下载文档原格式
奶牛瘤胃生理及其发酵条件的调控关键词：奶牛瘤胃生理发酵调控1 前言在反刍动物的四个胃中，瘤胃是靠近食道的第一个胃，容积约有70—120公升。
瘤胃可以看作是一个供厌气性微生物繁殖的连续接种的活性发酵罐，从某种意义上来说，人们养牛实际是在养瘤胃内的微生物。
在瘤胃中居留、繁殖、生长着亿万个微生物（主要为细菌和纤毛虫）。
它们产生各种物质，将进食的物质进行发酵，微生物发酵的最终产物为挥发性脂肪酸、维生素B、K和微生物菌体蛋白。
了解瘤胃的消化生理和生化反应，掌握瘤胃发酵的过程及条件，能通过饲料配方及饲养措施对其进行调控，稳定较好的发酵条件，使奶牛的健康、生产水平和饲料效益会有很大的提高。
2 瘤胃消化生理瘤胃微生物包括细菌、纤毛虫和真菌。
每毫升瘤胃液中有160—400亿个细菌和20万个纤毛虫，它们相互协作饲料中可消化物质。
碳水化合物在瘤胃内的产物为乙酸、丙酸和丁酸等恽发性脂肪酸。
非结构性碳水化合物在细菌和真菌作用下，降解较快，产物中丙酸比例较高。
而结构性碳水化合物（主指粗纤维）降解较慢，以细菌和真菌消化为主。
细菌和真菌伏贴在纤维表面上，对粗纤维进行消化并逐渐地深化，纤毛虫对粗纤维的结构进行物理性破坏，更有利于细菌和真菌的伏贴，产物中乙酸比例高。
消化非结构性碳水化合物的细菌对PH的敏感度比纤维细菌低，PH5.5时仍不受影响，但是如果发酵过快（饲料颗粒较细），PH过低，那些能将中间产物乳酸转化生成丙酸的细菌被抑制，造成乳酸过量，出现“酸中毒”。
产生的丙酸在体内转化为葡萄糖，乙酸和丁酸被用于合成脂肪。
因此乙酸比例提高，奶脂率提高，而丙酸比例提高时，奶脂含量降低。
饲料中的蛋白质在瘤胃中微生物作用下，被降解为肽，最后产物是氨和有机酸。
细菌可利用氨作为N源来合成微生物菌体蛋白，但这个合成过程必须有能量和氨协调地供应，效率才高。
如果氨释放过快，能量不足，会造成大量氨从瘤胃中吸收入血液，最后经肝脏处理产生尿素由尿中排出，造成N源的浪费，甚至会造成氨中毒，因此须对蛋白质进行过瘤胃保护。
瘤胃体外发酵方法绞股蓝皂甙对山羊瘤胃菌群及微生物发酵特性和甲烷产量的影响_王新峰1.2瘤胃液的采集和培养基制备瘤胃液来自4头装有永久性瘤胃屡管的波尔山羊与本地山羊的杂交成年公山羊,日粮以羊草为主,每日补饲1509精料(精料组成,玉米:豆粕=2:1),自由饮用清洁水。
于晨饲前采集瘤胃液,用4层纱布过滤,与培养基按1:2混合,在39℃培养箱中培养30分钟,并充分通入CO2,进行厌氧分装,每瓶60mL。
每升培养基中含有15.71mg CaCl2·2H2O,11.90mg MnCl2·4H2O, 1.19mg CoCl2·6H2O, 9.52mg Fe Cl3·6H2O, 0.143g MgSO4·7H2O, 76.2mgNaOH, 0.95gNH4HCO3, 8.33g NaHCO3, l.36g Na2HPO4, 1.48g KH2PO4, 2.98g Na2S·9H2O和0.298g盐酸半肌胺(Menke等,1979)1.3试验设计试验根据绞股蓝皂试添加量(0、5、10、20和40 mL /60mL)分为5组,对照组不加皂试,实验组分别加入5,10,20和40mg皂试。
取60mL瘤胃液与培养基混合液(瘤胃液:培养基二1:2)分装于160mL的发酵瓶中,每瓶含0.69底物"底物由精料和粗饲料组成(3:7),精料为玉米和豆粕,分别为0.126和0.054g,粗饲料为0.42g羊草草粉(过1mm筛)。
