琼脂稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)资料解读

抗菌药物的mic名词解释抗菌药物是指用于治疗细菌感染的药物，它们通过抑制细菌的生长或杀死细菌来达到治疗的目的。

MIC（最小抑菌浓度）是评价抗菌药物对细菌活性的一个重要指标。

本文将解释MIC的含义以及与抗菌药物及微生物耐药性相关的重要性。

一、MIC的定义MIC是指在体外实验条件下，抗生素或抗菌药物能够抑制细菌生长的最低浓度。

通常使用微量琼脂平板法或稀释法对抗菌药物进行浓度梯度测试，以确定细菌对药物的敏感性。

MIC值越低，表示药物对细菌的抑菌能力越强。

二、MIC的重要性1. 指导临床用药MIC值是临床上决定抗菌药物有效浓度的关键参数。

在治疗感染时，医生需要知道病原菌对抗生素的敏感性，以确定合适的药物剂量和疗程。

MIC测定可以帮助医生选择适当的抗生素，从而提高治疗的效果。

2. 药物耐药性评估MIC值不仅对于个体患者的治疗重要，也对于评估细菌的耐药性具有重要意义。

通过监测大量细菌株的MIC值，可以了解细菌对某些抗生素的耐药性水平。

在全球范围内进行耐药性监测可以帮助制定抗菌药物使用策略，减少多重耐药菌株的传播。

3. 临床研究工具MIC值是临床试验中评估新药物疗效的重要指标之一。

通过对新抗菌药物的MIC测试，可以确定其在细菌感染治疗中的最佳浓度范围，进一步确定其用于临床的剂量和给药方案。

三、MIC测定方法1. 白蛋白微量琼脂平板法这是常用的MIC测定方法之一。

它通过制备含有不同浓度抗菌药物的琼脂平板，将已知浓度的细菌悬液均匀涂布在琼脂平板表面，观察生长的抑制情况来确定MIC值。

2. 稀释法稀释法是一种经典的MIC测定方法。

它通过将抗菌药物稀释成一系列不同浓度的试液，然后将细菌悬液与不同浓度的试液接触，培养并观察细菌的生长情况，从而确定细菌对药物的敏感性。

四、MIC值的解读对于MIC值的解读需要根据具体抗菌药物和细菌来评估。

一般来说，低于或等于药物本身的CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）建议的断点值的MIC被认为是敏感的，而高于断点值的MIC则表示相对或绝对的耐药。

MIC测量指南范文导言微生物的耐药性是一个严重的公共卫生问题，探测微生物对抗生素的最低抑菌浓度（MIC）可以帮助科学家了解微生物的抗药性。

MIC测量在药物研发、临床治疗以及环境和农业领域都具有重要的应用价值。

本文将介绍MIC测量的基本原理、实验步骤以及常见的技术和注意事项。

一、基本原理1.试管稀释法：将一系列浓度递增的抗生素加入到含有已知浓度微生物的试管中，经过一段时间后观察是否产生生长。

最低的抑菌浓度即为MIC。

2.纸片扩散法：在含有已知浓度微生物的琼脂平板上放置一片含有抗生素的纸片，经过一段时间后观察纸片周围的菌落生长情况。

最低的抑菌浓度即为MIC。

3.微量平板法：将一系列浓度递增的抗生素加入到含有已知浓度微生物的微量琼脂平板上，经过一段时间后观察菌落生长情况。

最低的抑菌浓度即为MIC。

二、实验步骤1.培养微生物：选择要进行MIC测量的微生物株，经过前期培养，确保培养物的纯度和生长状态。

2.准备抗生素溶液：根据实验需要，制备一系列不同浓度的抗生素溶液。

使用无菌技术进行操作，确保溶液的纯度。

3.取样：将培养的微生物转移至无菌的培养液中，根据实验方法选择合适的取样量。

4.加入抗生素：将不同浓度的抗生素溶液分别加入到含有微生物的试管、琼脂平板或微量琼脂平板中。

5.孵育：将试管置于恒温培养箱或琼脂平板置于培养箱中，保持适宜的温度和湿度，孵育一定时间。

6.观察结果：观察试管中是否有菌落生长，或者观察琼脂平板上纸片周围的菌落生长情况。

最低的抑菌浓度即为MIC。

7.数据处理：根据实验结果，绘制MIC曲线或计算MIC值，进行数据分析。

三、常见技术和注意事项1.使用无菌技术：为确保实验结果的准确性，实验过程中所有操作都应在无菌条件下进行，避免外界微生物的污染。

2.控制实验条件：实验室的温度、湿度和光照等条件应保持稳定，以避免这些因素对实验结果的影响。

3.选择适当的培养基和培养条件：不同微生物对培养基和培养条件的要求不同，应根据实验需求合理选择。

抗菌药物最小抑菌浓度的测定一、概念：最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）：在特定环境下孵冇24 小时，可抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度，用于泄量测立体外抗菌活性。

