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实验10 影响酶活力的因素——正交实验法（碘量法测定酶活力）四个班，每班分16组两个同学一组目的要求：初步掌握正交实验设计法（简称正交法）的使用，运用正交法测定底物浓度、温度和pH这三种因素对酶活力的影响。
实验原理：酶反应受到多种因素的影响，如底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂和抑制剂等都能影响酶的反应速度。
这种多因素的实验可通过正交法即用—特制的表格——正交表来安排试验，计算和分析实验结果。
这样就能通过少量实验取得较好的效果。
实践证明正交法是一个多、好、快、省的方法，目前已广泛用于农业生产和科学实验中。
本实验运用正交法测定酶浓度、温度、PH值这三个因素对酶活性的影响，并求得在什么样的底物浓度、温度和pH值时酶的活性最大。
酶活力用硫代硫酸钠滴定法测定。
过氧化氢酶能把过氧化氢分解成水和氧，其活力大小以一定时间内一定量的酶所分解的过氧化氢量来表示。
被分解的过氧化氢量可用碘量法间接测定。
当酶促反应进行一定时间后，终止反应，然后以钼酸铵做催化剂，使未被分解的过氧化氢与碘化钾反应放出游离碘，再用硫代硫酸钠滴定碘。
其反应为：H2O2+2KI+H2SO4→I2+K2SO4+2H2OI2+Na2S2O4→2NaI+Na2S4O6反应完后，以样品溶液和空白溶液的滴定值之差求出被酶分解的过氧化氢量，即可计算出酶的活力。
实验器材：试管15毫升试管9*16=144支吸管1毫升2*16=32支吸管5毫升2*16=32支吸耳球16个漏斗1个研钵（或者搅碎机）1个（1台）恒温水浴锅3台铁架台16个蝴蝶夹16个酸碱两用滴定管16个100毫升的三角烧瓶3*16=48个烧杯500毫升18个（装好水放到恒温水浴锅里）实验所需药品：1. 0.01 mol/L 的过氧化氢溶液每组消耗50毫升，每班需16ⅹ50=800毫升1.1毫升过氧化氢溶液，用蒸馏水定容至1000毫升。
（用带盖白色试剂瓶分装10瓶。
分装1000毫升即可，其余3000用白色大试剂瓶装好备用）2. 1.8 mol/L 的硫酸溶液（每组消耗50毫升，每班需16ⅹ50=800毫升）共配4000毫升95毫升浓硫酸，用蒸馏水定容至1000毫升。
探究酶活性的实验设计酶活性是指酶在一定条件下催化反应的能力，影响酶活性的因素有很多，如温度、pH值、底物浓度等。
本文将探究酶活性的实验设计，通过实验方法和步骤的讲解，展示如何准确、科学地研究酶活性。
一、实验目的探究不同条件下酶活性的变化规律，分析影响酶活性的因素。
二、实验材料和设备1. 反应物料：酶溶液、底物溶液2. 实验器材：试管、移液管、计时器、恒温水浴、pH计、离心机等三、实验步骤1. 准备工作：a. 将酶溶液和底物溶液置于恒温水浴中，使其温度稳定在实验需要的温度（如37°C）。
b. 准备一系列不同pH值的缓冲液，确保在实验中能控制pH值。
c. 测量底物的浓度，并调整为实验所需的浓度。
2. 温度对酶活性的影响实验设计：a. 取若干试管，并标记好温度，如20°C、30°C、40°C等。
b. 向每个试管中加入相等体积的酶溶液和底物溶液。
c. 将试管放入恒温水浴中，分别加热或冷却到所标注的温度并保持一段时间。
d. 在预定时间间隔内，取出试管，通过添加某种试剂停止反应，并用比色法或浊度计等设备测定产物的生成量。
3. pH值对酶活性的影响实验设计：a. 取若干试管，并加入等体积的酶溶液和底物溶液。
b. 分别向每个试管中加入不同pH值的缓冲液，如pH=5、pH=7、pH=9等。
c. 将试管放置于恒温水浴中，保持一定时间。
d. 在适当时间内，用某种试剂停止反应，并通过测定反应产物的生成量来研究酶活性的变化。
4. 底物浓度对酶活性的影响实验设计：a. 在试管中加入等体积的酶溶液，且底物浓度分别设为1mol/L、0.5mol/L、0.2mol/L等。
b. 将试管放于恒温水浴中，反应一定时间。
c. 使用某种试剂停止反应，并测定生成的产物浓度。
d. 通过产物浓度的变化，探究底物浓度对酶活性的影响。
四、数据处理和分析1. 温度对酶活性的影响：a. 绘制反应速率随温度变化的曲线图，分析酶活性与温度的关系。
主题式实验教学设计案例一、题目。
请以“探究影响酶活性的因素”为主题，设计一个高中生物（人教版）的实验教学案例，包括教学目标、实验原理、实验材料、实验步骤、预期结果及结论、教学反思等内容。
