病原生物实验
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病源微生物学实验报告实验目的:探究病原微生物的来源和传播途径,了解其对人体健康的危害。
实验原理:许多疾病的发生与病原微生物的存在和传播有直接关系。
病原微生物可以通过呼吸道、消化道、皮肤、性传播等途径进入人体,引发感染和疾病。
因此,研究病原微生物的来源和传播途径对于预防和控制疾病具有重要意义。
实验材料和仪器:1. 夏满培养基2. 石蜡切片3. 显微镜4. 消毒酒精5. 双盘培养皿6. 细菌培养基实验步骤:1. 实验前准备工作:a. 将培养皿加入夏满培养基,进行灭菌处理,确保无细菌污染。
b. 准备好石蜡切片,用于后续显微镜观察。
c. 对相关仪器和实验环境进行消毒处理,保证实验的无菌状态。
2. 采集样本:a. 从医院采集病人体内分泌物或分泌物样本,如血液、尿液、痰液等。
b. 从环境中采集可能受到污染的样本,如空气中的微粒、土壤、水源等。
3. 样本处理:a. 将采集到的样本分别接种到夏满培养基和细菌培养基上。
b. 置于适宜温度和湿度下,培养一定时间(一般24-48小时)。
4. 观察实验结果:a. 检查夏满培养基上是否有可见的细菌或真菌生长。
b. 通过显微镜观察石蜡切片中是否存在微生物结构,如细菌菌落、孢子等。
5. 结果分析:a. 对培养基中出现的微生物进行鉴定和分类,并记录其性状和特征。
b. 对石蜡切片中观察到的微生物进行形态和结构分析,确认是否为病原微生物。
实验注意事项:1. 实验室操作应严格遵守无菌操作规范,避免细菌的交叉污染。
2. 实验结束后及时进行消毒处理,防止可能存在的致病菌传播。
3. 在操作过程中应注意个人防护,佩戴实验手套、口罩等防护用具。
实验结果:根据实验操作和观察结果,我们可以得到采集样本中的微生物的信息和形态特征,从而分析病原微生物的来源和传播途径。
这些结果对于疾病的预防和治疗具有重要参考价值。
结论:病原微生物来源广泛,可以通过各种途径进入人体,引发感染和疾病。
通过研究病原微生物的来源和传播途径,可以更好地预防和控制疾病的发生。
病原生物学实验报告病原生物学实验报告引言:病原生物学是研究病原微生物及其与宿主之间相互作用的学科。
通过实验研究,我们可以深入了解病原微生物的生物学特性、致病机制以及宿主免疫反应等方面的知识。
本实验旨在探究一种常见病原微生物的生物学特性,并通过实验结果分析其致病机制。
实验材料与方法:1. 实验材料:病原微生物菌株、培养基、实验动物等。
2. 实验方法:将病原微生物菌株接种于含有适宜营养物质的培养基中,培养一定时间使其增殖。
然后,将培养好的病原微生物注射到实验动物体内,观察其致病效果。
实验结果与分析:通过实验观察,我们发现病原微生物的生物学特性与致病机制有着密切关联。
以下是实验结果的详细描述与分析:1. 病原微生物的生长特性:我们在实验中发现,病原微生物在适宜的培养条件下能够迅速增殖。
其生长速度与培养基中的营养物质浓度、温度以及pH值等因素密切相关。
此外,我们还观察到病原微生物在不同培养基中的生长情况有所差异,这可能与培养基中的成分有关。
2. 病原微生物的致病机制:通过将病原微生物注射到实验动物体内,我们观察到不同病原微生物对宿主的致病效果各异。
一些病原微生物能够迅速侵入宿主细胞并繁殖,导致宿主组织受损;而另一些病原微生物则通过释放毒素或激活宿主免疫系统来引发疾病。
这些致病机制的差异可能与病原微生物的基因组、蛋白质组以及宿主免疫系统的反应性有关。
3. 宿主的免疫反应:实验中,我们还观察到实验动物对病原微生物的免疫反应。
