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月季组织培养技术研究

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月季花的组织培养知识讲解

月季花的组织培养知识讲解

月季的分类---地被月季
匍匐生长，枝条触地生 根，覆盖率极强（单株 年覆盖面1平方米左右 ，厚度30厘米左右）； 多花（单枝花朵50—— 100朵，单株次开花可 达千朵以上）；耐寒、 抗旱、抗病，是抵御风 沙、水土保持最理想花 卉品种。其中以恋情火 焰、巴西诺、哈德福俊 、梅郎珍珠为佳。
月季的分类---食用月季
（4） 壮苗培养
①对增殖倍率高的品种，所增殖的嫩茎很细弱，要求进行 一次壮苗培养，以取得适合生根和今后移栽的苗子。壮苗 培养的培养基为：MS+BA0.3-0.5+NAA0.01-0.1，如果并 不特别强调繁殖速度，也可以一直使用这种培养基，以壮 苗为主，增殖为辅，使增殖与壮苗合为一步。
（4）消毒与接种 在超净工作台上，用饱和
漂白粉上清液作表面灭菌25～30分钟，用无菌水涮洗数次 ，无菌纱布吸干茎段外表水分，按无菌操作要求接种，从 芽萌发到芽长到1厘米左右需要2～3周。
•（5）培养 培养温度21℃最
好，最高不超过25℃，有昼夜温差， 光照10～12小时/天，光强800～
1200LX。
（二）继代增殖
（1）将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到MS+BA12mg/l+IAA0.1-0.3mg/l或MS+BA1-2mg/l+NAA0.010.1mg/l的培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，原茎段 弃去。继代增殖培养基每升用蔗糖30克
（2）5周后 ，所培育的月季成倍的增加。
（3）每5～6周做一次继代增殖，继代前先制备好培养 基，然后在无菌操作条件下，将月季嫩茎切成1～2节一 段，投入新鲜的增殖培养基上，月季小苗就会按几何级 数增殖起来，也可以将大苗转入到生根培养基上。
1 ：初代培养 2 ：继代培养

月季花的快速繁育研究

月季花的快速繁育研究
接 种 到生 根 培养 基 上诱 导 生 根后 ， 移栽 至 （ 按 １ ： ３的
１ ／ ２ ＭＳ ＋ Ｎ ＡＡ ０ ． ５ ￣ １ ． ０ ｍｇ ／ Ｌ ， 或 ＭＳ ＋ ６ 一 Ｂ Ａ １ ． ５ ～ ２ ． ０ ａ ｒ ｇ ／ Ｌ ＋
比例混 合 ） 锯末 与培 养 土基 质上 ， 移 栽 幼苗 逐 步进行 Ｉ Ａ Ａ １ ． ０ ～ １ ． ５ ｍｇ ／ Ｌ的生根 培 养 基 上 １ ５ ｄ后 ，绝 大多
练苗 １ ４ ｄ 后， 即可进入苗期 的普通栽培管理 。
２ 结果 与分析
数 的 月 季小 苗 均 可 长 出根 ， 且 地 上 部 分 的苗 和 地下
部 分 的根长 势较 好 。
２ ． １芽的诱 导 、 增殖 与 生长
从 试 验 观察 结 果 来 看 ， 将 要 生 根 的月 季 小 苗 放 在黑暗处 ７ ｄ后 ， 再 放人 光 照 处 ， 其生根较快 ， 黑 暗 般均 生根 且生 根快 。将 已形 成根 原 基 的试管 苗 取
１ ： ３体 积混合 的营养钵 中 ， 浇 透水 ， 用 玻 璃罩 罩 住 ； 初
将 带有腋 芽 的嫩 芽节段 ， 接种 于 ＭＳ ＋ ６ 一 Ｂ Ａ（ １ ． ５ 基上 ， 培养 ２ ～ ４ ｄ后 都 可 以使 腋 芽萌 动 ， １ ０ ｄ 后 腋 芽
月后 ， 腋 芽 生 长健 壮 ， 并 形成 大 量 的丛 生芽 ， 但 苗 生 长缓 慢 ， 且在 芽基 部 形成 大量 的愈伤组 织 ， 将 其 愈 伤
在健 康 的优 良月季 母 株上 ， 取 腋 芽 的幼茎 ， 剥 去 组织切割再接种 于该培养基 中 ， 可进行扩繁增殖 ， 另外 ， 腋芽 的 嫩 叶 ， 用 自来水 进行 冲洗 ， 然 后 在无 菌 超净 工 根 据 观察 发 现 ，有 一 愈 伤 组 织在 ＭＳ ＋ ６ 一 Ｂ Ａ １ ． ５ ～ ３ ． ０ 作 台上 进 行 消 毒 ， 即把 幼茎 浸 入 ７ ０ ％酒 精 中 １ ～ ２ Ｓ ， ｍｇ ／ Ｌ ＋ Ｎ Ａ Ａ ４ ． ０ ～ ５ ． ０ ｍ ｇ ／ Ｌ ＋ Ｇ Ａ １ ． ５ ～ ３ ． ０ ｍ ｇ ／ Ｌ培 养 基 上 并用 无 菌水 冲洗 ， 再放 人 ０ ． １ ％氯化 汞 （ Ｈ ｇ Ｃ １ ： ） 中消毒 诱 导 出苗 ， 其他 培养 基 中 的愈伤组 织 还没 有此情 况 。 ５ ｍ ｉ ｎ左 右 。 接着 ， 用无 菌水 反 复冲洗 ４ ～ ５次 ， 再 将幼 ２ ． ３ 不 同培 养基 对 芽生长 的 影响

