【渔业资源与渔场学】第六课题鱼卵的形态学,卵膜扫描电镜观察及遗传学鉴定的研究

香鱼成熟卵母细胞过熟进程中卵膜超微结构变化徐玉敏;苗亮;李明云;安钦;李笑萌;穆方申;侯红红;陈炯【摘要】香鱼成熟卵母细胞能较长时间维持受精能力,但随时间延迟受精能力逐渐降低直至消失。

为探索其机制,采用透射电镜技术观察了香鱼卵母细胞过熟进程中卵膜超微结构的变化。

结果显示：处于滤泡内时,成熟卵母细胞表面的放射膜(Zona radiate, ZR)分为3层,从外到内依次是放射外膜1(ZR1)、放射膜2(ZR2)、放射膜3(ZR3),其中ZR1最厚；放射膜外有一层胶膜( Jelly coat, JC)。

排出后的成熟卵母细胞放射膜ZR1消失,仅ZR2和ZR3两层,但放射膜外面的胶膜层依然存在,此时ZR2很薄,ZR3层次明暗分明,包含明暗相间的各5条带并且完全不透明,在与卵膜垂直的方向上形成亮区(Light region, LR)和暗区(Dark region, DR)。

随着排卵后的时限延长,至48 h后,卵的胶膜层消失,放射膜压缩,内部出现孔道(Pore canals, PC)；60 h后胶膜层孔道数量增多,孔径变大；至96 h时孔道变长,贯穿ZR3的1/2；至104 h时ZR2基本解体,孔道继续伸长并贯穿ZR3,至此成熟卵母细胞彻底凋亡。

%Abstrat The mature oocytes of sweet fish Plecoglossus altivelis can maintain fertilization ability for a long time. In this study, we ob-served the ultrastructure′changes of P. altivelis oocytes during post-ovulatory process using transmission electron microscope( TEM) . In follicular phase, the outer layer of oocyte memebrane is zona radiate(ZR), which includes three-layers(ZR1, ZR2 and ZR3 from outside to inside, and the thickest layer is ZR1). Outside of ZR is jelly coat(JC). After ovulation, ZR1 disappears and ZR remains two layers (ZR2 and ZR3), and JC still exisst. In this stage, ZR2 is very thin, and ZR3 includes 5 light-bands alternate with 5 dark-bands. ZR3 is completely opaque, and in the vertical of oolemma showedalternating"light region" and"dark region". At 48 h after ovulation, JC disappears, ZR is thinner and pore canals(PC) appears in ZR3. At 60 h, the number of PC increases and diameter en-larges. To 96 h, the length of PC increases to 1/2 of the ZR3. 104 h later, with the disintegration of ZR2, PC continues to elongate and pass through ZR3, and then the mature oocyte completely apoptosis.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2016(033)005【总页数】3页(P5-7)【关键词】香鱼;卵母细胞;过熟;卵膜;透射电镜【作者】徐玉敏;苗亮;李明云;安钦;李笑萌;穆方申;侯红红;陈炯【作者单位】宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211;宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211;宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211;宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211;宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211;宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211;宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211;宁波大学教育部应用海洋生物重点实验室，宁波315211【正文语种】中文【中图分类】Q954;S917.4Abstrat The mature oocytes of sweet fish Plecoglossus altivelis can maintain fertilization ability for a long time. In this study, we observed theultrastructure′ changes of P. altivelis oocytes during post-ovulatory process using transmission electron microscope(TEM). In follicular phase, the outer layer of oocyte memebrane is zona radiate(ZR), which includes three-layers(ZR1, ZR2 and ZR3 from outside to inside, and the thickest layer is ZR1). Outside of ZR is jelly coat(JC). After ovulation, ZR1 disappears and ZR remains two layers (ZR2 and ZR3), and JC still exisst. In this stage, ZR2 is very thin, and ZR3 includes 5 light-bands alternate with 5 dark-bands. ZR3 is completely opaque, and in the vertical of oolemma showed alternating "light region" and "dark region". At 48 h after ovulation, JC disappears, ZR is thinner and pore canals(PC) appears in ZR3. At 60 h, the number of PC increases and diameter enlarges. To 96 h, the length of PC increases to 1/2 of the ZR3. 104 h later, with the disintegration of ZR2, PC continues to elongate and pass through ZR3, and then the mature oocyte completely apoptosis.香鱼(Plecoglossus altivelis)是原产于东亚地区(中国、朝鲜半岛、日本)沿海通海江溪中的一种名贵一年生经济鱼类，俗名仙胎鱼、八月香、油香鱼、留香鱼等。

