微生物的分离与培养知识点
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环境工程微生物⭐1-1、何谓微生物?它主要包括哪些类群?P27微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物总称。
1.原核类(真细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏体)2.真核类(真菌、原生动物、显微藻类)3.古生菌和非细胞型类(介于原核和真核之间)(病毒、亚病毒因子)⭐1-2、微生物有哪些特点?1.个体微小,结构简单,表面积大。
微生物大多是单细胞生物,有点复杂的多细胞微生物也少有组织器官的分化。
2.吸收多,转化快。
一些微生物的呼吸速率也比高等动、植物的组织强数十至数百倍。
这个特性为微生物的生长繁殖和合成大量代谢产物提供了充分的物质基础。
3.生长旺,繁殖快。
微生物具有极高的生长和繁殖速率。
4.适应强,易变异。
微生物结构简单,整个细胞直接与环境接触,易受环境因素影响,使其具有极其灵活的适应性或代谢调节机制。
5.分布广,种类多。
因微生物极小,很轻,附着于尘土随风飞扬,漂洋过海,栖息在世界各处,分布极广。
6.杂居混生,因果难联。
在自然条件下,微生物一般都是许多种相互杂居混生。
1-3、环境微生物学的主要研究内容有哪些?1.环境中微生物的分离、鉴定、培养及生理生化研究2.微生物与自然环境之间的关系3.微生物对环境的污染和危害4.微生物对受污染环境的净化和修复5.微生物在环境监测中的应用6.微生物产品1-4、试述显微镜的种类及与微生物学之间的关系。
1.光学显微镜2.电子显微镜3.扫描隧道显微镜2-2、如何命名微生物?种以上的系统单元有那几级?命名:一、俗名二、学名1、双名法学名=属名+种名加词+(首次定人名)+现名定名人+现名定名年(斜体字)(正体字)2、三名法学名=属名+种名加词+符号(可省略)+亚种或变种名的加词斜体斜体级:不知道2-3、试比较古生菌、细菌与真核生物的主要区别。
⭐2-4、微生物的鉴定方法。
其中现代分子生物鉴定分两类:1.通过核酸分析鉴定微生物遗传类型2.细胞化学成分作用鉴定指标2-5、试述16SrRNA寡核苷酸测序技术的原理、优点和简明操作步骤,并说明它在生物学基础理论研究中的重要意义。
分解纤维素的微生物的分离知识点纤维素是植物细胞壁的主要结构成分,通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起,其结合方式和程度对植物源食品的质地影响很大。
你知道纤维素的微生物怎么分离的吗?下面店铺给你分享分解纤维素的微生物的分离知识点,欢迎阅读。
分解纤维素的微生物的分离知识点一、纤维素与纤维素酶1.纤维素的化学组成含C、H、O三种元素,是一种多糖。
纤维素的基本组成单位是葡萄糖,人体内没有纤维素酶,所以人体不能直接以纤维素为能源物质,但土壤中有分解纤维素的微生物,最终把纤维素分解成葡萄糖释放到无机环境。
2.纤维素的分布棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物,此外,木材、作物秸秆等也富含纤维素。
纤维素产生于植物的光合作用,地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨。
研究土壤中分解纤维素的微生物将给我们的生活带来很大变化。
3.纤维素酶的组分纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分。
前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
二、纤维素分解菌的筛选1.方法刚果红染色法,常用的有两种,一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红。
2.原理(1)含纤维素的培养基中加入的刚果红,可与纤维素形成红色复合物。
(2)当纤维素被纤维素酶分解后,形成的纤维二糖、葡萄糖不和刚果红发生这种反应,红色复合物就无法形成,培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
三、实验设计1.实验流程土壤取样→选择培养(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。
2.土壤取样采取土样时,可以选择富含纤维素的环境。
3.选择培养(1)目的:增加纤维素分解菌的浓度,确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。
(2)操作方法:将土样加入装有30 mL选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下振荡培养1~2_d,直至培养液变混浊,也可重复选择培养。
微生物检验技术知识点1.培养方法:培养是微生物检验的基础,通过将样品接种到培养基上,使微生物在合适的环境中繁殖生长。
培养方法包括常规培养和不同培养手段。
常见的培养手段有液体培养、固体培养和胶体培养等。
2.鉴定方法:微生物的鉴定是判断其种属、属或是菌株的过程。
传统的鉴定方法包括形态学、生理生化特性和生物学特性等,而现代鉴定方法则应用了分子生物学等技术。
常用的鉴定技术有酶联免疫吸附试验(ELISA)、脱氧核糖核酸(DNA)杂交和聚合酶链反应(PCR)等。
3.纯化和分离方法:对于复杂的微生物种群,需要进行纯化和分离,以便对特定的微生物进行进一步的研究。
纯化和分离方法包括传统的分光技术、平板法和筛选法,以及最新的流式细胞术、脉冲场凝胶电泳(PFGE)和DNA测序技术等。
4.对微生物的抗生素敏感性检测:抗生素敏感性是指微生物对抗生素的反应情况。
抗生素敏感性检测可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗细菌感染疾病。
目前常用的抗生素敏感性检测方法包括纸片扩散法、E测试和微量稀释法等。