一些实验动物能够通过激活免疫细胞、产生抗体等方式来抵抗病原微生物的侵袭,从而减轻疾病的严重程度。
然而,有些病原微生物能够通过改变宿主免疫系统的功能来逃避免疫反应,导致感染持续存在。
结论:通过本次实验,我们深入了解了病原微生物的生物学特性以及其与宿主之间相互作用的机制。
病原微生物的生长特性、致病机制以及宿主免疫反应等方面的研究对于预防和治疗疾病具有重要意义。
未来,我们可以进一步探索病原微生物的遗传变异、耐药性以及宿主适应性等方面的研究,以期为疾病的防治提供更加有效的策略。
病原生物学与免疫学实验指导病原生物学与免疫学实验指导一、引言病原生物学与免疫学是生命科学领域中重要的研究方向,它们关注病原微生物的致病机制以及机体的免疫反应。
通过实验研究,可以深入了解病原微生物的传播途径、生长特性、致病机制,以及机体的免疫应答过程。
本实验指导将介绍病原生物学与免疫学实验的基本原理、实验操作步骤和实验结果的分析与讨论。
二、实验原理1. 病原生物学实验原理病原生物学实验主要通过分离、培养和鉴定病原微生物,以及研究其生长特性、毒力因子和抗药性等方面的特征。
常用的实验方法包括细菌分离培养、菌落计数、菌液浓度测定、生长曲线分析等。
此外,还可以通过PCR技术、DNA测序等分子生物学方法进行病原微生物的鉴定和分析。
2. 免疫学实验原理免疫学实验主要研究机体的免疫系统以及对病原微生物的免疫应答。
常用的实验方法包括免疫细胞分离培养、细胞因子测定、抗体检测、细胞毒性测定等。
此外,还可以利用流式细胞术、ELISA、免疫组化等技术进行免疫细胞的鉴定和免疫反应的分析。
三、实验步骤1. 病原生物学实验步骤(1)细菌分离培养:从临床样本或环境中采集细菌样品,进行分离纯化并进行培养。
(2)菌落计数:将培养液均匀涂布在琼脂平板上,经过一定时间后,用计数器进行菌落计数。
(3)菌液浓度测定:通过分光光度计测定菌液的吸光度,根据标准曲线计算菌液中的菌落数量。
(4)生长曲线分析:将菌液接种到含有适宜培养基的培养皿中,定期取样测定菌液浓度,绘制生长曲线。
2. 免疫学实验步骤(1)免疫细胞分离培养:从外周血或组织中分离免疫细胞,进行细胞培养。
(2)细胞因子测定:通过ELISA等方法检测培养上清中细胞因子的含量。
(3)抗体检测:利用ELISA或免疫印迹等技术检测血清中抗体的水平。
(4)细胞毒性测定:通过流式细胞术等技术测定细胞对靶细胞的毒杀能力。
四、实验结果分析与讨论1. 病原生物学实验结果分析(1)菌落计数结果反映了样品中细菌的数量,可以用于判断感染程度。
病原微生物耐药性实验报告一、实验目的本实验旨在探究病原微生物的耐药性,并分析耐药性产生的原因,为临床合理使用抗生素提供参考。
二、实验设备与试剂1. 试验设备:培养皿、显微镜、离心机、恒温培养箱、移液管等。
2. 试剂:复方盐酸红(MRSA筛选培养基)、亚洲疟原虫PLDH试剂、乙酸丹试剂、DNA提取试剂盒等。
三、实验步骤1. 样本采集:采集来自患者的分泌物、血液或尿液样本,并遵循严格的无菌操作。
2. 细菌培养:将样本接种于MRSA筛选培养基上,并在恒温培养箱中培养18-24小时。
3. 菌落观察:观察菌落的生长情况,记录菌落形态和特征。
4. 选择敏感菌株:挑选感染性较强的菌落,进行继续培养。
5. 耐药性测试:将挑选的菌株分别接种于含有不同抗生素的琼脂平板上,观察菌落的生长情况和抗生素对于菌株的抑制效果。
6. 细菌形态观察:将不同菌株进行染色,并使用显微镜观察菌株形态特征,如大小、形状等。
