红细胞血型血清学技术

血型鉴定标准操作规程1.目的为规范各血型系统血型鉴定的技术操作，保证鉴定结果准确及临床输血安全有效，特制定本规程。

2.适用范围适用于输血科（血库）进行各血型系统血型鉴定。

3.职责输血科（血库）技术人员负责各血型系统血型鉴定。

4.所需设备和试剂设备普通离心机，血型血清学专用离心机，普通显微镜。

试剂各血型系统单克隆血型试剂，3%-5%的A、B、O型试剂红细胞。

5.检测环境条件室温应控制在18-27℃，湿度应保持30%-70%。

6.项目及方法ABO血型鉴定ABO血型鉴定原理红细胞上具有A抗原，而血清中含有抗B抗体者为A型；红细胞上有B抗原，而血清中含有抗A抗体者为B型；红细胞上没有A和B抗原，而血清中含有抗A、B抗体者为O 型；红细胞上有A和B抗原，而血清中没有相应抗体者为AB型，见表1。

表1.试剂血清、红细胞鉴定血型（一）玻板法实验操作（1）洁静的玻板，用记号笔在正定型一侧注明抗A、抗B、抗A（B）,反定型一侧孔中注明A细胞、B细胞、O细胞。

（2）在正定型一侧孔中先加入相应试剂血清1滴,再加入待检者20%红细胞悬液1滴；在反定型一侧先加入待检者血清2滴,再加入相应20%试剂红细胞(为3-5人份的混合红细胞)1滴。

（3）摇动玻板数次,5min后观察凝集现象，判断并报告检测结果。

如有怀疑者,须做试管法对照。

（4）报告方式:通过计算机信息系统发布正式血型结果。

注意事项（1）操作者必须认真细致,严格查对,准确报告血型结果。

（2）鉴定血型时,室内温度宜在18-27℃,以免产生假阳性。

遇有可疑冷凝集时 (1)先将玻板放在日光灯处加热3-5分钟后观察 (2)将待检者红细胞用37℃生理盐水洗涤2-3次后，再做血型鉴定。

（3）抗A、抗B、抗A(B)试剂血清，效价不低于256，亲和力在15s以内出现凝集，3min 时凝块不小于1mm2，冷凝集等效价在1:4以下。

（4）应另备有一套合格的试剂的血清作对照。

（5）所有待检者的血型均应做正、反定型，防止误定血型。

红细胞血型抗体效价测定标准操作规程本文介绍了红细胞血型抗体效价测定标准操作规程，以规范输血科医务科护理部的技术操作，并适用于评估母婴血型不合的新生儿溶血病的风险程度及产前检查等其他临床需要。

在材料和设备方面，需要3%～5%的A、B型反定型试剂红细胞、0.2 mol/L二巯基乙醇(2-Me)应用液、抗球蛋白试剂、待检者血标本、微柱凝胶抗球蛋白卡等。

在检测环境方面，室温应控制在18-27℃，湿度应控制在30%-70%。

在检测原理方面，对于IgM类红细胞血型抗体，将受检血清经连续倍比稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应，以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价，并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分，完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。

对于IgG类红细胞血型抗体，则先用巯基试剂2-Me裂解其中的IgM型抗体，经巯基试剂2-Me处理后再测定IgG类红细胞血型抗体。

在操作步骤方面，盐水介质法测定IgM类红细胞血型抗体效价。

具体操作为将受检血清加入一系列稀释盐水中，分别加入A、B型反定型试剂红细胞，静置30分钟后观察凝集情况，以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价，并根据“红细胞凝集强度与评分标准”评分，完成对IgM类红细胞抗体效价的测定。

7.1.1.对12支试管进行排列编号，第2至第12管每管加入0.1ml生理盐水，第1管及第2管分别加入受检者血清0.1ml，混匀后吸出0.1ml移至第3管内，以此类推，连续倍比稀释至第12管（2048倍）。

7.1.2.在12支试管中，分别加入3%检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞50μl，轻摇试管架。

7.1.3.使用血型血清学专用离心机进行离心，离心速度为120g，离心时间为1min，观察并记录有无溶血及凝集情况。

7.1.4.结果判读：镜检呈“1+”凝集的最高稀释倍数的倒数即为检查目标抗体的效价，根据“红细胞凝集强度与评分标准”进行评分。

鉴定血型的实验报告一、实验目的本实验旨在通过血清学方法鉴定一个人的血型，以便了解其红细胞的抗原和抗体特性，以及输血或接受器官移植时的兼容性。

二、实验原理血型鉴定是基于抗原和抗体的特异性反应。

红细胞表面所携带的抗原与血清中的抗体相互作用，通过观察是否发生凝集反应来判断血型。

本实验将采用经典的ABO血型系统进行鉴定。

三、实验步骤1、准备试剂和器材：抗A抗体、抗B抗体、抗D抗体、生理盐水、微量移液器、离心机、试管、滴管等。

2、采集样本：使用微量移液器从受试者静脉中抽取50微升血液。

3、实验操作：a.将50微升血液分别加入抗A抗体和抗B抗体试管中；b.用生理盐水将试管中的血液稀释至100微升；c.用滴管缓慢加入5滴抗D抗体；d.摇匀后，观察凝集反应；e.用离心机分离血清和红细胞，观察结果。