二、实验目的：通过采用常量稀释法，检测几种抗菌药物对--菌株的最小抑菌浓度（MIC）, 对临床诊断用药有指导作用。

三、仪器和试剂:MH液体培养基无菌试管分光光度计0.5麦氏标准比浊管MH琼脂微量加样器蒸饰水吸头0.1 mol磷酸缓冲液接种环(PH6.0)无菌生理盐水无菌平板无菌滤膜0.22无菌针筒抗菌药物金黄色匍萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌四、检验方法：液体稀释法、琼脂稀释法、E试验（Etcst）液体稀释法操作步骤：抗菌药物原液配置0000000000000MH液体试管中抗菌药物梯度稀释观察结果1..抗菌药物原液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000ug/ml(如1280ug/ml)或10倍于最高测左浓度。

溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。

所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。

例如：需配制100 ml浓度为1280ug/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750ixg/mgo用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg.根据公式讣算所需稀释剂用量为：(182.6 mgX75O u g/ml)/1280 ug/ml= 107.0ml,然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。

制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表1。

配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-20°C环境，并注意抗菌药物的保存期限。

表1稀释法中常用的抗菌药物容积稀释法2.药敏试验用抗菌药物浓度范带|根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范国应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。

3.培养基NCCLS推荐使用Mueller-Hinton (MH)肉汤，pH7.2~7.4。

测定抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）方法1.1.常量肉汤稀释法1.1.1.抗菌药物贮存液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。

溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。

抗菌药物直接购自厂商或相关机构。

所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。

例如：需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750μg/mg。

用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。

根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6 mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。

制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。

配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境，保存期不超过6个月。

1.1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。

1.1.3.培养基NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。

需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。

在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。

嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。

1.1.4.接种物的制备有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。

增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1~2×108CFU/ml。

二是直接菌落悬液配制法，对某些苛养菌，如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株，推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。

几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法近年来，随着抗生素的广泛使用以及细菌耐药性的增加，抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）的测定变得日益重要。

MIC是指抗菌药物能够抑制细菌生长的最低浓度，是评估抗菌药物对细菌耐药性的一种重要方法。

下面介绍几种测定抗菌药物MIC的方法。

1. 琼脂扩散法琼脂扩散法是一种经典的MIC测定方法。

该方法基于抗生素与菌株相互作用抑制菌株生长的原理。

实验中将不同浓度的抗生素溶液加入琼脂平板中，并在琼脂表面均匀涂布细菌悬液。

待菌株在琼脂表面生长形成克隆后，观察克隆周围清晰的无菌区域大小，根据无菌区域所对应的抗生素浓度计算MIC值。

该方法简单易行，但由于该方法目测判断，因此存在主观性差异和读片误差的问题。

2. 荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑）（Alamar blue）法荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑）法是一种高通量及准确性较高的MIC测定方法。

该方法基于菌株呼吸代谢消耗的荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑）的发光信号变化来评估抗生素的MIC值。

实验中将不同浓度的抗生素溶液加入微孔板中，并添加细菌悬液及荧光素二磷酸盐3-（4,5-二苯基噻唑），经过一定时间后读取板上的荧光信号，测算MIC 值。

该方法准确性高，可用于筛选大量样本的抗菌药物敏感性，但需要特殊设备和耗费较多经费。

3. 壳聚糖纳米粒子微滴法壳聚糖纳米粒子微滴法是一种新兴的MIC测定方法。

该方法基于壳聚糖纳米粒子本身具有抑菌作用及微滴原理，实验中将不同浓度的抗生素与含菌液的溶液制成微滴，并添加壳聚糖纳米粒子，待微滴凝胶后进行观察，根据微滴内的细菌生长情况评估折射率值，进而计算MIC值。