7. 耐药基因检测:使用DNA提取试剂盒提取菌株的基因样本,并进行耐药性基因的PCR扩增与检测。
8. 耐药性机制分析:对不同菌株中检测到的耐药性基因进行比对,分析耐药性产生的机制。
四、实验结果与分析1. 菌落观察:观察到样本中产生的菌落数量较多,其中挑选出了数个不同形态的菌株。
2. 耐药性测试:结果显示,部分菌株对某些抗生素表现出耐药性,而对其他抗生素则较敏感。
3. 细菌形态观察:通过染色和显微镜观察,发现不同菌株的形态特征存在差异,有的为球状,有的呈链状等。
4. 耐药基因检测:在PCR扩增与检测中,发现某些菌株中存在耐药性基因,如β-lactamase基因等。
5. 耐药性机制分析:通过对不同菌株的耐药性基因比对,发现耐药性基因的差异可能导致不同耐药性的产生。
五、实验结论1. 实验结果表明,病原微生物样本中存在一定比例的耐药菌株。
2. 耐药性的形成可能与菌株自身基因变异、外源性耐药基因的获取等多种因素有关。
3. 进一步研究病原微生物的耐药性机制对于改善临床抗生素治疗的有效性具有重要意义。
病原生物学实验技巧研究总结病原生物学是研究病原生物的形态、结构、生命活动规律以及与机体相互作用关系的一门学科。
病原生物学实验作为这门学科的重要组成部分,对于深入理解病原生物的特性、诊断疾病以及研发防治策略都具有极其重要的意义。
在长期的病原生物学实验实践中,积累了丰富的实验技巧,本文将对这些技巧进行总结和梳理。
一、实验前的准备(一)实验材料的选择与处理在进行病原生物学实验前,首先要确保实验材料的质量和可靠性。
例如,在培养细菌时,要选择合适的培养基,并对培养基进行严格的灭菌处理,以防止杂菌污染。
对于实验动物,要选择健康、无特定病原体的个体,并在实验前进行适当的饲养和适应环境的处理。
(二)实验仪器的校准与调试病原生物学实验中常用到各种仪器,如显微镜、移液器、离心机等。
在实验前,必须对这些仪器进行校准和调试,确保其准确性和稳定性。
比如,显微镜的镜头需要清洁和校准,移液器的刻度要准确无误,离心机的转速和离心时间要根据实验要求进行设置。
(三)实验环境的控制实验环境的条件对实验结果有着重要的影响。
要保持实验室的清洁、卫生,定期进行消毒处理。
控制实验室内的温度、湿度和通风情况,为实验提供适宜的环境条件。
二、实验操作技巧(一)无菌操作技术无菌操作是病原生物学实验中最基本也是最重要的操作技巧之一。
在进行微生物培养、接种、取样等操作时,要严格遵守无菌操作原则,防止微生物的污染。
例如,在打开培养皿或接种环时,要用火焰对其进行灭菌;操作过程中要避免手或其他物品接触到无菌区域。
(二)涂片与染色技术涂片和染色是观察病原生物形态结构的常用方法。
涂片时要均匀地将样本涂抹在载玻片上,避免出现太厚或太薄的区域。
染色时要选择合适的染色剂,并严格控制染色时间和温度,以获得清晰、准确的染色结果。
(三)微生物培养技术微生物培养是病原生物学实验中的关键环节。
要根据不同微生物的生长特性,选择合适的培养条件,如培养基的种类、温度、氧气需求等。
在培养过程中,要定期观察微生物的生长情况,及时记录并分析。
病原生物学和免疫学实验概述病原生物学和免疫学是生命科学领域中非常重要的学科,对于人类疾病的发生和传播具有重要作用。
病原生物学研究病原微生物的生物学特性、致病机制和传播途径等,而免疫学研究机体的免疫系统以及如何识别和应对病原微生物的感染。
通过病原生物学和免疫学实验,可以更好地了解疾病的发生机制和防治方法。
本文将介绍一些常见的病原生物学和免疫学实验。
病原生物学实验细菌培养细菌培养是病原生物学实验中的基础实验,主要用于研究细菌的生长特性、代谢途径以及致病机制等。
