浓度以及其他生物学指标。
体内样品的收集方式有多种,如静脉采血、组织活检、尿液收集、呼出气收集、唾液收集等等。
静脉采血和尿液收集是最为常见的体内样品收集方式,它们能够反映药物的整体代谢和排泄情况。
组织活检是对某些组织特异性代谢酶进行研究的重要手段。
2.2 样品处理对获得的体内样品进行处理是药物代谢动力学研究的关键步骤之一。
样品处理的主要目的是分离出药物及其代谢产物,并除去与分析无关的物质。
样品处理方法主要包括沉淀、萃取、纯化等,不同的样品处理方法具有不同的适用范围和优缺点。
2.3 检测药物代谢动力学研究的最后一步是对分离出的药物及其代谢产物进行检测。
药物代谢动力学研究中检测方法的种类繁多,选用何种方法需要考虑实验目的、样品特性、所需检测精度等因素。
常用的检测方法有高效液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)、毛细管电泳(CE)、质谱分析(MS)等。
3. 注意事项在进行药物代谢动力学研究的实验方法时,需要注意以下几点:3.1 样品的采集、放置、处理以及检测的过程中,需要严格控制操作环境和相关因素,以尽量减少误差。
3.2 样品处理需要在不影响药物及其代谢产物的条件下,尽可能地剔除与分析无关的物质,以提高检测精度。
药物代谢实验:研究某种药物在体外代谢过程中的动力学特性实验名称:药物代谢实验——研究某种药物在体外代谢过程中的动力学特性实验原理:药物代谢是指药物在体内经过一系列化学反应转化成代谢产物的过程。
药物代谢实验主要通过体外实验来研究药物代谢动力学特性,包括代谢途径、代谢产物、代谢酶和代谢动力学等。
常见的体外代谢实验方法包括酶切实验、细胞培养实验、组织切片实验和微粒体系实验等。
实验步骤:1.制备药物代谢体系:准备含有代谢酶和底物的反应混合物。
代谢酶可以来源于体内或外源性来源,底物为需要测试的药物。
此外,还需添加缓冲液和辅酶等组分,以保持反应混合物的稳定性。
2.加入待测试药物:向反应混合物中加入待测试药物,使其与代谢酶发生反应。
反应时间可以根据药物的特性和代谢速率进行调整。
3.采样和制备样品:在反应过程中,定期取样,并使用化学方法或色谱方法等分析技术,分离和测定反应产物及底物残留量。
4.数据分析:根据分析结果,计算药物的代谢速率常数、代谢产物比例、代谢途径和代谢酶的动力学参数等。
注意事项:1.实验前要认真选择代谢酶和适宜的反应体系,以保证实验的可靠性和准确性。
2.实验中应严格控制反应温度、pH值和其他影响反应过程的因素,以保证实验的重复性和稳定性。
3.采样和制备样品的过程中,应避免药物和代谢产物的降解和失活,以确保分析结果的准确性。
4.在数据分析过程中,应该结合实验设计和实验条件等因素进行综合分析,以得出科学合理的结论。
再写一个电泳实验:分离DNA或蛋白质实验原理:电泳是利用电场对带电物质进行分离的方法,根据带电物质的大小、形状、电荷密度等特性,使其在电场中发生迁移,从而实现分离和纯化的目的。
DNA或蛋白质电泳实验是分子生物学和生物化学中常用的实验方法,可以用于分离和检测DNA或蛋白质的大小、数量、纯度等特性。
实验步骤:1.准备样品:样品可以是DNA或蛋白质,根据实验需要进行适当处理。
对于DNA样品,需要进行限制性酶切或PCR 扩增等操作,以获得特定大小的DNA片段。
药动学讲义:要求:掌握药物在体内跨膜转运规律和影响因素吸收、首关消除、肝药酶及肝肠循环、生物利用度;熟悉主动转运、易化扩散分布:血浆蛋白结合率、药物与血浆蛋白结合的特点、再分布、血脑屏障、胎盘屏障、生物转化了解一级消除动力学的概念、特点、基本公式半衰期、表观分布容积、稳态血药浓度:药酶抑制剂、药酶诱导剂零级消除动力学的概念、特点、基本公式消除速率常数、血浆清除率、负荷剂量药物主要内容:物代谢动力学( pharmacokinetics) Pharmacokinetics基本概念:简称药动学主要研究药物的体内过及体内药物浓度随时间变化的规律第一节药物的体内过程Process of Drug in the Body 药物经过给药部位进入直至排出机体的过程。