浅谈月季组织培养技术研究

浅谈月季组织培养技术研究

高校 图书馆创新服务建设进 行 了探讨 。 关键词 ： 高校 图书馆 ； 新 内容； 创 动脑动手； 益智 室
师生 ， 包括 学院行政领导干部在 内的各项服务 。图书馆服务 内容也 １高职 院校 图书馆基本服务现状 ２１ ０ ０以来 ， 高校都大大改善 了教学和 实验 等条件 ， 也有力地推 从馆藏 资源发展到 网络 资源 ， 服务 的手段也 向现代化 发展 ， 为读者 还包 括多媒体 、 图像 、 字化文献 等 ， 数 它 动 了高校 图书馆事业的发展 。近年来 ， 各高校校逐步加大 了对 图书 提供 的不仅仅是纸质 文献 ， 馆建设的投入力度。 目前 ， 高校图书馆 已全部实现 了计算机集成化 使传统 图书馆以书 目为中心的内务管理 ， 发展到现在 的面 向公众 的 管理 ， 数字化 、 网络化建设也 已开始运转 。 但在读者服务方 面还是 图 信 息服务 ， 并且 通过网络 ， 图书馆馆藏资 源与服务可 以无 障碍地走 书借 阅 、 刊阅览及 电子 阅览 室的数字文献 、 网服务 。随着互联 向世界 ， 强社会效益 。读者 可以预先通过 电脑输 入书名 、 期 上 增 作者姓 Ｓ Ｎ号等多种途径查询所需 的图 网、 手机移号、图书的 ＴＢ 通 然后进 入书库 中取书 ； 还可以通过网络查询多个馆的馆藏情况 ， 过互联网终端、 手机获得大量信息， 对图书馆的需求度大为下降。 例 书 ， 如图书馆的装帧精美字词典 已经成 了摆设 ， 人们 已经 习惯在 随身 电 直接在 网上进行预借 、 续借 和享受数 字图书馆 的全套 服务 ， 轻松地 建立个人 图书馆 、 联网 、 将所需资料下载到 自己的硬 盘上 ， 手机看 电影 、 看小说等愈来愈普及。 来图书馆的读者也愈来愈少 。 通 建立特色服务。有学者将图书馆特色服务定义为“ 以某种特 凡 某种 ＇Ｊ －ｌ ］￣ 过我们来图书馆读 者的分析统计 ， 借阅现代小说类和上 网的读者最 色藏书， 特色服务内容和某一特定读者群为专 Ｉ ／ 务对象 的服 多 ， 阅与 自已专业相关书籍的也不多 ， 网看 数字图书几乎没有 。 务就是特色服务” 这一定义准确地概括了图书馆特色服务 的内涵 、 借 上 。 因此 ， 图书馆在 全球 网络化 、 信息化 的大 环境 下 ， 图书馆 的功 能、 信 特征与服务对象 ， 从概念上将图书馆特色服务 与图书馆传统常规服 息用户的需求特征等都将发生 了很大 的变化 。读者 获取 知识 、 信息 务予以区分。图书馆特色服务通 常有 三种 表现形式 ： 第一， 以特色 是 之 目的， 以及获取渠道与要求等也与以往有很大 的不 同。以及读者 馆藏为基础而提供的特色服务。由于地域 、 历史及特定 的历史 文化 服务的个性化 ， 都要求图书馆进行服务创新 。 背景等原 因而形成 的特色馆藏 资源， 针对某一领域 的读者开展专 门 ２ 创 新 图书 馆 服 务 内容 化服务 。第二， 开展有别于传统 内容的具有特色的服务， 或运用新颖 ２１ ．服务理念创新 。经济学家约瑟夫 ・ 熊彼特于 １ １ ９ ２年首次提 的手段开展服务， 如视频点播 、 专家讲座 、 上门服务等 。第三， 针对某 出了“ 创新 ” 的概念 。 创新是指 以独特的方式综合 各种思想或在各种 特定读者群和 目标读者而定制 的个性化服务。 思想之 间建立起独特 的联 系的这样 一种能力 。能 激发创 造力的组 图书馆特色服务的特点 。 其一 ， 要有独特性。 独特性是相对 于图 织， 以不断地 开发出做事的新 方式 以及解决 问题 的新 办法。管理 书馆传 统服务 而言所表现 出来的特色 ，这些特色 可表现为 藏书结 可 创新 则是 指组织形成一创造性思想并将其转换为有用 的产 品、 服务 构 、 务内容 、 服 服务方式， 也可表现为针对特殊群体 的特殊 服务 。强 或作业方法的过程 。 创新必须在 以人为本思想指 导下对管理 中存在 调独特性并非刻意追求标新立异 ， 蹊径， 独辟 而是要 以需求作为 出发 的问题进行改革 。高校 图书馆 目前存在 的问题 很多， 最为关键 的 点， 但 以特色满足需求。其二 ， 要有针对性 。特色服务必须具有针对性， 是管理的封闭性 以及基础建设和人才缺乏 。 这主要是 由于各高职院 重点针对服务 对象 而展开 。 如根据辖 区丰富的旅游资源而设立旅游 校在图书馆管理上缺乏有效 的协调， 自为政 的分散 型管理使得宏 图书馆， 区域人才济济的优势开办专家论坛等。其三 ， 各 利用 要有创新 观规划 、 管理 、 调控 的能力丧失， 加之严格的行政监控使 图书馆缺乏 性。从某 种意义上来说， 色服务是在传统服务基础上 的创新 。 特 必要的管理 自主权 ， 活性 、 其灵 积极性 、 创新性都受 到限制， 图书馆管 ２ ． ３增加图书馆创新服务 。高职院校是培养高素质高技能 的实 理模 式趋 于僵化 。 先进 的服务理念是公共 图书馆服务创新 的思想基 用人才为 目地 ， 也是 高等职业教育体 现办学特色 、 把握教育 属性 的 础。应从传统 图书馆服务观念的禁锢 中走 出来 ， 确立新时期图书馆 重要 任务 。针对当前“ 高素质 、 高技能 ” 才培育 的实践， 人 高等职业院 服务的新 理念 。 一是 以人 为本理念 。 就是要 以读者为本 ， 把满足读者 校 图书馆应 当从 教育教学观念 转变 、 文教育专业渗透 、 师职业 人 教

有菌条件下月季组织培养技术

有菌条件下月季组织培养技术

加热 （ 因加 热蒸 发加 入母液 后到分 装时煮 沸刚好 是定 容要 求
的 １１０ Ｌ 冷却 后就 是 １ ， ０ ， ｍ 故配 １ Ｌ Ｌ培养 基量 取 １ Ｌ自来
水 ） 称 取 白糖 ３ 、 脂 ４ｇ 加 入 电饭 煲 锅水 中 ， 全 部 溶 ， ０ｇ 琼 ， 待 解 ， 加 入 １ ０倍 ＭＳ母 液 （ 中 ： 量 元 素 Ａ １ 大 量 再 ０ 其 大 ０ｍＬ、
瓶 中 水 ， 倒 入 自来 水 冲洗 １ 。 出 并滤 干 瓶 中 自来水 ， 再 次 倒
诱 导萌 芽培 养基 ： ＋ Ａ ０５ １ ＃Ｌ Ｓ ０ ＭＳ Ｂ ．～ ． ｍ ＋ １６杀 菌剂 ０３ ０ ．
ｍＵＬ 增殖 培养 基 ： ＋ Ａ １ ２ｍｇ ＋ Ａ ．～ ． ／＋ １６ ： ＭＳ Ｂ ￣ ／ Ｎ Ａ０１０２ｍｇＬ Ｓ ０ Ｌ 杀 菌 剂 ０３ｍＬＬ： 根 培 养基 ： ／ ＋ Ａ ．￣ ． ｒｇＬ ． ， 生 １２ＭＳ Ｎ Ａ ０ １ ０２ａ ／ ＋ Ｉ Ａ １ ／ （ Ｎ Ａ ０５ｍｇＬ ＋ １ ６杀菌 剂 ０３Ｉ【 。 Ａ ． ｍｇＬ 或 Ａ ． ， ） Ｓ ０ ０ － ｎ儿
冲洗 至 无泡沫 为止 。
普 及 月季名 优 新 特 品种 将 起 到重 要 的作 用 。 月季 常 规 组 培
技 术 报 道很 多 ， 但在 有 菌 环境 条 件 下 的 月季 组织 培 养 技 术 未 见报 道 。 １ 培 养基 组成
倒去 自来 水 ， 茎段 转移 到 一个 经 Ｓ ０ 把 １５杀 菌液 处理 过 的瓶 中 ， 入 ７ ％酒 精 浸 泡 ８ １ ， 入 自来 水 ， 即倒 出 倒 ５ ～ ０Ｓ倒 立
中图分 类号 ￥ ８ ．２ ６ ５１ 文献 标识 码 Ｂ 文章编 号 １０ — ７ ９ ２ １ ０ — ２ ６ ０ ０ ７ ５ ３ （０ ２）８ ０ １— １

