马铃薯植物组培
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马铃薯组织培养前言:马铃薯组织培养的意义 .马铃薯(Solanum tuberosum)属茄科茄属植物! 常见的育种途径有: 常规二倍体杂交法,四倍体水平的品种间杂交法,远缘种间杂交法 ,2n配子利用法。
这些途径都是通过有性生殖产生马铃薯变异体,通过系谱,回交,轮回选择的方法,需经过6-8代选出附合目标性状的新个体。
进入 20世纪90年代后,随着生物技术的深入发展,人类对植物细胞遗传行为,基因表达传递行为达到分子水平深入了解,作物育种工作者开始引入了除单纯户外有性杂交育种之外,又一育种方法室内体细胞无性系变异育种法,其中组织培养(tissue culture)诱导再生植株的突变就是最常用的一种。
当马铃薯外植体(茎尖脱毒分生组织)培养时,由于组培环境引发了细胞异染色质 DNA延迟复制, 产生了较田间自然突变率高出500倍的大量变异。
这一现象已越来越被马铃薯育种工作者所认可,并成为一条马铃薯育种的有效途径。
现从组织培养及组织培养在马铃薯育种上的发展历史,研究意义,研究方式以及未来展望等方面逐一论述。
马铃薯的市场效益(为什么选马铃薯作试验材料)马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻和玉米的第四种主要农作物就单位面积出产的干物质而言,它高于小麦、大麦和玉米,就单位面积出产的蛋白质而言,分别为小麦、水稻和玉米的2.02,1.33和1.20倍。
目前我国马铃薯常年种植面积为467万公顷左右,鲜薯年总产量5 500万吨,居世界第一位。
种植区域主要分布在黑龙江、吉林、内蒙古、山西、甘肃、青海、云南、贵州、四川等广大地区。
但是我国的马铃薯加工业发展十分缓慢,基本上以鲜食为主,少部分用于传统食品加工和制取粗淀粉,深加工产品很少,而且加工生产规模小,工艺落后。
20世纪90年代国内以马铃薯为原料的食品工业进入了一个蓬勃发展的时期然而产品与外同类产品相比,无论是在色泽、口味、品质,还是在包装上均存在一定差距。
马铃薯块茎水分多、脂肪少、单位体积的热量相当低,所含的维生素C是苹果的10倍,B族维生素是苹果的4倍,各种矿物质是苹果的几倍至几十倍不等,土豆是降血压食物膳食中某种营养多了或缺了可致病。
马铃薯组培生产流程介绍马铃薯组培是一种无性繁殖技术,通过将马铃薯的离体培养提供适宜的营养条件和激素刺激,使其快速增殖。
组培技术被广泛应用于马铃薯种苗生产、病毒清除和基因转化等领域。
下面将详细介绍马铃薯组培的生产流程。
步骤一:材料准备与消毒1.选择适宜的母本马铃薯作为组培的起始材料。
母本应选取无病虫害、无病毒污染、形状规则的健康马铃薯。
2.将选取的母本进行消毒处理。
首先用水清洗去除表面的土壤和杂质,然后将马铃薯浸泡在10%含氯消毒液中,保持30分钟。
之后,用去离子水反复冲洗3-4次,确保彻底去除消毒剂。
步骤二:组织切割1.将消毒后的马铃薯切割成5mm×5mm的组织块,每块含有一个芽眼。
切割时要确保刀具和工作台的消毒,避免污染。
2.切割好的组织块放入含有抗生素的高浓度杀菌剂中,进行再次消毒处理,时间为30分钟。
步骤三:愈伤组织诱导1.将消毒后的组织块放置在含有适宜激素的培养基上,培养基中添加有机植物激素,如生长素(NAA)和维生素B6(PA)等,以促进愈伤组织的形成。
2.将培养瓶或培养皿密封,放置在光照适宜、温度适宜、湿度适宜的培养箱中。
通常,培养温度为20-25摄氏度,光照强度为3000-5000勒克斯,湿度控制在60-70%。
步骤四:愈伤组织块增殖1.经过适当时间的培养(通常为4-6周),愈伤组织块开始增殖。
此时,可以将它们转移到新的含有低浓度激素的培养基中,以促进增殖。
常用的增殖培养基包括MS培养基、SH培养基等。
2.愈伤组织块的增殖可分为两个阶段,即缩小增殖和快速增殖。
在缩小增殖阶段,愈伤组织块的增殖速度较慢,所需时间较长。