5.流行病学监测:微生物检验技术在流行病学监测中发挥着重要作用。
通过对微生物种群的监测和分析,可以及时发现并控制传染病的传播。
流行病学监测常用的技术包括病原体分子鉴定、序列分析和生物信息学分析等。
6.污染控制技术:微生物检验技术也在环境和食品安全方面发挥着重要作用。
通过对环境和食品中微生物的检验,可以评估污染程度,并采取相应的控制措施。
常用的污染控制技术包括灭菌消毒、高温杀菌和辐照等。
7.微生物基因工程:微生物基因工程是指利用基因工程技术对微生物进行改造,以生产有用的产物或者改善微生物的特性。
微生物基因工程的应用广泛,可以用于制药、农业、环境工程等领域。
常见的微生物基因工程技术包括基因克隆、基因敲除和基因转导等。
总之,微生物检验技术是一门广泛应用于医学、生物学、环境工程等领域的技术。
通过不断地研究和创新,微生物检验技术将为疾病诊断、污染控制和资源利用等问题提供更好的解决方法。
微生物培养知识点总结高中一、微生物培养的基本概念微生物培养是指在实验室条件下,利用培养基等培养物质,使微生物在一定的温度、湿度和气氛条件下生长繁殖的过程。
微生物培养是微生物学实验的基础,通过微生物培养可以获得大量的微生物菌株,进行鉴定、生理生化性质和应用价值的研究。
微生物培养技术在医学、环境科学、食品工业等领域都具有重要的应用价值。
二、微生物培养的基本要素1. 培养基培养基是支持细菌或真菌生长繁殖的物质,一般由碳源、氮源、磷源、无机盐和生长因子等组成。
根据微生物生长的特点和营养需求,培养基可分为无机培养基和有机培养基。
无机培养基是以无机盐为主要成分,有机培养基则含有有机物质。
微生物培养需要根据不同微生物的特性选择合适的培养基,以促进微生物的生长和繁殖。
2. 温度微生物培养的温度是微生物生长的关键条件,不同微生物对温度的适应范围不同。
一般来说,细菌适宜的培养温度为30-37摄氏度,而真菌则适宜的培养温度通常为25摄氏度左右。
因此,在微生物培养实验中,要根据具体的微生物种类选择适宜的培养温度。
3. 湿度微生物在培养过程中需要适当的湿度条件来维持细胞内外环境的稳定性。
通常情况下,微生物培养所处的环境湿度应保持在60-80%之间,这样可以促进微生物的生长和繁殖。
4. 氧气氧气是微生物生长所必需的气体,绝大多数微生物都需要氧气来进行呼吸作用。
在微生物培养过程中,需要保持适当的氧气供应以促进微生物的生长。
不同微生物对氧气的需求量和适应能力不同,因此在微生物培养实验中需要根据具体微生物的需求来调节氧气的供应。
5. pH值微生物的生长和繁殖需要适宜的pH条件,不同微生物对pH值的适应范围各有不同。
一般来说,细菌的适宜pH范围为6.5-7.5,而真菌则适宜的pH范围通常为4-6。
因此,在微生物培养实验中需要根据具体的微生物种类来调节培养基的pH值,以促进微生物的生长和繁殖。
三、微生物培养的常用技术方法1. 细菌单菌落分离在微生物培养实验中,通过单菌落分离可以获得纯种细菌,为细菌的鉴定和分类提供了基础。
一微生物的基本培养技术【知识链接】一、培养基的配制1.培养基的概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基,用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
2.培养基的种类:3.营养组成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
4.培养基特殊需求:(1)培养乳酸杆菌时,在培养基中添加维生素。
(2)培养霉菌时,将培养基调至酸性。
(3)培养细菌时,将培养基调至中性或弱碱性。
(4)培养厌氧微生物时,需要提供无氧的条件。
二、无菌技术1.目的:防止实验室的培养物被杂菌污染(获得纯净培养物);有效避免操作者自身被微生物感染。
2.关键:防止杂菌污染。
3.常见方法:(1)概念:①消毒:使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的一部分微生物(不包括芽孢和孢子)。
②灭菌:使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。
(2)类型与方法:连一连:将无菌技术类型、常用方法和适用对象用线连起来。
三、微生物的纯培养1.微生物纯培养的概念:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
2.酵母菌的纯培养:3.基于对酵母菌接种过程的理解,下列接种过程正确的顺序是baefcgd。
知识点一培养基的配制1.培养基的种类、特点及作用的分析:【特别提醒】常见选择培养基举例①缺少氮源的培养基可以筛选利用大气中N2的微生物。
②含青霉素的培养基可淘汰细菌,筛选出真菌。
③无有机碳源的培养基可筛选出自养生物。
2.培养基的成分、功能及来源分析:【特别提醒】有关培养基营养物质的三点提醒(1)培养不同的微生物所需要的营养物质可能不同。
①自养型微生物的培养基主要以无机营养为主。
②异养型微生物的培养基主要以有机营养为主。
(2)微生物需要补充生长因子,是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。
(3)微生物需要量最大的是碳源,能合成含碳有机物的是自养型,反之则为异养型。
高一生物微生物的实验室培养介绍【导语】微生物的实验室培养是高中生物的重要考点,这方面的考点学生掌控了吗?下面是作者给大家带来的有关于微生物的实验室培养介绍,期望能够帮助到大家。
高一生物微生物的实验室培养知识点该知识点包括培养基、无菌技术、实验操作(制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌)等几个要点知识。
1. 培养基:培养基的类型(1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂),一样不能被微生物利用,只起到凝固作用。
(2)挑选培养基一样只生长具有特定目的的微生物,鉴别培养基可以存在其他微生物,而且能鉴别特定的微生物。