月季组织培养

月季组织培养

有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
不同植物激素使用顺序和使用量
使用顺序 实验结果
先生长素， 有利于分裂但 后细胞分裂素 不分化 先细胞分裂素， 细胞既分裂也 分化 后生长素 同时使用 分化频率提高
生长素细胞 结果 分裂素比值 比值高时 促根分化， 抑芽形成 比值低时 促芽分化， 抑根形成 比值适中 促进愈伤组 织生长
3 .培养基
• 用于月季的基本培养基种类很多，如 B5、N6、WPM和 MS 培养基等。众多培养基中以 MS 培养 基的效果为最好，广泛用于月季的离体快速繁殖中。培养基的培养成分（主要是各类无机盐浓度） 及物理性能（pH 值、糖分以及固化支持物）会影响月季的组培。对 MS 培养基的成分及物理性能 进行合理的选择会提高月季组织培养的成功率。 MS 培养基中无机盐离子浓度因月季培养阶段的不同而有不同： 1）茎段培养阶段，将带有腋芽的嫩茎接种到不添加任何激素类物质的 MS 和 1/2MS 培养基上，两 周后，MS 培养基上的腋芽生长，而在 1/2MS 培养基上的腋芽几乎不萌发或发育不良。通过提高 MS 培养基中氯化钴的浓度，并用硫酸铵代替硝酸铵培养“Bulgarian rose”，可使其茎的生长状况 得到改善。同时有报道认为在 MS 培养基中添加硝酸银可以缓解叶片衰败并提高茎段侧芽的生长。 2）诱导生根阶段，一般要求较低的 MS 培养基无机盐离子浓度。Skirvin 等在用（Forever Yours ）月季做生根试验时发现，采用1/4MS 培养基，不加生长素即可以促进生根。
外植体消毒
接种
冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌 水冲洗至少三次之上
培
养
栽
培
移
栽

3个传统月季品种的组织培养研究

3个传统月季品种的组织培养研究
织 培养 ， 为传 统 月季 品种 的扩繁 及应 用奠定 了基 础 。
１ 材 料 与 方 法
以中 国传 统 月 季 品种 “ 品朱 衣 ” “ 香 红 ” 一 、软 及
“ 水绿 波 ” 长 势 和 年 龄 相 近 的带 单 芽 茎 段 为外 植 春 生 体 。流水 冲 洗 １ｈ后 ， 入 已 灭 菌 的 三 角 瓶 内。 用 转 ７ ％ 酒精 浸泡 灭 菌 ６～ ｉ， 不 断轻 轻 摇 晃 。再用 ５ ８ｍｎ 并 无 菌水 冲 洗 ３遍 ， 种 到 培 养 基 中 ， 瓶 ５段 。３周 接 每 后， 再将 健壮 程度 较 为 一致 的芽 切 下 ， 离 ， 掉 枯 萎 分 去 叶 片 ， 入增值 培养 基 （ ＭＳ培 养基 配方 的基 础 上 ， 转 在 添加 激素 的种 类及 浓度 见表 １ 。每瓶 接 种 ３个 单芽 。 ） 每 个配方 接种 ８瓶 ， 复 ３次 。３周 后 ， 重 观察 并 记 录 芽 的增 值 系数 、 高度 、 长势等 。培养室 的温 度为 ２ 生 ０℃ ，
缩 ； ： 片 颜 色 绿 ， 面 积 较 大 ， 问发 育 正 常 ； ２级 叶 叶 节 ３ 级： 叶片颜 色浓 绿 ， 间粗 壮 。 （ 体 生 长势 级 别 的 划 节 具
分见 图 １ 。 ）
表 １ 传统月季 品种不定芽增值培养基配方表
品朱衣”、春 水绿波” 软 香红” “ 及“ 的腋 芽增值诱 导的影响 。结
所示 。
通讯作者 ： 张启翔 ， 教授 ， 主要研究 方向为 园林植物 生物技 术与遗 传育
种 ： 。 ｉ： ｑ＠ ｂｆ．ｄ ． ｎ Ｅｍａ ｚｘ ｊ ｅｕ ｃ 。 ｌ ｕ
・
方差 分析 （ ３ 表 明 ， 表 ） 在不定 芽 的增值 系数 、 高度