尼罗罗非鱼[Tilapia nilotica （L）]卵子结构扫描电镜观察蓝厚珍;勇济本【期刊名称】《动物学报》【年(卷),期】1989(035)001【摘要】本文对尼罗罗非鱼(亦称尼罗丽鲷)Ⅳ期末至Ⅴ期初的成熟卵子进行光镜与扫描电镜观察,发现其卵子的细胞核相,正处于第二次成熟裂中期。

卵子皮质部的皮层颗粒小,排列不规则。

卵子质膜外有厚薄不同的两层膜,合为壳膜(chorion)。

在卵子动物极的壳膜中央有一个卵膜孔(Micropyle)。

受精后,可见精子从此孔迸入。

这是精子入卵的唯一通道。

受精时,壳膜上附有许多精子,但是由于精孔管径与精子头部横径大小相近,首先进入卵子的仅有一个精子。

【总页数】2页(P107-108)【作者】蓝厚珍;勇济本【作者单位】不详;不详【正文语种】中文【中图分类】Q595.483【相关文献】1.尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂人工杂交卵子、精子形态观察 [J], 罗明坤;赵金良;赵岩;魏继海;叶卫;符云;陈辉崇2.尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)不同月龄数量性状遗传力估计 [J], 唐瞻杨;陈文治;罗永巨;梁军能;郭忠宝;钟欢;谭芸;甘西;贺融兴3.罗非鱼（Tilapia nilotica）简达气单胞菌病的病原分离鉴定及药敏试验 [J], 杨宁;姜芳燕;黄海;焦健4.用激素处理尼罗罗非鱼（Tilapia nilotica）的雄性化诱导试验 [J], 梁广耀;黄海东5.伽利略罗非鱼（Tilapia galilaea）和尼罗罗非鱼（Tilapia nilotica）在养鱼池的生态特性[J], A·YASHOUV;卢兆发;陈震宇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

鱼卵和仔稚鱼鉴定技术研究进展作者：金雨婷蒋日进赵进刘志坚管峰来源：《安徽农业科学》2019年第15期摘要鱼卵和仔稚鱼是鱼类繁殖的早期幼体形态，其分布、数量和种类对于渔业资源的可持续发展和生物学研究具有重要意义，鱼卵和仔稚鱼鉴定是这一研究的重要环节。

鱼卵和仔稚鱼的鉴定先后历经了形态学鉴定和分子鉴定两个技术发展阶段。

简述鱼卵和仔稚鱼鉴定在渔业资源普查和科学研究中的重要意义以及2种主要鉴定技术的研究进展，为鱼卵和仔稚鱼鉴定研究提供基础知识。

关键词鱼卵和仔稚鱼;物种鉴定;形态学;分子鉴定;DNA条形码中图分类号 S917文献标识码 A文章编号 0517-6611（2019）15-0018-03doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.15.005开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Abstract Fish eggs and larvae are early juvenile forms of fish reproduction， and their distribution， quantity and species are of great significance for the sustainable development of fishery resources and biological research. And the key part of this study field is species identification of fish eggs and larvae. There had two stages of technological development had been gone in the species identification of fish eggs and larvae， i e morphological identification and molecular identification. In this review， the importance， significance， utilization and progress of fish eggs and larvae species identification in the fishery census and scientific research were focused， the aim is to provide some guidance for fish eggs and larvae study.Key words Fish eggs and larvae;Species identification;Morphology;Molecular identification;DNA barcoding基金项目浙江省科技计划项目（2017C32081，2017F50015）。

尼罗罗非鱼成熟卵结构及精子入卵早期的电镜观察
黄永松
【期刊名称】《动物学报》
【年(卷),期】1990(036)003
【摘要】用扫描电镜观察尼罗罗非鱼(Tilopia nilotica)成熟卵卵膜孔结构和精子入卵的早期情况,用透射电镜观察成熟卵皮质,可见卵膜孔包括前庭和精孔管两部分,前庭壁及壳膜外表面上有许多小孔洞,精孔管壁呈阶梯状。