药物体内过程包括药物的吸收( absorption)、分布( distribution)、代谢( metabolism) 和排泄( excretion),即ADME 四个基本过程。
代谢和排泄都是药物在体内逐渐消失的过程,统称为消除( elimination)。
一、药物的转运转运的类型主动转运Active Transport 简单扩散易化扩散Simple diffusion 主要影响因素为体内大多数药物的转运方式主要受到药物的溶解性和解离性等理化特性的影响,脂溶性强的药物容易跨膜转运水溶性强的药物难于跨膜转运。
离子障ion trapping 离子型药物被限制在使其变成离子膜的那一侧,不可自由穿透;即非离子型即分子型脂溶性好,可自由穿透。
许多药物是弱酸或弱碱性的弱酸性或弱碱性药物的离子化程度由其pKa 及其所在溶液的pH 而定。
pKa: 药物在溶液中50 %离子化时的pH。
二、吸收Absorption药物自给药部位经细胞组成的屏蔽膜进入血液循环的过程药物作用的快慢与其吸收速度相关(一)胃肠道给药方式:口服(per os )小肠粘膜舌下(sublingual )颊粘膜直肠(per rectum )直肠粘膜首关消除first pass elimination First Pass Elimination 药物在肠道吸收后,通过门脉进入肝脏,部分药物在通过肠黏膜及肝脏时被灭活代谢,使进入体循环的药量减少,药效也随之下降的现象。
实验一药酶诱导剂及抑制剂对戊巴比妥钠催眠作用得影响【目得】以戊巴比妥钠催眠时间作为肝药酶体内活性指标,观察苯巴比妥及氯霉素对戊巴比妥钠催眠作用得影响,从而了解它们对肝药酶得诱导及抑制作用。
【原理】苯巴比妥为肝药酶诱导剂,可诱导肝药酶活性,使戊巴比妥钠在肝微粒体得氧化代谢加速,药物浓度降低,表现为戊巴比妥钠药理作用减弱,即催眠潜伏期延长,睡眠持续时间缩短。
而氯霉素则为肝药酶抑制剂,能抑制肝药酶活性,导致戊巴比妥钠药理作用增强,即催眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长。
【动物】小白鼠8只,18~22g【药品】生理盐水、0、75%苯巴比妥钠溶液、0、5%氯霉素溶液、0、5%戊巴比妥钠溶液【器材】天平、鼠笼、秒表、注射器1 ml×4、5号针头×4【方法与步骤】一、药酶诱导剂对药物作用得影响1、取小鼠4只,随机分为甲、乙两组。
甲组小鼠腹腔注射0、75%苯巴比妥钠溶液0、1 ml/10g,乙组小鼠腹腔注射生理盐水0、1 ml/10g,每天1次,共2天。
2、于第三天,给各小鼠腹腔注射0、5%戊巴比妥钠溶液0、1 ml/10g,观察给药后小鼠得反应。
记录给药时间、翻正反射消失与恢复得时间,计算戊巴比妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
二、药酶抑制剂对药物作用得影响1、取小鼠4只,随机分为甲、乙两组。
甲组小鼠腹腔注射0、5%氯霉素溶液0、1 ml/10g;乙组小鼠腹腔注射生理盐水0、1 ml/10g。
2、30分钟后,给各小鼠腹腔注射0、5%戊巴比妥钠溶液0、1 ml/10g,观察给药后小鼠得反应。
记录给药时间、翻正反射消失与恢复得时间,计算戊巴比妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
【统计与处理】以全班结果(睡眠持续时间,分)作分组t检验,检验用药组与对照组有无显著性差异。
(参见“数理统计在药理学实验中得应用”)【注意事项】1、催眠潜伏期为开始给药到动物翻正反射消失得间隔时间,睡眠持续时间为翻正反射消失至恢复得间隔时间。
2、本实验过程中,室温不宜低于20 C,否则戊巴比妥钠代谢减慢,使动物不易苏醒。
3、氯霉素溶液有结晶析出时可在水浴中加热溶解。
4、吸取氯霉素溶液得注射器应预先干燥,否则易结晶堵塞针头。
【思考题】1、何谓肝药酶诱导剂与抑制剂?2、试从理论上解释苯巴比妥及氯霉素对戊巴比妥钠睡眠时间得影响。
实验二家兔血浆中水杨酸钠浓度测定与药代动力学参数测定【实验目得】1、以水杨酸钠为例了解血浆药物浓度随时间变化得时量关系。
