初始污染回收率及检测记录

初始污染菌检验方法适用性验证方案文件编号：编制/日期：审核/日期：批准/日期：XXXX有限公司1.验证目的---------------------------------------------------------32.范围-------------------------------------------------------------33.验证小组成员及职责-----------------------------------------------34.参考资料---------------------------------------------------------35.检验仪器及器具---------------------------------------------------36.菌种信息---------------------------------------------------------47.试验环境---------------------------------------------------------48.产品选择---------------------------------------------------------49.方法适用性验证---------------------------------------------------410.修正系数（校正因子）--------------------------------------------611.测试结果--------------------------------------------------------712.再验证周期------------------------------------------------------713.结论------------------------------------------------------------714.附表------------------------------------------------------------81.验证目的证明本公司医疗器械产品初始污染菌洗脱培养计数检验方法的适宜性和准确性。

初始污染菌检验操作规程文件编号：版本：编制/日期：审核/日期：批准/日期：受控状态:8批准实施1 目的为了规范产品初始污染菌检验操作，编制本规程。

2 适用范围本规程适用于产品初始污染菌检验操作。

3 职责3.1 检验室负责对产品初始污染菌检验操作的取样和化验，并填写检验报告；3.2 品管部经理负责签发检查报告。

4 工作程序（《中国药典》2020年版）4.1 供试品数量成品：灭菌前产品至少取3个单位以上。

4.2 供试液制备和接种4.2.1 取样品至少10个，以无菌操作方法移入灭菌的50ml 0.9%NaCl震摇洗脱备用。

4.2.2 用无菌吸管取上述样品洗脱液混合物2ml，分别注入两个灭菌平皿内，每平皿1ml。

另取1ml 注入到9ml灭菌洗脱液中，用手振荡80次充分混匀，使成1:100稀释液，另取一支吸管吸取2ml，分别注入两个灭菌平皿内，每平皿1ml。

4.2.3 将熔化并冷却至45℃左右的大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）倾注于平皿内，每平皿约15ml，另倾注一个不加样品的灭菌空平皿，作空白对照。

随即转动平皿，使样品与培养基充分混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平皿，在37±1℃恒温培养48小时，观察结果。

4.3结果观察4.3.1 先用肉眼观察计数菌落，然后再用5-10倍放大镜检查，以防遗漏。

记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。

若其中一个平板有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以无片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。

若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。

4.3.2 首先选取平均菌落数在30—300之间的平板，作为菌落总数测定的范围。

当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数。

4.3.3 若有两个稀释度，其平均菌落数在30—300之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。

初始污染菌检验规程1.目的：制订初始污染菌检验规程，对从事检测的操作人员进行培训指导按检测规程操作。

2.范围：本方法适用于一次性使用无菌医疗器械灭菌前染菌量的检测。

3.术语和定义：无4.职责：质量部负责实施。

5.内容：5.1仪器电子天平、电热恒温干燥箱、净化工作台、压力蒸汽灭菌器、电热恒温水浴锅、恒温培养箱、电炉。

5.2器具烧杯、量筒、三角瓶(带硅胶塞)、试管(带硅胶塞)、酒精灯、手术剪刀、培养皿、刻度吸管、薄膜过滤器5.3 培养基、试剂：胰酪大豆胨琼脂培养基、无菌生理盐水5.4 试验前的准备5.4.1胰酪大豆胨琼脂培养基的制备：按产品说明书进行配制、灭菌，供细菌培养记数用。

5.4.2 无菌生理盐水（0.9%氯化钠溶液）的制备：a．配制：称取9.0g氯化钠加入蒸馏水溶解使成1000ml。

b. 分装：分装于试管中，装量不得超过试管容量的2/3，盖上硅胶塞，包好。

c．灭菌：121℃20分钟高压灭菌。

5.5 取样方式a）灭菌前随机抽取样品；b）抽取不适于销售的产品，如废料或不合格品（即已经过各关键工序的生产过程阶段（包括清洗和包装过程）的产品）；c）初包装材料可用无菌手续取样随即取10套/件（卷料无菌手续取100cm2）。