丰花月季‘美神’组织培养研究

丰花月季‘美神’组织培养研究
根 系发 达 。 、
关键词 ： 丰花 月季 ； 茎段培养 ； Ａ ＮＡ
’
中图分类号 ： ８ ． ２ 文献标识码 ： 文 章编号 ：０ １ ００ （０ ０ ０ －０ ４ － ０ Ｓ６ ５ １ Ａ １０ － ０ ９ ２ １ ）５ １３ ３ 月季是蔷薇科 蔷薇属木本 植物 ， 又名 四季 蔷薇 ， 原 产于 中国口 ， 近代风靡 世界 的名花 ， ］是 素有 “ 中皇后” 花 之美誉 ， 受 人 们 的喜 爱 ， 为 切 花 的 四大 支 柱 之 ］深 成
ｃｌ ｏ ａ，ｕｔａ ｏ ｉ ｅ ｈ ｄ ｗａ ｏ ｎｄ ｔ ｅｓ ｐ ｒｏ ｏ ｒ ｐ ｔ ｉｅ ｆｅ ｚｎ －ｈ ｗｉ ｇ ｍ ｅｈ ｄ Ｔｈ ｌｒ ｓ ｎｃ ｔｏ ｏｎ ｉｉｎ ｌｒ ｓ ｎ ｃｍ ｔ ｏ ｓ ｆ ｕ ｏ ｂ ｕ ｅ ｉｒ ｔ ｅ ｅｉ ｖ ｒ ｅ ｉ ｇ ｔ ａ ｎ ｔ ｏ ． ｔ ｅ ｕｔａ ｏ ｉａ ｉｎ ｃ ｄ ｔ ｓ ｏ
选 自湛江师 范 学 院植物 园 内当年生 丰 花月 季 ‘ 美
神 ’ 壮 优 良母 株 上 未 开 花 枝 条 。 健 １ ２ 试 验 方 法 ．
１ ２ １ 不 同茎段 腋 芽诱 导 ．．
将 选 取 的外 植 体剪 去 叶
片 、叶柄 ， 自来 水冲洗 干净 ， 用 将其剪成 ３段 ： 顶端 １ ～
ｃ ｍｐ ｉｅ ｕｔａ ｏ ｉ ｆ３ Ｓ ｎ ｅ ｖ ｌｏ ，ｆｅ ｕ ｎ ｙ ｏ ９ ｔｍｅ ，ｐ ｗｅ ｆ５ ０ Ｗ ，ａ ｄ ｔｅ ｔｄ ｔ ｃ ． Ｔ ，ｅ ｔａ ｐ ｏ ｏ ｒｓ ｌｒ ｓ ｎｃ ｏ ，ｉ ｔｒ ａ ｆ２ Ｓ ｒ ｑ ｅ ｃ ｆ９ ｉ ｓ ｏ ｒｏ ０ ｎ ｒ ａ ｅ ｗｉｅ ｃ ｑ ｅ ｐ ｒ — ｐ ｉｔ ｔ ｏ ｓｆ ｒｅ ｔａ ｔｎ ｎ ｍｉ ｒａ ｅｍｅ ｈ ｄ ｏ ｘ ｒ ｃｉ ｇｇｅ ｏ ｃＤＮＡ ，ｗｅｃ ｍｐ ｒ ｄ ｂ ｎ ｙ ｈ ｏ ｉｅｍｅ ｈ ｄ，ｌ ｕｄ ｎ ｔｏ ｅ ｅｒｇｅ：’ ａ ｄ ｇ ａ ｓ ｏ ａ ｅ ｅ ｚ ｌｃ ｌｒｄ ｔ ｏ ｉ ｉ ｉｒ ｇ ｎｒ ｆｉ ｒ ｍ ｎ ｌｓ ｑ

月季“卡罗拉”组培快繁研究

月季“卡罗拉”组培快繁研究
要 意义 ｌ ｌ 。本试 验以月季“ 卡罗拉” 为材料进行组织培
养技术研究 ， 以期建 立该 品种快繁体系 ， 同时为完善月 季组培快繁技术
１ 材 料 ． １
以上所 有培养 基均添加 ３ｇ￣蔗糖 ，ｇＬ ｏ／ ６， 琼脂 ，Ｈ ｐ 值调 至 ５ 左 右 。 有瓶苗在培养室 中培养 ， ． ８ 所 培养条件
不易成活 。朱鹿 鸣 ４ 认为具根 原基的试管苗 比根系 已长 出的试管苗移栽成活率高 ，并且耐贮藏 ，不易烂 苗， 相关机理有待进一步研究 。 本研 究初步建立 月季 “ 罗拉” 培快繁体 系 ， 卡 组 为
大规模推广应用该 品种提供 了基础 。江西省近年来大 量 引进名优月季 品种 ， 但一直未建立相应 的快繁体 系 ，
目套用 。
到添加不 同浓 度 的 Ｎ Ａ或 ＩＡ的 １ ＭＳ培养基 中进 Ａ Ｂ ／ ２
行生根 培养 。结果 发现 ， １ Ｍ ＋ Ａ ０１ ０ ｍ ｍ） 在 ／ Ｓ Ｎ Ａ（． ． ｇ ２ —６
的培养 基 中培养 的植 株基部 均产生许 多愈 伤组织 ， 培 养 １ｄ后才有部分植株在愈伤组织周 围长 出根 ，根短 ７
在试验 的 Ｂ Ａ浓度 范 围内，嫩芽 的增殖倍 数开始 随着 Ｂ Ａ浓度 的增加而增加 ， Ｂ 当 Ａ达 １ ｍ ／ ． ｇ ５ Ｌ后增殖
倍数无 明显变化 。 在相同浓度的 Ｂ Ａ条件下 ， Ａ Ｎ Ａ浓度 对增殖倍数影 响不大 ， 响增殖苗长 势。 但影 从增殖倍数 和 增 殖 苗 长 势等 综 合 因素 看 ， ＋ Ａ ２ ｍ ／＋ Ａ ＭＳ Ｂ ． ｇ Ｎ Ａ ０ Ｌ
２３ 生根 培 养 ．
２ ． 同激 素浓度对生根 的影响 。 ． １不 ３ 将月季 幼嫩植 株接
体上看 ，本研究结 果与其 它月季组织培养研究 在某些 结果方面具有一定 的差异 ，这可能与其基因型差异有 关 】 。在进行 其它 品种月季组 培快 繁时 ， 进行 培养基 及各种激素 的适宜浓度配 比的探讨是必要 的，不能盲

月季分生组织培养技术要点

月季分生组织培养技术要点
甘肃紫斑牡丹植株高大耐寒耐旱花色 艳丽籽实饱满芳香四溢油脂可食用 主要分 布于海拔 0 )""! )"" 34;" &' 温度 !( 湿度 )"*的培养室进行 培养 生根培养
外植体清洗干净后"放在消毒过的超净工作 台上"用无菌的脱脂棉擦拭 & 遍外植体表面&
+*酒精消毒 & 分钟" 用无菌水冲洗 & 次* 有效氯 !,的 -./01 溶液消毒 !" 分钟"用无菌水 冲洗 # 次% 最后加入 "$& )234 5( 浸泡 !" 分钟% 接种及培养条件
刀用酒精灯灼烧灭菌"解剖刀)镊子的先端 在 %*,的酒精中蘸一下"再用酒精灯灼烧灭菌" 置于刀架上冷却"待用% 用镊子夹住蘸有酒精的 脱脂棉点着"对接种盘里外进行灼烧灭菌"灭菌 好的接种盘放上滤纸%
关键词 紫斑牡丹繁育嫁接砧木
紫 斑 牡 丹 又 名 甘 肃 牡 丹 西 北 牡 丹 紫 斑 牡 丹品种群是中国第二大牡丹品种群 仅次于中 原牡丹品种群 紫斑牡丹是我国特有的一级保
!基 金 资 助 "#甘 肃 省 农 业 科 学 院 重 点 研 发 计 划 项 目 $甘肃紫斑牡丹品种资源收集% 评价及种质创新& '!"!0=883!%()
从培养室移到温室的瓶苗在移栽前必须进 行驯化需 0)!" 天 先用遮阴网把瓶苗全部盖 住白天温度 !#!9 晚上 !"!# 湿度 9"* 左右使瓶苗逐渐适应温室环境 经过一段时间 的锻炼幼苗叶片由嫩绿色变深绿色萌发新叶 茎变粗壮幼苗整体长高并生出新根表明幼苗 已经适应外界环境 选择阴天或晴天早上移栽

