当前位置：文档之家 › 重组人血清白蛋白的研究进展--200908

重组人血清白蛋白的研究进展--200908

  • 格式：pdf
  • 大小：163.69 KB
  • 文档页数：4

下载文档原格式

  / 4

合集下载

重组蛋白的最新研究进展

重组蛋白的最新研究进展

重组蛋白的最新研究进展近年来，随着生物技术的快速发展和不断更新，蛋白重组技术也在不断创新和完善。

重组蛋白是利用生物技术手段，通过基因重组、原核或真核表达等方法从宿主细胞系统中制备并表达目的蛋白。

它具有很多优点，如可以避免从动物或人体中提取或分离蛋白所带来的传染风险，同时也可以制备出高质量和高纯度的蛋白。

随着重组蛋白技术的不断发展，越来越多的研究者们也开始对其进行了深入的研究，试图找到更好的方法和途径来提高其生产效率和质量。

以下是其中几项最新研究的进展。

一、人类IgG1 Fc重组蛋白的良好稳定性IgG是一种常见的抗体，是人体免疫系统中产生的免疫球蛋白G。

在药物制剂中，人类IgG1 Fc重组蛋白是一种广泛应用的生物药物。

然而，IgG1的不稳定性一直是一个难题。

因此，研究人员最近利用基因工程技术，构建了一种新型的IgG1 Fc重组蛋白，可以更好地保持其稳定性，从而提高其生产效率。

该研究的主要目的是探索IgG1 Fc重组蛋白的稳定性，以找到一种更优的表达蛋白质量方法。

结果显示，新构建的IgG1 Fc重组蛋白在体内制备的过程中，其构象和空间结构都得到了很好的保持，因此在药物制剂领域中具有非常广阔的应用前景。

二、重组蛋白与人体免疫系统的相互作用近年来越来越多的生物技术研究中心开始关注重组蛋白与人体免疫系统之间的相互作用。

这种相互作用对于确保重组蛋白治疗的有效性和安全性至关重要。

近期，许多的研究结果都表明，重组蛋白不仅可以与人体免疫系统发生相互作用，而且这种相互作用可能对其治疗效果产生积极或负面的影响。

最新的研究表明，重组蛋白可能对免疫系统的调节产生不同的反应，并对治疗产生不同的反应。

另外，还发现重组蛋白最佳剂量管理往往被影响，因为免疫系统不同特定的重组蛋白不同的反应。

三、利用重组蛋白产生新型疫苗重组蛋白技术的另一项前沿应用是利用其制备新型疫苗。

在过去，生物制剂领域的疫苗主要包括灭菌和变性疫苗，而重组蛋白疫苗是一种新型、高效的疫苗。

人白蛋白重组表达的最新研究进展.ppt

人白蛋白重组表达的最新研究进展.ppt

基因剂量
表达载体单元插入到宿主菌表达系统时，可采用质粒直接转化到宿主 菌细胞中呈附加体型载体( Episomal vector) 存在,也可通过线型特异 位点整合到酵母菌的染色体上。当外源基因表达单元呈整合型 ( Integrative type) 存在于染色体上时,因随染色体的复制而复制,遗传
9
rHSA 表达体系的建立
随着基因重组技术所表达蛋白的复杂性越来越高， 酵母作为真核生物具有能对所表达的蛋白进行翻 译后修饰，易于大规模培养等优点逐渐取代大肠 杆菌生产外源蛋白。在HSA的重组研究过程中， 人们分别采用了酿酒酵母、汉逊醉母、裂殖酵母、 克鲁维氏酵母、毕赤酵母等作为宿主细胞，以及 转基因动物、转基因植物来分泌表达重组人血白 蛋白。
2011-04-01
极其稳定。
18
毕赤酵母表达重组人血清白蛋白
rHSA 的发酵过程包括二个阶段, 以甘油为碳源积 累生物量的生长期和以甲醇为碳源的rHSA 诱导 表达期。 甲醇的流加速率控制在培养基中的浓度小于1 % , 一般诱导表达150～300h 左右。整个过程的pH 控制在610 左右, 溶氧控制在10 %以上。 在两段法的发酵条件优化方面, 发现将甘油和甲醇 混合流加可提高rHSA 产量, 也就是诱导开始时首 先流加甲醇, 在确保醇氧化酶被诱导后, 开始混合 流加。混合流加时严格控制甘油和甲醇的度比例 和流加速率, 使发酵液中甘油不积累, 同时甲醇浓 度不超过0.5 %。
2011-04-01 3
国内外研究进展
Lawn R .M. 等在1981年首次报道了重组人血白蛋白 (Recombinant Human Serum Albumin ,rHSA)cDNA序列 和首次采用色氨酸(Trp)启动子，色氨酸引导肽及来自质粒 pBR322的Tcr和Ampr基因构建了第一个表达重组人血白 蛋自的表达载体pHSAI并在大肠杆菌(E.coli)中得到了成功 表达。HSA在大肠杆菌中表达量为细胞总蛋白的7%，但 由于HSA含有大量的二硫键使得其在体外极难完成正确折 叠，未能得到有生物功能的蛋白;同时细菌细胞壁脂多糖 造成热反应也带来很多麻烦。

重组人血清白蛋白在生产中的问题

重组人血清白蛋白在生产中的问题

重组人血清白蛋白在生产中的问题全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：重组人血清白蛋白是一种由人类基因重组技术合成的蛋白质，具有与人类自身血清白蛋白相同的生物特性和功能。