2、了解药代动力学参数得临床意义。
【实验材料】1.动物:家兔1只,雌雄不限,体重(2、5+0、5)kg。
2.器材:试管5支、离心管3支、试管架、小玻棒、l0ml吸管、注射器(1 ml、5ml、l0ml)、手术器械、动脉插管、动脉夹、721分光光度计、离心机3.试剂与药品:25%氨基甲酸乙酯、10%及0、02%水杨酸钠溶液、10%三氯醋酸溶液、10%三氯化铁溶液。
【实验步骤】1、实验准备:取离心管3支及试管5支,编号备用,麻醉(乌拉坦4ml/Kg),1~3号离心管及4、5号试管中分别加入10%三氯醋酸7ml2、手术:颈动脉取血2ml,放入1号离心管3、给药:耳缘静脉注入10%水杨酸钠,150mg/Kg,取血(5,35min分别取血2ml放入2、3号离心管,4、5试管分别加入蒸馏水及0、02%水杨酸钠2ml)4、离心:2000r/分,5min ,取上清液6ml ,加入10%三氯化铁(12滴),比色(5min 后,波长510nm ),计算结果。
【注意事项】1、注意颈总动脉插管术。
2.取血时,要先用0、1%肝素润湿注射器与针头,取血后用肝素封管,避免血液凝固,每次取出血第1ml 弃去不用,再吸取2ml 置于离心管内。
3、给药时间及给药后取血时间要记清。
4、取上清夜时,要先将上清液倒入编号相对应得试管中,再吸取所需得ml 数,以免吸入沉淀影响比色,注意吸管要对号使用。
5、计算Vd, CL 时注意单位换算。
【实验结果】管号 光密度(X ) 水杨酸钠浓度(Y )g/100ml 标准管(5号) X 0、02 给药后5min (2号) X 1 C 1 给药后35min (3号) X 2 C 2 计算:1、 半衰期(t 1/2): K=y/xC 1=kx 1,C 2=kx 2(单位:g/100ml)t 1/2=tC C ∆-/)2log 1(log 301.0 (单位:min )注:k 为清除速率常数,y 为0、02g/100m1,x 为标准管即5号管得光密度值; C1, C2分别为给药后5、35分钟取血时得血药浓度;△t 为两次取血得时间差。
2、表观分布容积(Vd):C0=C1×lg-1(0、301×t1/t1/2)(单位:g/100ml)Vd=D0/C0(单位:L/Kg)注:D0为用药初始剂量(150mg/Kg),t1为用药后到第一次取血得时间间隔3、清除率(CL):CL=0、693/t1/2×Vd(单位:ml/min、Kg)实验三氨茶碱得血药浓度测定及药动学研究【实验目得】掌握血清中氨茶碱血药浓度得紫外测定法,掌握血清中茶碱提取法,验证氨茶碱得动力学模型,掌握二房室动力学模型得参数计算方法。
用有机溶剂将血清中得氨茶碱提出,用紫外测定法根据标准曲线测出氨茶碱浓度,用残差法运用计算机进行数据处理、曲线描绘及参数计算,从而验证氨茶碱动力学模型,使大家对药动学研究有一初步得了解。
【实验原理】1.氨茶碱为临床常用平喘药,由茶碱与乙二胺缩合而成。
在酸性条件下,可用有机溶剂从血清中提取出茶碱,再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出。
测量λ274与λ298处得吸光度(A274为茶碱与本底,即溶剂、血清得吸光度,A298为本底得吸光度),ΔA= A274-A298。
2、氨茶碱经静脉进入血液,随血液循环进行组织分布,达到平衡后转入消除相。
时量曲线呈二房室动力学模型。
3、房室模型就是抽象得数学模型,它得划分与解剖学部位或生理学功能无关。
药物转运速率相同或相近得部位可划分为同一房室。
房室模型可以分为一室模型、二室模型、多室模型。
大多数药物在体内得转运与分布符合二室模型。
即药物静脉注射入血后,首先快速进入血流量大得组织,如心、肝、肾、肺、脑等,然后缓慢地向血流量小得组织,如脂肪组织、静止得肌肉组织等转移。
【实验材料】1、动物家兔1只,雌雄不限,体重(2、5+0、5)kg2、药品氨茶碱标准液3、试剂0、1mol/L HCl0、1mol/L NaOH异丙醇:氯仿抽提液(5:95)。
4、仪器754型紫外分光光度计液体涡旋混与器数学坐标纸一张半对数坐标纸一张。
【实验方法】1 动物实验部分1、1取健康家兔1只,称重,将家兔置于兔台。