而在快速增殖阶段,增殖速度显著加快,愈伤组织块数量迅速增加。
步骤五:愈伤组织分化1.当愈伤组织块增殖至一定数量时,可以进行愈伤组织的分化。
将增殖后的组织块转移到含有适宜激素的培养基中,培养出新的植株。
2.分化培养基的选择要根据所要培养的植株部位而定。
例如,若要培养出根系,可选择含有较高浓度生长素(IBA)的培养基;若要培养出茎叶,可选择含有较高浓度细胞分裂素(KT)的培养基。
马铃薯组织培养技术综述摘要:马铃薯是我国重要粮食作物之一,其组织培养技术日益成熟,目前已大量应用于生产实践和科学研究。
掌握马铃薯组织培养的基本原理与方法,了解影响培养结果的因素,有利于完善培养技术,解决马铃薯组织培养过程中的常见问题如污染、褐变和玻璃化等。
目前国内专述马铃薯组织培养技术的文献不多,本文参考相关研究,就上述方面对马铃薯组织培养技术进行综述。
关键词:马铃薯;组织培养;影响因素;常见问题。
1 前言植物组织培养是指从植物体内取出组织或细胞,在离体的条件下模拟体内的生理环境,使其生存、生长、繁殖,近年来在生产实践上显示出广泛的应用前景。
马铃薯属茄科茄属植物,是粮菜兼用作物,产量仅次于水稻、小麦、玉米,居世界第四位,我国是种植面积最大的国家【1】。
马铃薯生产中多采用块茎进行无性繁殖,在其繁殖过程中,易受病毒和细菌侵染导致产量下降,经数代积累可使种性退化【2】。
通过植物组织培养技术,可以生产马铃薯的脱毒苗,缩短其生长周期,进行批量快速繁殖。
除了满足生产实践的需要,在科学研究上马铃薯是细胞培养和农杆菌介导转化的模式植物之一。
因此,马铃薯组织培养是植物组织培养技术的重要应用领域。
2 植物组织培养概述植物细胞具有全能性。
细胞全能性是指植物体任何一个细胞都携带者一套发育成完整植株的全部遗传信息,在离体培养情况下,这些信息可以表达产生出完整的植株。
根据这一理论,植物组织培养技术在20世纪初建立起来,至今发展已比较成熟,而且随着研究的深入不断涌现新的技术。
植物组织培养需要经过脱分化和再分化的过程。
分化了的植物根、茎、叶细胞,通过脱分化培养可以产生愈伤组织。
愈伤组织是一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团。
愈伤组织经过进一步的分化培养,提供不同的营养和激素成分,又可再生出完整的小植株。
植物组织培养常见应用领域包括脱毒和快速繁殖、育种研究、低温储存及种质库的建立、药物及其他生物制剂的工业化生产等【3】。
3 马铃薯组织培养技术3.1基本方法3.1.1表面灭菌由于在培养基上,真菌和细菌的生长远远快于植物试材,导致过盛生长而杀死植株。
马铃薯组培生产流程马铃薯组培生产流程马铃薯是世界上重要的粮食和工业作物之一。
传统的马铃薯种植方法存在许多问题,如土壤污染、病虫害等,给农民带来很大的经济损失。
为了解决这些问题,马铃薯组培生产技术应运而生。
本文将介绍马铃薯组培生产的主要流程。
1. 材料准备组培生产的第一步是收集马铃薯的组织细胞。
通常,我们会选用新鲜、健康的马铃薯作为材料。
然后,将马铃薯切成小块,用含有植物生长素和细胞分裂素的培养基进行处理。
2. 培养基制备培养基是组培生产的关键。
它提供了细胞分裂和植物成长所需的营养和激素。
通常,马铃薯培养基中含有葡萄糖、无机盐、维生素和胰蛋白胨等物质。
3. 细胞培养与增殖将经过处理的马铃薯细胞块放入培养基中,并在暗室中进行保温处理,使其不受外界干扰。
此时,细胞逐渐长成植物体,并逐渐增殖。
4. 植株分化将培养好的细胞块移植到含有植物生长素和细胞分裂素的新培养基中,可以促进细胞的不定向分化,形成不定芽、根和茎。
然后,将不定芽、茎、叶和根分开移植,进行标准化处理和定向培养,最终形成真正的植株。
5. 普通育苗和大田试验植株培育好之后,将其移植到普通的苗床中进行管理。
在它们长成健康的马铃薯苗后,会进行大田试验,以确保它们在真实环境下的适应性和生产能力。
6. 入市销售经过上述步骤的马铃薯植株可以投放市场销售,它们可以用来繁殖更多高质量的马铃薯,并在硬化、销售和应用等环节进行处理。