常见的细菌培养基包括肉汤培养基、琼脂培养基等。
实验中,可以通过无菌技术将细菌接种到培养基中,然后进行培养和观察,以研究细菌的生长情况。
细菌荧光染色是病原生物学实验中常用的方法之一,通过给细菌染色,可以观察到其在细胞内的分布情况和形态特征。
常见的细菌荧光染色方法有荧光原位杂交和荧光染料染色等。
通过细菌荧光染色,可以更加直观地了解细菌的结构和功能。
细菌致病性实验细菌致病性实验是病原生物学研究中的关键实验之一,通过研究细菌的毒力因子和致病机制,可以揭示病原菌引起疾病的机理。
常见的细菌致病性实验包括动物感染模型实验和细胞培养实验等。
通过这些实验,可以进一步了解细菌的致病机制,并为相关疾病的防治提供理论依据。
免疫学实验免疫细胞培养免疫细胞培养是免疫学实验中常用的方法之一,通过培养免疫细胞,可以研究其生物学特性和功能。
常见的免疫细胞包括T细胞、B细胞、巨噬细胞等。
在培养过程中,可以通过添加不同的激素和生长因子,来模拟机体内免疫细胞的生长环境,从而研究其功能和代谢途径等。
免疫荧光染色是免疫学实验中常用的方法之一,通过给免疫细胞或组织染色,可以观察到其特定蛋白的表达情况和分布情况。
常见的免疫荧光染色方法有免疫组织化学染色和流式细胞术等。
通过免疫荧光染色,可以研究免疫细胞的分化和活化过程,从而了解免疫应答的机制。
免疫学检测免疫学检测是免疫学实验中非常重要的一个环节,常用于检测机体内抗体和细胞因子的水平以及免疫细胞的功能等。
病原微生物实验设计病原微生物实验是指在实验室条件下,对病原微生物进行观察、研究和实验的过程。
通过合理的实验设计和操作,可以深入了解病原微生物的特性、传播途径以及影响因素,为疾病的预防和治疗提供科学依据。
本文将就病原微生物实验的设计要点进行详细论述。
一、实验目的病原微生物实验的目的通常是为了以下几个方面:1)研究病原微生物的生物学特性,如生长特点、代谢途径等;2)研究病原微生物的致病机制,如毒力因子、感染途径等;3)探索病原微生物的传播途径,如空气传播、食物传播等;4)评估药物对病原微生物的抗菌活性。
二、实验设计1. 选择病原微生物在开始实验之前,需要明确研究对象是哪种病原微生物。
根据实验目的和所关注的疾病类型,选择合适的病原微生物进行研究。
常见的病原微生物包括细菌、病毒、真菌等。
2. 实验设备与试剂根据病原微生物的生长需求和实验要求,选择合适的实验设备和试剂。
常见的实验设备包括培养皿、恒温箱、离心机等;常见的试剂包括琼脂、培养基、抗生素等。
3. 实验操作步骤实验操作步骤应该详细、准确,确保实验可重复。
具体步骤如下:步骤一:准备实验样品和培养基。
将需要研究的病原微生物分离培养,并制备适量的培养基。
步骤二:接种和培养。
将病原微生物接种到培养基上,进行培养。
在培养过程中,需注意温度、湿度和氧气浓度等条件,以促进病原微生物的生长。
步骤三:观察和记录。
定期观察培养皿中的菌落的形态和颜色。
记录菌落的数量和大小等信息。
步骤四:测定毒力。
根据实验目的,可以通过体外或体内的方法测定病原微生物的毒力。
例如,可以通过小白鼠进行毒性试验来评估病原微生物对宿主的损害程度。
三、实验结果和分析实验结果应该详细、准确地呈现,包括实验数据、实验观察和实验分析等。
需要根据实验目的和实验设计,对实验结果进行科学、合理的分析和解释。
四、实验控制和安全在病原微生物实验过程中,需要严格控制实验环境和操作过程,确保实验的准确性和安全性。
具体控制和安全措施如下:1. 严格遵守实验室规章制度和操作规程,正确佩戴实验室防护装备。
一、实验目的1. 熟悉病原微生物的基本概念和分类。