发酵瓶封盖!气压平衡后置于39℃培养箱中培养,并定时摇匀,培养24h。
第二次发酵培养120h,分别在0,1,2,4,6,8,12,24, 48,72,96,120h, 计算出累积产气量;测定120h后干物质消失率。
1.4指标测定1.4.1产气量的测定根据Theodorou等(1994)的方法,使用气压转换器(IGER,UK)定时测定厌氧瘤胃微生物发酵产气量。
-----WORD格式--可编辑--专业资料-----饲料进入瘤胃后，在微生物作用下，发生一系列复杂的消化和代谢过程，产生挥发性脂肪酸（VFA），饲料的分解产物可用来合成微生物蛋白、糖原和纤维素等，供机体利用。
（1）糖类的分解和利用：反刍动物饲料内的糖类物质均能被微生物发酵，其中可溶性糖类的发酵速度最快，淀粉次之，纤维素和半纤维素最慢。
反刍动物饲料中的糖类物质主要是纤维素，其中40％—45％在瘤胃内被细菌和纤毛虫分解，其他糖类由不同细菌和纤毛虫发酵。
发酵的终产物主要是挥发性脂肪酸（VFA）、CO2和甲烷（CH4）。
VFA主要是乙酸、丙酸、丁酸，可以经动物瘤胃壁吸收进入血液，被机体利用，其中乙酸和丁酸是泌乳期反刍动物合成乳脂的主要原料。
瘤胃微生物在发酵糖类的同时，还能把分解产生的单糖和双糖转化成糖原，储存于细胞内。
微生物随食糜进入皱胃和小肠后能被消化，糖原可被宿主吸收利用，是反刍动物机体葡萄糖的来源之一。
（2）蛋白质的分解和合成：反刍动物能利用饲料中的蛋白氮和非蛋白氮，合成微生物自身的蛋白质，供宿主利用。
饲料蛋白进入瘤胃后50％—70％被微生物的蛋白酶分解为多肽和蛋白酶。
氨基酸经脱氨基酶的进一步分解，生成有机酸、氨和CO2。
微生物也可以直接利用氨基酸和多肽合成蛋白质，储存于微生物内，所以瘤胃中游离氨基酸很少。
瘤胃内的微生物还能分解饲料中的非蛋白含氮化合物，如尿素、铵盐、酰胺等，产生氨和CO2。
一部分氨作为氮源，可被微生物利用，用来合成菌体蛋白，储存在微生物体内；一部分可被瘤胃壁吸收进入血液，经门静脉运输到肝，经鸟氨酸循环生成尿素。
一部分尿素分泌到唾液中，进入瘤胃后被细菌分泌的脲酶分解为CO2和氨。
氨被瘤胃壁吸收后，可重新合成尿素，这一过程称尿素再循环。
糖类的分解产物和挥发性脂肪酸可为蛋白质的合成提供碳源，并可提供能量。
因此饲料中必须有足够的糖类物质，如给骆驼投喂几乎不含蛋白质的饲料时，其代谢产生的尿素并没有从尿中排除，而是在瘤胃用于蛋白质的合成。
（1）糖类的分解和利用：反刍动物饲料内的糖类物质均能被微生物发酵，其中可溶性糖类的发酵速度最快，淀粉次之，纤维素和半纤维素最慢。
反刍动物饲料中的糖类物质主要是纤维素，其中40％—45％在瘤胃内被细菌和纤毛虫分解，其他糖类由不同细菌和纤毛虫发酵。
发酵的终产物主要是挥发性脂肪酸（VFA）、CO2和甲烷（CH4）。
VFA主要是乙酸、丙酸、丁酸，可以经动物瘤胃壁吸收进入血液，被机体利用，其中乙酸和丁酸是泌乳期反刍动物合成乳脂的主要原料。
瘤胃微生物在发酵糖类的同时，还能把分解产生的单糖和双糖转化成糖原，储存于细胞内。
微生物随食糜进入皱胃和小肠后能被消化，糖原可被宿主吸收利用，是反刍动物机体葡萄糖的来源之一。
（2）蛋白质的分解和合成：反刍动物能利用饲料中的蛋白氮和非蛋白氮，合成微生物自身的蛋白质，供宿主利用。