卵膜孔下的卵皮质是一凹陷区,这一区域存在着皮质小泡。

本实验见到5种形态的皮质小泡,其中大的皮质小泡靠近质膜。

【总页数】4页(P227-230)
【作者】黄永松
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】Q959.405
【相关文献】
1.文蛤(Meretrix meretrix)精子的超微结构及精子入卵过程的电镜观察 [J], 董迎辉;林志华;柴雪良;吴松燕
2.大菱鲆成熟精子、卵子及精子入卵早期过程的电镜观察 [J], 吴莹莹;柳学周;王清印;邱兆星
3.家养鱼类受精生物学的研究——Ⅱ．几种淡水鱼类成熟卵球的精孔器与精子入卵通路的光镜与扫描电镜观察 [J], 王瑞霞;张毓人;傅仓生;李振兰;吴宜章;张福顺;郝宏
京
4.黑鲷(Sparus macrocephalus)成熟精、卵和精子入卵早期过程的初步观察 [J], 张筱兰;丛娇日;姚斐;范瑞青;高澜;郭恩棉;姚善成
5.暗纹东方鲀精、卵超微结构及精子入卵早期电镜观察 [J], 卢敏德;葛志亮;倪建国;高伟建;诸葛兰剑;叶金明
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黄、渤海区不同生态类型鱼卵卵膜和受精孔区亚显微形态卞晓东;万瑞景;金显仕;张秀梅;马骞【期刊名称】《水产学报》【年(卷),期】2016(040)005【摘要】Marine teleosts eggs distributed in the Yellow Sea and the Bohai Sea cover almost all the egg ecological types.Scanning electron microscope (SEM) observation was conducted to examine the ultrastructure of external egg membrane and micropyle of the 15 species with different egg ecological types which have been collected during the fisheries resource surveys in recent years.Taxonomic diagnostic ultrastructures have been accumulated,also habitat suitability of some related ultrastructures have been discussed.Current SEM studies have demonstrated that ultrastructure of the external egg membrane varies among egg ecological types or even among species.The external egg membrane of the floating eggs and mouth-breeding eggs was thin,but was thick in the demersal eggs and the eggs with adhesive egg filaments.The pores distribution density,sculptured patterns and peculiar elaborations of the external egg membrane and type of the micropyle in the floating eggs;fine structure of the external egg membrane and type of the micropyle in the demersal eggs;number and location of membrane thread or filament of the external egg membrane and type of the micropyle in the adhensive eggs;number and arrangement of the filamentsand surface ridges in the micropyle region in the mouth-breeding eggs could be used as the diagnostic characters in taxonomy of fisheggs.Untrastructural differences in envelope surface and micropyle between species were associated with its systematic groups,spawning environment and geographic differences.Envelope surface ultrastructures were considered to be taxonomically useful features for identifying fish eggs to the family or genus level,with the pores distributiondensity,sculptured patterns and peculiar elaborations of the external egg membrane may be possible to assign the eggs to a species.While morphology of the micropyle was usually species-specific.Egg envelope structure and thickness of various teleosts often reflect the ecological challenges a species is faced with during its embryonic life stages.The sculptured patterns and peculiar elaborations on the outer egg membrane were considered as biological response to different habitat environments.The present study would accumulate basic data on ontogeny and morphological classification features during its embryonic life stages of the teleost fishes distributed in the Yellow Sea and the Bohai Sea.%黄、渤海区分布的硬骨鱼类鱼卵几乎涵盖了所有鱼卵生态类型.本研究借助扫描电镜观察技术对近年来黄、渤海渔业资源监测调查期间采集的15种不同生态类型鱼卵卵膜和受精孔区亚显微形态特征进行观察,以阐明其亚显微结构并总结提炼可用于鱼卵形态分类的特征,同时将相应鱼种产卵场环境因子引入到卵膜形态特征的认识中,以揭示其生境适应性.结果显示不同生态类型或不同鱼种卵膜形态不尽相同,浮性鱼卵和口含鱼卵卵膜较薄,沉性鱼卵和具卵膜丝鱼卵卵膜较厚;浮性鱼卵卵膜表面壁孔密度、卵膜外表面呈现的蚀刻或特殊结构以及受精孔形状类型,沉性鱼卵卵膜黏膜层表面结构、受精孔形状类型,具卵膜丝鱼卵卵膜丝数量、着生位置及受精孔形状类型,口含鱼卵受精孔区形状及周边附着丝数量等均可用于鱼卵形态分类.鱼卵卵膜和受精孔区亚显微结构差异与鱼种系统分类地位、产卵场环境和地理分布区相关联.鱼卵卵膜表面结构可以作为区分鱼类科或属的性状,卵膜壁孔密度、表面呈现的蚀刻或奇异结构是鱼卵形态分类的重要依据;受精孔结构则一般具有物种特异性.卵膜结构与厚度可反映鱼卵对不同生境的适应性,而卵膜表面的许多特殊结构和装饰被认为是鱼卵应对产卵场环境的保护和适应性策略.本研究将为黄、渤海区硬骨鱼类早期生活史阶段个体发生和鱼卵形态分类研究积累基础资料.【总页数】14页(P689-702)【作者】卞晓东;万瑞景;金显仕;张秀梅;马骞【作者单位】中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东省渔业资源与生态环境重点实验室,山东青岛266071;青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东青岛266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东省渔业资源与生态环境重点实验室,山东青岛266071;青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东青岛266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东省渔业资源与生态环境重点实验室,山东青岛266071;青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东青岛266071;中国海洋大学水产学院,山东青岛266003;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东省渔业资源与生态环境重点实验室,山东青岛266071;青岛海洋科学与技术国家实验室,海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东青岛266071【正文语种】中文【中图分类】Q132.1;S917.4【相关文献】1.向家坝工程扰动区不同类型边坡土壤不同形态磷的分布 [J], 吴彬;夏振尧;杨悦舒;张琳琳;夏栋;许文年2.我国四海区不同群体文蛤形态差异与判别分析 [J], 冯建彬;李家乐;王美珍;陈汉春3.不同品种梨花粉亚显微形态观察及比较 [J], 胡德昌;蒋小满;解卫海;王方;张序4.不同生长条件下复叶槭生态型叶片显微形态特征的变化 [J], 沈应柏;平立岩;骆有庆;陈华君;郝建华5.昆明市域不同生态功能类型区景观格局与生态服务价值分析 [J], 范学忠;李玉辉;角媛梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