通过以上流程,马铃薯组培生产技术可以确保生产出高品质、高产量的马铃薯,从而提高效率降低成本,增加农民收入。
这种技术也可以避免植物疾病的传播和土壤污染等问题,减少对环境的影响,是一种非常值得推广的作物生产技术。
马铃薯组培实验室总体管理细则
1、实验室在任何时候必须保持干净整洁,不允许在实验室内吃零食,工作完成后带走室内所有垃圾。
2、各无菌室和组培室及接种使用的镊子、剪刀、工作服、口罩等必须定期消毒,工作人员出入无菌室和组培室也必须严格做好消毒工作,严禁在实验室周围吸烟。
3、无菌操作人员必须严格按操作规程进行,标好名称、代号、时间、接种人员信息等,并由管理人员及时清点计数。
进行品种分类登记,并及时分类分批上架。
培养架上排放的材料必须规整,充分利用培养架的空间。
4、每瓶接种20株脱毒苗,每人的接种速度必须达到70瓶以上,污染率必须控制5%以内,
5、不浪费材料,下班时及时切断电源、水源,关锁好门窗,如发现灯亮或水池漏要追究当班人责任。
在上班过程中如发现隐患问题组长必须及时上报。
6、实验室内不得随意领闲杂人员出入,如工作需要、务必做好消毒工作
7、培养基制备人员严格按操程序进行,做到安全、及时、有效,药品的称量,必须准确,并做到及时登记,母液的配置和存放必须按规定进行。
如在实际工作中发现的问题及解决办法:
1对实验室常用的超净工作台、灭菌锅、蒸馏水器,冰箱、
日光灯和紫外灯等定期派人进行检修。
一些常用配件随时损坏将会导致生产延误,应多备些易损易耗的配件。
2.实验室内的湿度过大,墙面与天花板出现长霉现象,霉菌大面积繁殖会引起脱毒苗的大面积污染,极大地影响生产进度,最好能在易长霉菌的地方铺上防潮材料。
马铃薯组织培养1、繁殖瓶苗将待繁脱毒苗在无菌条件下每叶节切一段,接种在仅含大量元素、微量元素和铁盐的无激素M S固体或液体(可用纸桥)培养基的组培瓶中,置培养室内培养。
培养条件为:光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,培养温度(25±2)℃,空气相对湿度50%-60%,自然通风。
叶节段接种30-50d后长成3-5片叶的幼苗。
记录苗芽发生时间,生长状况,污染率。
再按照上述方法重复进行扩繁,直到达到要求繁殖数量为止。
2、繁殖微型薯将上述具有3-5片叶幼苗,加入液体培养基(MS+BA2-10mg/L)或(MS+BA2-10mg/L+IAA1m g/L+CCC100-500mg/L+糖80-100g/L),放入培养室,遮光全黑暗或光照时数少于8h/d,温度(20±2)℃,空气相对湿度50%-60%,自然通风。
经40-70d后,在植株叶腋处长出微型薯。
记录微型薯发生时间,生长状况,污染率。
马铃薯组织培养及原原种生产技术摘要:本文作者根据自己多年的工作经验,详细地介绍了马铃薯组织培养方法和原原种生产技术。
关键词:马铃薯组织培养原原种生产技术病毒和类病毒的累积性感染是引起马铃薯种性退化的重要因素,而通过组织培养获取无病毒种薯来恢复种性的方法已被马铃薯生产地区广泛采用。
现将马铃薯组织培养方法和原原种生产技术介绍如下:1 马铃薯组织培养1.1外植体培养从已催出芽(芽长一般2—4cm)的干净健康马铃薯块茎上掰下芽,用自来水冲洗干净,放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟,在超净工作台上消毒完后,放入无菌水中浸泡6次,每次5分钟,然后接种到MS+6-BA1.5mg/L (毫克/升)+GA30.5mg/L+IBA0.5mg/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L(PH值为5.8)的培养基上,每个培养瓶接种1—5个外植体。