在医药领域中，重组人血清白蛋白被广泛应用于治疗各种疾病，其生产过程中也面临着诸多问题和挑战。

在重组人血清白蛋白的生产过程中，最主要的问题之一是工艺优化。

生产重组蛋白需要在细胞培养基中加入适当的培养因子和生长因子，以促进细胞的生长和表达目标蛋白。

不同细胞株对培养条件的要求可能会有所不同，需要进行不断的优化和调整。

提高产量和纯度也是工艺优化的重要目标，需要通过改进细胞培养条件、提高蛋白表达水平等途径来实现。

重组人血清白蛋白的纯化过程也是生产中的一个关键环节，其中存在着许多技术难题。

由于重组蛋白和其他细胞培养基组分之间的相似性，纯化过程中可能出现蛋白质结构的损失，导致产物的纯度下降和活性丧失。

如何选择合适的纯化方法，提高产物的纯度和活性成为了生产过程中的重要问题。

重组人血清白蛋白的稳定性也是生产中需要解决的问题之一。

由于蛋白质易受热、酸碱、氧化等因素的影响，其稳定性较差，容易降解失活。

在生产过程中需要采取一系列措施，如冷冻保存、添加稳定剂、优化工艺参数等，以提高蛋白的稳定性和保存期限。

重组人血清白蛋白在生产中还存在着一些其他问题，如生产成本较高、生产周期较长、质量标准不统一等。

解决这些问题需要不断进行技术创新和工艺改进，以提高生产效率和产品质量。

重组人血清白蛋白在生产过程中面临着诸多问题和挑战，需要不断进行技术创新和工艺优化，以确保产品质量和生产效率的提高。

希望在未来的研究中，可以通过引入新的技术和方法，解决这些问题，推动重组人血清白蛋白在医药领域的应用和发展。

【2000字】第二篇示例：重组人血清白蛋白是一种在生产中备受关注的重要药物。

它是一种用于治疗众多疾病的生物药物，具有重要的生物学功能和临床应用前景。

在生产过程中，重组人血清白蛋白面临着一些问题和挑战，这些问题不仅影响了其生产效率和质量，还影响着其在临床应用中的效果和安全性。

重组人血白蛋白的纯化研究

重组人血白蛋白的纯化研究

重组人血白蛋白的纯化研究【摘要】本文综述了血浆人血清白蛋白（pHSA）和基因重组人血清白蛋白（rHSA）的优缺点以及共同之处，讲述了一种纯化重组人血白蛋白的方法，为获得高纯度、安全、稳定的产品，各种色谱分离技术得到更多的应用。

由于rHSA 在临床上有广泛的用途，所以其在国内外有很大的市场需要，现阶段尽管rHSA 的纯化技术已有一定的发展，但纯化过程仍需优化以提高产品纯度及收率。

【关键词】重组人血清白蛋白；人血白蛋白；分离纯化；研究人血清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA）是由585 个氨基酸组成分子量为68KDa 的蛋白组成，约占血浆总蛋白的60 %，含17 对二硫键。

在人体内起着相当大的作用，如具有维持血液渗透压和携带血液中多种配基（包括氨基酸，脂肪酸，金属离子，类固醇及药物）；组织进行交换等生理功能[1]。

另外，人血清白蛋白在临床上广泛应用于休克、大出血、烧伤、白蛋白过少症等[2]。

目前市场上销售的HSA 商品都是提取纯化人源血浆得到。

然而人血来源有限，外加污染较为严重，如艾滋病及肝炎的蔓延，威胁人血制品的安全性，由此得出通过遗传工程开发HAS势在必行[3]。

1 rHSA与pdHSA的比较1.1 结构方面比较经高度纯化后，rHSA与pdHSA在分子结构上是一致的，是一条66.5-kDa 单链、非糖基化多肽链，含17对二硫键和一个半胱氨酸位点，由585个氨基酸残基组成。

rHSA的三级结构呈心形，67%为α-螺旋，不含β-折叠，由三个结构域（I、Ⅱ和Ⅲ）组成，每个结构域又各包含两个亚结构域[4]。

Sadaharu等[5]分析了rHSA的三个结构域与药物的结合能力，发现I型区域与药物结合的能力最强，这是由其34位上游离的半胱氨酸残基所决定的。

1.2 功能方面比较作为pdHSA最可能的临床替代品rHSA，在生理功能上具有与pdHSA十分相似性。

用同位素125I标记rHSA与pdHSA注射大鼠体内静脉，发现二者在组织分布、尿液和粪便代谢、血液半衰期等方面都无显著差异[6]。

浅谈重组人血白蛋白的进展

浅谈重组人血白蛋白的进展

116生物技术世界 BIOTECHWORLD人血白蛋白(HSA)是最早诞生并进行大规模生产和应用的血液制品,在人血浆中含量最高,每100ml血浆含3500～5500mg,约占血浆总蛋白的60%,其分子量为66.5kDa,是由585个氨基酸组成的包含3个功能区和9个亚功能区的非糖基化单条肽链盘曲而成的球状分子,结构稳定性好,等电点为4.7-4.8,在体内由肝脏合成并分泌到血液循环系统中发挥作用,其主要生理功能是维持血液胶体渗透压和体液平衡、抗休克、运输内源性及外源性物质和解毒、营养供给等,其适应证有失血、创伤及烧伤等引起的休克、体外循环、成人呼吸窘迫综合征、颅压升高、治疗性血浆交换、肝硬化或肾病引起的腹水、水肿等[1]。

