U6_5S_miRNA 引物探针设计

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内参

1.RNU6

Homo sapiens RNA, U6 small nuclear 1 (RNU6-1), small nuclear RNA NR_004394.1 ORIGIN

1 gtgctcgcttcggcagcacatatactaaaattggaacgatacagagaagattagcatggc

61 ccctgcgcaaggatgacacgcaaattcgtgaagcgttccatatttt

RNU6-F

CTCGCTTCGGCAGCACA

RNU6-R

AACGCTTCACGAATTTGCGT

2.5S

Homo sapiens RNA, 5S ribosomal 2 (RNA5S2), ribosomal RNA NR_023364.1 ORIGIN

1 gtctacggccataccaccctgaacgcgcccgatctcgtctgatctcggaagctaagcagg

61 gtcgggcctggttagtacttggatgggagaccgcctgggaataccgggtgctgtaggctt

121 t

5S-F

TCTCGTCTGATCTCGGAAGCTA

5S-R

GCGGTCTCCCATCCAAGTA

MiRNA

方案1

Universal Reverse primer TGGTGTCGTGGAGTCG

方案2

Universal Reverse primer GTGCAGGGTCCGAGG

1.hsa-miR-122

序列:uggagugugacaaugguguuug 长度:22

2.Hsa-miR-16

序列:uagcagcacguaaauauuggcg 长度:22

3.hsa-mir-93

序列:caaagugcuguucgugcagguag 长度:23

Primer Result:

miRNA miRNA sequence (5'-3') Prime

r

Primer Sequence (5'-3')

Len

gth

of

prim

er

Tm

of

prim

er

GC content

of primer

hsa-mir-122 TGGAGTGTGACAATGG

TGTTTG

RT

prime

r

CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAG

TTGAGCAAACACC

44

0.52272727

2727

Forw

ard

prime

r

ACACTCCAGCTGGGTGGAGTGTGACAATG 29 90 0.55

hsa-mir-16 TAGCAGCACGTAAATA

TTGGCG

RT

prime

r

CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAG

TTGAGCGCCAATA

44

0.52272727

2727

Forw

ard

prime

r

ACACTCCAGCTGGGTAGCAGCACGTAAAT 29 88 0.52

hsa-mir-93 CAAAGTGCTGTTCGTG

CAGGTAG

RT

prime

r

CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAG

TTGAGCTACCTGC

44

0.54545454

5455

Forw

ard

prime

r

ACACTCCAGCTGGGCAAAGTGCTGTTCGTG 30 94 0.57

Primer Result:

miRNA miRNA sequence

(5'-3')

Prime

r

Primer Sequence (5'-3')

Leng

th

of

prim

er

Tm

of

prim

er

GC

conte

nt of

prime

r

hsa-mir -122 TGGAGTGTGACAATGG

TGTTTG

RT

prime

r

GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACT

GGATACGACCAAACA

50 0.54

Forwa

rd

prime

r

GCGGCGGTGGAGTGTGACAATG 22 72 0.64

hsa-mir -16 TAGCAGCACGTAAATA

TTGGCG

RT

prime

r

GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACT

GGATACGACCGCCAA

50 0.58

Forwa

rd

prime

r

GCGGCGGTAGCAGCACGTAAAT 22 70 0.59

Forwa

rd

prime

r

GCGGCGGCAAAGTGCTGTTCGTG 23 76 0.65