月季植物组织培养实验报告

月季植物组织培养实验报告

月季植物组织培养实验报告姓名：张恒玉（天津师范大学10生乙10517085）摘要：月季（Floribunda roses）为蔷薇科蔷薇属木本植物,其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。

在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。

植物组织培养主要以绿色植物细胞或组织块为研究主要对象，把植物体上的生活器官、组织块活细胞从整体上离体下来进行人工培养。

以细胞全能性为理论基础对最适月季培养的培养基、激素、培养基质进行筛选，使离体组织经过脱分化和再分化而发育成新的植物个体。

为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。

关键词：月季组织培养Rose Plant Tissue Culture Lab ReportName: ZhangHengyu（Tianjin Normal University college of Life Science, Biological Sciences 300387）Abstract:Rose (Floribunda roses) for the woody Rosaceae Rosa, the beautiful flower position, abundant flowers, colors available, easy to trim the tree, planting small difficulty; its flowers large, beautiful, elegant, noble. Applications in the flowers, the status and the proportion rose growing is the world's leading one of the four cut flowers. Plant Tissue Culture main object of the green plant cells or tissue blocks for research, Of life on the plant organ, tissue block living cells isolated from the whole down the artificial culture, Cell totipotency theory based on the optimum rose culture medium, hormones, culture media filter, Isolated tissue and develop into new individual plants after dedifferentiation and redifferentiation. breeding of new varieties offer a new way, in the rose show a significant improvement potential applications.Keywords: Rose tissue culture1 月季介绍月季为常绿有刺灌木，或呈蔓状与攀援状。

月季组织培养繁殖技术

月季组织培养繁殖技术

强调繁殖速度 ， 可以一直使用这 种培养基 ， 壮茁为 主 ， 也 以 增
殖 为 辅 ， 增 殖 与 壮 苗 合 为 一步 。培 养 条 件 ： 照 １￣ ２小 时／ 使 光 ０１
段 芽 第 ５天 就 能萌 发 ， 基 部 和 梢 部 的 芽 往 往 迟 至 １ 而 ５天 才 萌
发
天 ， 强 ８０ ｌ８ ０勒 克 斯 ， 度 ２ ￣ ３ ， 高 ２ ￣ ６Ｃ。 光 ０ ～ ０ 温 ０ ２℃ 最 ４ ２￣
无 根 嫩 茎 ，经 ２周左 右 出现 根 原 基 ，幼 根 尚 未 长 出 即 出 瓶 种
植。
目前 多 使 用 浓 度 为 ０１ ． ％氯 化 汞 消 毒 ２ ８分 钟 ， 毒效 果 ～ 消 最 好 ， 去 除 较 难 ， 人体 有 害 ， 用 时 需 反 复用 无 菌 水 冲洗 。 但 对 使 另 常用 饱 和 漂 白粉 上 清液 ， 毒 效 果 很 好 ， 除也 容 易 。 在 超 消 去 净 件 ｝ 用饱 和 漂 白粉 上 消 液 作 表 面 ： 菌 ２ － ０分 钟 ， ， Ｔ ＜ ５３ 灭 蒲 同 扎 刊 ， 去 灭 菌 溶 液 ， 无 菌 水 涮 洗 数 次 ， 菌 纱 布 蛳 埘 无 吸干茎 段外表， Ｋ舟 ， 无 菌操 作 要 求 ， 种 到 小 试 管 里 ， 芽 接 接 从
～
活 率 不 高 ， 增 加 一 个 生根 前 培 育 壮 苗 的步 骤 。 增 殖 倍 率 中 可 对
等的一些品种 ，可采用减少细胞分裂素 的方法使增殖倍 率降
低， 减少 细 弱 苗 。 ４对 增 殖 倍 率 高 的 品 种 ， 增 殖 嫩 茎 细 弱 ， 求 进 行 １ ． 所 要 次 壮苗培育 ， 以取 得 适 合 生 根 和移 栽 的 苗 。 壮 苗 培 育 培 养 基 为 ： ＭＳ Ｂ ０３ ０５毫 克， ＋ Ａ ００ ￣ ． 克， ， 果 并 不 特 别 ＋ Ａ ．－ ． 升 Ｎ Ａ ．１ ０１毫 升 如

月季组培实验报告

月季组培实验报告

月季快速繁殖实验报告月季介绍月季花(学名: Rosa chinensis Jacq.)被称为花中皇后，又称“月月红”,是常绿、半常绿低矮灌木，四季开花. -般为红色.或粉色、偶有白色和黄色.可作为观赏植物，也可作为药用植物，亦称月季。

有三个自然变种,当代月季花型多样,有单瓣和重瓣，尚有高心卷边等优美花型;其色彩艳丽、丰富,不仅有红、粉黄、白等单色，尚有混色、银边等品种;多数品种有芳香。

月季的品种繁多，世界上已有近万种，中国也有千种以上。

一、实验目的1.掌握月季快繁体系: ①母株的选择②外植体消毒与接种③诱导培养④生根培养⑤.驯化移栽的操作流程2.掌握无菌操作的植物组织培养办法;3.通过配备ms 培养基母液，掌握母液的配备和保存办法;4.理解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最后长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞的全能性的理解。

二、实验原理(一)植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至，单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成- -完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织构造的细胞团,即愈伤组织。

这-过程称为"脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

(二)植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都含有该植物的全套遗传基因,在一定培养条件下每个细胞都可发育成一种与母体一-样的植株。

(三)组织的分化外植体诱导出愈伤组织后，通过继代培养，能够在愈伤组织内部形成一类分生组织即含有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。

有些状况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。

(四)培养基的构成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近,似成功地使用该培养基进行组织培养的重要条件。

月季组织培养

月季组织培养

月季组织培养技术摘要：月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。

月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。

关键词：月季组培随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。

以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展，并对月季组培的最优条件进行了总结。

本研究探索出的月季组培快速繁殖技术，在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面，较前人有所改进。

一.月季组织培养的研究进展月季是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。

别名长春花、月月红、斗雪红、瘦客等，蔷薇科蔷薇属植物，其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小。