1、2 在家兔一耳缘注射部位去毛、热敷与消毒,待血管扩张后,以左手拇指与食指压住静脉耳根端,使静脉充盈,给药前用12号针头自耳静脉取血1-1、5ml,7号针头平行刺入静脉,抽动针管,见有回血即可推注。
对其静脉注射氨茶碱15mg/kg。
1、3另一耳用锐利刀片切割取血。
分别在给氨茶碱后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。
1、4分离血清,各管均取血清0、5ml于15ml试管中,加0、1mol/L盐酸0、2ml、抽提液5ml,振摇混合,2500r/min离心10min。
2 血药浓度测定(紫外分光光度法)2、1 吸取下层氯仿液4ml置另一试管中,加入0、1mol/L NaOH溶液4ml,振摇混匀,2500r/min离心10min。
2、2吸取上层碱液,以0、1mol/L NaOH溶液4ml作参比,振摇混匀,2500r/min离心10min。
测定其在λ274与λ298处得吸收度(A274与A298),计算△A。
3 制作茶碱标准曲线:取5支试管,依次加入茶碱标准液20、40、60、80、100µl,各加入0、1mol/L NaOH溶液4ml,终浓度依次为0、5、1、0、1、5、2、0、2、5µg/ml,测定各管得A274与A298,计算△A。
以茶碱浓度为横坐标,△A为纵坐标描点绘图,用Excel软件求直线回归方程,即为茶碱标准曲线得直线方程(图示)。
4、将测得血清样品得△A代入标准曲线得方程,求得相应得C,C×10即为茶碱得血药浓度。
以时间为横坐标,浓度对数为纵坐标,用CAPP软件描点做【注意事项】1、紫外分光光度计使用前需预热30min并激发氢灯。
2、振摇混匀药液时防止溅出并准确加样。
3、样品离心前需配平。
4、测量时若更换波长,必须重新调节0与100%。
【讨论】1、氨茶碱得时量曲线呈几房室模型?为什么?2、为何要测两个波长下茶碱得吸光度并取其差值?3、试述药动学参数V1、Vd、t1/2α、t1/2β、K10、K12、K21、Cl、AUC得含义。
实验四体液pH对水杨酸钠排泄得影响【实验目得】1.学习尿液中水杨酸得检测方法,掌握体液pH对药物排泄得影响及其临床意义。
2.熟悉大鼠代谢笼得使用,巩固大鼠得各种给药方法。
【实验原理】水杨酸钠经肾脏排泄物为水杨酸,尿液pH对水杨酸排泄影响非常大,当尿液呈酸性时仅排泄5%而尿液呈碱性时则排泄大约85%。
尿液中得水杨酸遇到三氯化铁后可生成紫色络合物,根据反应后溶液紫色深浅可以定性分析水杨酸钠排泄量得多少。
【实验材料】1.动物大白鼠,雌雄不限,200~300g。
2.器材大白鼠代谢笼两个,天平一个,棉手套一只,大鼠灌胃器两个,5毫升注射器两个,6号针头两个,30ml量筒1个,50ml注射器2个。
3.药品5%碳酸氢钠溶液,15%氯化氨溶液,(单盲法配制并编号为A、B),2%水杨酸钠溶液,1%三氯化铁溶液,5%葡萄糖生理盐水,蒸馏水,苦味酸,1%速尿。
【实验方法】1.取大白鼠两只称重并编号。
2.给其中一只按0、5ml/100g灌胃A药液,给另一只以同样剂量灌胃B 药液。
3.30分钟后给两只大鼠灌胃5%葡萄糖生理盐水2ml/100g。
4.30分钟后,分别给两只大鼠腹腔注射2%水杨酸钠溶液1ml/100g及1%速尿0、2ml/100g。
5.收集各鼠30分钟尿液,将收集得尿液分别用蒸馏水稀释到30ml,加1%三氯化铁5ml,比较紫色深浅。
【实验结果】表2-1 体液pH值对水杨酸钠排泄得影响鼠号体重(g) 药物尿液反应后颜色结果分析1 2 A B【注意事项】1.实验步骤进行到4后,再将集尿笼插入代谢笼中,以免收集尿液前将集尿笼污染。
2.实验用烧杯、量筒、注射器、集尿笼应清洗干净,否则影响反应pH,导致实验结果不准确。
【思考题】1、药物得排泄途径有哪些?影响药物排泄得因素有哪些?2、体液pH还对药物得哪些体内过程有影响?有何临床意义?3、实验中给予碳酸氢钠、氯化氨、葡萄糖生理盐水、速尿等药物得目得各就是什么?4、根据反应后溶液紫色深浅为什么可以定性分析水杨酸钠排泄量得多少?写出水杨酸与三氯化铁得反应式。