2. 掌握病原微生物的分离、培养和鉴定方法。
3. 培养无菌操作技能,提高实验室生物安全意识。
4. 学习病原微生物与人类健康的关系,增强防护意识。
二、实验原理病原微生物是指能引起人类、动物和植物疾病的微生物。
本实验通过病原微生物的分离、培养和鉴定,了解病原微生物的基本特征,为疾病诊断和治疗提供依据。
三、实验材料1. 实验器材:显微镜、接种环、培养皿、移液器、酒精灯、无菌棉签等。
2. 实验试剂:生理盐水、营养肉汤、营养琼脂、血琼脂、革兰染色液、芽孢染色液等。
3. 实验样本:粪便、尿液、痰液等。
四、实验步骤1. 病原微生物的分离(1)将实验样本分别接种于营养肉汤和营养琼脂平板。
(2)将接种好的平板置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
(3)观察培养结果,挑选可疑菌落进行进一步鉴定。
2. 病原微生物的培养(1)将可疑菌落接种于营养肉汤中。
(2)将接种好的肉汤置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
(3)观察肉汤的变化,如浑浊、沉淀等。
3. 病原微生物的鉴定(1)革兰染色:取一小段肉汤培养物,滴加革兰染色液,观察菌体染色结果。
(2)芽孢染色:取一小段肉汤培养物,滴加芽孢染色液,观察菌体染色结果。
(3)生化试验:根据革兰染色和芽孢染色结果,选择相应的生化试剂进行试验,观察菌落的反应。
五、实验结果与分析1. 病原微生物的分离实验结果显示,在粪便样本中分离出革兰阳性菌和革兰阴性菌。
2. 病原微生物的培养在37℃恒温培养箱中,革兰阳性菌和革兰阴性菌均呈现浑浊现象。
3. 病原微生物的鉴定(1)革兰染色:革兰阳性菌呈紫色,革兰阴性菌呈红色。
(2)芽孢染色:革兰阳性菌芽孢呈无色或淡紫色,革兰阴性菌无芽孢。
(3)生化试验:根据革兰染色和芽孢染色结果,进行生化试验,结果显示革兰阳性菌为葡萄球菌,革兰阴性菌为大肠杆菌。
六、实验讨论1. 病原微生物的分离和培养是病原微生物学实验的基础,通过实验可以了解病原微生物的基本特征,为疾病诊断和治疗提供依据。
病原生物学实验指导实验一显微镜的使用及细菌的观察一、显微镜油镜的使用和保护目的熟练掌握显微镜油镜的使用和保护,以便能娴熟应用油镜观察细菌材料标本。
原理细菌个体微小,肉眼不能看到,必须使用油镜,将其放大1000倍左右才能看到。
如光线直接从标本玻片经空气层进入油镜头时,由于介质密度不同发生折射现象,因此进入物镜中的光线很少,结果视野暗淡,物像不清晰。
如在标本玻片上加上折光率和玻片(n=1.52)相近的香柏油(n=1.515),就可避免光线的分散,加强视野的亮度,获得清晰的物像(见图1)。
材料附有油镜头的普通光学显微镜一架,染色标本片,香柏油,擦镜纸,二甲苯,消毒缸。
方法步骤(一)使用法1.油镜的识别油镜头上都有标记,标有90×或100×;镜头前端有黑、白或红色的圆圈:刻有“HI”或“oil”等,其孔径也较其他物镜小,约帽针头大。
2.油镜的使用(1)用油镜观察标本时应将显微镜直立,勿将镜臂弯曲,以免镜油流散。
(2)以天然光线为光源时,使用平面反光镜,如以灯光为光源,使用凹面反光镜。
(3)将聚光器升到最高位置,再将光圈完全打开,增大射入光线的强度。
(4)标本固定在载物台上,标本面上加镜油1小滴,用标本移动器夹紧标本。
(5)先用低倍镜将视野调至最亮时,并找到标本的适当位置,然后换用油镜。
(6)用眼从侧方看着物镜,缓慢转动粗调节器,使物镜头浸于油滴内,并几乎与玻片接触为止,但切勿使两者相碰,防止损伤镜头或压碎玻片;然后从目镜观察,轻轻转动粗调节器,看到物像时,再调换细调节器,使物像清晰。