2. 无菌技术:消毒与灭菌用酒精消毒时,70%的酒精杀菌成效。
若浓度过高,菌体表面蛋白质凝成一层保护层,则乙醇分子不能渗透其中;若浓度过低,杀菌能力减弱。
获得纯洁培养物的关键是避免杂菌污染,无菌技术可从以下四个方面展开:(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰邻近进行。
(4)实验操作时,应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
3. 实验操作(制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌):制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤是:(1)运算:根据培养基配方比例,运算配制100ml的培养基,各种成分用量。
(2)称量:准确称取各种成分。
(3)溶化:将称好的牛肉膏加少量水溶化后,加入称量好的蛋白胨、氯化钠、琼脂加热溶解,并补加蒸馏水定容至100ml。
(4)灭菌:将配置好培养基转移到锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。
将培养基用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。
(5)倒平板:待培养基冷却到50 ℃左右时,在酒精灯邻近倒平板。
【微生物的实验室培养考点分析】考题多以非挑选题的情势显现,考核微生物的培养条件、代谢特点,实验室微生物培养规范和主要步骤。
专题四选修一生物技术实践必背知识实验一大肠杆菌的培养和分离【考点一】培养基1、培养基配置①微生物的生命活动需要五大营养要素:水、无机盐、碳源、氮源、生长因子;②有的物质既是碳源又是氮源(为微生物生长提供碳元素和氮元素),如:蛋白质、蛋白胨;③有的既是碳源又是生长因子(是微生物生长不可缺少的微量有机物),如:酵母提取物;④“细菌喜荤,霉菌喜素”;细菌喜37℃的温度;霉菌喜25-30℃的温度;⑤细菌的培养基:蛋白胨、酵母提取物、一定量的氯化钠,以维持一定的渗透压;通常在中性偏碱的环境中生长;⑥霉菌的培养基:一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可;通常在中性偏酸的环境中生长;⑦在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要适宜的pH、温度以及特殊营养物质,以满足微生物生长对的要求。
2、培养基的种类及用途:①液体培养基:呈现液态,用于扩大培养和工业生产;②固体培养基:配制时需加入琼脂(凝固剂),呈固态,用于菌种分离、鉴定、计数等;③我们一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌,用LB固体培养基来分离大肠杆菌。
【考点二】灭菌和消毒1、无菌技术:人们利用微生物完成一定的反应,必须要求某种微生物是没有被其他微生物污染的,因此,在培养微生物时必须进行无菌操作;2、灭菌是用物理或化学的方法,杀死或除去环境中的一切微生物的方法。
杀死病原菌的方法叫消毒。
如:实验室要对使用前和使用后的培养基、各种容器进行灭菌;要对实验服、对病人的排泄物和衣物进行消毒。
3、干热灭菌法:是利用火焰将接种环和试管上的微生物烧死(又称灼烧灭菌法),或在140-160℃的烘箱中加热2-3h,将微生物的营养体和芽孢杀死。
4、加压蒸气灭菌法(高压蒸气灭菌法):这是生产和实验室常用的灭菌法,将灭菌锅内通入压力达到1000g/cm2的高压蒸气,锅内温度达121℃,持续15-30min,即可达到灭菌目的;注意:当培养基内有葡萄糖时,为防止葡萄糖分解碳化,要用500g/cm2压力(90℃以上)灭菌30min。
微生物实验知识点微生物实验是指对微生物进行观察、培养、检测及相关实验操作的科学研究方法。
下面是一些关于微生物实验的知识点:1.实验室安全:进行微生物实验时,必须遵守实验室的安全规范,包括佩戴实验手套、口罩和实验服。
同时,实验室的环境要定期消毒,以防止微生物的交叉污染。
2.微生物培养基:微生物实验常用的培养基有固体培养基和液体培养基。
固体培养基可以用于分离纯培养和观察菌落形态,而液体培养基常用于大规模培养微生物。
3.纯培养与混合培养:纯培养是指从一种微生物中分离出单一的菌株进行培养,得到纯净的培养物;混合培养是指将两种或多种微生物一起培养,观察它们之间的相互作用。
纯培养和混合培养的选择取决于实验的目的和研究内容。
4.微生物的分离与鉴定:微生物实验常用的分离方法包括涂布法、稀释法和过筛方法。
通过形态特征观察、生理生化测试、分子生物学技术等方法,可以鉴定微生物的种属和菌株。
5.微生物生长曲线:微生物生长曲线是研究微生物生长动力学的重要实验方法,通过连续测量微生物的生物量、代谢产物或生长速率,可以得到微生物在一定条件下的生长曲线,以了解微生物的生长特性。
6.抗菌药物敏感性试验:抗菌药物敏感性试验是评价微生物对不同抗菌药物的敏感性和抗性的实验方法。
通过测定微生物对抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC)或抑菌圈直径,可以判断微生物对抗菌药物的敏感程度。
7.酶活性检测:微生物实验中常用酶活性检测来评估微生物酶的产生与活性。
通过观察酶的底物转化情况、染色反应、电泳分析等方法,可以确定微生物是否具有特定酶的活性。
8.微生物的遗传转化:遗传转化是指微生物通过吸收外源性的遗传物质,如质粒DNA或线性DNA片段,加入到自身的遗传物质中。
通过转化实验可以在微生物中引入外源基因、观察基因的表达和相关功能的变化,进一步研究微生物基因的功能。
这些知识点涵盖了微生物实验的基本概念、常用实验方法和技术应用,希望对你有帮助!。
四年级神奇的微生物土壤知识点土壤微生物的采集一般有土样采集、增殖培养、培养分离、筛选最后进行纯种分离、毒性试验等。