1.2茎尖剥离及初代培养外植体培养20天后,在超净工作台上解剖镜下用解剖针将生长点0.1——0. 5mm部分剥离出来,转接到MS+肌醇100mg/L+6-BA1.5mg/L+GA30.5mg/L+泛酸钙1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L+活性炭0.17g/L(PH值为5.8)的培养基上,每个培养瓶接种4—5个生长点。
马铃薯种苗组培室工作总结引言这篇文档是对马铃薯种苗组培室工作的总结。
我们将回顾过去一段时间我们在马铃薯种苗组培室的工作情况,总结其中的成绩和问题,并提出改进的建议。
通过这样的总结,我们希望能够不断提高工作效率和质量,为马铃薯种植提供更好的支持。
工作概况在过去的几个月里,我们在马铃薯种苗组培室进行了大量的工作。
主要的工作内容包括:1.种子消毒和处理:我们使用专业的消毒方法对马铃薯种子进行处理,以确保其无病虫害。
2.材料准备和灭菌:我们准备了足够的培养基、试管、杂交袋等材料,并进行了灭菌处理,以保证实验环境的纯净。
3.种苗接种和培养:我们按照标准的操作程序,进行了马铃薯种苗的接种和培养工作。
4.数据记录和分析:我们详细记录了每个批次的操作步骤和结果,并进行了数据分析,为进一步研究提供了参考。
工作成果在过去几个月的工作中,我们取得了以下的成果:1.高质量的马铃薯种苗:通过严格控制操作程序和环境,我们培养出了大量高质量的马铃薯种苗,为后期的种植提供了保障。
2.环境质量的提升:我们采取了一系列的措施,提高了种苗组培室的环境质量,减少了细菌和真菌的污染,保证了实验结果的准确性。
3.数据分析和归纳:我们对每个批次的数据进行了仔细的分析和归纳,发现了一些规律和问题,并进行了相应的调整和改进。
存在的问题尽管我们取得了一些成绩,但在工作过程中,我们也发现了一些问题:1.设备故障:在工作期间,一些设备出现了故障,给工作带来了一些困扰。
我们需要尽快修复这些设备,以确保工作的顺利进行。
2.人员不足:在忙碌的时候,我们往往感觉人手不足,无法同时进行多项任务。
因此,需要考虑增加人员配备,以提高工作效率。
3.整体协作需要加强:在工作中,不同人员之间的沟通和协作还有待加强,需要更好的分工合作和信息共享,以提高整体工作效能。
改进措施针对上述存在的问题,我们提出了以下的改进措施:1.维修和维护设备:及时修复故障设备,并加强对设备定期维护和保养,以减少故障的发生。
不同浓度比久对马铃薯组培苗生长的影响马铃薯是世界上最重要的食用作物之一,其栽培面积和产量在全球范围内都居于前列。
在马铃薯的种植中,组培技术可以大大提高其繁殖速度和生产效率,因此备受农业科研和生产部门的重视。
而在组培技术中,培养基浓度的选择对植物生长发育也有一定的影响。
本文旨在探讨不同浓度比久对马铃薯组培苗生长的影响,为马铃薯组培生产提供科学依据和技术指导。
1.马铃薯组培苗生长特点马铃薯组培苗是通过离体培养技术制备的组培苗,其具有生长迅速、无土栽培、病虫害少等优点。
在组培苗培养过程中,培养基的成分和浓度对组培苗的生长发育有重要影响。
2.培养基浓度对组培苗生长的影响培养基中的植物激素、无机盐和碳源等成分的浓度比例,直接影响着组培苗的生长发育。
一般来说,适当的植物激素浓度和无机盐浓度能够促进组培苗的生长,而过高或过低的浓度则会抑制组培苗的正常生长发育。
科学合理地调配培养基的成分和浓度是保证组培苗生长健康的关键。
不同浓度比久对马铃薯组培苗生长的影响主要表现在组培苗的株高、茎粗、叶片数目、根系生长和鲜重等方面。
一般来说,低浓度的培养基有利于组培苗的长势生长,但如果浓度过低,也会导致组培苗生长缓慢,叶片发黄、畸形等现象。
而高浓度的培养基则会加快组培苗的生长速度,但过高的浓度也可能引起植株内生理代谢紊乱,导致生长势受到抑制。
4.培养基浓度比久的优化在马铃薯组培苗生产中,科学合理地选择培养基的成分和浓度比例是非常重要的。
根据马铃薯不同生长阶段的需求,可以对培养基浓度进行优化调整,以促进组培苗的正常生长发育。
在实际生产中,还可以通过控制培养基中植物激素的浓度比例或添加一些生长调节剂等手段来调控组培苗的生长。
二、结论不同浓度比久对马铃薯组培苗生长具有显著的影响。