未能看到物像时,再重复上述操作。
(7)油镜头使用后立即用拭镜纸擦净镜头上的油。
如油已干,可在试镜纸上滴少许二甲苯擦试,并随即用干的试镜纸擦去二甲苯,以防镜片脱落。
(二)油镜的保护1.显微镜是贵重精密仪器,使用时要精心爱护,不得随意拆散和碰撞。
2.取送显微镜时,应右手持镜臂,左手托镜座,平端于胸前,然后轻放于台面上或柜箱内。
3.防止与强酸、强碱、乙醚、氯仿、酒精等化学药品接触。
4.擦镜头时,用试镜纸擦,切忌使用粗糙的纸片或布片擦试等。
擦镜时应顺其直径方向擦,不要转圈擦。
5.不用时,将物镜转开呈八字,使其不正对聚光器,以免物镜与聚光器相碰撞。
将聚光器下降,罩上镜套或盖布,对号归位。
思考题1.怎样操作才能使显微镜的视野最亮?标本最清晰?2.使用油镜应注意哪些主要事项?二、细菌材料玻片标本制备(操作)目的细菌材料需涂布固定于玻片上,然后经染色才能观察其形态、结构及染色反应。
原理细菌为胶体原浆蛋白为主,涂布在玻片上经火焰温热后可固定于玻片,再经染色冲洗既可被染上颜色,且不易被水冲洗掉。
材料葡萄球菌、大肠杆菌培养物、玻片、生理盐水、接种环、酒精灯、火柴、消毒缸。
方法步骤按涂片→干燥→固定顺序进行。
1.涂片取洁净载玻片1张,用接种环取1~2环生理盐水置于玻片,接种环灭菌后取菌少许,与盐水混匀并涂成面积不超过1cm2的薄膜。
如用液体培养物涂片,可直接取培养物涂于玻片上,不加生理盐水。
2.干燥将涂片放空气中自然干燥,或将标本面向上,放在离火焰较远处烘干,避免烤焦。
3.固定手持载玻片一端,将涂片在火焰高处连续通过3次,约2~3秒,就可固定标本。
注意事项1.玻片要洁净无油,否则菌液不易涂开。
不宜选用厚玻片,以免标本观察时视野难调清晰。
2.取菌量宜少,涂上要均而薄3.水洗时要以细流水徐缓冲洗,避免直接冲洗涂菌处,要切忌未经火焰固定的标本立即染色水洗。
思考题涂片后为什么必须进行固定?固定时应注意什么?三、细菌的革兰染色法(操作)目的革兰染色法是最常用的细菌鉴别染色法,根据染色结果将细菌分成两大类,即革兰阳性菌和革兰阴性菌,此有助于细菌鉴别、分析细菌的结构特点、致病性和选用抗菌药物提供依据。
原理由于两大类细菌细胞壁成分和结构不同。
革兰阴性菌细胞壁中有较多的类脂质,而肽聚糖含量较少。
当用酒精脱色时,溶解了类脂质,增加了细胞的渗透性,使结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细胞脱色,经复染后,染上复染液的颜色。
而革兰阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大,类脂质含量少,经酒精脱色后,肽聚糖层的孔径变小,通透性降低,细胞仍保留结晶紫的颜色。
材料1.葡萄球菌和大肠杆菌18~24小时培养后的混合菌液。
2.革兰染色液一套。
3.其它材料同玻片标本制备法。
方法步骤涂片→干燥→固定后按以下顺序染色。
1.初染滴加结晶紫染液数滴于标本面上,染色1分钟,轻轻水洗,甩干。
2.媒染滴加卢戈氏碘液数滴于标本面上,染色1分钟,轻轻水洗,甩干。
3.脱色滴加95%酒精于标本面上,频频倾动玻片,直到不再溶下染料为止,约半分钟,视标本片材料厚薄而增减时间,然后水洗、甩干。
4.复染加稀释石炭酸复红液于标本面上,染1/2~1分钟,水洗后甩干,用毛边纸或滤纸轻轻吸干,待标本充分干燥后加油,用油镜观察并绘图。
提示:经革兰染色后,显紫色者为革兰阳性菌,显红色者为革兰阴性菌。