二、解析。
1. 教学目标。
知识目标。
学生能够理解酶的活性概念，掌握影响酶活性的因素（如温度、pH等）。
能够阐述不同因素对酶活性影响的原理。
能力目标。
通过设计和进行实验，培养学生的实验设计能力、操作能力和观察分析能力。
学会控制实验变量，设置对照实验，提高科学探究能力。
情感目标。
培养学生严谨的科学态度和团队合作精神。
激发学生对生物学科的兴趣，增强探索生命奥秘的欲望。
2. 实验原理。
酶的活性可以用单位时间内底物的减少量或产物的增加量来表示。
以唾液淀粉酶为例，它可以催化淀粉水解为麦芽糖。
在适宜的温度和pH下，酶的活性最高，反应速度最快；当温度或pH偏离适宜范围时，酶的活性会降低，反应速度减慢。
淀粉遇碘液变蓝，而麦芽糖遇碘液不变蓝。
通过检测反应后溶液是否变蓝以及变蓝的程度，可以判断酶的活性。
3. 实验材料。
新鲜唾液（唾液淀粉酶的来源）。
可溶性淀粉溶液、碘液。
不同pH值的缓冲溶液（如pH = 3、pH = 5、pH = 7、pH = 9、pH = 11等）。
不同温度的水浴装置（如0℃、37℃、100℃等）。
试管、滴管、量筒等实验仪器。
4. 实验步骤。
探究温度对酶活性的影响。
取3支洁净的试管，编号为1、2、3。
在1号试管中加入2 mL可溶性淀粉溶液，然后将试管放入0℃的水浴锅中保温5分钟；在2号试管中加入2 mL可溶性淀粉溶液，放入37℃的水浴锅中保温5分钟；在3号试管中加入2 mL可溶性淀粉溶液，放入100℃的水浴锅中保温5分钟。
另取3支洁净的试管，编号为4、5、6。
向4号试管中加入1 mL新鲜唾液，放入0℃的水浴锅中保温5分钟；向5号试管中加入1 mL新鲜唾液，放入37℃的水浴锅中保温5分钟；向6号试管中加入1 mL新鲜唾液，放入100℃的水浴锅中保温5分钟。
一、实验目的通过本实验，探究影响酶活性的因素，包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度和抑制剂等，了解这些因素如何影响酶的催化效率，并掌握实验设计和数据分析的方法。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一和可调节的特性。
酶的活性受多种因素的影响，包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度和抑制剂等。
本实验主要探究这些因素对酶活性的影响。
三、实验材料与仪器材料：1. 淀粉酶2. 淀粉溶液3. 碘液4. 氢氧化钠溶液5. 硫酸溶液6. 底物缓冲液7. 酶缓冲液8. 抑制剂溶液仪器：1. 试管2. 烧杯3. 温度计4. pH计5. 移液器6. 恒温水浴箱四、实验方法与步骤1. 温度对酶活性的影响- 将淀粉酶溶液分别置于不同温度（0℃、25℃、37℃、50℃、75℃）的水浴中，恒温5分钟。
- 向每个试管中加入等量的淀粉溶液，摇匀。
- 在37℃下放置5分钟，使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液，观察颜色变化。
2. pH值对酶活性的影响- 将淀粉酶溶液分别置于不同pH值（2、4、6、8、10）的底物缓冲液中，恒温5分钟。
- 向每个试管中加入等量的淀粉溶液，摇匀。
- 在37℃下放置5分钟，使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液，观察颜色变化。
3. 底物浓度对酶活性的影响- 向一系列试管中加入不同浓度的淀粉溶液。
- 向每个试管中加入等量的淀粉酶溶液，摇匀。
- 在37℃下放置5分钟，使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液，观察颜色变化。
4. 酶浓度对酶活性的影响- 向一系列试管中加入不同浓度的淀粉酶溶液。
- 向每个试管中加入等量的淀粉溶液，摇匀。
- 在37℃下放置5分钟，使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液，观察颜色变化。
5. 抑制剂对酶活性的影响- 向一系列试管中加入不同浓度的抑制剂溶液。
- 向每个试管中加入等量的淀粉酶溶液和淀粉溶液，摇匀。
- 在37℃下放置5分钟，使酶与底物充分反应。
- 向每个试管中加入碘液，观察颜色变化。
