【CN110050780A】冻存液及其在脐带间充质干细胞冻存中的应用【专利】

一种脐带间充质干细胞及其应用在医院的妇产科病房里，新生命的诞生总是伴随着喜悦与希望。

我看到邻床的一位年轻妈妈，她刚刚经历了分娩的痛苦，现在正疲惫却又幸福地看着襁褓中的宝宝。

她的丈夫在一旁忙前忙后，一会儿给她递水，一会儿又轻轻逗弄着孩子，嘴里还不停地念叨着：“看咱们的小宝贝，多可爱啊。

”这时候，护士走了进来，手里拿着一些文件和资料。

她微笑着对年轻妈妈说：“您知道吗？宝宝出生时留下的脐带可是个宝贝呢。

”年轻妈妈有些疑惑地抬起头：“脐带？不就是连接宝宝和我肚子的那根东西吗？它有什么特别的？”护士耐心地解释道：“是啊，脐带可不简单。

现在有一种很神奇的细胞叫脐带间充质干细胞，就来自宝宝的脐带。

”我也被这个话题吸引了过去，凑上前去听护士继续讲。

护士接着说：“这种脐带间充质干细胞啊，就像是身体里的一群小工匠。

您想啊，如果把咱们的身体比作一座大房子，那这些细胞就是随时待命的小工匠，哪里坏了它们就跑到哪里去修补。

”从科学的角度来说，脐带间充质干细胞具有多向分化潜能。

这是什么意思呢？就好比一个多才多艺的人，可以身兼数职。

这些细胞可以分化成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等等。

比如说，如果有人不小心骨折了，正常情况下骨头愈合需要一定的时间，但是这些脐带间充质干细胞就有可能像超级英雄一样，快速赶到受伤的部位，然后变成骨细胞，帮助骨头更快地愈合。

而且，它在治疗一些疾病方面有着巨大的潜力。

第二人称的你或许会问，都能治疗哪些病呢？像自身免疫性疾病，例如类风湿关节炎。

得了这种病的患者，关节就像年久失修的机器，总是疼痛难忍。

脐带间充质干细胞就有可能成为那把修复的钥匙，调节免疫系统，减轻炎症反应，让关节不再那么痛苦。

再看看那些患有心血管疾病的患者，心脏就像一个疲惫的发动机，动力不足。

脐带间充质干细胞也许就能分化成心肌细胞或者释放一些有益的因子，来改善心脏的功能，就如同给发动机注入新的活力。

她的丈夫也连连点头：“这可真是个好东西，要是能真的对宝宝以后的健康有保障，那可太值了。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010171835.9(22)申请日 2020.03.12(66)本国优先权数据201910282416.X 2019.04.09 CN(71)申请人 北京大学第三医院（北京大学第三临床医学院）地址 100191 北京市海淀区花园北路49号申请人 中国科学院化学研究所(72)发明人 乔杰　严杰　闫丽盈　李蓉　王健君　金晟琳　(74)专利代理机构 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535代理人 黄越　焦健(51)Int.Cl.A01N 1/02(2006.01)(54)发明名称一种冷冻保存液在干细胞冻存中的应用(57)摘要本发明公开了一种冷冻保存液在干细胞冷冻保存中应用。

所述冷冻保存液含有PVA，乙二醇和蔗糖。

所述冷冻保存液以PVA为主要低温保护剂成分，DMSO含量低，毒性小，用于细胞或组织尤其是卵母细胞的冷冻保存时，能达到与商业化冷冻保存液(含有DMSO 15％)同等甚至更高的细胞存活率和功能表达稳定性，具有较高的保存效率。

本发明的冷冻保存液组成简单，且原料来源方便，成本低廉，可广泛应用于各类细胞、组织以及器官的冷冻保存。

权利要求书2页 说明书14页 附图3页CN 111789104 A 2020.10.20C N 111789104A1.一种冷冻保存液在干细胞冷冻保存中应用，其特征在于，以所述冷冻保存液的每100mL体积计，含有PVA 0.01-6.0g，多元醇5.0-45mL，水溶性糖0.1-1.0molL-1，DMSO 0-15mL，血清0-30mL，缓冲液余量。