目前,临床上使用的HSA均是从人源血浆中分离纯化而获得,被称为pdHSA(Plasma-derived HSA),但是受限于人血浆来源有限且生产成本高以及存在人血浆携带病毒的风险,HSA在临床上不能得到广泛应用。

而重组人血白蛋白(rHSA)可以有效降低病毒污染风险并来源不受限,而且经研究证明与pdHSA在分子结构、理化性质、免疫学和生理功能等方面相似[2],因此用rHSA取代pdHSA成为一种发展趋势。

1 rHSA 的表达系统白蛋白是一组复杂的大分子蛋白质,必须经过正确的折叠、组装和翻译后修饰才能赋予其特定的结构和功能,因此在rHSA制品的生产中,表达系统的选择是一个非常重要的方面。

1.1 原核表达系统HSA基因最早就是在原核生物大肠杆菌(E.coli)中表达成功的,Lawn等[3]于1981年首次报道了rHSA的cDNA序列并首次构建了第一个表达rHSA的表达载体pHSAI,然后在E.coli中表达成功,表达量为细胞总蛋白的7%,但E.coli表达系统体外很难正确折叠和组装结构复杂的HSA,缺乏翻译后的修饰和加工,表达的蛋白多形成包涵体且纯化较难,所以未能得到有生物功能的蛋白,细菌细胞壁脂多糖还会造成热反应。

重组人血清白蛋白在生产中的问题_概述说明以及解释

重组人血清白蛋白在生产中的问题_概述说明以及解释

重组人血清白蛋白在生产中的问题概述说明以及解释1. 引言1.1 概述本文旨在探讨重组人血清白蛋白在生产过程中所面临的问题，并提出解决这些问题的相关技术和方法。

重组人血清白蛋白作为一种重要的生物制剂，广泛应用于医药领域，具有重要的临床价值。

然而，在生产过程中，由于其复杂性和蛋白质特性等因素，会遇到一系列挑战和难题，包括蛋白质纯化问题、质量控制问题等。

1.2 文章结构本文将从以下几个方面对重组人血清白蛋白的生产问题进行阐述：首先是生产过程概述，介绍重组人血清白蛋白的基本制备流程；然后针对其中存在的问题分别进行了详细描述和分析，包括蛋白质纯化问题及质量控制问题；接着提出了解决这些问题的具体技术改进与创新、质量管理与监控措施以及合规性与规范要求；最后进行总结并展望未来研究方向和可能解决方法。