探究影响酶活性的因素一、探究温度对酶活性的影响（一）实验原理（注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C）：1．淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。
2．淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
（二）方法步骤：1、取3支试管，编上号（A、B、C），然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液；2、另取3支试管，编上号（a、b、c），然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液；3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，A和a试管放入热水（约600C）、B和b放入沸水，C和c放入冰块中，维持各自的温度5min；思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液，这是为什么4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min；5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录；思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象思考题3、通过上述实验，你能得出什么结论思考题4、在上述实验中，自变量是什么无关变量是什么思考题5、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果为什么二、探究PH值对酶活性的影响（一）实验原理：思考题6、请依据下面所列实验操作步骤，写出该实验的实验原理。
步骤：用表格显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）思考题7、请在上表中填入你所观察到的实验现象。
思考题8、通过上述实验，你能得出什么结论思考题9、在上述实验中，自变量是什么无关变量是什么思考题10、在设计“影响酶活性的条件”实验中最关键的一步是什么附加实验：思考题11、能否用淀粉酶探究PH对酶活性的影响1.（多选）在证明酶的催化作用受温度影响的实验时，有学生取两支试管分别将淀粉溶液与唾液混合后，分别将试管放在冰水、沸水中5min后，待试管冷却后分别加入3滴碘液，结果两支试管都变蓝，证明酶的催化作用需要适宜的温度。
此实验的不足之处是A．酶与淀粉不能在设置各自温度之前接触B．缺少温度为37℃的对照实验C．这两支试管都不应变蓝D．不能用碘液检验是否存在淀粉2.（多选）下图表示的是在最适温度下，反应物浓度对唾液淀粉酶所催化的化学反应速率的影响。
探究影响酶活性的因素教案一、教学目标1知识目标：概述温度、pH的变化对酶活性的影响。
2能力目标：①通过探究影响酶活性的因素，发展学生的科学探究能力②培养学生观察、分析问题，解决问题的能力③培养学生实验操作能力④提高学生收集资料和语言表达能力。
3情感目标：①通过探究影响酶活性的因素，培养学生的探索精神、创新精神和合作精神②培养学生实事求是和严谨的科学态度③激发学生对生物科学的兴趣和热爱，培养学生理论联系实际。
二、教学重点和难点1.教学重点：设计探究实验方案，实验操作动手能力2．难点：影响酶活性因素的探究。
设计探究实验方案，实验操作动手能力三、课时安排：1课时四、教学过程：一、导入：播放“雕牌加酶洗衣粉”的广告视频，教师总结并导入新课：通过刚才的视频我们知道加酶洗衣粉的蛋白污渍去污能力比国家标准高了2倍，这主要是和什么有关？酶（确切的说是和酶的活性有关）。
细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的，那么环境条件的改变能否影响到酶的活性呢？今天我们就一起来探究影响酶活性的条件。
什么是酶的活性呢？（酶对化学反应的催化效率。
酶活性越高，催化效率越高，化学反应速率越快。
）下面我们来看一个雕牌洗衣粉包装袋背面的洗衣说明，在这个说明中你有什么疑问呢？加酶的洗衣粉的使用说明中为什么强调对温度的要求？二、师生互动探讨新课（1）展示资料：资料一：①洗前浸泡三十分钟，效果更佳②若衣服太脏，可适当增加用量③用温水浸泡效果更好，但水温不要超过60℃,实验证明：用加酶洗衣粉时，温水的洗涤效果要比冷水好资料二：当口腔中的唾液淀粉酶进入胃中以后，不再具有催化淀粉分解的功能。