其花型大，美丽，幽雅，高贵。

在鲜花应用中，月季花的地位和比重与日俱增,是世界上著名的四大切花之一。

月季的花色可编制成完美的连续色谱。

月季是重要的花卉，世界的销售额多年来稳居各类花)卉的第一或第二。

月季的一大优点是分布极广，适应性良好，栽培容易。

月季是四季常青花卉，花期长，花色多，芳香馥郁，由于其特殊的情感内涵和商品价值，被广泛应用于园林、庭院装饰，并可制成月季盆景，作切花、花篮、花束等。

此外，月季花可提取香料，根、叶、花均可人药，具有活血消肿、消炎解毒等功效。

当前，月季育种是花卉育种中最活跃的领域之一。

月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。

随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。

月季植物组培方案

月季植物组培方案

月季植物组培方案月季是一种常见的观赏花卉，其花朵色彩丰富，花期长，是花坛、花境、花笼和花圃中常见的植物。

然而，传统的繁育方法存在效率低下、时间长、容易受到病害感染等问题。

因此，利用组织培养技术进行月季植物的繁育具有十分重要的意义。

一、材料准备1.可供选择的月季植株，选择健康无病害的茎干作为外植体。

2.组培基质：可以选择MS培养基，配制麦芽糖浓度为30g/L，琼脂浓度为7g/L。

3.消毒液：例如75%酒精、10%双氧水、0.1%漂白粉。

4.无菌器皿：例如培养瓶、试管、平皿等。

5.显微镜及显微镜片：用于观察、检验组培过程中的细胞分裂情况。

6.整枝针和剪刀：用于取样。

二、外植体消毒处理1.将外植体的茎干从月季植株上剪下。

2.将茎干进行无菌处理，先用70%酒精擦拭，再浸泡于10%双氧水中10-15分钟，最后用无菌水洗净。

3. 将处理后的茎干切成0.5-1.0cm长的段，并观察切割的部位是否出现霉变，如有则再次进行消毒处理。

三、组培基质配制1.取适量MS培养基粉末，按照说明书配制，加入适量麦芽糖并充分溶解。

2.将溶解的培养基过滤灭菌，滤液加热至煮沸并充分搅拌，再加入适量琼脂并搅拌均匀。

3.将配制好的培养基灌装到无菌器皿中，如培养瓶、试管或平皿。

四、组培过程1.将处理好的茎段放置于准备好的无菌器皿中，使其埋入培养基中。

2.将无菌器皿密封，并放入无菌环境，通常应保持在25-28℃、光周期为16/8小时（光照/黑暗）的条件下，以促进茎段的快速生长。

3.在培养过程中，应定期观察外植体的生长情况，如出现异常或病害感染，应及时更换培养基或采取其他措施进行处理。

4.经过3-4周后，可观察到茎段的侧芽开始发生增殖，此时外植体可进行移植。

五、移植1.在移植之前，应先准备好新的无菌器皿和培养基。

2.将茎段取出，用消毒液进行消毒处理，然后将其移植到新的培养基中。

3.将培养皿重新密封，并放回无菌环境中继续培养。

4.经过数周后，可将外植体移植到普通培养基中，进行生根和生长。

《月季组织培养》课件

《月季组织培养》课件

月季组织培养在园艺产业中的应用前景
01
02
03
花卉品种保护
通过组织培养技术，保护 和繁殖珍稀、濒危月季品 种，维护生物多样性。
花卉生产
利用组织培养技术快速繁 殖月季，满足市场需求， 提高花卉产业的产量和效 益。
花卉品种改良
通过组织培养技术，改良 月季品种的性状，提高其 观赏价值和适应性。
月季组织培养对花卉产业的影响与贡献
抗病育种提供了新的思路和方法。
案例三：月季繁殖效率的组织培养
总结词
通过组织培养技术，提高月季的繁殖效率，缩短繁殖 周期。
详细描述
繁殖效率是月季生产中的重要指标之一，通过组织培 养技术，可以显著提高月季的繁殖效率。在实验中， 研究人员采用适当的培养基和激素组合，优化了月季 外植体的培养条件，提高了增殖速度和生根率。同时 ，研究人员还探索了小型化培养容器和快速繁殖技术 ，以进一步缩短繁殖周期和提高繁殖效率。这一技术 为月季的快速繁育和生产提供了有力支持。
01
设定适宜的培养温度、光照、湿度等条件，以满足月季组织生 长的需求。
02
制备适合月季组织生长的培养基，添加适量的营养物质和激素
。
培养基的pH值要调整到适宜的范围，以保证组织的正常生长。
03
细胞分裂与增殖
1
在适宜的培养条件下，月季组织开始分裂和增殖 。
2
定期观察组织的生长情况，记录生长数据，以便 及时调整培养条件。
推动花卉产业技术创新
月季组织培养技术的发展将促进花卉产业的技 术创新和进步。
增加花卉产业的附加值
通过组织培养技术，开发新品种和特色产品， 提高花卉产业的附加值。
促进花卉产业的可持续发展
月季组织培养技术的应用将有助于实现花卉产业的可持续发展，提高产业竞争 力。

月季茎段组织培养

月季茎段组织培养
2012-6-5
5、接种（超净工作台中进行）
接种时，吸干外植体表面的水分 将消毒好的茎段，茎基部朝下，插入培养基中。 接种后，在培养瓶上贴上标签并写上接种者姓 名、日期，之后移入培养室进行培养
6、培养条件
培养温度25左右，光强1500—2000lx，光照时 间14h/d
7、腋芽萌发
接种两周后观察，并调查污染率及茎段成活率 和发芽数
2012-6-5
实验准备
1、月季茎段培养基的配制、灭菌 MS+6-BA（2mg/L）+NAA（0.5mg/L） 配置600ml 最终分装成16个培养瓶 高压灭菌
2012-6-5
地点：图书馆前 时间：2011.11.11 中午12点半左右 天气晴朗 阳光明媚
2、外植体的采集
2012-6-5
我们采集的外物材料
通常老的材料比幼嫩材料带菌多，田间生长比温 室材料带菌多，一天中以中午阳光最强时的材料 带菌少
• 严格消毒灭菌
采用多次灭菌法
• 合理安排繁殖程序 • 规范操作，控制环境条件
保持接种室的清洁、干燥、密闭等。操作熟练。
2012-6-5
谢谢
2012-6-5
2012-6-5
两周后。。。
2012-6-5
2012-6-5
2012-6-5
结果分析
• 16瓶培养瓶 其中4瓶生长状态良好 另外12瓶均有不同程度的细菌或真菌感染
污染率：75% 茎段成活率：25%
2012-6-5
污染的种类
• 细菌：培养基某一位置或培养材料周围出 现黏液状物或浑浊的水渍状痕，有时呈现 发酵状泡沫 原因：材料、培养基灭菌不彻底或操作不当 • 真菌：污染部位发霉，颜色黝黑、白、黄 等 原因：周围环境和空气污染造成的

