血小板聚集的测定

• 血小板聚集是指活化的血小板导致粘附的血小板之间聚集成团的 特性。
• 血小板聚集功能主要与血小板膜GPⅡb／Ⅲa、Ⅰb、血浆纤维蛋 白原及细胞外钙离子等有关。
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• 动脉粥样硬化 • 冠状动脉疾病，CAD和急性心肌梗死 • 脑血管疾病和中风 （脑血管意外） • 周围动脉闭塞性疾病 （PAOD） • 糖尿病
• 快速，经济，操作简单，高度敏感的特性，应用广泛。
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血小板聚集-诱导剂
• 二磷酸腺苷（ADP） • 胶原（COLL） • 花生四烯酸（AA） • 瑞斯托霉素（RIS） • 肾上腺素（Ad）
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测定血小板聚集的方法
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血小板聚集的测定
• 1.样品制备 • （1）抗凝剂采用3.28%的枸橼酸钠，抽血量与抗凝剂应为9：1。 • （2）PRP（富血小板血浆）制备：抗凝血800转/分，10min。 • （3）PPP（贫血小板血浆）制备：将抗凝管第二次离心，3000转/min，10min。 • 2.光路矫正
导致血小板聚 集的病理因素
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• 血小板在执行生理性止血的同时，也在病理 性血栓形成过程中起重作用。
• 血小板功能检测对于临床相关疾病的诊断和 抗血小板药物的筛选及相关研究有着重要的 意义。
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血小板聚集的测定方法
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血小板聚集-比浊法
• 在富含血小板的血浆（PRP）或全血（WB）中，加入致聚剂（亦 称诱导剂）连续搅拌能诱发血小板聚集。
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• ADP、肾上腺素、凝血酶和胶原等都是血小板的致聚剂。
• 不同的致聚剂引起的聚集过程表现有所不同。
• 激活的血小板中，血小板膜里的花生四烯酸游离出来，最后在不同酶的作用 下，形成血栓烷A2（TXA2）。血栓烷A2是迄今已知的最强的致聚剂。
• 内皮细胞释放的前列腺素I2（PGI2）可通过激活腺苷酸环化酶使环腺苷酸 （cAMP）水平升高，抑制血小板聚集。
• 血小板的主要功能是凝血和止血作用，修补破损的血管。 • 血小板和血液中的其他凝血物质——钙离子和凝血酶等，在破损
的血管壁上聚集成团，形成血栓，堵塞破损的伤口和血管。 • 血小板还能释放肾上腺素，引起血管收缩，促进止血。有保护血
管内皮、参与内皮修复、防止动脉粥样硬化的作用。
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• 血液中的血小板数低于10万/μ1(100×109/L)为血小 板减少，低于5万/μL(50×109/L)则有出血危险。
血小板聚集的测定 与临床应用
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血小板聚集与临床应用
• 再认识血小板 • 血小板聚集的病理生理 • 血小板聚集的测定方法 • 血小板聚集的临床应用
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血小板
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血小板
• 血小板是骨髓中巨核细胞质脱落下来的小块，故无细胞核，表面 有完整的细胞膜。
• 血小板体积小，直经为2～4微米，呈双凸圆盘状。 • 易受机械、化学刺激，此时便伸出突起，呈不规则形。
• 加300 μl蒸馏水于测试杯中，逐各检查测试孔光路，比色结果为0.171~0.178为正常
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3.测试步骤：
（1）加PPP 250 μl于测试杯中，放预热孔中预热备用。 （2）加PRP 2250 μl于另一测试杯中（杯内预先放入搅拌珠一粒），放预热孔中预热备用。 （3）用微量进样器吸取25μl AA、ADP聚集剂备用。 （4）将盛有PPP血浆的测试杯插测试孔中。 （5）按键，测试孔对应绿灯亮，表明已调好基准点。 （6）将PPP测试杯取出，将PRP测试杯插到底，将预先吸好试剂的微量进样器沿管角插 到底，迅速注入试剂，即刻按“TEST”键，仪器自动完成测试 （7） 完毕后显示屏显示当时的血小板聚集率。
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药物影响
抑制血小板聚集的药物： ⑴ 制花生四烯酸代谢的药物 磷酯酶A2抑制剂 ：阿托品、 氢化可的松 环氧化酶抑制剂 ：阿司匹林、吲哚美辛、保泰松 ⑵ 酸二酯酶抑制剂：西洛他唑双嘧达莫、茶碱 ⑶ ADP受体拮抗剂： 氯吡格雷、噻氯匹定、腺苷 ⑷ 肾上腺素受体拮抗剂：酚妥拉明、普萘洛尔 ⑸ 血酶拮抗剂：肝素 阿昔单抗、潘生丁、消炎痛、维生素E、维生素B6、氨茶碱、血管扩张剂(硝普钠、硝酸甘油、 亚硝酸钠)、心得安、速尿、利尿酸、氨丙嗪、非那根、苯海拉明、安妥明、青霉素、羧苄青 霉素、呋喃坦丁、蝮蛇类降纤药（Svate）、丹参、川芎、赤芍、红花、当归等。 提高血小板聚集的药物： 迈格尔（注射用人重组白细胞介素-11）、利可君、强的松、糖皮质激素、甲泼尼龙片仙鹤草、 紫珠草、白芨。
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采血注意事项
• 总原则采血要顺利，不可反复穿刺。 • 标本从采集到操作完成在3小时内完成，放置过久降低血小板的
聚集强度和速度。 • 用凝血蓝帽的抗凝管采血4毫升分两管，立即轻轻颠倒混匀至少3-
5次。 • 用3.2%的枸橼酸钠按和血液1：9混合。
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采血注意事项
• 饮食，采血前须空腹或12小时内未进高脂食物。 • 烟酒，采血前12小时内禁用烟酒。 • 药物，一周内不用阿司匹林类药物。 • 三天内不用影响血小板功能的药物，如潘生丁、消炎痛、维生素E、维生素B6、氨茶碱、
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• 在血液中，血小板是最小的有形细胞。 • 血小板在电子显微镜下像橄榄形盘状．也有梭形或
不规则形，电镜下血小板的膜表面有糖衣，能吸附 血浆蛋白和凝血因子。 • 正常人血液中血小板计数为(100～300)×109/L • 三分之一的血小板平时贮存在脾脏中。
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血小板形态
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血小板功能
• 静息血小板的寿命平均为7～14天。 • 循环血小板的寿命平均是5～9天。
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血小板聚集的病理生理
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• 血小板聚集（platelet aggregation,PAgT）是指血小板与血 小板之间的相互粘附，活化的血小板相互作用聚集成团 的生理（病理）特征。
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血小板的主要功能
凝血和止血，修补破损的血管
• 血小板的表面糖衣能吸附血浆蛋白和凝血因子Ⅲ，血小板颗粒内含有与凝血有关的 物质。
• 血小板颗粒物质的释放，则进一步促进止血和凝血。当血管受损害或破裂时，血小 板受刺激，由静止相变为机能相，迅即发生变形，表面粘度增大，凝聚成团。
• 在表面第Ⅲ 因子的作用下，使血浆内的凝血酶原变为凝血酶，后者又催化纤维蛋 白原变成丝状的纤维蛋白，与血细胞 共同形成凝血块止血。