这种方法具有较高的准确性和可靠性，但需要特殊仪器和技术支持。

4. 测序MIC法随着测序技术的发展，现已出现测序MIC法。

该方法基于高通量测序技术，对菌株进行全基因组测序，确定细菌株中抗生素耐药基因的编码序列，并进行序列比对和分析，确定抗生素的MIC值。

抗菌药物最小抑菌浓度的测定之阿布丰王创作一、概念：最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）：在特定环境下孵育24小时,可抑制某种微生物呈现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度,用于定量测定体外抗菌活性.二、实验目的：通过采纳常量稀释法, 检测几种抗菌药物对----菌株的最小抑菌浓度( MIC) , 对临床诊断用药有指导作用.三、仪器和试剂：MH液体培养基无菌试管分光光度计0.5麦氏标准比浊管MH琼脂微量加样器蒸馏水吸头0.1mol磷酸缓冲液接种环（PH6.0）无菌生理盐水无菌平板无菌滤膜0.22 无菌针筒抗菌药物金黄色葡萄球菌、年夜肠埃希菌、铜绿假单胞菌四、检验方法：液体稀释法、琼脂稀释法、E试验（E test）液体稀释法把持步伐：1..抗菌药物原液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度.溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度. 所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算.例如：需配制100 ml 浓度为1280μg/ml 的抗生素贮存液,所用抗生素为粉剂,其药物的有效力为750μg/mg.用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg.根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6 mg ×750μg/ml ）/1280μg/ml=107.0ml,然后将182.6 mg 抗生素粉剂溶解于107.0ml 稀释剂中.制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表1.配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-20℃环境,并注意抗菌药物的保管期限.表1 稀释法中经常使用的抗菌药物容积稀释法2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验把持标准,药物浓度范围应包括耐药、中介和敏感分界点值,特殊情况例外.3.培养基 NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤,pH7.2~7.4.需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好.在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时,应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠,按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤.嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤,肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤.4.接种物的制备有2种方法配制接种物,一是细菌生长方法,用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个,接种于4-5ml的水解酪卵白（MH）肉汤中,35℃孵育2-6h.增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准,约含1~2×108CFU/ml.二是直接菌落悬液配制法,对某些苛养菌,如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株,推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液.用MH肉汤将上述菌悬液进行1∶100稀释后备用.注意应在15分钟内接种完配制好的接种物,并取一份接种物在非选择性琼脂平板上传代培养,以检查接种物纯度.5.稀释抗菌药物的制备及菌液接种取无菌试管（13×100mm）13支,排成一排,除第1管加入1.6mlMH肉汤外,其余每管加入MH肉汤1ml,在第1管加入抗菌药物原液（如1280μg/ml） 0.4ml混匀,然后吸取1ml至第2管,混匀后再吸取1ml至第3管,如此连续倍比稀释至第11管,并从第11管中吸取1ml弃去,第12管为不含药物的生长对比.此时各管药物浓度依次为256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μg/ml.然后在每管内加入上述制备好的接种物各1ml,使每管最终菌液浓度约为5×105CFU/ml.