1、采样:一般在有机质较多的肥沃土壤中,微生物的数量最多,中性偏碱的土壤以细菌和放线菌为主,酸性红土壤及森林土壤中霉菌较多,果园、菜园和野果生长区等富含碳水化合物的土壤和沼泽地中,酵母和霉菌较多。
选择一定的土壤环境采集土样,将采集到的土样盛入清洁的聚乙烯袋、牛皮袋或玻璃瓶中。
2、增殖培养:为了容易分离到所需的菌种,让无关的微生物至少是在数量上不要增加,可以通过配制选择性培养基,选择一定的培养条件来控制。
例如碳源利用的控制,可选定糖,淀粉,纤维素,或者石油等,以其中的一种为唯一碳源,那么只有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长,而其它微生物就可能死亡或淘汰。
这样对下阶段的纯种分离就会顺利得多。
3、培养分离:尽管通过增殖培养效果显著,但还是处于微生物的混杂生长状态。
因此还必须分离,纯化。
在这一步,增殖培养的选择性控制条件还应进一步应用,而且控制得细一点,好一点。
纯种分离的方法有划线分离法,稀释分离法。
4、筛选:这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件,通过三角瓶的容量进行小型发酵试验,以求得适合于工业生产用菌种。
关于菌种的识别,细菌、放线菌、酵母菌和霉菌,每一类微生物在一定培养条件下形成的菌落各具有某些相对的特征,利用观察这些特征,来区分各大类微生物及初步识别、鉴定微生物。
土壌一般取土壤表层5-10cm处土壤,如果土壤有翻动,应更深一点,避免空气中微生物污染。
1、我们一般都用那种封口袋(塑料的),纸袋不容易保持水分。
2、当天采当天快递回来,不用加冰袋。
3、快递一般三天就到,对微生物菌群影响不大。
4、在冰柜中4度保存,时间不要超过一个月,尽量随采随做。
菌株分离(seperation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对它们进行分离、筛选,进而得到所需的微生物的过程。
1、培养基的类型及其应用注意:(1)选择培养基:①特点:培养基中加入有利某种微生物生长繁殖所需的营养物质,以抑制或阻止不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长;②用途:选择出用于培养、分离出特定的微生物 (如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐) (2)鉴别培养基:①特点:根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或者化学药品;②用途:鉴别不同种类的微生物,如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽)2、培养基的营养成分:水、无机盐、碳源、氮源。
还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。
3、无菌技术——(微生物接种技术的核心)获得纯净培养物的关键是:防止杂菌污染。
(1)消毒指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。
分为煮沸消毒法,巴氏消毒法(不耐高温的液体,如牛奶。
原因:可以杀死牛奶中的微生物,并且使牛奶的营养成分不被破坏。
)化学药剂消毒法(如酒精、氯气、石碳酸等),紫外线消毒法(原理:破坏DNA的结构)。
(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
分为灼烧灭菌法(接种环、接种针等金属工具、试管口)、干热灭菌法(吸管、培养皿等玻璃器皿、金属用具,所用器械是干热灭菌箱)、高压蒸汽灭菌(培养基、无菌水等,所用器械是高压蒸汽灭菌锅)(3)防止杂菌污染的操作:在酒精灯火焰旁拔出锥形瓶瓶盖;在酒精灯火焰旁打开培养皿一条缝;打开的锥形瓶的瓶口通过火焰;平板冷却凝固后倒置。
4、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算—称量—溶化—灭菌—倒平板(1)各营养成分都有且有一定的比例。
牛肉膏提供碳源、氮源和生长因子等;蛋白胨提供碳源、氮源和生长因子等;琼脂作为凝固剂。
(2)要将平板倒置的原因:防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
5、纯化大肠杆菌(1)纯化方法:微生物接种的方法,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术一、培养基的配制1.培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
2.培养基的种类3.培养基的营养组成各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质,此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
二、无菌技术1.获得纯净的微生物培养物的关键:防止杂菌污染。
2.消毒和灭菌消毒灭菌概念使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、酒精消毒法、紫外线消毒法湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌适用对象操作空间、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
三、微生物的纯培养1.纯培养:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
2.微生物纯培养的步骤:微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
3.酵母菌的纯培养(1)菌落:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