4、结果记录：记录每个试管中的凝集反应情况，包括凝集颗粒的数量、颜色变化等。

5、结果分析：根据记录的凝集反应情况，判断受试者的血型。

四、实验结果与分析1、实验结果：在加入抗A抗体的试管中，受试者血液呈现凝集反应，形成明显的凝集颗粒；而在加入抗B抗体的试管中，血液未发生凝集反应。

2、结果分析：根据ABO血型系统的特点，受试者的红细胞表面可能携带A抗原，而未携带B抗原。

因此，可以初步判断受试者为A型血。

为了进一步确认血型，可以继续进行Rh血型等其他血型系统的鉴定。

五、结论本实验通过血清学方法成功鉴定了受试者的ABO血型为A型。

这一结果对于了解受试者的红细胞抗原和抗体特性，以及输血或接受器官移植时的兼容性具有重要意义。

在实际应用中，鉴定血型是确保医疗安全和有效治疗的关键环节之一。

红细胞血型系统课件一、引言红细胞血型系统是生物学和医学领域中的一个重要概念。

红细胞血型是指红细胞表面抗原的特异性，这些抗原在个体之间存在差异。

了解红细胞血型系统对于临床输血、器官移植、新生儿溶血病等疾病的诊断和治疗具有重要意义。

本课件将介绍红细胞血型系统的基本概念、分类和应用。

血型血清学部分名词解释红细胞抗原抗体反应主要类型1．凝集反应2．沉淀反应3．溶血反应抗人球蛋白试验--IgG不完全抗体的Coombs试验人红细胞表面抗原与不完全抗体结合（常是IgG类抗体），即不完全抗体致敏红细胞由于该不完全抗体分子量小或和其两个Fab段扩张角度小，不能使相邻红细胞桥联，红细胞仍是分散状况，不出现肉眼可见的红细胞凝集现象。

在反应体系中，加入针对该抗体的抗体，即抗抗体，该抗抗体Fab段结合红细胞上不完全抗体Fc段，出现肉眼可见的红细胞凝集现象，该试验称之抗人球蛋白试验。

也称Coombs试验，该抗抗体称之抗人球蛋白抗体或Coombs抗体。

抗人球蛋白试验--需要补体和抗补体的Coombs试验一些抗体与相应抗原反应需要在补体存在时，才能出现肉眼可见凝集反应，如Duffy 抗体，与一些补体直接反应，而另一些需要只有在补体存在时才出现血凝反应Coombs试验分类为直接Coombs试验和间接Coombs试验。

直接Coombs试验：红细胞在体内被致敏，即红细胞在体内已结合了抗体。

直接加入抗抗体（Coombs抗体），红细胞发生凝集。

间接Coombs试验：红细胞在体外被致敏，即红细胞膜在体外试验时结合不完全抗体，然后加入抗抗体（Coombs抗体），红细胞发生凝集。

Coombs试验的应用直接抗人球蛋白试验：1. 对新生儿溶血病（HDN）胎儿（婴儿）红细胞检测2. 输血反应3. 其它溶血性疾病间接抗人球蛋白试验：1. 检测体内不规则抗体a. 妊娠妇女b. 献血者c. 受血者或有过输血史的人d. 交叉配血试验2. 对已发现抗体鉴定3. 对一些血型抗原的检测，如Ｄ弱型，Kell. Duffy. Kidd 和其它血型检测。

抗体和免疫球蛋白（Antibodies and Immunoglobulins）抗体是与特异性抗原结合的免疫球蛋白。

所有的抗体是免疫球蛋白，但是不具有与抗原特异性结合功能的免疫球蛋白不是抗体，即不是所有的免疫球蛋白都是抗体。

一、实训目的通过本次实训，使我对血型知识有更深入的了解，掌握血型的检测方法，熟悉血型在临床医学中的应用，提高我的实际操作能力和医学素养。

二、实训内容1. 血型的基本知识（1）血型的定义：血型是指血液中红细胞表面所含有的抗原类型。

根据红细胞表面抗原的不同，人类血型可分为A、B、O、AB四种基本血型。

（2）血型的遗传规律：人类血型遗传遵循孟德尔遗传规律，即父母双方各遗传一个基因给子女，子女的基因组合决定了其血型。

2. 血型的检测方法（1）血清学方法：通过检测血清中的抗体来鉴定血型。

具体操作如下：①取患者血液样本，分离血清。

②将血清与已知抗A、抗B抗体混合，观察凝集现象。

③根据凝集结果，判断血型。

（2）分子生物学方法：通过检测DNA序列来鉴定血型。

具体操作如下：①提取患者血液样本中的DNA。

②对DNA进行扩增，得到与血型相关的基因片段。

③对扩增产物进行测序，分析序列，确定血型。

3. 血型在临床医学中的应用（1）输血：血型鉴定是输血前的重要环节，确保输血安全。

（2）器官移植：血型相容性是器官移植成功的关键因素之一。

（3）法医学：血型鉴定在法医学领域具有重要应用，如犯罪现场的血迹鉴定等。

三、实训过程1. 实验准备（1）熟悉血型知识，了解血型检测方法。

（2）准备实验器材，包括抗A、抗B抗体、血型鉴定卡等。

2. 实验操作（1）取患者血液样本，分离血清。

（2）将血清与已知抗A、抗B抗体混合，观察凝集现象。

（3）根据凝集结果，判断血型。

3. 实验结果与分析（1）根据实验结果，确定患者血型为A型。

（2）分析实验过程中可能出现的误差，如操作不当、试剂过期等。

四、实训总结通过本次实训，我掌握了血型检测方法，熟悉了血型在临床医学中的应用。

在实验过程中，我提高了自己的实际操作能力和医学素养。

以下是我对本次实训的总结：1. 血型检测是临床医学中重要的基础工作，对输血、器官移植等具有重要意义。

2. 血型检测方法多样，血清学方法和分子生物学方法各有优缺点，应根据实际情况选择合适的方法。