注:以上方式可根据产品具体情况择其一操作；5.6 取样频率当月生产各产品至少抽取一批次；每批来料初包装材料最少抽取一次。

5.7 试验步骤5.7.1 消毒：将待检的产品外包装用酒精棉擦拭后，放于经擦拭的垂直式超净工作台面，紫外灯照射0.5小时以上。

5.7.2 供试液的制备：按无菌操作法制备供试液，制备后应在2小时内进行检测；若保存在2～8℃，可在24小时内使用。

5.7.3用无菌注射器吸取10～100ml无菌生理盐水，注入样品管内往返振荡5次；外部用无菌注射器吸取10～100ml无菌生理盐水冲洗管壁；内外壁如此各重复二到三次。

分别将供试液注入无菌容器中，分别检测。

5.7.4 以上制备的供试液直接或稀释后采用薄膜过滤法、平板计数（平皿法）或其他适宜方法进行分析检查。

XXXXX公司建立医用产品灭菌剂量验证报告送检单位：公司日期：年月日目录序言 (2)试验前准备工作 (2)方法 (4)实施内容 (4)结果 (5)结论 (6)附注 (6)参考资料 (6)初始污染菌检测规范 (6)确定灭菌剂量 (8)无菌检查 (9)序言本实验是对医用产品公司的一次性医疗用品进行了辐射灭菌剂量设定和验证.实验原理是基于ISO11137—2：2006的方法，即先对辐照前产品的初始污染菌进行测定,然后选择验证剂量.再用验证剂量对产品进行辐照，并测定辐照后存活微生物的样品件数，以此来确定所确定的验证剂量能够满足10—6的灭菌保证水平。

本实验从年月日开始至年月日结束.试验前准备工作一、样品1样品：医用产品，三个批号:生产企业：公司。

2器具及试剂2。

1器材试管容量瓶三角烧瓶酒精灯灭菌剪刀、镊子灭菌平皿(9cm)75％乙醇棉灭菌刻度吸管（1ml、5ml）紫外可见分光光度计立式压力蒸汽灭菌器电热鼓风干燥箱酸度计恒温培养箱电热恒温水浴锅生化培养箱电热恒温干燥箱2。

2培养基及试剂：a）流体硫乙醇酸盐培养基b)改良马丁培养基c）营养琼脂培养基2。

3稀释液、冲洗液及其制备方法a）质量浓度为9g/L的无菌氯化钠溶液b）0。

1％蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清,调节pH值至7。

1±0.2，分装，灭菌。

c）pH7。

0氯化钠-蛋白胨缓冲液取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4。

30g、蛋白胨1。

0g，加水1000ml,微温溶解，滤清，分装,灭菌。

二、实验前准备2.1培养基要求：用于培养需(厌）气菌和真菌的培养基的制备、培养基灵敏度检查及其他各项要求应符合《中国药典(二部）》附录中《无菌检查法》的规定。

培养基使用按中国药典方生产的符合规定的脱水培养基。

制备后采用验证合格的灭菌程序灭菌。

制备好的培养基保存在2～25℃、避光的环境.2。

2器具灭菌：与供试液接触的所有器具应采用可靠方法灭菌,置压力蒸气灭菌器内121℃30min，或置电热干燥箱内160℃2h。

1 目的
建立校正因子的检验规程，为初始污染菌的检测做前期准备，周期性评估对应初始污染菌测试的校正因子。

2 范围
本规程适用于我司所有需要检测初始污染菌的产品，同时包括需要检验初始污染菌的原材料的校正因子测试。

3 职责
质量部微生物实验员负责按此规程进行校正因子测试。

4 定义
4.1初始污染菌：一件产品和/包装上存活的微生物总数。

通常以初始污染菌估计值计。

4.2 初始污染菌估计值：通过对活菌计数或灭菌前活菌计数加上一个回收效率校正因子，得出的总值。

4.3 校正因子：用于对活菌计数或灭菌前活菌计数进行修正的数值，以补偿产品上无法完全洗脱的微生物，
以便算出初始污染菌的估计值。

4.4回收率：对某一特定的技术从产品上获取微生物的能力的测定值。

5 实验器材
电子天平、生化培养箱、压力蒸汽灭菌器、恒温水浴锅、超净工作台、旋涡混合仪、洗脱液（0.9%无菌生理盐水）、普通琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、平皿、电动吸引器、冰箱、移液器/移液管
6 抽样要求及频次
6.1抽样要求
6.1.1产品：随机抽取5件同一批号中的产品样品进行检测。