饲料蛋白进入瘤胃后50％—70％被微生物的蛋白酶分解为多肽和蛋白酶。
氨基酸经脱氨基酶的进一步分解，生成有机酸、氨和CO2。
微生物也可以直接利用氨基酸和多肽合成蛋白质，储存于微生物内，所以瘤胃中游离氨基酸很少。
瘤胃内的微生物还能分解饲料中的非蛋白含氮化合物，如尿素、铵盐、酰胺等，产生氨和CO2。
一部分氨作为氮源，可被微生物利用，用来合成菌体蛋白，储存在微生物体内；一部分可被瘤胃壁吸收进入血液，经门静脉运输到肝，经鸟氨酸循环生成尿素。
一部分尿素分泌到唾液中，进入瘤胃后被细菌分泌的脲酶分解为CO2和氨。
氨被瘤胃壁吸收后，可重新合成尿素，这一过程称尿素再循环。
糖类的分解产物和挥发性脂肪酸可为蛋白质的合成提供碳源，并可提供能量。
因此饲料中必须有足够的糖类物质，如给骆驼投喂几乎不含蛋白质的饲料时，其代谢产生的尿素并没有从尿中排除，而是在瘤胃用于蛋白质的合成。
微生物随食糜进入皱胃后，微生物蛋白可被宿主利用。
在畜牧生产过程中，常用尿素替代日粮中约30％的蛋白质，尿素在瘤胃内脲酶的作用下迅速分解，产生氨的速度为微生物利用速度的4倍。
牛的饲养中的瘤胃功能调节瘤胃是牛类动物消化系统中的关键器官，对牛的饲养和生长具有重要作用。
瘤胃功能的调节对于牛的健康和生产性能非常重要。
本文将围绕牛的饲养中的瘤胃功能调节展开详细探讨，包括瘤胃功能的作用、调节方法以及注意事项等内容。
1. 瘤胃功能的作用瘤胃是牛类动物消化系统中的第一化验室，主要包括瘤胃皱胃、网胃和omasum三部分。
瘤胃通过微生物的发酵作用，将纤维素等难以消化的植物纤维分解为易于吸收的有机物质，提供给牛类动物。
瘤胃还可以调节食物在胃肠道中的通过速度，保证养分的充分吸收。
因此，合理调节瘤胃功能对于牛的生长发育和生产性能至关重要。
2. 瘤胃功能调节方法（1）饲料管理：饲料是影响瘤胃功能的重要因素之一。
合理搭配饲料种类和比例，确保饲料中的粗蛋白、粗纤维和能量等养分均衡，有利于瘤胃微生物的发酵作用。
（2）水的供给：水是牛类动物消化系统中的重要组成部分，保证水的充分供给有利于瘤胃功能的正常发挥。
饮水不足会导致瘤胃粘膜干燥，影响微生物的生长和发酵。
（3）定时定量饲喂：定时定量饲喂有助于稳定瘤胃内的微生物群落，增强瘤胃功能。
避免过度饲喂或者间断饲喂，避免对瘤胃功能造成负面影响。
（4）添加益生菌：益生菌是对抗有害微生物、促进瘤胃微生物平衡的重要营养素。
适当添加益生菌可以促进瘤胃内的有益菌群生长，帮助牛类动物更好地进行食物消化。
3. 瘤胃功能调节注意事项（1）避免过度灌食：过量饲喂会导致瘤胃内pH值降低，影响瘤胃微生物的平衡，严重时可引发瘤胃溃疡等疾病。
（2）注意饲料质量：优质的饲料是保证瘤胃功能正常的基础，避免饲料变质或者含有过多的有毒物质。
（3）定期检查：定期检查牛的瘤胃健康状况，如瘤胃酸度、微生物种群等，及时调整饲料搭配和管理方法，保证瘤胃功能的正常发挥。
总结：牛的饲养中瘤胃功能的调节是关乎牛类动物生长和生产性能的重要环节。
通过合理的饲料管理、水的供给、益生菌的添加等手段，可以有效调节瘤胃功能，提高牛的健康水平和生产效益。
微生物发酵工艺的使用技巧与注意事项引言：微生物发酵工艺是一种利用微生物代谢产物进行生产的方法，广泛应用于食品、药品、环境保护等领域。
正确使用微生物发酵工艺可以提高产品质量和产量，而忽视相关技巧与注意事项可能会导致发酵失败。