(2)获得单菌落的方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
判断对错(正确的打“√”,错误的打“×”)1.液体培养基含有水,而固体培养基不含水。
( ) 2.获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
() 3.用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基都要进行消毒。
() 4.培养基分装到培养皿后进行灭菌。
() 5.平板冷凝后应将平板倒置,防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染。
临床微生物检验知识点临床微生物检验是通过对临床样本进行微生物学检验,利用各种实验方法和技术手段,对病原微生物进行鉴定、分离、培养和药敏试验,从而帮助医生进行准确诊断和合理治疗的一项重要检测技术。
以下是一些临床微生物检验的知识点。
1.微生物的鉴定:通过观察病原微生物的形态特征、生理生化指标、生物学特征等,进行鉴定。
常用的方法包括显微镜观察、革兰染色、培养特性观察等。
2.微生物的分离:将样本中的微生物分离出来,使其能够单独生长并进行后续的检验和鉴定。
常用的方法包括涂布法、稀释涂布法、过滤法等。
3.微生物的培养:将分离后的微生物进行培养,使其能够增殖形成纯种,并提供足够的数量用于进一步检验。
常用的培养基包括富养基、选择性富养基、增菌富养基等。
4.微生物的药敏试验:通过对分离的病原微生物进行不同抗菌药物的敏感性试验,确定该微生物对抗菌药物的敏感性和抗药性。
常用的方法有纸片法、扩散法、微量稀释法等。
5.微生物的快速检测方法:为了达到更快速、准确的临床微生物检测结果,目前发展了许多快速检测方法,如PCR技术、基因测序技术、质谱技术等。
6.微生物的标本采集和保存:正确的标本采集对于临床微生物检验结果的准确性和可靠性至关重要。
常见的标本有血液、尿液、痰液、脑脊液、伤口分泌物等。
标本采集后应存放在适当的条件下,以避免微生物的生长和变质。
7.常见病原微生物的检验:临床微生物检验主要涉及到常见的病原微生物,如细菌、真菌、病毒和寄生虫等。
对于每种病原微生物的检验方法和操作要点有所不同。
8.质量控制:临床微生物检验对质量控制要求较高,包括内、外质控。
内质控主要通过引入质控菌株进行培养和药敏试验等操作,确保检测结果的准确性和可靠性。
外质控则是通过参加各种质量评估项目来衡量实验室的检测质量。
在临床微生物检验过程中,需要严格遵守相关的操作规范和质量控制要求,以确保检验结果的准确性和可靠性。
临床医生在接到微生物检测结果后,应结合临床病情和患者的病史等信息,合理解读检验结果,并进行科学的诊断和治疗。
微生物分离纯化的原理
微生物分离纯化的原理是利用微生物在培养基上的生长特性差异,通过适当的培养条件和方法,将混合菌落分离出单一菌落,并将其纯化。
微生物分离纯化的步骤主要包括:
1. 选择合适的培养基:根据待分离微生物的特性,选择适合其生长的培养基。
培养基的选择要考虑 pH 值、营养成分和添加
的选择性抑制剂等因素。
2. 接种样品:将待分离微生物的样品接种在培养基上,通过涂布、均匀涂布、点接种等方法将样品均匀地分布在培养基上。
3. 培养条件控制:根据待分离微生物的生长要求,控制培养条件,如温度、湿度、气体组成等,以促进微生物生长。
4. 分离单一菌落:经过一定时间的培养,单一菌落开始形成。
通过肉眼观察或显微镜观察,识别出目标菌落,并用针筒或接种环将该菌落转移至新的培养基上,实现分离纯化。
5. 进一步纯化:如需要更进一步纯化,可以重复分离的步骤,直至获得纯净的单一菌落。
也可以借助生理生化特性、抗生素敏感性等方法进行进一步鉴定和纯化。
通过以上步骤,微生物的分离纯化可以获得纯净的单一菌株,为后续的研究和应用提供可靠的基础。
引言概述微生物分析培养是一种重要的实验技术,用于分离和培养微生物。
通过对微生物的分析和培养,我们可以了解微生物的类型、特性和生态功能,也可以研究微生物与人类健康、环境功能以及工业和农业生产等方面的关系。
本文将详细介绍微生物分析培养的步骤、方法和应用。
正文内容一、微生物分析培养的步骤1.样品采集:首先需要选择适当的样品,例如土壤、水体、食品、体液等。
然后使用无菌工具采集样品,并将样品尽快送至实验室进行分析。
2.样品处理:对于含有大量杂菌的样品,需要进行处理,以减少杂菌对目标微生物的干扰。
处理方法包括稀释、过滤、离心等。
3.分离:将处理后的样品在无菌条件下分离到含有营养成分的培养基上。
通常采用平板、液体或半固体培养基。
4.培养:将分离后的微生物在恰当的温度、湿度和氧气条件下进行培养。
培养的时间因微生物种类不同而异,一般需要数天至数周。
5.鉴定:根据微生物的形态特征、生理生化特性和遗传特性等进行微生物鉴定。
常用的鉴定方法包括形态学观察、生化试验、分子生物学方法等。
二、微生物分析培养的方法1.纯培养法:通过单个菌落的选取和传代,获得纯种菌株。
这种方法可以用于对纯种微生物的性状、生长特性以及代谢功能等进行研究。
2.表型微生物分析方法:根据微生物在培养基上的营养需求、形态特征、生长速度和产物等,通过观察和测量这些表型特征来分析和鉴定微生物。
3.基因分析方法:通过分析微生物的基因组DNA或RNA,利用PCR、测序等技术进行基因分型、基因表达和基因功能等方面的研究。
4.免疫学分析方法:通过检测微生物特异性抗原或抗体来鉴定和分析微生物。
常用的方法包括免疫荧光、酶联免疫吸附测定等。
5.分子生物学方法:利用PCR、基因克隆、DNA测序等技术,对微生物的基因表达、基因功能以及微生物与宿主相互作用等进行分析和研究。
三、微生物分析培养的应用1.医学领域:微生物分析培养在临床诊断和治疗方面起着重要的作用。
通过培养和鉴定微生物,可以确定感染病原菌,选择合适的抗生素进行治疗。
分解纤维素的微生物的分离知识点分解纤维素的微生物是指能够分解植物纤维素的微生物,包括细菌、真菌和原生动物等。
纤维素分解微生物的分离是研究纤维素降解的关键步骤之一,需要一系列技术手段和实验方法。