在实际生产中,我们需要根据马铃薯组培苗的生长特点和营养需求,科学合理地选择培养基的成分和浓度比例,以确保马铃薯组培苗的健康生长。
还需要不断开展相关研究,深入探讨培养基浓度比久对组培苗生长的影响机制,为马铃薯组培生产提供更多的科学依据和技术支持。
马铃薯组织培养脱毒快繁植物组织培养(Plant tissue culture)是指在无菌的条件下,将离体的植物(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(形成层、花药组织、胚乳、皮层等)、细胞(体细胞和生殖细胞)以及原生质体,培养在人工配制的培养基上,给予适当的培养条件,使其长成完整的植株。
由于培养物是脱离植物母体,在玻璃瓶中进行培养,所以也叫做离体培养。
在有些情况下,再分化也可不经愈伤组织阶段,而直接发生于脱分化的细胞。
[1]植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分,在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物,脱除病毒得到无毒苗株,继而在大田快速繁殖的技术。
脱毒及离体快繁,这是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。
主要是进行茎尖培养脱除病毒。
对于脱毒苗、新育成、新引进、稀缺良种、优良单株、濒危植物和基因工程植株等可通过离体快速繁殖,同时可不受地区和气候的影响,比传统的繁殖方法快数万倍。
植物组织培养已发展成为一门富有生命力的学科。
[2]植物组织技术在农业上的应用有很多方面,其中植物脱毒和离体快速繁殖是目前植物组织培养应用最多、最有效的一个领域。
通过植物生物技术改良作物是以后农业科学领域最重要的发展之一。
首先用茎尖脱毒获得无病毒植株成功的是法国人莫勒尔,他们用大丽花为原料,在1952 年试验产生了无病毒植株。
在1955 年以马铃薯为材料产生了无病毒植株。
农业生产中,许多农作物都带有病毒,无性繁殖方式植物如马铃薯、甘薯、大蒜等尤为严重,但是感病植株并非每个部位都带有病毒。
[3]一、国内外研究动态(一)研究背景栽培种的马铃薯(Solanurn tuberosurn)是双子叶种子植物, 属茄科(Solanceae)茄属(Solanum)的一年生草本植物,生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖。
[4]马铃薯用块茎繁殖,植株长势逐年削弱、矮化,分枝变小,结薯变小,产量逐年下降,甚至绝产,这种现象叫做种性退化。
马铃薯组培周记
马铃薯组培苗扩繁是将组培苗上带有生长点的茎段进行再次扦插快速繁殖的一种培养方法。
马铃薯组培周记我的观察如下,首先来介绍我的培养方法,用75%酒精喷待接的试管苗和制备好待用的扩繁培养基表面,将已脱毒株系按每苗留1-2片叶为一个茎段剪下,正向插入扩繁培养基(即 MS+6-BA0.5mg/ L+NAA0.5-1.5mg/ L+蔗糖30g/ L +琼脂8g/ L +活性炭0.17g/ L , PH 值为5.8的培养基)上。
一般每个培养瓶接种15个茎段,在温度25-27℃,光照2000-3000Lux。
第1周由成苗转入新的培养基为第1天,1-3天通常是愈合期;4—7天向下扎出须根,向上从顶端或叶腋处生出第一片新叶。
在此阶段培养(太旗气候)温度保持在23℃±2℃、湿度45%、少光8—10小时为宜、通风3小时左右。
在此阶段后期挑第一遍污染。
第2周总体生长速度快,7—14天期间生长6㎝左右,此阶段培养温度保持在22℃、湿度55%、光照10小时为宜、较上一阶段增加通风。
在根未盘满瓶底之前挑第二遍污染。
第3周生长速度缓慢,叶片颜色由浅绿变为深绿,根系基本盘满整个瓶底。
此阶段培养温度保持在20℃、湿度45%、光照12小时为宜、增加通风以防止瓶苗内气生根或分叉的情况出现。