希望通过对这些问题的深入研究，能够为重组人血清白蛋白生产提供理论指导和实践经验。

1.3 目的本文旨在全面了解和分析重组人血清白蛋白生产中所面临的问题，并探索相应的解决方案。

通过对重组人血清白蛋白生产过程中存在的问题进行深入剖析，旨在提高产品质量和生产效率。

同时，本文还将探讨合规性与规范要求，并展望未来可以采取的研究方向，为该领域今后的发展提供参考。

2. 重组人血清白蛋白的生产问题：2.1 生产过程概述：重组人血清白蛋白是一种由基因重组技术合成的人血清白蛋白，广泛应用于医药领域。

然而，在其生产过程中存在一些问题需要解决。

首先，生产过程需要大量投入，包括使用高成本的培养基和设备。

其次，由于生物合成过程中涉及到复杂的细胞培养和提取纯化步骤，导致生产时间长且容易受到外界环境条件的影响。

2.2 蛋白质纯化问题：在重组人血清白蛋白的生产中，最大的挑战之一是蛋白质纯化。

由于细胞培养液中含有大量其他蛋白质、碎片、杂质等物质，需要采用有效的纯化方法来获取高纯度的目标产品。

然而，传统的蛋白质纯化方法对规模化生产不够适用，并且存在一定损失率和浪费现象。

人血清白蛋白纯化技术研究进展

人血清白蛋白纯化技术研究进展
［!］
。目前， DEF 的市场需求量
很大， 国际市 场 年 需 求 量 达 #%% 吨， 我 国 需 求 量 也 已 达 2% 吨， 并将随着农村生活水平和医疗条件的改善不断增加。 每针剂量通常达 !%<， 而大多数蛋白 DEF 临床使用量大， 质药物如细胞因子、 激素的剂量仅为 ! 因此相对 < 或 B< 级， 其它蛋白质药物来说 DEF 的纯度要求更为严格。产品中即 使有害杂质为 %L%%!M ， 每针剂仍会有 %L!-< 的杂质被注入 人体， 可能造成极大的危害。DEF 的纯化技术在此是关键因 素。国内外已有许多科研机构致力于此方面的研究， 并将其 进行了大幅度改进。本文将对 DEF 纯化技术的进展及发展 趋势进行综合分析。
!" 卷 # 期 $%%$ 年 !! 月
生 物 工 程 学 报 !"#$%&% ’()*$+, (- .#(/%0"$(,(12
&’() !" *’) # *’+,-.,/ $%%$
! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! !
人血清白蛋白纯化技术研究进展
路秀玲 苏志国"
（中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室， 北京 !%%%"%）
摘
要
本文综述了国内外关于血浆人血清白蛋白 （ CDEF） 和基因重组人血清白蛋白 （ /DEF） 分离纯化的进展和发
但近年来发展的离子交换色谱、 凝胶 展趋势。以冷乙醇沉淀为主的 CDEF 分离方法仍是目前多数工业采用的工艺， 过滤色谱、 亲和色谱等多种色谱分离技术具有自动化程度高、 生产周期短、 更符合 GHI 等特点， 正在逐步取代传统 的冷乙醇沉淀法。当前用基因工程技术表达的人血清白蛋白对分离纯化提出了新的挑战。为获得高纯度、 安全、 稳定的产品， 各种色谱分离技术得到更多的应用， 其中扩张床离子交换色谱可以省去离心、 过滤等传统固液分离操 作。尽管 /DEF 的纯化技术已有一定的发展， 但纯化过程仍需进一步优化以提高产品纯度及收率。 关键词 人血清白蛋白，纯化，重组人血清白蛋白，色谱 J"! 文献标识码 K 文章编号 !%%%03%#! （$%%$） %#0%2#!0%# 白的方法： 利用乙醇的低介电常数性质以及蛋白质在一定温 离子强度及浓度条件下在不同浓度乙醇中溶解度不 度、 CD、 同分离血浆蛋白质， 可以生产出多种血浆医用蛋白， 成为著 名的 K’@B 乙醇沉淀法。!N2! 年 *,O-7B 等人对此方法进行 可在同一过程中得 了改进， 将血浆在 $ P 1Q 进行沉淀分离， 到更多产物如血液第八因子、 血纤维蛋白原等， 成为目前广 泛使用的冷乙醇沉淀法。其它沉淀方法如： 硫酸铵、 利凡诺、 辛酸盐沉淀法， 也都获得应用。我国早期使用硫酸铵盐析法 生产 DEF， 但由于硫酸铵腐蚀性强， 生产过程繁琐， 所以后来 也采用冷乙醇沉淀法。冷乙醇沉淀法过程相对简单 （尽管设 备可能较为复杂） ， 生产白蛋白产量较高； 乙醇具有杀菌能 力， 可得到无热原的产品； 更重要的是冷乙醇沉淀法有助于

人血清白蛋白纯化技术研究进展

人血清白蛋白纯化技术研究进展

人血清白蛋白纯化技术研究进展人血清白蛋白（Human serum albumin，HSA）是一种重要的生物医学制剂和临床药物载体材料，已广泛应用于治疗领域。

为了获得高纯度的HSA，研究者们一直在不断探索和改进人血清白蛋白的纯化技术。

早期的HSA纯化技术主要依赖于血浆的分离和凝集法，如冷沉淀法、聚合物吸附法、直接提取法等。

然而，这些方法存在操作复杂、纯度低和净化效率低等问题。

随着生物技术和分离纯化技术的发展，越来越多的新技术被应用于HSA的纯化过程。

以下是一些研究进展的概述。

亲和层析技术是最常用的HSA纯化方法之一、亲和层析技术利用HSA 与特定配体的高亲和力进行结合，然后通过洗脱来分离HSA。

常用的配体有疏水性配体（如脂肪酸和硫醇）、金属离子配体（如硫氰酸盐和8-氨基喹啉）等。

该技术具有操作简单、纯度高和净化效率高的优点，但成本较高。

离子交换层析技术是另一种常用的HSA纯化方法。

离子交换层析技术利用HSA带有的负电性与正电性离子交换树脂之间产生静电吸附而实现分离纯化。

动态调整pH值和离子浓度可以控制吸附和洗脱过程。

该技术适用于大规模生产，但纯化效率相对较低。

凝胶过滤层析技术是一种基于颗粒大小分离的技术。

这种技术通过选择性排除比HSA分子大的组分，实现纯化的目的。

凝胶过滤层析技术简单易行，可用于样品的初步纯化和浓缩。

另外，有学者探索了大孔树脂吸附和反应表面吸附等技术在HSA纯化中的应用。

此外，高效液相色谱、超滤、超声波辅助技术和基于蓝藻细胞表面展示技术等新技术也被尝试用于HSA的纯化过程。

总的来说，人血清白蛋白的纯化技术一直在不断发展和改进。

上述提到的技术只是其中的一部分，随着科学技术的进步和对HSA纯化需求的日益增长，我们可以预见将会有更多新的技术被应用于HSA的纯化过程，从而推动临床应用中HSA的质量和效果不断提高。