以下是关于纤维素分解微生物的分离的一些知识点:1.分离介质的准备:为了分离纤维素分解微生物,需要准备一定的分离介质,常用的包括CMC(羟乙基纤维素钠)、氧化纤维素、纤维素硝酸酯等。
这些介质能够提供纤维素作为微生物的唯一碳源,并通过对媒介上的纤维素降解能力的检测来筛选分解能力强的微生物。
2.样品的收集与预处理:从自然环境中收集样品,如土壤、水体、动物肠道等,作为分离纤维素分解微生物的样品。
对于不同的样品,需要进行不同的预处理步骤,如土壤样品可能需要先进行筛分、稀释等,以获取适合的微生物样品。
3.纤维素分解菌的分离方法:常用的方法有网状过滤法、稀释平板法、涂布法和固体培养法等。
其中网状过滤法是将含有微生物的溶液经过一系列的精细滤网,用含纤维素降解酶活性的培养基滴洒在滤膜上,等待菌落的出现。
稀释平板法是将经过适当稀释后的微生物样品均匀涂布在含有纤维素的固体培养基上,将纤维素分解菌形成的菌落分离开,纯化得到纯种纤维素分解菌株。
涂布法则是将含有微生物的溶液均匀涂布于含有纤维素的涂料上,使纤维素降解菌后来形成的菌落附着在涂料上,然后将涂料悬浮于培养基中,得到分离的纤维素降解菌株。
4.分离纯化:通过以上方法获得菌落后,需要经过反复的分离纯化步骤,包括连续经过固体培养基的孢子形成、接种至液体培养基、分几次进行稀释平板和观察等步骤,以得到单个纯菌株。
5.鉴定和筛选:通过形态学、生理学和生化学方法对分离得到的纤维素分解微生物进行鉴定和分类。
同时,通过测定其纤维素降解酶活性和产生的代谢产物,评估其纤维素分解能力和代谢途径。
此外,还可以使用分子生物学方法,如16SrRNA测序和PCR等,对分离得到的微生物进行进一步的鉴定和分类。
6.构建工程菌株:通过基因工程技术,可以将纤维素降解酶基因导入到高效率发酵菌中,构建高纤维素降解能力的工程菌株,用于工业生产等。
1.2.1 微生物的基本培养技术微生物:难以用___________观察的微小生物的统称。
包括以下类群:病毒(无细胞结构生物):SARS 病毒、新冠病毒等____________病毒;T 2噬菌体等____________病毒。
细菌(原核生物):蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等;放线菌:衣氏放线菌等。
真菌(真核生物):酵母菌、毛霉等;原生生物:草履虫、变形虫等。
防止____________,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提,也是酵工程的重要基础。
实验室培养微生物的条件:①要为人们需要的微生物提供合适的____________和____________条件;②要确保____________无法混入,并将____________分离出来。
一、培养基的配置 1.培养基的概念和类型(1)概念:人们按照微生物对____________的不同需求,配制出供其____________的营养基质,即培养基。
(2)培养基的作用:用以____________、____________、____________、____________微生物或____________其代谢物。
(3)培养基的类型2.培养基的配制(1)基本成分:水、碳源、氮源、无机盐。
①碳源:a.无机碳源:CO2、CO32-、HCO3-→____________微生物;b.有机碳源:葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等→____________微生物。
②氮源:a.无机氮源:NH4+、NO3-、NH3等。
b.有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、____________、氨基酸等。
注意:含C、H、O、N的有机物是____________微生物的碳源、氮源、能源。
如____________等。
(2)特殊需求:某些微生物对______、特殊营养物质以及_______的需求。
特殊营养物质:____________、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)①培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加____________;②培养霉菌时,需要将培养基调至____________;③培养细菌时,需要将培养基调至____________或____________;④培养厌氧微生物时,需要提供____________的条件。
微生物的分离与培养知识小结与专题训练一、微生物的培养和分离技术1.微生物生长需要的营养物质一般都含有水、碳源、氮源、无机盐牛肉膏又称牛肉浸膏,是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。
有牛肉自然香味,易溶于水,水溶液呈淡黄色。
牛肉膏当中含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。
蛋白胨,是有机化合物。
蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂。
蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。
在胃内蛋白质的初步消化产物之一就是蛋白胨。
蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。
能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。
对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物既是碳源,又是氮源、能源。
2.培养基的制作合格与否通过未接种的培养基表面是否有菌落生长来验证3.常用的无菌技术有⑴对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