第4周总体生长速度慢,较第三周快,21—28天的组培苗生长到10㎝左右,基本成苗可作为基础苗继续扩繁,此阶段培养温度保持在20℃、湿度45%、光照12小时为宜、保持适宜通风。
此阶段根
据苗长势及时转接,超过35天苗易缺少营养变黄影响下代质量。
除此之外还需要根据实际地域、季节、品种、组培室硬件设施做出相应的管理调整,以达到优质苗的标准。
马铃薯组培生产流程的马铃薯组培生产流程的探索与理解1. 引言马铃薯是世界上重要的粮食作物之一,被广泛应用于食品加工、养殖业和工业生产等领域。
在马铃薯种植中,组培生产技术被广泛采用,可实现快速繁殖优良品种和传播无病害马铃薯植株。
本文将深入探讨马铃薯组培生产流程的各个方面,帮助您更加全面地了解这一技术的原理和应用。
2. 马铃薯组培生产流程的基本步骤2.1 材料准备在马铃薯组培生产流程中,首先需要确保高质量的原材料。
选择无病害、健康的马铃薯植株作为起始材料,并进行表面消毒以去除外界的污染物和病原体。
2.2 茎段切割将马铃薯茎段切割成适当的大小,使其含有一个或多个芽眼。
茎段的选择应注重选用茎尖或茎中段的组织,以获得更好的培养效果。
2.3 培养基配制制备适合马铃薯组培的培养基是组培生产流程的关键。
常用的培养基包括MS培养基和Schenk和Hildebrandt培养基等。
培养基中添加适量的植物生长调节剂(如激素)有助于激发茎段的芽眼分裂和发根。
2.4 培养条件调控为了促进茎段的发芽和生长,适宜的培养环境条件非常重要。
调节培养基的温度、光照和湿度等因素可以影响茎段的生长速度和质量。
2.5 孵化和发芽将切割好的茎段置于含有适量培养基的培养瓶中,并置于恒温箱中进行孵化。
在适当的温度和湿度条件下,茎段的芽眼会发生分裂和萌发,形成初级茎。
2.6 子瓣培养和愈伤组织的诱导将初级茎切割成子茎瓣并转移到含有适量植物生长调节剂的培养基上进行培养,可以促进愈伤组织的诱导和植株再生。
2.7 植株生长和播种经过适当的培养时间,愈伤组织将发育成植株,并形成根系。
此时,可以将植株取出,清洗掉培养基,并进行土壤或合适介质的播种,进行后续生长。
3. 对马铃薯组培生产流程的理解3.1 组培技术的优势马铃薯组培生产流程具有许多优势。
由于每个茎段都可以独立生长成植株,因此可以实现大规模的繁殖和生产马铃薯种苗。
在组培过程中,可对植株进行选择性生长,从而快速获得高产、耐旱和抗病性强的马铃薯品种。
马铃薯组培快繁实验报告
实验目的: 探究马铃薯组织培养快速繁殖的效果及影响因素。
实验材料:
1.马铃薯鲜根茎;
2.呋喃、氯仿、乙酸乙酯等有机试剂;
3.组织培养基。
实验方法:
1.将马铃薯鲜根茎表皮和细胞分离;
2.制备酵母提取物培养基;
3.将马铃薯组织进行无菌培养;
4.对组培快繁效果进行观察并记录;
5.探究温度、光照、培养基成分等因素对马铃薯组培快繁的影响。
实验结果:
经过6个月的组培, 马铃薯组织得到快速繁殖, 从单个组织增殖到100个以上, 可见组织培养在马铃薯鲜根茎中具有较好的效果。
在探究因素对组培快繁的影响过程中, 发现温度、光照和培养基成分三者间都有显著影响。
较高的温度有利于组织培养, 但也容易导致组织失去活性。
光照则会影响植物代谢活动以及组织培养过程中细菌或真菌的生长, 长时间暴露在强光下会导致组
织死亡。
而培养基成分则是影响效果较大的因素之一, 其中激素的添加比例、营养因素的比例、蔗糖的浓度等都将会影响组培效果。
实验结论:
马铃薯组培快繁具有一定的优势, 适宜的培养条件下, 可实现快速繁殖, 以便进行后续的育种和研究工作。
同时在培养过程中, 需根据不同的因素进行调节, 保证组织能够生长、分化、产生完整的植株。
马铃薯组培苗工厂化高效快繁技术马铃薯组培苗工厂化高效快繁技术摘要:本文介绍了我系在脱毒马铃薯快繁上的生产技术,较常规马铃薯快繁技术有所改进,本文就马铃薯从培养基制作、接种技术到温光湿控制到瓶装苗及其污染控制、消毒灭菌和日常管理等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁生产管理技术要点和应注意的问题,以求达到工厂化高效快繁目的。