本文将详细介绍微生物发酵工艺的使用技巧和注意事项，以帮助读者正确运用发酵工艺并避免潜在问题。
一、微生物菌种选择在使用微生物发酵工艺前，正确选择合适的菌种至关重要。
优质的菌种需要具备以下特点：1. 在所需的发酵条件下具有稳定的生长和代谢特性。
2. 能够产生高效产物并具有较高的产量。
3. 菌种亲和性良好，适应性强，对环境条件的变化能够快速适应。
二、培养基配方的优化培养基是支持微生物生长及产物形成的基础，合理优化和调整培养基配方可以提高发酵效果。
以下是一些改善发酵工艺的常用技巧：1. 确定合适的碳源和氮源：菌种对碳源和氮源的需求不同，因此根据不同菌种的特点选择合适的碳源和氮源。
2. 添加合适的浓度调节剂：适量添加葡萄糖、无机盐和酵母提取物等对于提高发酵效果具有重要作用。
3. 避免有毒物质的污染：特别关注一些金属离子和抗生素对微生物生长的干扰，尽可能避免培养基受到污染。
三、合适的发酵条件控制控制适宜的发酵条件对于保证产品质量和提高产量至关重要。
以下是一些常见的发酵条件调控技巧：1. 温度控制：不同菌种对最适生长温度有明确要求，保持发酵温度在最适范围内有利于微生物代谢活动的进行。
2. pH值调控：菌种对酸碱度有一定要求，通过添加酸碱试剂或酶来控制培养物的pH值，保持合适的酸碱平衡。
3. 氧气供应：对于需氧菌种，保持合适的通气量是必要的，通过调整搅拌速度或配备合适的氧气供应设备来满足菌体的气体需求。
四、注意在发酵过程中的卫生防护在进行微生物发酵工艺时，卫生防护措施是至关重要的。
以下是一些需要注意的卫生防护事项：1. 工作区域的清洁：确保操作区域经过彻底清洁，并采取必要的无菌措施，避免微生物的外源性污染。
一、实验目的1. 了解牛胃的结构及其生理功能。
2. 掌握牛胃消化过程中的重要环节。
3. 分析牛胃对不同饲料的消化能力。
二、实验原理牛胃分为四个室：瘤胃、网胃、瓣胃和皱胃。
瘤胃和网胃是反刍动物特有的胃室，主要负责发酵和软化食物。
瓣胃和皱胃则与单胃动物的胃相似，负责分泌胃液进行消化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜牛胃、饲料（如草料、精料等）、生理盐水、pH试纸、试管、滴管等。
2. 实验仪器：解剖显微镜、天平、温度计、计时器等。
四、实验步骤1. 解剖牛胃：将新鲜牛胃取出，沿胃大弯切开，观察瘤胃、网胃、瓣胃和皱胃的结构特点。
2. 瘤胃发酵实验：取一定量草料，加入瘤胃，观察瘤胃内微生物发酵情况，记录pH值变化。
3. 网胃软化实验：取一定量精料，加入网胃，观察网胃对精料的软化作用，记录软化程度。
4. 瓣胃和皱胃消化实验：取一定量草料和精料，分别加入瓣胃和皱胃，观察胃液分泌情况，记录pH值变化。
五、实验结果与分析1. 瘤胃发酵实验：瘤胃内pH值在发酵过程中逐渐降低，说明瘤胃内微生物对草料进行了发酵。
2. 网胃软化实验：网胃对精料的软化作用明显，说明网胃在反刍动物消化过程中起到了重要作用。
3. 瓣胃和皱胃消化实验：瓣胃和皱胃内pH值在消化过程中逐渐升高，说明胃液分泌有助于食物的消化。
六、讨论与结论1. 牛胃是反刍动物特有的消化器官，其结构复杂，功能多样。
2. 瘤胃和网胃是反刍动物消化过程中的关键环节，负责发酵和软化食物。
3. 瓣胃和皱胃与单胃动物的胃相似，负责分泌胃液进行消化。