⑵将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
⑶为避免周围环境中的微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
⑷实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
考点细化:①灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
消毒是指用较为温和的理化方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,不包括芽孢、孢子。
②灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,灼烧灭菌用于接种用的金属工具;干热灭菌用于能耐高温的,需要保持干燥的玻璃器皿等;高压蒸汽灭菌用于培养基等③消毒的方法有煮沸消毒法,用于液体消毒;巴氏消毒法,用于不耐高温的液体;化学药剂(如用体积分数70%-75%的酒精)或紫外线消毒,用于物体表面的消毒。
4.微生物的纯培养指的是防止外来杂菌入侵。
5.配制固体培养基的步骤:计算、称量、溶化、(调节pH、分装、包扎)灭菌、倒平板6.微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。
将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是纯化的菌落。
★平板划线法中的注意事项①操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍加逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。
考点细化:①平板冷凝后,要是有水滴滴到培养基上,会导致菌蔓延,这样就不能计数,分离了。
为防止冷凝水滴到培养基上,所以培养时平板一定要倒置。
②接种操作每次划线之前都要灼烧接种环,是因为每次操作都要及时灭菌,以防污染杂菌。
操作结束时,仍然需要灼烧接种环的原因是防止杂菌污染环境。
二、特定微生物的数量的测定1.测定微生物数量的方法有显微镜直接计数、统计菌落数目。
三、培养基对微生物的选择作用1.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。
例如:在选择培养基的配方中,将尿素作为培养基中唯一的氮源,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
考点细化:①选择培养基配置的原理是增加或减去某种成分,使要选择的微生物能生长,其它微生物不能生长。
②培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌③培养基中不加氮源可以分离出固氮微生物练习巩固一、单项选择题1. 下列说法正确的是A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.除水以外的无机物只能提供无机盐D.无机氮源不可能提供能量2.要从多种细菌中分离某种细菌,培养基要用A.固体培养基B.液体培养基C.加青霉素的培养基D.加入高浓度食盐的培养基3.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥ C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤4.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前5.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约5~10 min后将平板倒过来放置6.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物的营养的描述中,不正确的是A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一7.若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起采用下列哪组培养基可将它们分离A.加食盐的培养基和蛋白胨培养基B.伊红—美蓝培养基和无氮培养基C.斜面培养基和液体培养基D.加青霉素的培养基和液体培养基8A.碳源B.氮源 C.能源D.包括A、B、C三项9.给无氮培养基接种土壤稀泥浆的方法是A.打开培养皿盖,取一根接种环沾取少许稀泥浆,轻轻地点接在培养基的表面上B.取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆,略微打开培养皿盖,在培养基的表面轻点C.打开培养皿盖,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点D.略微打开培养皿盖,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌,冷却后沾取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点10.有关平板划线操作正确的是A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞C.把皿盖打开,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置,放入培养箱中培养11.在涂抹平板操作时错误的是A.将刮铲在酒精灯火焰上灼烧,直至烧红 B.取少量菌液滴加在培养基表面C.用体积分数为70%的酒精消毒 D.涂抹时可转动培养皿,使涂布均匀12.产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是A.一个细菌,液体培养基 B.许多细菌,液体培养基C.一个细菌,固体培养基 D.许多细菌,固体培养基13.