!月"研究简讯"人工四倍体鲤鲫成熟卵受精过程的扫描电子显微镜观察"叶玉珍!王忠卫!吴清江!袁秀萍!周建峰中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术重点实验室!武汉&*%%O "!"%%()%!)"&收稿!"%%()%$)%’收修改稿!"国家自然科学基金$批准号#*%&O !*&"%和国家+十五,攻关$"%%!G ;(%(G %(%’%资助项目!+),-./#^^a 6!.6H #-8#82摘要!!以人工四倍体鲤鲫卵子和普通红鲤精子为材料进行人工受精#在受精后的不同时间以扫描电子显微镜观察卵子对精子的应答反应%受精孔形态%数量与大小以及受精过程等超微结构特征#结果表明#四倍体卵子动物极的卵壳上仅有一个受精孔#但受精孔区域有($$个似小山丘状的嵴状结构#而鲤却完全没有这种结构#研究证实(四倍体鲤鲫成熟卵属单受精孔%单精受精类型#其特异的嵴状形态结构可作为区分普通鲤的标记表型#关键词!!人工四倍体鲤鲫!受精过程!单精受精!电子显微镜观察!!硬骨鱼类的受精过程主要依靠于成熟卵子动物极的卵壳上敞开的特殊结构***受精孔来完成!但不同的鱼类其受精孔和受精孔区域的结构却不同#关于这方面的研究!国内外学者已在多种鱼类中对鱼卵受精过程和受精后卵壳结构变化进行了观察!并有详细的报道#日本学者[7<5&!’曾以鲤$!I /.,’@(*&./,+%为材料就受精孔的形态(精子入卵及其引起卵子表面的变化等作了研究!发现其卵壳漏斗状的前庭较光滑并有一个受精孔#N -?@等&"’发现斑马鱼$?.&*0I 9&’,+.#.,+%卵的前庭有突褶并呈螺线排列#张天荫等&*’发现金鱼$!&.&((,@(&@.&:@(%的前庭呈明显的沟嵴#吴坤明等&&’对泥鳅$5,(%@.’@(&’%@,$$,*&@9&:@(%成熟卵受精孔进行了观察并确认其为涡旋状结构#姚纪花&(’等对大鳞副泥鳅$2&.&H ,(%@.’@(9&=.I&’@(%"G ?7,),>@@&$’等对底!$E @’9@$@(0#:#.+*$,:@(%正常受精后早期过程进行了观察#迄今为止!在人工诱导多倍体方面虽有一些学者进行了大量探索&O *!"’!但在受精生物学方面尚未见到研究报道#人工四倍体鲤鲫是本实验室采用人工染色体基因组操作技术构建的一种以雌核发育为特殊生殖模式的多倍体鲫克隆鱼&’’!它具有两套鲤和两套鲫的染色体组!生长快(体形好(抗病力强(易捕捞!比普通二倍体鲫和三倍体鲫经济性状更优良!因此将具有广阔的生产应用前景#像这种具有两套鲤染色体和两套鲫染色体的多倍体卵子的受精孔到底属于何种类型/是多受精孔还是单受精孔/是多精受精还是单精受精/以及在精子入卵过程中其各个时期的形态特征有何变化等都是值得研究的问题#本文针对以上问题进行了详细观察并取得重要研究结果!现报道如下#$!材料与方法四倍体鲤鲫和红鲤$!I /.,’@(*&./,+%均取自中国科学院水生生物研究所关桥实验基地#在生殖季节取四倍体鲤鲫成熟卵子和红鲤精子进行人工受精!然后迅速将卵均匀洒在浸在水里的%**!尼龙筛绢上并取经人工受精后(!!%!"%!*%!$%! A%和!"%4的受精卵和未受精卵进行双固定!同时取红鲤的正常受精卵子作为对照#将样品置于"#(B戊二醛中在&n条件下固定"&6!后用!B锇酸固定!再用梯度酒精脱水!最后以乙酸异戊醇置换!F]"临界点干燥!