微型月季“金太阳”组织培养技术研究

微型月季“金太阳”组织培养技术研究
培养基 内 ， 每瓶接 １ 个 新芽 ， 每个处理接 １ ０瓶 ， 重复 ３次 。培 养３ ０ ｄ后统计丛生芽 的增殖倍 数。试验采用 （ ３ ） 正交设
以盆栽微型月季品种“ 金太 阳” 为试材 ， 选取 当年生无 病
计 ， 同初代 培 养设 计 。基 本 培养 基设 置 ３个 水 平 ： ＭＳ 、
１ ． ３ 培养条件 在 培养 室内进行光照培养 ， 初代培养和增殖培养的条件 ：
温度为（ ２ ５± ２ ） ℃， 光照强度为 ２ ０ ０ ０ ｌ ｘ ， 光 照时间为 １ ２ ｈ ／ ｄ 。
培养基除了试 验设 计 的影 响因子 外 ， 另添 加 蔗糖 ３ ％、 琼 脂
０ ． ６ ％， 用１ ｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ的 Ｈ Ｃ １ 和Ｎ ａ Ｏ Ｈ将 培 养基 ｐ Ｈ 值调 整 为 ５ ． ８ ， 配制 的培养 基在 １ ２ １℃高温下灭菌 １ ７ ｍ ｉ ｎ ， 放置 １周后
收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — ０ ４— １ ５ 作者简介 ： 耿 晓东 （ １ ９ ７ ９ 一） ， 男， 江苏 扬 中人 ， 硕士， 高 级工程 师 、 讲 师， 从事 观赏植 物栽培 、 园林植物 应用等方 面的教 学与研究 。Ｔ ｅ ｌ ：
（ ０ ５ １ ２ ） ６ ６ ０ ９ ８ ５ ０ ６； Ｅ—ｍ ａ ｉ ｌ ： ｇ ｅ ｎ ｇ ｘ ｉ ａ ｏ ｄ ｏ ｎ ｇ １ ０ ８ ８ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｎ。 ｒ
１ 材料与方法
１ ． １ 试 验 材 料
每瓶接 种 １ 个茎段 ， 重复 ３次 ； 培养 １ ５ ｄ后统计腋芽诱 导率。 基本培养基设置 ３个水平 ： ＭＳ 、 １ ／ ２ Ｍ Ｓ 、 １ ／ ３ ＭＳ ； ６一Ｂ Ａ设置 ３
个 水平 ： ０ ． ５ … １ １ ５ ｍ ｇ ／ Ｌ ； Ｎ Ａ Ａ设置 ３ 个水平 ： ０ ． １ 、 ０ ． ３ ， ０ ． ５ ｅ ｒ ＃Ｌ ；
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月季组织培养技术研究摘要：以MS为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素（6-BA）和生长素(NAA)，以及用不同外植体部位筛选出最适合月季腋芽萌发的培养基和最佳外植体部位。

实验结果表明：诱导侧芽萌发以MS+6-BA2.0mg/L培养基效果最好，外植体部位以中部枝条发芽率最佳,为80%。

关键词：月季；组织培养；快速繁殖Abstract: Use MS as basic medium ,with different concentration of cytokinin and auxin,and use different part of the stem as explant for tissue culture to select the suitable mediumand best explants site for the induction of Rosa chinensis. The results showed that MS +6BA2.0mg / L is the suitable medium for bud germination, and the middle part of the stem isthe best explant.Keywords: Rosa chinensis, tissue culture, rapid propagation月季（Rosa chinensis）是蔷薇科落叶或半长绿灌木，其花色艳丽、香味浓郁，是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一。

由于其分布极广、适应性良好、栽培容易等优点，加之月季四季常青、花期长、花色多等特点，使得在园林和路带绿化以及庭院居室的盆栽美化和切花等方面都得到广泛的应用。

月季在观赏植物中具有很高的地位。

月季花型大、美丽、幽雅、高贵，深爱各国人民喜爱，月季的销售额多年来稳居各类花木的前茅。

被誉为“花中皇后”之美称，深受人们喜爱。

月季通常采用扦插和嫁接繁殖，一些名贵品种扦插不易生根，主要是靠芽接繁殖[1]。

而芽接速度慢，因而造成优良品种苗木供不应求。

应用组织培养技术可以大大缩短其增殖周期，达到快速繁殖优良品种的目的。

近年来随着生物技术的不断发展与更新，用植物组织培养的方法快速繁殖各种花木技术得到了普遍重视和广泛应用，关于月季的离体培养、根诱导及移栽问题，以有了不少报道[1、2、8、9、10]。

由于受基因影响，不同品种之间的组织培养特性表现出一定的差异[2]。

因此讨论不同品种组培快繁的培养条件，特别是培养基中适宜的不同激素配比仍具有重要价值，另外选择适合接种的外植体不同部位也会影响其发芽率。

本实验以月月红月季品种为材料进行了侧芽的诱导和筛选出适合月季组织培养最佳外植体部位的组织培养特性研究，试图找出适合月季品种的组培快繁的最佳激素配比的培养基和最适合培养的外植体部位。

1 材料与方法1.1 实验材料及采样地生境条件1.1.1 实验材料供试材料取自都江堰市中国科学院华西亚高山植物园月月红月季当年生无花蕾嫩茎。

1.1.2 采样地生境条件采样地位于成都平原与川西北山地之间，地理坐标：东经103°，北纬31°，海拔700 m左右，为浅切割低山地貌类型。

土壤为黄壤，质地为重壤质，PH值4.5～5.5，由于多雨，在沉积层与母质层之间有明显潜育现象，土壤肥力中等，保肥保水性好。

采样地属于亚热带气候类型，年平均气温15.2 ℃，极端最高、最底温度分别为38 ℃和～-10 ℃，年平均相对湿度81%，年平均降雨量1243 mm，无霜期269 d。

1.2 技术路线培养基的配制→培养基灭菌→外植体采集→外植体预处理→外植体表面灭菌→外植体接种→培养→试验结果统计与分析1.3 实验仪器与试剂仪器用品：高压灭菌锅、超净工作台、试管、电子天平、烧杯、微波炉、酒精灯、镊子试剂：75%酒精、琼脂、蔗糖、蒸馏水、6-BA、MS储备液、NAA1.4 培养基配方表1 培养基中6-BA和NAA的组成及配比处理号 6-BA NAA(mg/L) (mg/L)A1 2.0 ---A2 2.5 ---A3 2.0 0.1A4 2.0 0.51.5 培养基的配置称琼脂7.5 g→蒸溜水400～500mL →微波加热5 min →蔗糖30 g →微波加热5 min →大量元素母液→微量元素母液→有机物母液→铁盐母液→定容至1L →调pH至5.8～6.0 →分装→高温灭菌1.6 外植体采集与灭菌1.6.1 外植体采集在晴朗的清晨采集生长健壮，无病虫害母株上的当年生枝条。