胃中的蛋白酶随食糜进入小肠后也不再具有催化功能。
资料分析：资料一：洗衣粉的去污效果主要是和酶的活性有关，资料1中提到（不超过60摄氏度）说明酶的活性可能与温度有关。
我们再来看另外一个资料，从资料2中我们可以看出不同的酶需要不同的PH条件，说明酶的活性还可能与PH有关。
竭诚为您提供优质文档/双击可除影响酶活性的因素实验报告篇一：实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称：生物化学实验（甲）指导老师：成绩：实验名称：酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型：分离鉴定实验同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）三、主要仪器设备（必填）五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理（必填）四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析（必填）Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1.了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的反应（酶促反应）要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同，它们的专一性可以分为下列几种：1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用benedict试剂检测反应产物。
benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。
na2co3+2h2o2naoh+h2co3cuso4+2+na2so4还原糖(—choor—c=o)+2cu(oh)2cu2o(砖红色或黄色)+2h2与benedict试剂无呈色反应。
1．探究温度对酶活性的影响(1)实验原理①反应原理：②鉴定原理：温度影响酶的活性，从而影响淀粉水解，滴加碘液，根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。
(2)实验步骤取试管分组编号(1、2、3号)→加入等量可溶性淀粉溶液→分别控制温度(60 ℃、沸水、冰块)5 min →加等量淀粉酶溶液5 min →加等量碘液→观察溶液颜色。
[思考] ①在上述实验操作中先加入等量淀粉酶再分别控制温度可行吗？为什么？提示：不可行。
因为酶具有高效性，先加入酶液后，酶在常温下就可以发挥催化作用，影响实验结果。
②上述实验的实验结果是什么？提示：1号试管溶液(60 ℃)不变蓝色，2号、3号试管溶液变蓝色。
(3)实验结论：温度影响酶的活性。
2．探究pH 对酶活性的影响(1)实验原理 ①反应原理：H 2O 2――→过氧化氢酶2H 2O ＋O 2(反应式)。
影响酶的活性，从而影响氧气的生成量，可用带火星的卫生香燃烧的情况来检验O 2产生量的多少。
(2)实验步骤取试管分组编号(1、2、3)→分别注入等量过氧化氢酶溶液→调节pH(分别加入等量的蒸馏水、5%的盐酸、5%的NaOH 溶液)→分别注入等量的3%的H 2O 2溶液→观察气泡产生→带火星的卫生香检验。
[思考] ①上述实验步骤中，调节pH 和注入等量3%的H 2O 2溶液能否调换？说明理由。
提示：不能调换。
酶与底物一接触，就会发生催化作用，使H 2O 2分解，影响实验结果。
②本实验观察到的实验现象是什么？提示：(3)实验结论：pH 能影响酶的活性。
角度一 以实验分析的形式，考查影响酶活性的因素1．(2013·江苏高考稍改动)为了探究温度、pH 对酶活性的影响，下列实验设计合理的是解析：选B过氧化氢受热易分解，不宜用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响，实验①不合理；蔗糖酶不能催化淀粉水解，实验③不合理；斐林试剂呈碱性，能与酸性物质发生反应，不适合用于探究pH对酶活性的影响，实验④不合理。