重组人血清白蛋白在结构生物学方面的研究进展

重组人血清白蛋白在结构生物学方面的研究进展
１ ． １ ． ３ 其他 作用 ： 血浆 中 Ｈ Ｓ Ａ含量 高 ． 且亲水 性大 ， 可对血 浆中含量较低的球蛋 白起到胶体 保护作用 。另外 ， Ｈ Ｓ Ａ也是
一
这些原因不但导致世界范围 内 Ｈ Ｓ Ａ注射 液的短缺 ，而且还
限制了其应用 ＿ 】 － ３ ］ 。
随着 基 因工 程技 术 的发 展 ，人 们 能够 制备 大 量重 组 （ ｒ ＨＳ Ａ） 代 替血源制剂 ， 在一定程度上缓解这 种紧张局 面 ， 也 是未来 发展 的必然趋势。
脉端组织 间液重返血管的主要动力 ． 对于调节血管 内外 的水 分交换 ， 维持正常血容量具有重要作用。 Ｈ Ｓ Ａ减少 ， 会导致血
，
占血浆蛋 白总量 的 ６ ０ ％。 Ｈ Ｓ Ａ主要 由肝细胞合成 。 分泌进
入血液循环系统 ， 在人体代谢物和药物的转运 、 分布 、 代 谢中 发挥重要作用 。同时 。 ＨＳ Ａ对维持人正常血浆胶体渗透压和
内源性和外源性物质的运输 、 分 布与代谢 ， 比如脂肪酸、 氨基 酸、 激素 、 胆红素、 乙酰胆碱 、 药物、 染料 、 金属离子等。 ＨＳ Ａ与
２ ５ ％的 ＨＳ Ａ注射 液 １ ０ ０ ｍ ｌ 可在 ３ ０ ～ ６ ０ ｍｉ ｎ内，吸收 ３ ５ ０ ｍ ｌ
细胞间液 ， 扩充血容量约 ４ ５ ０ ｍｐ， ４ ａ ］ 。 １ ． ２ ． ２ 低蛋 白血症 的治疗 ：低蛋 白血症是一 种临床 常见症 状， 主要由慢性 消耗性疾病 、 营养不 良或药物 引起 。 目前 ， 低
一
１ ． １ ． ２ 维持正常的血浆胶体渗透压和 ｐ Ｈ：人正常血浆胶体
渗透压 约为 ２ ５ ｍｍ Ｈ ｇ（ ３ － ３ ｋ Ｐ ａ ） ， 主要 由血浆蛋 白产生 。 其 中 ＨＳ Ａ相对分子质量较小 ， 含量 高（ 约 占血浆 蛋白的 ６ ０ ％） 而成 为产生血浆胶体渗透压 的主要成分 。 血浆胶体渗透压是使静

重组人血清白蛋白的研究进展_满初日嘎

重组人血清白蛋白的研究进展_满初日嘎

第26卷　第4期2009年　8月 生物医学工程学杂志Journal of Biomedical EngineeringVol.26　No.4August　2009重组人血清白蛋白的研究进展＊满初日嘎1　张英霞2Δ　综述　张　云3　审校1(海南大学农学院,海口570228)2(海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室海南省热带水生生物技术重点实验室,海口570228)3(中国科学院昆明动物研究所,昆明650223) 摘要　人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)是现代医学中一种重要的临床生物制品,主要用于维持血浆胶体渗透压及作为血浆容量扩充剂,广泛应用于出血性休克、烧伤、癌症、白细胞增多症、白蛋白过少症等。

H SA 主要靠收集人的血液分级过滤获得,有可能被病毒、致病蛋白粒子等污染。

目前人们利用生物工程技术表达重组人血清白蛋白(Recombinant HSA,rH SA),其结构和功能与血浆来源的血清白蛋白(P lasma derived HSA,pdHSA)相似。

预临床和临床试验已证明r HSA可安全地应用于多种疾病治疗。

关键词　重组人血清白蛋白　功能　临床中图分类号　Q512.1 文献标识码　A 文章编号　1001-5155(2009)04-0900-04Progresses in Recombinant Hu man Serum AlbuminManchu Riga1　Zhang Yingxia2　Zhang Yun31(The College o f Li fe S cience and Ag ricultu re,Ha inan University,H aikou570228,Ch ina) 2(K ey Labor ator y o f Trop ic B iolog ical Res our ces,Ministr y o f Ed ucation,Hainan Key Laborator y o f Trop icalH ydr obio logy Tech no logy,Ocean C o llege,Hainan University,Ha ikou570228,China)3(Kunming Institute o f Zoolog y,The Ch inese Academy of Sciences,K unming650223,China) Abstract　Human se rum albumin(HSA)is an impo rtant bio log ical pro duct in clinical pharmacy practice a t pres-ent.I ts main clinical use is in maintaining co llo id osmo tic pr essure and increasing circulating plasma v olume so as to cure hemo rrhagic sho ck,burn,cancer,hy percy to sis,hypoalbuminosis,etc.HSA is iso lated by f ractionating human plasma,w hich entails po ssible co ntamina tion by viruse s o r prions.Recombinant human ser um albumin(rH SA)has been successfully pro duced by biological eng ineering.T he structural and functio na l proper ties of r HSA are similar to tho se of plasma de rived human se rum albumin(pdHSA).P reclinical and clinical trials have confir med the safety and efficacy of using this r HSA preparation in the treatment of certain disease s.Key words　Recombinant human se rum albumin(r HSA) F unctio n Clinic1　引　言血清白蛋白是脊椎动物血浆中含量最丰富,且极易纯化的蛋白质,因而是血浆蛋白中研究最早、最清楚的组分。