注意事项1.注意掌握好染色的时间,尤其是酒精脱色时间,不宜过长或过短。
2.染色过程中,不可使染液干涸。
3.选用适龄培养物,以18~24小时为宜,否则影响染色效果。
4.细菌染色标本片观察后仍应放入规定的玻片缸中以便消毒处理。
思考题1.革兰染色法的基本步骤如何?应注意哪些关键步骤?2.革兰染色有何实际意义?四、细菌的基本形态和特殊结构观察(示教)目的在适宜条件下,各种细菌保持其原有形态和染色反应,可作为菌种鉴别基本条件。
某些细菌除了具有菌细胞的基本结构之处,尚具有某些特殊结构,可供菌种的鉴别。
原理细菌为无色半透明胶体,经染色或特殊染色后,可显示其固有形态或特殊结构,可以供菌种的观察和识别。
材料1.细菌基本形态标本片(1)球菌葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、脑膜炎双球菌染色标本片。
(2)杆菌大肠杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等染色标本片。
(3)螺菌类霍乱弧菌、幽门弯曲菌标本片等。
2.细菌特殊结构标本片肺炎球菌荚膜、破伤风杆菌芽胞、变形杆菌鞭毛等染色片。
方法步骤1.使用油镜观察细菌基本形态各标本片并绘图。
2.在示教油镜下观察细菌特殊结构标本片并绘图。
思考题1.细菌有哪些特殊结构,其在医学实践中意义如何?2.为什么细菌能保持其固有形态?实验二病原性球菌、杆菌一、观察各病原性球菌的菌落特征(示教)目的熟悉病原性球菌的培养特性及主要鉴别点材料与方法金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌血琼脂平板、脑膜炎双球菌巧克力平板培养物。
观察各菌生长情况,注意单个菌落的形态、大小、表面、边缘、透明度、颜色及溶血环。
思考题α和β溶血的实质是什么?二、血浆凝固酶试验-玻片法(操作)目的掌握血浆凝固酶试验的原理。
原理致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,使人或动物血浆发生凝固,因此,测定血浆凝固酶的有无是鉴定葡萄球菌致病性的重要依据。
致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是结合凝固酶,结合在细胞壁上,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附于细胞表面,发生凝集,可用玻片法测出。
另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶,作用类似凝血酶原物质,可被血浆中的协同因子激活变成凝血酶样物质,而使纤维蛋白原变成纤维蛋白,从而使血浆凝固,可用试管法测出。
材料金黄色葡萄球菌培养物、表皮葡萄球菌培养物、玻片、生理盐水、兔血浆、接种环、酒精灯、火柴、消毒缸方法1.取干净玻片一张,用记号笔将玻片划成三格,其中第一格、第二格各加2接种环的兔血浆,第三格加2接种环生理盐水。
2.用接种环取少许金黄色葡萄球菌培养物分别于第一格的兔血浆及第三格的生理盐水混匀,取少许表皮葡萄球菌培养物与第二格的兔血浆混匀。
3.5分钟以内观察结果。
结果若有凝块出现,即为阳性;若无凝块出现,则为阴性。
思考题致病性葡萄球菌的特点有哪些?鉴定致病性葡萄球菌常用的方法有哪些?三、肠道杆菌在选择鉴别培养基上的菌落特点(示教)选择鉴别培养基中除基本营养成分外,含乳糖、指示剂、选择性抑菌剂等成分。
如SS琼脂培养基中指示剂为中性红,选择性抑菌剂为胆盐、枸橼酸钠和煌绿等,对大肠杆菌有抑制作用而对肠道病原性杆菌无抑制作用或作用微弱。