4. 本实验结果表明，牛胃对不同饲料的消化能力较强，为反刍动物提供了丰富的营养来源。
七、注意事项1. 实验过程中要严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性。
2. 注意实验材料的新鲜度，避免影响实验结果。
3. 实验过程中要密切观察实验现象，做好记录。
八、实验体会与建议1. 通过本次实验，我们对牛胃的结构和生理功能有了更深入的了解。
瘤胃发酵的概念瘤胃发酵是一种在胃部进行的一种发酵过程，主要在反刍动物的瘤胃中进行。
瘤胃是一种特殊的胃部构造，在先充填食物的瘤胃中，通过分泌特殊的酶和细菌的存在，使食物得到进一步分解和降解。
这种发酵过程有助于反刍动物的消化和能量获取。
本文将详细介绍瘤胃发酵的概念，过程和作用。
瘤胃发酵的过程可以分为三个主要阶段：微生物附着、发酵产物生成和食物降解。
首先，在瘤胃内存在着大量的微生物，包括真菌、细菌、原生动物等。
这些微生物在瘤胃壁上附着并形成一种被称为微生物附着体的菌群。
这些微生物附着体中的微生物都具有特定的功能，它们通过合作和共生的方式参与食物降解和发酵过程。
其中，细菌是主要的附着体成分，包括纤维分解细菌和淀粉分解细菌等。
其次，瘤胃中的细菌通过产生一系列酶促进食物降解。
纤维分解细菌主要分解纤维素，产生短链脂肪酸等有营养的产物。
这些短链脂肪酸可以被反刍动物吸收并提供能量。
淀粉分解细菌则分解淀粉和其他碳水化合物，产生乳酸和醋酸等产物。
最后，瘤胃发酵过程中的产物被吸收和利用。
瘤胃壁上具有高度发达的血管系统，可以有效地吸收产生的短链脂肪酸和其他营养物质。
这些产物被转运到其他部位，满足反刍动物对能量和营养的需求。
除了帮助食物降解和提供能量外，瘤胃发酵还具有其他重要的生理作用。
瘤胃发酵可以改变食物的物理性质和微生物菌群，增强食物的可消化性和提高其营养价值。
此外，瘤胃发酵还可以抑制有害微生物的生长，减少病原菌的数量，从而保护反刍动物的肠道健康。
瘤胃发酵是反刍动物消化系统中一个非常重要的环节。
通过瘤胃发酵，反刍动物能够充分利用发酵产物和营养物质，提高食物利用效率和能量获取。
瘤胃发酵也对反刍动物的生长和发育具有重要的影响。
例如，小牛出生时的瘤胃处于发育不成熟的状态，随着日龄的增加，瘤胃发酵开始逐渐形成。
瘤胃发酵的建立和调控对小牛的生长和发育至关重要。
总结起来，瘤胃发酵是反刍动物独特的消化过程，通过微生物附着、发酵产物生成和食物降解三个阶段实现食物的降解和利用。
体外法研究纳豆枯草芽孢杆菌对瘤胃发酵及功能细菌数量的影响体外法研究纳豆枯草芽孢杆菌对瘤胃发酵及功能细菌数量的影响引言：瘤胃是反刍动物消化系统中重要的部位，也是诸多微生物活动的主要场所。
瘤胃微生物的活动对于动物的营养吸收、健康状况以及整个动物生态系统的稳定起着重要的作用。
纳豆枯草芽孢杆菌是一种在动物瘤胃中广泛存在的功能菌种，其对瘤胃微生物群落结构和功能发挥着重要的调控作用。
本实验旨在体外模拟瘤胃条件下，研究纳豆枯草芽孢杆菌对瘤胃发酵及功能细菌数量的影响。
材料与方法：实验将采用50头体质健康的瘤胃完好的牛进行采集。
将其瘤胃通过手术方式取出，并将取出的瘤胃进行清洗，去除其中的食物残渣。
清洗后的瘤胃组织将切割成小块，分为实验组和对照组进行处理。
实验组将加入纳豆枯草芽孢杆菌，并根据不同浓度（0、10^5、10^6、10^7 cfu/g）进行分组处理；对照组则没有加入纳豆枯草芽孢杆菌。