关键词:马铃薯,组培苗,高效,快繁,工厂化生产江苏农林职业技术学院农艺系王宇二0一一年七月十五日目录一、前言 (2)二、组培实验室的合理设计 (3)(一)组培实验室组成 (6)(二)设计具体原则 (8)(三)我系组培室平面简图 (8)三、实验室设备配制 (3)(一)通用器械 (6)(二)各种盛具 (8)(三)计量器械 (6)(四)灭菌器械 (8)(五)接种器械 (6)(六)培养器械 (8)(七)其它设备 (6)四、培养基的制作 (3)(一)培养基成分 (6)(三)培养基的配制 (8)五、接种操作 (8)(一)准备工作 (3)(二)接种步骤 (4)(三)记录与打扫 (4)六、培养条件管理 (9)(一)培养条件 (9)(二)继代次数及繁殖速率 (9)七、日常管理 (9)(一)污染防治 (4)(二)定期检查 (10)八、常见问题及解决措施 (9)(一)培养基配制中常见问题 (3)(二)组培苗污染原因及解决措施 (4)(三)组培苗常见问题 (4)马铃薯组培苗工厂化高效快繁技术一、前言马铃薯是无性繁殖的,以前主要以营养器官薯块播种,极易感染病菌,种薯年年退化,种薯“退化”主要是由病毒引起的,通过茎尖分生组织培养及后期的良繁体系能够获得“无病毒”的“复壮”健康种薯。
我国从上世纪70年代初开始研究推广这一技术,现已作为一种成熟技术被广泛应用,实践证明用高质量的脱毒种薯可使产量增加30%-50%,我国近两年已加大生产和推广脱毒薯力度,无毒种薯已渐渐在主产区普及,推广种植面积达66.67万hm2,每年增效2.5亿元以上。
马铃薯的种植技术,附组织培养步骤回答选择种薯:要选择品种优良的种薯,一般选择表皮鲜艳且健康无畸形的马铃薯。
催芽处理:将选取的种子放在湿润且厚度在10cm 左右的沙土中,平放种子,在上面覆盖一层5cm厚度的过筛沙土,浇水,保持土壤潮湿。
整地需求:栽种前消毒土壤,再浇入有机肥后进行松土。
入栽定植:栽种前在土表埋入少量稀薄的有机肥颗粒。
一、马铃薯的种植技术1、选择种薯种植马铃薯时,要挑选品种优良的种薯,一般选择表皮鲜艳且健康无畸形的马铃薯,再对其进行催芽处理。
2、催芽处理催芽处理是马铃薯种植技术中的关键,主要将选取的种子放在湿润且厚度在10cm左右的沙土中,将种子平放在里面,在上面覆盖一层5cm厚度的过筛沙土,用喷水壶进行浇水,保持土壤湿润状态,温度保持在20℃左右即可。
3、科学整地(1)栽种前需要将土壤进行消毒,消毒方法为喷洒稀薄的硫酸铜或者草木灰溶液,以防止病菌的滋生。
(2)基质应以疏松肥力足且富含有机质的土壤为主,马铃薯不适合连作,易发生病害,可在浇入有机肥后进行松土。
4、入栽定植(1)栽种前需要在土表埋入少量稀薄的有机肥肥粒,以加快根系的生长。
(2)一般早熟的种苗间距需保持在20公分左右,中熟品种的则在25公分左右,栽后覆盖一层6-10cm左右的细土,浇入水分后保湿,进行深耕处理。
5、栽后管理(1)如气温较低,需要在土壤上覆盖一层地膜,以免植株冻伤。
(2)在生长期间需控制温度在16℃-20℃左右,3月时可以打开地膜,利于通风,长势好的时候可追施1-2次的磷酸二氢钾,保持土壤湿润。
二、马铃薯的组织培养步骤1、什么是马铃薯的组织培养(1)马铃薯的组织培养是指,通过无菌操作分离马铃薯体的一部分(外植体explant),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。
(2)主要有原生质体(Protoplast),悬浮细胞,组织(愈伤组织Callus、茎尖分生组织),器官(胚,花药,子房,根和茎的培养)。
马铃薯的块茎组织培养的研究
生命科学学院生物工程132班组长:林伟平组员:温楚婷凌琦雯刘钰荧
一,实验目的
(1)以马铃薯的块茎为材料,研究经过器官分化或愈伤组织增殖与再分化途径,获得较多的试管苗,掌握植物快速繁殖的基本方法和过程。
(2)观察和分析不同糖类对外植体愈伤组织诱导,增殖和器官分化的影响。
二,实验原理