重组人血清白蛋白的药学应用研究进展

重组人血清白蛋白的药学应用研究进展
重组人血清白蛋白( recombinant human serum a-l bumin, rHSA) 广泛用于血浆容量扩充剂。因其具有 无酶活性且无免疫原性等特点, 还可作为赋形剂和 稳定剂, 用于各种药物制剂及无血清细胞培养基的 组分等。另外, 由于具有抗氧化性, rHSA 也 被用作
[ 接受日期] 2005- 09- 28
不同放射性同位素标记的白蛋白微球体还可用 作诊断试剂, 经静脉注射后能有效地检查血管完整 性及肺、肝、脾等器官是否存在血栓或肿瘤。放射 性同位素标记的白蛋白微球体也可用作指示剂, 显 示药 物 被 Kupffer 细 胞 吸 收 后 是 否 存 在 吞 噬 作 用[ 12] 。在许多例子诸如肿瘤治疗中, 放射性同位素 标记的 白蛋 白 微 球体 都 用 作诊 断 试 剂[ 13] 。由 于 99mT c 标记的 rHSA 具 有肺、肝和 心脏血 管成像 作 用, rHSA 微球体已用于闪烁扫描研究。
基于卟啉能与血清白蛋白结合的特性, 黄宇彬 等[ 11] 成功地将 FeP 整合至 rHSA 中, 结果表明 FeP 的整 合 并 未 影 响 rHSA 的 结 构 和 生 物 功 能。将 rHSA- FeP 与等体积人血相混合, 结果显示它们之间 有很好的相容性, 红细胞的均一形态未受影响。临 床前大鼠试验表明, 在与血色素和肌血球素相似的 生理条件下, rHSA-FeP 复合体还能可逆地结合释放 氧。37 e 时, rHSA-FeP 在肺和肌肉组织间运输氧的 效率为 22% , 而在相同条件下, 红细胞的运输效率 为 23% [ 11] 。
以白蛋白为基础的药物传输系统已取得很大发 展, 将化疗药物与大分子载体系统相连可以增强肿 瘤定位作用, 降低药物毒性并克服抗药性。增殖的 肿瘤细胞利用白蛋白和其他血浆蛋白作为氮源, 它 们通过液相内吞作用以比正常组织快得多的速率吸 收白蛋白。这个特性促使人们选择白蛋白作为药物 载体, 连接后的结合物具有与白蛋白相同的肿瘤定 位性质, 如肿瘤吸收率高, 肝脏吸收率低, 生物半衰 期长。

医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术

医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术

医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术随着科学技术的不断进步，医药工业也日新月异，植物源重组人血清白蛋白制备技术便是其中的一大突破。

本文将从不同角度深入探讨这一技术的原理、应用和未来发展方向，希望能给读者带来新的启发和思考。

1. 技术原理医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术是指利用植物细胞或植物组织作为宿主，通过基因工程技术将人类血清白蛋白基因导入植物细胞，并使其表达和分泌人类血清白蛋白。

这一技术的原理是通过转基因手段，使植物细胞拥有制备人类蛋白的能力，进而实现大规模的可控制备。

相比于传统的动物细胞培养技术，植物源重组技术具有成本低、易于扩大规模和生物安全性好等优势，因此备受关注。

2. 技术应用植物源重组人血清白蛋白制备技术在药物生产、临床治疗和疾病研究等领域具有广泛的应用前景。

在药物生产方面，医药级植物源重组人血清白蛋白可以用于制备各类治疗性蛋白药物，如免疫球蛋白、细胞因子等，满足临床治疗需求。

在临床治疗方面，植物源重组蛋白可以作为血液净化和替代性治疗的重要药物，并广泛应用于多种疾病的治疗中。

在疾病研究方面，该技术也为科学家提供了重要工具，帮助他们更好地理解疾病的发病机制和寻找治疗方法。

3. 技术未来发展方向随着生物技术的快速发展，医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术也面临着新的发展机遇和挑战。

未来，技术发展的方向主要包括提高制备效率、改善蛋白质表达质量和扩大适用范围等方面。

在提高制备效率方面，科学家将继续优化基因表达系统和生产工艺，以提高植物细胞的蛋白表达水平和产量。

在改善蛋白质表达质量方面，科学家将努力解决蛋白后翻译修饰、折叠和组装等关键环节的技术难题，以获得高质量的医药级蛋白制品。

扩大适用范围也是未来发展的重要方向，科学家将进一步探索新的植物宿主和蛋白制备技术，以满足不同医药需求。

个人观点医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术的发展为医药行业带来了前所未有的机遇和挑战。

作为一名生物技术工作者，我认为我们应该充分发挥技术优势，加强国际合作，不断完善技术体系，推动技术向更深层次发展，为人类健康事业作出更大的贡献。

重组人血清白蛋白的研发进展

重组人血清白蛋白的研发进展

人血清白蛋白被称为血液里的“黄金救命药”。

人血清白蛋白是从健康人的血液中提取的，可直接静脉注射到病人体内，临床上主要被用于以下适应症：（1）失血创伤、烧伤引起的休克；（2）晚期癌症患者的维持治疗；（3）脑水肿及损伤引起的颅压升高；（4）癌症、肝硬化及肾病引起的水肿或腹水；（5）低蛋白血症的防治；（6）新生儿高胆红素血症；（7）心肺分流术、烧伤或血液透析的辅助治疗、成人呼吸窘迫综合征，是临床急救的一种特殊药品。

在生物医药领域，人血清白蛋白不仅可以作为药物直接经静脉注射使用，而且还可以作为优良的药物载体，延长药物的体内半衰期，实现药物长效，也可以作为疫苗等生物制剂的稳定剂使用，或作为CHO等细胞的培养基使用。