真空喷镀!用美国;,?-^公司生产的扫描电子显微镜$P+R%观察!加速电压为"%M X!摄影成像#(!结果(&$!卵子与精子的形态四倍体鲤鲫产出的成熟卵一般为圆形或椭圆形!半透明#在P+R下观察!卵壳呈致密状!并具有大量致密球形蜂窝状结构!排列较为整齐!直径在%#**%#&*,!卵内充满细胞质#通过P+R观察可以发现红鲤的精子的结构十分简单!主要由头部和尾部构成!头部呈椭圆形!尾部细长#实验表明!精子进入四倍体卵子的过程非常迅速!而且受精后的卵子表面结构也随之发生变化!最明显的特征是卵壳电子密度变低!呈疏松状态!球形蜂窝状结构排列不够整齐!直径在%#$*%#’*,#(&(!受精孔结构在受精前观察受精孔区域构型发现!四倍体卵子外壳有一定的严密结构!并处于封闭状态!只留有一个非常小的受精孔$图!$-%%#受精孔主要是由前庭区域和精孔管两部分组成#与红鲤比较发现!它们虽然在靠动物极卵壳上都有一个环状(敞开的受精孔!但两者在形态结构上有却有着很显著的差别#四倍体鲤鲫受精孔区的前庭是由(*$个形状相同和大小基本相似的小山丘状突起嵴状物组成!显得十分特别$图!$H%%#但与大多数硬骨鱼类一样!卵壳中央也只有一凹陷(呈圆形环状结构!精孔管外开口就位于嵴状结构凹陷底部中央!这就是受精孔#受精孔的直径为*#(*&#%*,!口部具有一个明显的环状结构!在环状结构周围还可以观察到一些微绒毛!它可能含有精子入卵的识别位点!以至于每次受精时也就只容许有一个精子入卵受精#从图!$8%可以很清楚地看出红鲤卵子动物极的受精孔前庭区域呈漏斗形!且四周边缘区域非常平坦而光滑!口部只有一个清晰的环状结构!而没有发现像人工四倍体鲤鲫那样的嵴状结构或其他形状的结构!底部就是精孔管的外开口!直径为*#’* &#**,#图$!扫描电子显微观察图像$-%四倍体鲤鲫卵子的受精孔"$H%四倍体鲤鲫受精孔区域的脊状结构"$8%红鲤的受精孔#,>!受精孔"?!脊状物"8!环状物(&)!单精入卵与受精过程在观察的所有成熟卵子中!没有发现一个有多受精孔!也没有观察到多精受精的现象!据结果推测!精子入卵的必经之路只能是从那一个受精孔道穿入!因此受精时通常也只能允许一个精子受精#一般情况下受精(*!%4后!在P+R下就能看到在卵子朝向动物极方向有大量的精子聚集于受精孔前庭区域附近$图"$-%%#受精后"%**%4!尽管有大量的精子聚集于此!但每个卵子的靠动物极方向的卵壳上的受精孔中也只有!个精子进入受精孔受精!而其余的精子都被挡在受精孔外边!未发现有多精入卵的情况#图"$H%是!个精子正进入受精孔!**!!第受精的情况#图"$8%是精卵结合!%4后!个精子拖着一条长长的尾巴进入受精孔管道!而另外一些精子被阻挡在外面的典型受精情景#一般情况下!受精&%4后!仍然可以观察到在受精孔区域附近还有许多精子"而受精(%4后!受精孔口开始出现一些降解精子和絮状物质将受精孔紧紧堵住$图"$<%%#与此同时!我们还观察到当四倍体鲤鲫成熟卵受精(%4时!许多精子虽已死亡!但有些精子的形态仍然较正常!有些精子则开始发生变化!一般受精$%4后!精子绝大部分解体!受精区大面积被白色的解体精子絮状物覆盖$图"$>%%"也可见到少量未解体的死亡精子在受精孔区的嵴状结构之间$图"$1%%!此时成熟卵的嵴状物也开始慢慢合拢!并形成受精孔关闭状态!受精A%4后!嵴状结构明显融合并呈模糊的一条细缝$图"$3%%!