下面对菌落的表述不正确的是A.肉眼可见的菌落一般均是由许多细菌大量繁殖形成的B.霉菌等在面包上生长形成的不同颜色的斑块即为菌落C.噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解,从而使菌落变得透明D.细菌、放线菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同14.菌种鉴定的重要依据是A.细菌的大小、形状和颜色 B.菌落的大小、形状和颜色C.有无鞭毛 D.培养基的不同15.菌落的特征包括①菌落的形态②菌落的结构③菌落的大小④菌落的颜色⑤菌落的隆起程度⑥菌落的数量A.①③④⑤ B.①②④⑥ C.①③⑤⑥ D.①④⑤⑥16.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法可依次用于杀死哪些部位的杂菌A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环C.培养基、手、接种环D.接种环、手、培养基二、多选择题17.在接种操作过程中,正确的是A.要将接种环灼烧灭菌B.取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C.将接种环伸入试管内,先接触长菌多的部位D.接种后还要将管口灭菌加塞18.实验室用于分离出与大肠杆菌混杂的酵母菌,培养基的要求是A.添加琼脂 B.不加氮源C.添加青霉素D.pH调节到7.0~8.019.下列关于无菌操作的叙述,正确的是A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B.将用于微生物培养的培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触20.有关涂抹平板法,叙述正确的是A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂抹到琼脂固体培养基的表面C.适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落三、简答题21.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。
首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。
请回答下列问题:(1)对买回来的菌种进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料:________、________、________、________、________。
其中提供氮源的是________________;提供能源的主要物质是________。
(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的________。
在烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止_______________ _______________。
(3)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入__________________中灭菌,压力________kPa,温度________,时间_________。
灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。
如果棉塞上沾有培养基,此试管应____________。
(4)使用高压蒸汽灭菌锅时应注意,先向锅内倒入________,把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后再将锅密闭。
22.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。
实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。
请回答与此实验相关的问题:(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。
除此之外,培养基还必须含有的基本成分是________和________。
(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是___ _____。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于______________中培养,培养的温度设定在37℃。
要使该实验所得的结果可靠,还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
(4)培养了20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有________种细菌。
一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越________。
(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐________细菌,这种培养基被称为______________________。
21.(1)牛肉膏蛋白胨水无机盐琼脂蛋白胨、牛肉膏牛肉膏(2)比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅100 121℃15~30 min 废弃(4)适量水22.(1)氮源(碳源不作要求) 碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多深(5)盐(或NaCl) 选择培养基解析用于培养微生物的培养基中,一般要含有微生物所需要的碳源、氮源、水和无机盐等成分,碳源、氮源一般分别由糖类和蛋白质所提供。