人血清白蛋白市场竞争格局由于人血清白蛋白来源于血液制品，而在我国血液资源相对紧缺，所以人血清白蛋白的价格也比较昂贵。

据统计，2018年中国人血清白蛋白行业市场规模为238.44亿元，同比增长9.1%。

2019年国内人血清白蛋白批签发总量（以10g/支规格折算）为4731.08万支，同比增长0.6%，其中国产人血清白蛋白批签发量为1922.97万支（+0.9%）、进口人血白蛋2808.11万支（+0.3%）。

2019年年进口人血清白蛋白占比达59.35%。

2020年1-10月，人血白蛋白批签发总量为4884万支（以10g/支规格折算），同比增长18%。

其中，国产人血白蛋白批签发总量为1810万支（同比+4%），占比为37%；进口人血白蛋白批签发总量为3073万支（同比+28%），占比为63%。

图1. 我国人血清白蛋白批签发数据（万支）[1]2020年1-10月，在进口企业中，杰特贝林（CSL）、基立福（Grifols）、百特（Baxter）、奥克特珐玛（Octa-pharma）占据主要进口市场份额，分别为1137、660、656和566万支，同比增速分别为+6%、+51%、+12%和+100%。

2020年1-10月，共14家国产企业获批人血白蛋白。

重组蛋白质药物研究现状及进展

重组蛋白质药物研究现状及进展
重组蛋白质药物在临床应用方面已取得了显著成就，为多种威胁人类生命的重大疾病提供了有效的治疗手段。例如，胰岛素用于治疗糖尿病，促红细胞生成素用于肾衰竭的治疗，以及干扰素（IFN）在治疗肝炎中的应用。这些治疗性蛋白的成功应用，不仅证明了重组蛋白药物的临床价值，也展示了生物技术在现代医学中的重要地位。此外，重组蛋白药物的修饰技术，包括基因水平的生物学修饰和蛋白质水平的化学修饰，进一步提升了药物的治疗效果。这些修饰技术能ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ改善蛋白质药物的药代动力学性质，延长药物在体内的半衰期，提高药物的安全性和耐受性，降低免疫原性，从而减少药物与自身抗体的中和反应，降低药物通过免疫反应被清除的风险。总的来说，重组蛋白药物的临床应用研究不仅为重大疾病提供了有效的治疗手段，还通过不断的技术创新，优化了药物性质，提高了患者的生活质量。

重组人血清白蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达

重组人血清白蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达

重组人血清白蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达摘要人血清白蛋白是一种在医学上应用广泛，需求量大的蛋白质药物。

而目前血浆提取生产的方式难以满足市场的要求，用基因工程方法生产人血清白蛋白无疑具有巨大的商业价值。

由于巴斯德毕赤酵母表达系统自身的许多优点，使得其在表达外源蛋白中具有十分大的优势。

本文的工作是用巴斯德毕赤酵母（Pichia Pastoris）构建并筛选分泌重组人血清白蛋白(rHSA)基因工程高产菌株，并对其发酵纯化条件进行初步研究。

在构建高产人血清白蛋白的基因工程菌时，采用了分泌型表达质粒pPIC9K构建成质粒pPIC9K-hsa。

构建的质粒经线性化后电转化整合进入毕赤酵母GS115染色体AOX1基因中，通过MD/MM平板筛选出his+Mut s型菌株。

在此基础上，用G418平板筛选出高拷贝表达子。

BMGY/BMMY摇瓶培养对不同的拷贝子进行筛选，发现随着拷贝子的增加表达量增加。

其中菌株GS115-rHSA-8表达量最高。

免疫印迹检测所表达的rHSA具有免疫原性。

采用工业基础盐培养基，用摇瓶对发酵条件进行了实验研究。

结果表明，组氨酸的加入量为0.15g/L时，蛋白表达量增加57.1%；加入0.10%体积比油酸时，蛋白量可增加43.4%；甲醇浓度控制在0.5％体积比左右时可以获得高产量，甲醇的加量超过1%体积比时，会对蛋白的分泌表达产生抑制，在2%时已经比较明显；甲醇诱导时添加甘油时可以提高产量，但当甘油添加量达到0.2%体积比时甘油已产生抑制表达作用；诱导表达时硫酸铵浓度为7g/L时蛋白浓度最高，高于9g/L时已开始出现抑制表达作用；改变培养时发酵液的pH为7.0，诱导表达时添加 1.5%的YP(Yeast extract,5g/L; Peptone, 10g/L)均可以有效的控制rHSA的降解，而温度对蛋白的降解没有显著性影响。

另外，添加100μm的PMSF也对降解有较好的控制作用，但因为毒性原因其安全性值得评价。

重组人血清白蛋白的生产方法[发明专利]

重组人血清白蛋白的生产方法[发明专利]

[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公开说明书[11]公开号CN 1239103A[43]公开日1999年12月22日[21]申请号98102506.4[21]申请号98102506.4[22]申请日98.6.17[71]申请人上海海济生物工程有限公司地址200031上海市肇嘉浜路288号鼎新大楼20楼[72]发明人李绍极 陆德如[51]Int.CI 6C07K 14/765C12N 15/14C12N 15/65C12N 1/19//C1 2N1/19,C12R1:84权利要求书 2 页 说明书 27 页 附图 14 页[54]发明名称重组人血清白蛋白的生产方法[57]摘要本发明涉及以重组DNA技术生产人血清白蛋白的方法，特别是涉及合成的由酵母偏性密码子组成的并经过适当修饰的人血清白蛋白基因，携带所说的基因的重组表达载体和用所说的载体转化的酵母宿主细胞，以及由所说的酵母宿主，特别是甲基营养型酵母宿主以可分泌形式生产人血清白蛋白的方法。