至受精!"%4后!前庭的特异嵴状结构完全把受精孔关闭!从受精卵卵表面观察已完全没有受精孔和嵴状物的任何痕迹$图"$6%%!至此卵子完成整个受精过程!随后受精卵开始早期的胚胎发育#图(!四倍体鲤鲫受精过程!详见正文"4I!精子"4@!精尾"<>4!降解精子"<4!死亡精子)!讨论关于一般硬骨鱼类的受精生物学机制许多学者已研究得相当深入!并提出鱼类本身具有阻止多个精子入卵的能力!因此受精方式都是单精入卵!单精受精!从而维系胚胎基因组的正常大小和一系列胚胎发育#[7<5等&!’曾经观察了鲤鱼等多种硬骨鱼类的受精过程!他认为大多数鱼类属单精受精#防止多精入卵的机制有*种类型#$!%精孔管狭窄!其孔径只允许单个精子通过"$"%精子进入精孔管后即产生受精锥!它能阻止其他精子再进入精孔管"$*%由于精子进入精孔管后!卵子即产生皮质反应!释放出的皮质激素能把受精孔周围的多余精子胶联成团#我们也曾对人工复合三倍体鲤卵子的受精生物学做过较详细的观察&!!’!虽发现部分卵子有多精进入!但雄核与雌核不融合!胚胎发育完全由雌核单独调控#\-2-3.,-86&!*’曾在鲱鱼$!$@/#&/&$$&(,%的受精孔发现一种特殊的蛋白质!它们能激活并促使精子进入卵内受精#本研究观察的结果揭示!人工四倍体鲤鲫卵子的受精生物学特点仍然与大多数鱼类相同!控制精子入卵的部位很可能就位于卵壳上的受精孔区域#很明显!未受精卵因为卵外壳具有一定的严密结构!处于封闭状态#卵子受精过程主要是受机械(物理或化学反应等多种机制调控!如本实验中在每一个卵表面都只观察到有一个受精孔!而且受精孔孔径大小和精子头部大小相似#从实验中我们还观察到在受精后的精孔管由于皮质反应而凝集成团的未进入卵子的大量多余精子!从而防止了多精入卵的现象发生!同时卵子可能在受精的瞬间就能产生某种物质以凝集其他精子"**!!第于卵的表面!而不允许任何精子进入受精孔发生受精#据此结果推测!当第一个精子进入受精孔后!其他的超数精子很可能就停止运动!进而退化(解体或被吸收#此外!从人工四倍体成熟卵与红鲤精子受精激活后的发育情况看!胚胎和幼苗的成活率都极高!与正常的两性生殖的鲤(鲫无差别!同时在发育过程中也没有发现由于多精受精引起的多精综合症症状#综合这些事实说明人工四倍体鲤鲫虽属天然雌核发育类型!但仍属于单受精孔(单精入卵!单精受精类型的鱼类#研究表明!四倍体鲤鲫的成熟卵对红鲤精子受精后的应答是在受精后瞬间发生的一系列受精生理变化过程!当卵子排出体外而未+受精,时!位于动物极的受精孔是完全敞开并且是静止的!未受精前!一切都是稳定平静的!一旦精子入卵受精!卵子对精子迅速发生应答并发生急剧的生理变化!卵子间隙周围的囊胞大量向外排除!动物极和植物极明显分出!随后开始进行一系列胚胎发育过程#在以前报道的鱼类受精生物学研究资料中!没有见到如此明显而详细的卵壳上的受精孔由开放直到慢慢封闭的全过程!本研究观察到的这一详细的过程对于受精生物学的研究将具有十分重要的意义#依据人工四倍体鲤鲫受精时间来看!受精后&%4!受精卵表面就有絮状物分泌!那么其受精过程在*%4之内就完成了!与鲤&!’(金鱼&*’等受精时间很相似!但远远短于大鳞副泥鳅&(’#因此当四倍体鲤鲫在进行体外人工受精时必须严格控制时间!以保证获得较高的雌核发育激活率#参!考!文!献!![7<5P#P I>?,I>2>@?-@.52-2<@6>15?,-@.5251-1>?