第1管至第11管药物浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、05、0.25、0.125μg/ml.另外设对比3支,别为肉汤对比、质控菌对比和待测菌生长对比.6.孵育将接种好的稀释管塞好塞子,置35℃普通空气孵箱中孵育16~20h；嗜血杆菌和链球菌在普通空气孵箱中孵育20~24h；对可能的耐甲氧西林葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌应继续孵育满24h.7.结果判断与解释在读取和陈说所测试菌株的MIC前,应检查生长对比管的细菌生长情况是否良好,同时还应检查接种物的传代培养情况以确定其是否污染,质控菌株的MIC值是否处于质控范围.以肉眼观察,药物最低浓度管无细菌生长者,即为受试菌的MIC.甲氧苄胺嘧啶或磺胺药物的肉汤稀释法终点判断,与阳性生长对比管比力抑制80%细菌生长管药物浓度为受试菌MIC.【MIC参考范围】表2稀释法质控标准菌株MIC预期值范围（ug/ml）经常使用抗菌药物稀释和配制方法药物溶媒配制方法青霉素N.S 一次氨苄西林N.S 一次氨苄西林氟氯西林N.S 一次氨苄西林舒巴坦N.S 一次阿莫西林氟氯西林N.S 一次阿莫西林舒巴坦N.S 一次阿莫西林克拉维酸N.S 一次奈夫西林N.S 一次阿洛西林5%GNS,5-10%G.S 二次,每g先用10ml注射用水溶解美洛西林5%GNS,5-10%G.S 一次美洛西林舒巴坦N.S,5%GNS,5-10%G.S 二次,先用适量注射用水或生理盐水溶解羧苄西林5%G.S 一次替卡西林克拉维酸5%G.S 二次,先用10ml注射用水溶解哌拉西林无一次哌拉西林他唑巴坦5%G.S,NS 一次哌拉西林舒巴坦5%G.S,NS 一次苯唑西林N.S,G.S 一次头孢唑啉N.S,G.S 二次,先用注射用水溶解五水头孢唑啉N.S,5%G.S 二次,先用注射用水溶解头孢硫脒N.S 一次头孢噻吩N.S,5%G.S 二次．先4g用20ml注射用水溶解头孢呋辛无一次头孢美唑N.S,G.S 一次头孢替安N.S,G.S 一次头孢替唑N.S,G.S 一次头孢尼西N.S,5-10%G.S 一次头孢西丁N.S,5-10%G.S 一次头孢孟多N.S,5%G.S 一次头孢他定N.S,5%G.S 一次头孢曲松N.S,5%G.S 二次,先用注射用水、N.S、G.S配成0.1g/ml 头孢哌酮G..N.S 一次,终浓度为5-25mg/ml头孢哌酮舒巴坦N.S,5%G.S 二次,1g—水溶后总量4ml,再用同一溶媒溶解. 头孢哌酮他唑巴坦N.S,5%G.S 二次．先用注射用水、N.S 5-10ml溶解拉氧头孢N.S,5%G.S 一次头孢米诺N.S,5-10%G.S 一次头孢唑肟N.S,10%G.S 一次头孢地嗪N.S,林格,5%G.S 一次头孢甲肟N.S,G.S 一次头孢匹胺N.S,G.S 一次头孢吡肟N.S,G.S 一次头孢匹罗N.S,G.S 一次亚胺培南西司他汀N.S,G.S 一次美罗培南N.S,5-10%G.S 二次,可先用合适液体配制氨曲南N.S,5-10%G.S 二次,1g先用至少3ml注射用水溶解,终浓度不超越2%阿奇霉素N.S,5%G.S 二次．先用注射用水稀释成0.1mg/ml,再稀释成终浓度为1-2mg/ml依替米星N.S,5%G.S 一次多西环素N.S,5%G.S 二次．先用注射用水或其他溶液稀释成10mg/ml,再溶解成0.1-1mg/ml克林霉素无一次万古霉素N.S,5%G.S 二次．先用10ml注射用水溶解,再加入至少200ml溶液中.滴注>1小时.去甲万古霉素N.S,5%G.S 二次．先用注射用水溶解,再用至少200ml液体慢滴.替考拉宁N.S,5%G.S 二次．先用注射用水溶解,双手滚动小瓶至药粉全部溶解.如果呈现泡沫,静置15分钟.培氟沙星5%G.S 一次氟罗沙星5%G.S 一次洛美沙星N.S,5%G.S 二次,先用5ml注射用水溶解左氧氟沙星N.S, G.S 一次加替沙星N.S,5%G.S 一次,终浓度为2mg/ml依诺沙星5%G.S 一次帕珠沙星N.S 一次利福霉素5%G.S 一次氟康唑无一次两性霉素B 5%G.S（用NS有沉淀）二次．5ml注射用水溶解25mg药物,终浓度<0.1mg/ml,避光慢滴6h以上阿昔洛韦N.S,5%G.S 二次．每0.1g用10ml注射用水溶解成50g/l.再用年夜瓶稀释成至少100ml.终浓度不超越7g/l.慢滴.注意水化更昔洛韦N.S,5%G.S 先用N.S或注射用水溶解,再用年夜瓶稀释成100ml.浓度不超越10mg/ml,一次最年夜量6mg/kg聚安洛韦N.S,5%G.S 一次膦甲酸钠无一次．注意水化（2.5L/d）,可适当用利尿剂,慢滴阿糖腺苷无一次．日剂量<10mg/kg病毒唑N.S,5%G.S 一次．1mg/ml,慢滴磷霉素N.S,5%G.S 先用注射用水溶解.慢滴1-2小时.总结：1. N.S溶解：青霉素、氨苄西林类、阿莫西林类、奈夫西林、头孢硫脒、帕珠沙星（阿青安怕牛来）2. G.S溶解：培氟沙星、氟罗沙星、曲伐沙星、依诺沙星、两性霉素B/利福霉素（两粒）3. 需二次配制的：青霉素类：阿洛西林、美洛西林舒巴坦、替卡西林克拉维酸（阿美卡拉）；头孢类：唑啉、噻吩、曲松、哌酮舒巴坦（他唑巴坦）；两粒霉素B、磷霉素、多西环素、阿奇霉素、洛美沙星（20多哈罗）、万古霉素、去甲万古霉素、替考拉宁；阿昔洛韦、更昔洛韦、氨曲南、美罗培南。