6.1.2原材料的供试液制备
采用无菌手法取10 1g，放入200mL灭菌生理盐水中，放到混合仪上，开始振荡，直至充分混匀。

注意：如果被检样品含有大量吸水树脂材料而导致不能吸出足够样液时，稀释液量可按照每次50mL递增，直到能吸出足够的测试用样液，在计算细菌总数和霉菌及酵母菌总数时应调整稀释度。

6.2频次
6.2.1在产品、生产环境及各道生产工序未发生变化的状态下，每年对对应的的初始污染菌的校正因子重新。

初始污染菌、回收率试验
近日，科学家们通过试验证实，将初始污染菌与回收率结合起来，可以更好地促进水源的可持续利用。

首先，初始污染菌可以提高水源的回收率，从根本上减少污染物。

因此，使用初始污染菌作为水源的污染物减少的方式，不仅可以提高
水源的回收率，还有利于降低水中污染物的浓度。

初始污染菌的使用，可以在短期内显著地降低水源中的污染物。

其次，回收率可以更好地帮助水源减少流失，促进水源的可持续
利用。

因此，试验表明，将初始污染菌和回收率综合起来，可以更好
地促进水源的可持续利用。

随着初始污染菌的应用，水源的回收率可
以显著提高，有利于将水源的流失降至最低。

最后，科学家们建议，要想促进水源的可持续利用，应该将初始
污染菌和回收率有机地结合起来，充分发挥它们的优势特性。

联合使
用两者，给水源带来更好的可持续利用前景，有助于减少污染物，达
到更高回收率，促进水源的可持续发展。

综上所述，将初始污染菌与回收率通过试验结合起来，将使水源
的可持续利用受到更大的鼓励。

只要我们充分发挥它们的优势特性，
就能够促进水源的更好发展，净化我们周围的环境。

医疗器械灭菌工艺检查要点指南（2010版）发布时间：2011-08-17灭菌工艺过程控制是无菌医疗器械生产企业质量管理体系中极其重要的一环，灭菌控制水平的结果直接影响着无菌医疗器械产品的质量安全。

本指南旨在帮助北京市医疗器械生产监管人员增强对无菌医疗器械相关知识的认识，指导和规范全市医疗器械生产监管人员对医疗器械生产企业灭菌工艺控制水平的监督检查工作，同时，为医疗器械生产企业（以下简称生产企业）在灭菌工艺过程管理要求提供参考和依据。

当国家相关法规、标准、检查要求发生变化时，或随着灭菌技术和方法的不断发展及实际情况的变化，应重新对本指南进行修订。

一、适用范围本指南适用于北京市药品监督管理局组织、实施的《医疗器械生产企业许可证》核发、变更、换证等现场检查、医疗器械质量管理体系考核、医疗器械生产质量管理规范检查、医疗器械生产日常监督等各项涉及灭菌工艺的检查。

目前已知的灭菌方法很多，根据灭菌方式的不同，医疗器械行业常用的灭菌方法有环氧乙烷灭菌（以下简称EO灭菌）、辐照灭菌和湿热灭菌等。

本指南选择目前北京市医疗器械生产企业普遍采用的EO灭菌和钴60辐射灭菌进行说明。

二、EO灭菌的检查EO灭菌过程的检查应在了解生产企业是否掌握灭菌知识和要求的基础上，围绕灭菌设备的管理、灭菌确认及再确认和日常灭菌活动等情况开展，重点检查生产企业实施灭菌过程控制及动态监视灭菌过程的情况。

（一）EO灭菌确认的检查灭菌工艺的确认是保证灭菌效果达到灭菌要求的重要步骤，也是生产企业日常对灭菌活动进行监视控制的主要依据。

生产企业应在初次对产品进行灭菌前，对灭菌过程进行确认，确认产品特性、灭菌器参数设置、工艺参数等。

生产企业的灭菌工艺控制部门应熟练掌握灭菌确认过程的关键点和重要环节，确认工作可与灭菌设备生产厂共同完成，但生产企业应全程参与灭菌确认工作。

灭菌确认工作的应包括：输入→策划→确认过程→确认报告。

1、输入应包括：与产品有关的要求，如法规要求、顾客要求、产品无菌保证水平、产品的设计、包装的设计、产品性能要求等。