实验过程中，将建立体外模拟瘤胃环境，包括温度、酸度、氧气等因素的控制。
实验组和对照组的变量包括发酵产物的产量（例如挥发脂肪酸、气体产量）和功能菌数量（例如纤维分解菌、蛋白质分解菌等）。
这些变量将通过气体检测仪、高效液相色谱分析仪和培养基平板计数法进行测定。
结果与讨论：实验结果显示，随着纳豆枯草芽孢杆菌浓度的增加，瘤胃发酵产物的产量也呈现出逐渐增加的趋势。
与对照组相比，纳豆枯草芽孢杆菌投加组在同样的条件下，产生的挥发脂肪酸和气体产量显著增加。
这一结果表明，纳豆枯草芽孢杆菌的投加能够促进瘤胃发酵过程，增加有益的代谢产物的生成。
另外，实验发现纳豆枯草芽孢杆菌投加组中的功能菌数量也比对照组明显增加。
纳豆枯草芽孢杆菌的存在能够改变瘤胃微生物群落结构，增加纤维分解菌和蛋白质分解菌的数量。
这些功能菌对于动物的消化吸收和营养代谢具有重要作用，并能够提高动物的饲料转化率和生长性能。
结论：本实验通过体外模拟瘤胃条件，研究了纳豆枯草芽孢杆菌对瘤胃发酵及功能细菌数量的影响。
瘤胃体外发酵方法绞股蓝皂甙对山羊瘤胃菌群及微生物发酵特性和甲烷产量的影响_王新峰1.2瘤胃液的采集和培养基制备瘤胃液来自4头装有永久性瘤胃屡管的波尔山羊与本地山羊的杂交成年公山羊,日粮以羊草为主,每日补饲1509精料(精料组成,玉米:豆粕=2:1),自由饮用清洁水。
于晨饲前采集瘤胃液,用4层纱布过滤,与培养基按1:2混合,在39℃培养箱中培养30分钟,并充分通入CO2,进行厌氧分装,每瓶60mL。
每升培养基中含有15.71mg CaCl2·2H2O,11.90mg MnCl2·4H2O, 1.19mg CoCl2·6H2O, 9.52mg Fe Cl3·6H2O, 0.143g MgSO4·7H2O, 76.2mgNaOH, 0.95gNH4HCO3, 8.33g NaHCO3, l.36g Na2HPO4, 1.48g KH2PO4, 2.98g Na2S·9H2O和0.298g盐酸半肌胺(Menke等,1979)1.3试验设计试验根据绞股蓝皂试添加量(0、5、10、20和40 mL /60mL)分为5组,对照组不加皂试,实验组分别加入5,10,20和40mg皂试。
取60mL瘤胃液与培养基混合液(瘤胃液:培养基二1:2)分装于160mL的发酵瓶中,每瓶含0.69底物"底物由精料和粗饲料组成(3:7),精料为玉米和豆粕,分别为0.126和0.054g,粗饲料为0.42g羊草草粉(过1mm筛)。
发酵瓶封盖!气压平衡后置于39℃培养箱中培养,并定时摇匀,培养24h。
第二次发酵培养120h,分别在0,1,2,4,6,8,12,24, 48,72,96,120h, 计算出累积产气量;测定120h后干物质消失率。
1.4指标测定1.4.1产气量的测定根据Theodorou等(1994)的方法,使用气压转换器(IGER,UK)定时测定厌氧瘤胃微生物发酵产气量。
瘤胃体外发酵方法绞股蓝皂甙对山羊瘤胃菌群及微生物发酵特性和甲烷产量的影响_王新峰1.2瘤胃液的采集和培养基制备瘤胃液来自4头装有永久性瘤胃屡管的波尔山羊与本地山羊的杂交成年公山羊,日粮以羊草为主,每日补饲1509精料(精料组成,玉米:豆粕=2:1),自由饮用清洁水。
于晨饲前采集瘤胃液,用4层纱布过滤,与培养基按1:2混合,在39℃培养箱中培养30分钟,并充分通入CO2,进行厌氧分装,每瓶60mL。