常量肉汤稀释法：1、抗菌药物储存液的制备：浓度不应低于1000ug/ml或10倍于最高测定浓度。

溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。

配制好的药物储存液应贮存于-60度以下环境，保存期不超过6个月。

制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂2、药敏实验用抗菌药物浓度范围：根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。

3、培养基：NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。

需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。

在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。

嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。

4、接种物的制备：有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。

增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1~2×108CFU/ml。

二是直接菌落悬液配制法，对某些苛养菌，如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株，推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。

用MH肉汤将上述菌悬液进行1∶100稀释后备用。

注意应在15分钟内接种完配制好的接种物，并取一份接种物在非选择性琼脂平板上传代培养，以检查接种物纯度。

5、MIC板制备：无菌操作，将倍比稀释后不同浓度的抗菌药物溶液分别加到灭菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第11孔加药液，每孔10μl，第12孔不加药作为生长对照，冰冻干燥后密封，-20℃以下保存备用。

6、接种物制备：将用生长法或直接菌悬液法制备的浓度相当于0.5麦氏比浊标准的菌悬液，经MH肉汤1∶1000稀释后，向每孔中加100μl，密封后置35℃普通空气孵箱中，孵育16~20h判断结果。

最小抑菌浓度（MIC）01定义最小抑菌浓度是指能够抑制细菌生长的最低抗（抑）菌成分浓度。

换句话说，当抗（抑）菌成分的浓度达到MIC时，细菌的生长受到抑制。

02测定方法常用的MIC测定方法有营养肉汤稀释法、琼脂稀释法和分光光度法等。

其中，琼脂稀释法较为常用。

根据消毒技术规范2002年版2.1.8.3最小抑菌浓度测定试验（琼脂稀释法）和2.1.8.4最小抑菌浓度测试（营养肉汤稀释法）中所述，将细菌接种至含有不同浓度抗（抑）菌成分的培养基中，通过观察受试菌的生长抑制情况来确定该物质的MIC值。

03实际应用MIC是评价抗（抑）菌成分活性和细菌耐药性的重要指标。

如果某种成分对特定的细菌或真菌的MIC较低，说明该成分对该菌种的抗（抑）菌效果较好。

同时在医学上，MIC还可以指导临床医生制定合理的治疗方案。

最小杀菌浓度（MBC）01定义最小杀菌浓度是指能够杀灭99.9%细菌或真菌的最低抗菌成分浓度。

换句话说，当抗菌成分浓度达到MBC时，大部分细菌或真菌将会被杀死。

02测定方法MBC的测定通常在MIC测定基础上进行。

首先，通过MIC试验确定抗（抑）菌成分对细菌或真菌的抑制浓度。

然后，在此基础上继续将受试菌接种在含有不同抗（抑）菌成分浓度的培养基上，继续培养一段时间，观察菌落的减少程度。

有些物质的MBC与其MIC非常接近，如氨基糖苷类；而有些物质的MBC比MIC大，如抗生素的β内酰胺类。

如果某成分对受试菌的MBC ≧32倍的MIC，可判定该微生物对该成分产生了耐药性。

03实际应用MBC主要用于评估抗菌成分的杀菌能力。

如果某种抗菌成分的MBC 较低，说明该成分具有较好的抗菌性能。

然而在应用过程中，由于细菌或真菌可能存在耐药性等原因，MBC并不总是与实际情况完全一致。

抗菌药物最小抑菌浓度的测定一、概念：最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）：在特定环境下孵冇24 小时，可抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度，用于泄量测立体外抗菌活性。

二、实验目的：通过采用常量稀释法，检测几种抗菌药物对--菌株的最小抑菌浓度（MIC）, 对临床诊断用药有指导作用。

MH液体培养基无菌试管分光光度计0.5麦氏标准比浊管MH琼脂微量加样器蒸饰水吸头接种环0.1 mol磷酸缓冲液(PH6.0)无菌生理盐水无菌平板无菌滤膜0.22无菌针筒抗菌药物金黄色匍萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌四、检验方法：液体稀释法、琼脂稀释法、E试验（Etcst）液体稀释法操作步骤：抗菌药物原液配置0000000000000MH液体试管中抗菌药物梯度稀释观察结果1..抗菌药物原液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000ug/ml(如1280ug/ml)或10倍于最高测左浓度。

溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。

所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。

例如：需配制100 ml浓度为1280ug/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750ixg/mgo用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg.根据公式讣算所需稀释剂用量为：(182.6 mgX75O u g/ml)/1280 ug/ml= 107.0ml,然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。

制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表1。

配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-20°C环境，并注意抗菌药物的保存期限。

表1稀释法中常用的抗菌药物容积稀释法2.药敏试验用抗菌药物浓度范带|根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范国应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。

3.培养基NCCLS推荐使用Mueller-Hinton (MH)肉汤，pH7.2~7.4。