在植物组织培养体系中,从外植体形成再生植株有不同的再分化途径,会受到培养基中不同浓度的糖的影响。
植物的快速无性繁殖是指以合适的外植体为起始材料,在无菌条件下,通过合适的培养技术,在有限的空间,短时间内快速生产大量植株的技术。
三,实验材料,试剂与器具
(1)实验材料:马铃薯块茎
(2)试剂:实验十一配制的各种培养基母液,蔗糖,葡萄糖,琼脂,蒸馏水,1mol/LHCl,1mol/LNaOH,HgCl或次氯酸钠,吐温20,75%乙醇或20g/L新洁尔灭,无菌水等。
(3)器具:高压灭菌锅,分析天平,酸度计,光照培养箱,微波炉,冰箱,培养架,果酱瓶,烧杯(1000mL,500mL,100mL,50mL),移液管,量筒,不锈钢镊子,剪刀,解剖刀,脱脂棉,培养皿,称量纸,记号笔,标签纸,药匙,玻璃棒,洗耳球,洗瓶,电炉,酒精灯
四,实验内容
1,确定培养基配方,MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+8g/L琼脂+不同浓度的葡萄糖/不同浓度的蔗糖(分别为1%,2%,3%,4%的葡萄糖或蔗糖)
3,移液与溶化:将所需的各储存母液按顺序摆放好,将洁净的量筒,烧杯,移液管,玻璃棒,漏斗等放在指定的位置,准备好蒸馏水及瓶盖,包装纸等,取100mL小烧杯一只,用50mL 量筒量取大量元素,用各母液专用移液管分别吸取微量元素母液,铁盐母液,有机附加物母液,2,4-D母液,6-BA母液。
取1000ml烧杯一只,先用量筒取1000mL蒸馏水倒入烧杯中,用记号笔画好液位线,将蒸馏水倒出一半,准确称取8g琼脂倒入烧杯中,置于电炉煮沸,待琼脂完全溶化后,加入10g葡萄糖,充分溶解后,将准备好的含大量元素,微量元素,铁盐,有机附加物和植物生长调节物质的母液混合物倒入烧杯中,用蒸馏水将盛过母液混合物的小烧杯洗三次,一并倒入1000mL烧杯中,加热至沸腾,将烧杯远离火源,并加蒸馏水定容至设定的液位线。
4,调节pH:用酸度计测定培养基的pH,用1mol/LHCl或1mol/LNaOH溶液将培养基的pH调整至5.8到6.0。
调整时,应用玻璃棒不断搅拌。
5,分装:将溶化的培养基趁热均匀的分装于果酱瓶,每瓶30mL培养基,分装3瓶,随即封
口。
6,重复步骤3到步骤5,步骤3中分别加入20g葡萄糖,30g葡萄糖,40g葡萄糖,10g蔗糖,20g蔗糖,30g蔗糖,40g蔗糖。
7,含有每个浓度的糖的培养基分装三个果酱瓶。
一共24个果酱瓶。
8,将分装好的培养基及用报纸包扎好的剪刀,镊子,解剖刀,含有滤纸的培养皿和果酱瓶装蒸馏水等,置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌,灭菌条件为温度121℃,压力为1.1Kg/cm2,灭菌时间20min。
9,对外植体进行消毒,接种:(1)准备工作,接种前,用75%乙醇棉球擦拭超净工作台台面,将培养基,无菌水及接种用具,废液杯等放入超净工作台台面适当的位置,打开超净工作台紫外灯,照射30min后关闭,然后打开风机,10min后,再打开日光灯进行无菌操作。
(2)外植体表面消毒与整理,将马铃薯块茎在自来水下冲洗干净,用小刀切取块茎芽眼部位,置于50mL烧杯中,用75%乙醇浸泡30s后,立刻除去乙醇,在超净工作台上,在烧杯中加入含有1到2滴吐温20的0.1%氯化汞溶液,浸泡10min,倒去消毒液,用无菌水洗三次,将马铃薯块茎置于经灭菌处理过的垫有无菌滤纸的培养皿中,使用镊子和解剖刀将马铃薯切成小块。
(3)接种,在酒精灯上方,左手握住果酱瓶,右手打开瓶盖,将瓶盖朝上置于台面,右手用镊子将马铃薯块茎平放于培养基表面。
(4)培养与观察,将接种后的培养瓶置于组织培养室内,有光培养。
五,实验结果统计分析
蔗糖和葡萄糖的浓度各四个,分别为1%,2%,3%,4%,每个浓度做三个,一共二十四个果酱瓶,每四天观察一次。
愈伤组织诱导结果
器官分化与植株再生结果
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