1.6.2 外植体灭菌与接种采集回的外植体剪去顶部和基部并去叶，用洗衣粉水溶液轻轻洗涤30 min，自来水冲洗30 min后，用滤纸吸干，剪成约2 cm长带侧芽茎段。

在超净工作台上用70％的酒精消毒30 s，无菌水洗3次，再用0．1%升汞溶液消毒10 min，然后用无菌水冲洗5次，在无菌滤纸吸干后，将灭菌好的外植体接种于培养基上。

1.7 培养培养条件：培养温度25±1℃；光照强度1 800～2 000 1x；光照时间12 h／d。

1.8 数据统计培养30 d后统计外植体的污染率、发芽率。

污染率（%）=污染的外植体数/接种外植体总数×100发芽率（%）=发生芽的外植体数/无菌外植体总数×1002 结果与分析培养30 d后对6-BA、NAA浓度组合外植体的发芽率、污染率以及不同外植体部位的发芽率、污染率进行统计。

结果见表2、表3：表2 不同6-BA、NAA浓度组合外植体的发芽率、污染率处理号接种数(瓶) 培养基发芽率(%) 污染率(%)B1 20 MS+6-BA2.0mg/L 85 40B2 20 MS+6-BA2.5mg/L 30 20B3 20 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L 65 40B4 20 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L 40 352.1 6-BA浓度对外植体生长的影响从表2可见，处理号B1、B2中随着6-BA的浓度变化，相应的发芽率与污染率也随之发生了变化。

6-BA的浓度为2.0mg/L时发芽率为85%；6-BA浓度为2.5mg/L时发芽率为30%，。

这说明随着6-BA浓度的增高其发芽率下降，因为植物激素对外植体的生理作用与其使用浓度密切相关，浓度过高或过低都不能有效的诱导芽的萌发。

2.0mg/L是6-BA诱导月季芽萌发的适宜浓度。

2.2 6-BA与NAA组合对外植体生长的影响从表2中可见，处理号B3、B4中6-BA与NAA组合随着NAA浓度的增加其发芽率也随着增高， 6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L时，发芽率为65%；当6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L时，其发芽率为40%。

这说明给培养基中加入适量的NAA对外植体的萌发、生长有一定的促进作用。

因为外植体腋芽的萌发并不只是要求较高的细胞分裂素，而是要求在体内建立一个适宜的细胞分裂素与生长素的平衡[5]。

所以培养基要求有一定的细胞分裂素与生长素的配比。

从表2可以看出，6-BA2.0mg/L时的发芽率为85%，6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L时的发芽率为65%。

因此单独使用6-BA的发芽率效果比6-BA与NAA组合的培养基效果要好得多，说明了生长素浓度较高时抑制了细胞分裂，从而降低了形成芽细胞的生理活性，使某些芽的萌发受到了明显的抑制[4、6 ]。

实验得出最适合月季诱导侧芽萌发的培养基为：MS+6-BA2.0mg/L。

表3 不同部位外植体的发芽率、污染率外植体部位接种数发芽率污染率(个) (%) (%)茎段上部 10 40 50茎段中部 10 80 50茎段基部 10 50 602.3 不同外植体部位对发芽率的影响从表3可见，中部茎段外植体发芽率最好，为80%；这有可能是枝条中部较之上部和基部，营养状况好，营养物质积累丰富，外植体的生活力强，萌发力强，所以其发芽率就很高。

而上部枝条由于枝条幼嫩，营养物质积累有限，且本身的失水快，所以其萌芽率就会下降。

茎段下部由于木质化程度较高，所以发芽率比较低。

2.4 月季组织培养中的污染从实验结果可以看出，外植体平均污染率为42.2%。

本次试验中造成污染率过高的原因很多，（1）操作员出入多，造成接种室环境杂菌含量过高；（2）接种时，接种工具灭菌不彻底，操作没有严格按照要求进行；（3）接种人员操作熟练程度不够；（4）外植体消毒处理不完善等等。

3 结论（1）以月月红月季为品种，诱导侧芽萌发最适培养基为：MS+6-BA2.0mg/L。

发芽率为85%。

在培养基中加入一定量的NAA时，发芽率明显下降。

（2）以月月红月季为品种，实验筛选出最适外植体部位为：茎段中部，发芽率为80%。

4 讨论4.1 最适6-BA浓度的进一步筛选实验结果表明，诱导侧芽萌发的最佳培养基为：MS+6-BA2.0mg/L。

当6-BA的浓度增加到2.5mg/L时，外植体发芽率明显下降，因此6-BA浓度不可继续增加；如果将6-BA的浓度降低到2.0mg/L以下，较低的6-BA浓度对外植体的发芽率的影响有待进一步研究。

4.2 NAA的浓度对芽萌发的影响作用从实验中可看出，6-BA与NAA组合的培养基是随着NAA浓度的升高，发芽率也随着增高。

当培养基为：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L，发芽率为65%。

培养基为：MS+6-BA2.0m g/L+NAA0.1mg/L，发芽率为40%。

进一步试验中可将NAA浓度继续升高，以确定NAA的浓度对芽萌发会有影响。

生长素的作用主要是促进细胞伸长和细胞分裂，诱导受伤的组织表面至数层细胞恢复分裂能力，形成愈伤组织，促进生根等，因此过高或过低的生长素都会抑制芽的萌发。

在培养基配制中适量的生长素浓度对芽的萌发有促进作用[3]。

4.3 月季组织培养中污染的控制针对此次月季组织培养实验污染率较高的问题，为完善月季组织培养技术，对常见的污染采取一些必要的控制措施。

(1)经常对接种室进行空间消毒；(2)对超净工作台仔细灭菌；(3) 工具用后及时灭菌，避免交叉污染； (4) 进一步筛选外植体材料灭菌的适宜方法；（5）接种人员加强培训，提高操作的熟练程度和规范程度；（6）培养过程中及时去除污染瓶。

一旦发现培养瓶内有污染产生，应立即采取合适的方法进行处理，如用高压蒸气灭菌。

本试验只是对月月红这一品种进行的研究，总体上看与他人关于月季的组织培养研究在某些结果方面具有一致性，但也有一定的差异[7]，这可能与其基因型差异有关，还需进一步研究。

因此在进行其它品种月季组培快繁时，进行培养基及各种激素的适宜浓度配比的探讨和筛选最佳外植体是必要的，不能盲目套用。

对实验中出现新问题进行更深入的科学研究，对完善月季组织培养技术有着重要的科学意义。