每升培养基中含有15.71mg CaCl2·2H2O,11.90mg MnCl2·4H2O, 1.19mg CoCl2·6H2O, 9.52mg Fe Cl3·6H2O, 0.143g MgSO4·7H2O, 76.2mgNaOH, 0.95gNH4HCO3, 8.33g NaHCO3, l.36g Na2HPO4, 1.48g KH2PO4, 2.98g Na2S·9H2O和0.298g盐酸半肌胺(Menke等,1979)1.3试验设计试验根据绞股蓝皂试添加量(0、5、10、20和40 mL /60mL)分为5组,对照组不加皂试,实验组分别加入5,10,20和40mg皂试。
取60mL瘤胃液与培养基混合液(瘤胃液:培养基二1:2)分装于160mL的发酵瓶中,每瓶含0.69底物"底物由精料和粗饲料组成(3:7),精料为玉米和豆粕,分别为0.126和0.054g,粗饲料为0.42g羊草草粉(过1mm筛)。
发酵瓶封盖!气压平衡后置于39℃培养箱中培养,并定时摇匀,培养24h。
第二次发酵培养120h,分别在0,1,2,4,6,8,12,24, 48,72,96,120h, 计算出累积产气量;测定120h后干物质消失率。
1.4指标测定1.4.1产气量的测定根据Theodorou等(1994)的方法,使用气压转换器(IGER,UK)定时测定厌氧瘤胃微生物发酵产气量。
瘤胃微生物体外发酵过程与注意事项
瘤胃微生物体外发酵过程通常由以下步骤组成：
1. 选择合适的培养基：瘤胃微生物在体外培养需要合适的培养基来提供必要的营养物质和生长因子。
常用的培养基包括Ruminal Fluid Medium和Grain Medium等。
2. 收集瘤胃液：可以通过手术方式或经皮逆行注射等方法收集健康反刍动物的瘤胃液作为发酵的种子物质。
收集过程中需要注意避免污染，确保瘤胃液的质量。
3. 调整酸碱度和温度：瘤胃微生物主要在弱酸性条件下进行发酵，一般采用pH 6.5-7.0的培养条件。
此外，适宜的温度也是促进微生物生长和发酵的关键因素。
4. 添加底物和营养物质：添加适量的底物（如纤维素、淀粉、蛋白质等）和营养物质（如维生素、无机盐等）是瘤胃微生物体外发酵的必要步骤。
不同的瘤胃微生物有不同的营养要求，因此需要根据具体情况进行配方。
5. 保持氧气供应：瘤胃微生物主要是厌氧生物，因此在培养过程中需要注意排除氧气的影响。
可以通过使用密闭容器或添加还原剂等方法来维持适宜的厌氧条件。
6. 监测发酵过程：通过定期取样分析微生物数目、发酵产物和代谢产物的变化等指标，来监测瘤胃微生物体外发酵的进展和效果。
在进行瘤胃微生物体外发酵时，需要注意以下事项：
1. 严格控制实验条件：如pH、温度、厌氧条件等，确保实验
结果的准确性和可重复性。
2. 避免污染：在采集瘤胃液和进行发酵过程时，要避免外界杂质的污染，以避免对实验结果的影响。
3. 合理选择培养基和底物：根据瘤胃微生物的特点和需求，选择合适的培养基和底物，以提供必要的营养和生长因子。
4. 注意安全问题：一些瘤胃微生物可能产生有害物质或是具有致病性，因此在操作过程中需要注意个人安全保护，如戴手套、口罩等。
总之，瘤胃微生物体外发酵是一项复杂的实验操作，需要严格控制实验条件，避免污染，并注意安全问题，以确保实验的成功实施和准确性。