2.根据权利要求1所述的冷冻保存液在干细胞冷冻保存中应用，其特征在于，所述DMSO 含量为0.5-10mL；优选地，所述血清含量为10-20mL。

3.根据权利要求1所述的冷冻保存液在干细胞冷冻保存中应用，其特征在于，所述DMSO 和/或血清含量为0。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710746062.0(22)申请日 2017.08.26(71)申请人 刘劼地址 200065 上海市普陀区灵石路1669弄东旺雍景苑9号502申请人 朱益辉　孙毅　胡敏　曾赤佳　陆军　薛婷　陈彩琴　廖方圆　黄明辉(72)发明人 刘劼　朱益辉　孙毅　胡敏　曾赤佳　陆军　薛婷　陈彩琴　廖方圆　黄明辉　(51)Int.Cl.A01N 1/02(2006.01)(54)发明名称一种人脐带间充质干细胞的储存液(57)摘要本发明提供一种人脐带间充质干细胞的储存液，属于干细胞生物学领域，是适合临床应用的干细胞储存液的组合物。

采用多种活性成分对储存条件进行优化，是含有氯化钠、白蛋白、腺苷、血管紧张素-II、氯化锂、黄酮类化合物、肝素以及人脐带间充质干细胞来源的外泌体、短肽和多肽类化合物的混合水溶液。

在上述储存液中，人脐带间充质干细胞在4℃条件下在3天内的细胞活性保持在90%以上，且细胞表型稳定；在-20℃条件下在7天内的细胞活性仍能保持在90%以上，细胞表型同样稳定。

这种储存液保证了干细胞的质量稳定，能够实现干细胞的远距离运送，为临床干细胞的广泛应用奠定了基础。

权利要求书1页 说明书6页CN 107410288 A 2017.12.01C N 107410288A1.一种人脐带间充质干细胞的储存液，是含有氯化钠、白蛋白、腺苷、血管紧张素-II、氯化锂、黄酮类化合物、肝素、人脐带间充质干细胞来源的外泌体、短肽和多肽类化合物的混合水溶液。

2.根据权利要求1要求的储存液体系中氯化钠的配制，可以选择不同优化浓度的氯化钠建立储存体系，分别配制8.5g/L、9g/L、9.5g/L、10g/L的储存液体系。

3.根据权利要求1要求的储存液体系中白蛋白的配制，可以选择不同优化浓度的白蛋白建立储存体系，分别配制10g/L、20g/L、40g/L、80g/L的储存液体系。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201911223206.X(22)申请日 2019.12.03(71)申请人 上海泉生生物科技有限公司地址 201499 上海市奉贤区望园路2066弄2幢4层(72)发明人 江益红　刘梦琴　夏琎　李兰花　顾燕凤　薛文斌　王丽倩　李鹏　王皓　齐念民　吴丹枫　(74)专利代理机构 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328代理人 陈详(51)Int.Cl.A01N 1/02(2006.01)(54)发明名称一种适用于脐带间充质干细胞冻存制剂冻存的方法(57)摘要本发明提供了一种适用于脐带间充质干细胞冻存制剂冻存的方法，具体地，本发明经过大量试验意外发现，在细胞冻存过程中，快速降温以后维持低温一定时间然后再继续降温非常有利于细胞的冻存，能够使细胞存活率及复苏后细胞质量几乎接近冻存前的细胞质量。

权利要求书1页 说明书6页 附图17页CN 110973119 A 2020.04.10C N 110973119A1.一种细胞冻存方法，其特征在于，将细胞样品置于程序降温仪进行程序降温，降温步骤包括：(1)第一段降温以第一降温速度将程序降温仪的温度降至第一温度，其中，所述第一降温速度为0.5～2.5℃/min，所述第一温度为-8～-20℃；(2)第二段降温以第二降温速度将程序降温仪的温度降至第二温度，其中，所述第二降温速度为5～25℃/min，所述第二温度为-30～-50℃；(3)低温维持维持程序降温仪的温度为第二温度±5℃，维持时间为3-10min；(4)第三段降温以第三降温速度将程序降温仪的温度降至第三温度，其中，所述第三降温速度为5～20℃/min，所述第三温度为-60～-120℃。

2.如权利要求1所述的细胞冻存方法，其特征在于，所述第一降温速度为0.8～1.2℃/min；和/或，所述第一温度为-10～-15℃。