题型一
题型二
对特定微生物的分离纯化
【例题2】 有些细菌可分解原油 ,从而消除由原油泄漏造成的土
壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油
的菌株。请回答下列问题。
(1)在筛选过程中 ,应将土壤样品稀释液接种于以
为
唯一碳源的固体培养基上 ,从功能上讲 ,该培养基属于
培养基。
(2)纯化菌种时 ,为了得到单菌落 ,常采用的接种方法有两种 ,即
和
。
(3)为了筛选出高效菌株 ,可比较单菌落周围分解圈的大小 ,分解
圈大说明该菌株的降解能力
。
题型一
题型二
(4)通常情况下 ,在微生物培养过程中 ,实验室常用的灭菌方法有
火焰灭菌、
和
。无菌
技术要求实验操作应在酒精灯
附近进行 ,以避免周围
环境中微生物的污染。
题型一
题型二
解析:(1)要获得分解原油的细菌 ,应选择以原油为唯一碳源的培 养基,以保证这种细菌可以大量繁殖 ,而其他细菌不能生存。此种 培养基属于选择培养基。 (2)纯化菌种常用平板划线分离法和涂布 分离法。 (3)在以原油为唯一碳源的培养基上 ,菌落周围的原油被分 解而形成分解圈 ,分解圈越大 ,说明该菌株降解能力越强。 (4)实验 室灭菌的方法有火焰灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法 ,实验操作 要在酒精灯火焰附近的无菌区进行。
一二
4.接种方法 划线或涂布过程包括 平板划线分离 法和涂布分离法。常用的划 线方法有 平行划线和连续划线两种。
1.平板划线分离法的操作要点 (1)在操作第一步、每次划线之前及划线操作结束时都要灼烧接 种环。操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的 微生物污染培养物 ;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结 束后接种环上残留的菌种 ,使下一次划线时 ,接种环上的菌种直接 来源于上次划线的末端 ,从而通过划线次数的增加 ,使每次划线时 菌种的数目逐渐减少 ,以便得到单个菌落 ;划线结束后灼烧接种环 能及时杀死接种环上残留的菌种 ,避免细菌污染环境或感染操作者。 (2)在灼烧接种环之后 ,要等其冷却后再进行划线 ,以免接种环温 度太高 ,杀死菌种。 (3)在进行第二次以及其后的划线操作时 ,要从上一次划线的末端 开始划线。划线后 ,线条末端细菌的数目比线条起始处要少 ,每次 从上一次划线的末端开始 ,能使细菌的数目随着划线次数的增加而 逐步减少 ,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