大肠杆菌在SS平板上生长受抑制,少数长出菌落者因发酵乳糖产生酸类,能使中性红变红,以致菌落呈红色,而一般肠道致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨产生硷性物质,故菌落呈淡黄色,故起到选择鉴别大肠杆菌及其他肠道致病菌的作用。
EMB培养基中伊红、美蓝兼有指示剂和选择性抑菌剂的作用,大肠杆菌在EMB平板上因分解乳糖产酸,pH下降,使菌体带正电荷,从而结合伊红、美蓝使呈紫黑色有金属光泽的菌落,而一般肠道致病菌不分解乳糖、呈无色半透明菌落。
SS 琼脂培养基对大肠杆菌抑制作用很强,EMB琼脂培养基对大肠杆菌抑制作用较弱,故前者更适宜于沙门菌、志贺菌等肠道病原性杆菌的分离培养。
表肠道杆菌在SS平板、EMB平板上的菌落特征培养基大肠杆菌菌落沙门菌、志贺菌等菌落SS平板红色较小、淡黄色半透明EMB平板紫黑色、有金属光泽较小,无色半透明四、肠道杆菌的生化反应及动力(示教)材料 5种肠道杆菌在葡萄糖发酵管、克氏双糖铁培养基、尿素培养基、蛋白胨水、半固体培养基的24小时培养物。
结果观察1.观察葡萄糖发酵管内5种肠道杆菌的生长情况,注意是否产酸或产酸产气。
2.观察克氏双糖铁培养基内5种肠道杆菌生长情况,注意对葡萄糖及乳糖分解能力、能否产气;有无硫化氢产生。
OH呈硷性,可使培养基(含 3.观察能否分解尿素,如能分解尿素形成NH4指标剂酚红)变为桃红色。
4.在蛋白胨水培养物中滴加数滴吲哚试剂(对二甲基氨基苯甲醛),如能分解色氨酸产生吲哚,则出现玫瑰红色环,即为吲哚试验阳性。
5.观察细菌在半固体培养基中生长情况,如细菌仅沿穿刺线生长,为动力试验阴性,如扩散生长而使整个培养基混浊,则为动力试验阳性。
表 5种肠道杆菌的生化反应及动力试验菌名生化反应动力葡萄糖乳糖H2S 尿素靛基质大肠杆菌○+○+--++变形杆菌○+-+++/-+乙型副伤寒杆菌○+-++ --+伤寒杆菌+-+/---+痢疾杆菌+---+/--思考题什么叫选择鉴别培养基?举例说明。
实验三病毒及其它微生物一、钩端螺旋体(示教)材料钩端螺旋体镀银染色示教片方法用油镜观察钩端螺旋体的形态、染色特点二、狂犬病病毒包涵体(示教)材料狂犬病病毒包涵体HE染色示教片方法用油镜观察狂犬病病毒包涵体的特征,在神经细胞的胞浆内可见嗜酸性包涵体,至圆形或椭圆形,数量1个或多个。
三、病毒的血凝抑制试验(示教)原理病毒的红细胞凝集现象,可于病毒(或其血凝素)悬液中,加入特异性免疫血清所抑制,即为病毒的红细胞凝集抑制试验。
方法按下表进行塑料板孔 1 2 3 4 5 6 7 89血清对照10抗原对照11血球对照生理盐水(ml)-0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 病人血清(ml)1:10稀释0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25弃0.25病毒抗原(ml)0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0 0.25 0 0.5%鸡红细胞(ml)0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5摇匀,室温中静置30~60分钟结果血清稀释度1:10 1:20 1:40 1:80 1:60 1:320 1:640 1:1280 / / /结果判定以能完全阻断病毒抗原发生血凝的最高血清稀释度为该血清的血凝抑制效价。