@./.a-@.52852>.2@6>85,,528-?I>33#=>Z>/5I E?5J@6-2<=.11>?!!A’%!""$*%#&%**&!&"!N-?@:N!=525Z-2R#P@?78@7?>51@6>865?.52-2<4.@>51 4I>?,>2@?^.2@6>>3351G?-86.<-2.5#‘+K I V55/!!A’*!""O $"%#"O O*"A$*!张天荫!封树芒!潘忠宗#金鱼精子入卵过程的扫描电镜观察#动物学研究!!A A*!!&$"%#!$$*!O%&!吴坤明!沈其璋!刘根洪#泥鳅成熟卵受精孔涡旋状结构的研究#科学通报!!A A!!*$$!(%#!!O(*!!O’(!姚纪花!周平凡#大鳞副泥鳅卵子壳膜结构与受精过程的扫描电镜观察#上海水产大学学报!!A A’!O$!%#$(*$’$!G?7,,>@@;9!=7,52@‘:#L2.@.-/4@-3>514I>?,I>2>@?-@.52 .2@5@6>>3351E@’9@$@(0#:#.+*$,:@(#‘57?2-/51+K I>?.,>2@-/ V55/53^!!A O A!"!%#&!O*&**O!=523Y N!\>\V!S7b‘#F5,I-?-@.Z>4@7<.>452@6>,.8?5) I^/-?-I I-?-@74.2157?1?>46J-@>?1.46>4J.@648-22.23>/>8@?52 ,.8?5485I>#;227-/9>I5?@51P@-@>[>^T-H5?-@5?^15?W?>46) J-@>?+85/53^-2<G.5@>8625/53^51F6.2-!!A A&!!%**!%O’!S7b‘!\>\V!=523Y N#U J572.4>K7-/-?@.1.8.-/I5/^I/5.< 8/52>48524@?78@><H^3>25,>-<<.@.525185,,528-?I$!I/.,<’@(*&./!%%-2<8?78.-28-?I$!&.&((,@(&@.&:@(%#P8.>28>.2F6.) 2-!F!"%%*!&$$$%#!*’A!=523Y N!\>\V!S7b‘#F^@5/53.8-/H-4.451I5/^4I>?,.81>?@./.a-@.52.2-2-?@.1.8.-/,7/@.I/>@?.I/5.<#F6.2=>Z>/5I9>I?5<G.5/!!A A’!!O$!%#&!c&O!%!\>\V!S7b‘#Q5/^4I>?,^J.@6,-@7?>>33451-?@.1.8.-/,7/) @.I/>@?.I/5.<8-?I#;_7-87/@7?>!!A A*!!!!#*!A!!!叶玉珍!吴清江#人工复合三倍体鲤卵的受精生物学研究#水生生物学报!!A A&!!’$!%#!O*"!!"!\>\V!V657‘W!S-23Y N!>@-/#9>I?5<78@.52,5<>51-2 -?@.1.8.-/-//5@>@?-I/5.<8-?I$Q.48>4"F^I?.2.<->%#N>?><.@-4!"%%"!!*O#!&%*!&&!*!\-2-3.,-86.9#P@7<.>4511>?@./.a-@.52.2!$@/#&/&$$&(,#X L# W>?@./.a-@.5251>33<>I?.Z><51@6>,>,H?-2>#‘I2‘L86@65/!!A(O!$#&!*&O***!!第。