98102506.4权 利 要 求 书第1/2页1．基本上由酵母偏性密码组成的，并经过适当修饰的合成的编码人血清白蛋白的核苷酸序列及其功能等同物。

2．根据权利要求1的核苷酸序列，其中对所说的修饰包括对编码人血清白蛋白的核苷酸序列的内含子剪接位点、非转录终止区的转录终止序列、长的重复序列、内部启动子序列及核糖体结合位点的修饰。

3．根据权利要求1的核苷酸序列，其中所说的编码人血清白蛋白的核苷酸序列是分别合成三组各8个核苷酸链，然后再以基于聚合酶链反应的合成技术拼接成三个核苷酸片段，再经克隆和纠正个别碱基错误后彼此串联而得到的。

4．根据权利要求1的核苷酸序列，其中对所说的人血清白蛋白编码序列具有如图SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

5．包含根据权利要求1至4中任何一项的编码人血清白蛋白的核苷酸序列的重组表达载体。

6．根据权利要求5的重组表达载体，其中包括一个或多个由(1)甲基营养酵母之甲醇反应性基因的启动子区域，(2)编码啤酒酵母α交配因子(A M F)前原序列和编码H S A的核苷酸序列，(3)在甲基营养型酵母中有功能活性的转录终止子的，以及(4)至少一个可选择标志基因和细菌复制原点组成的表达盒。

重组人血白蛋白工业应用研究进展

重组人血白蛋白工业应用研究进展

重组人血白蛋白工业应用研究进展
王宗太;马宁宁
【期刊名称】《中国当代医药》
【年(卷),期】2017(024)019
【摘要】人血清白蛋白(HAS)在人血浆中的含量最为丰富,是蛋白质的一种,在血浆总蛋白中所占约60％的比重,生理功能不仅重要,而且较多,同时其也是制药工业中最为重要的一种原辅助料.当前市场中销售的HSA大部分为提取与人血浆,但是血液的隐藏风险较大,这就使得基因重组人血清蛋白(rHSA)成为HSA的首选替代品.本文重点介绍了重组人血清白蛋白在工业生产上应用的研究进展.
【总页数】4页(P11-14)
【作者】王宗太;马宁宁
【作者单位】沈阳药科大学,辽宁沈阳110016;华北制药股份有限公司生物技术分公司,河北石家庄056215;沈阳药科大学,辽宁沈阳110016
【正文语种】中文
【中图分类】R977.6
【相关文献】
1.重组人血白蛋白临床研究进展 [J], 黄顺军;李梅彦
2.重组人血白蛋白的研究进展 [J], 温中华;朱海;戴小宇;张晓冬
3.疏水色谱分离在重组人血白蛋白分离纯化中的应用研究 [J], 崔斌;张嵘
4.重组人血白蛋白在哺乳动物细胞培养中的应用 [J], 张悦
5.新型人血白蛋白分离介质吸附性能及重组人血白蛋白分离 [J], 葛程童;褚文宁;姚善泾;林东强
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

重组人血清白蛋白的药学应用研究进展

重组人血清白蛋白的药学应用研究进展

重组人血清白蛋白的药学应用研究进展
殷艺伟;陈建华
【期刊名称】《药学进展》
【年(卷),期】2006(30)2
【摘要】综述了重组人血清白蛋白的性质、结构和功能,及常用表达系统.重点介绍了重组人血清白蛋白在药学上的应用.人血清白蛋白是人血浆中最丰富的蛋白质,具有许多重要的生理特性,用途广泛.
【总页数】5页(P70-74)
【作者】殷艺伟;陈建华
【作者单位】中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009
【正文语种】中文
【中图分类】Q512.1;R973.5
【相关文献】
1.具创新分子结构的更优长效性重组人血清白蛋白/促红素融合蛋白的表达、制备和特性研究 [J], 富岩;杨小楠;魏开华;富俞淞;云文琦;郑博崴;刘丹;于在林
2.重组人血清白蛋白在紫花苜蓿中的转基因表达 [J], 陈林涛;韦双双;黄永林;吴昊;郭子怡;陈银华;王大勇
3.一种转基因猪血中重组人血清白蛋白分离纯化新方法 [J], 余谦;王勇;钱小红;秦伟捷;张普民;张养军
4.重组人血清白蛋白与干扰素α-2b融合蛋白中聚乙二醇1500残余量测定方法研
究 [J], 张娜; 杜莹莹; 李月; 常早荣; 薛冲; 刘志敏; 任飞
5.重组人血清白蛋白-硫氧还蛋白融合蛋白对流感病毒所致急性肺损伤小鼠的保护作用 [J], 付南燕; 徐娟; 韩晓群
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

* 国家自然科学基金 资助项目 ( 30700128) ; 海南 省自然 科学基 金资助项目 ( 80623) 通讯作者。E mail: yingx iaz hang@ hotm ail. com
第4期
满初日嗄等。
重组人血清白蛋白的研究进展
901
许多病理状态都导致血容量减少, 它是病人死 亡的主要原因。血容量的恢复可以有效地避免组织 缺血及由此导致的多器官损伤。 H SA 增加了血液 的胶体渗透压以阻止液流从血管内溢出到血管外, 从而增加血容量。高浓度血清白蛋白的渗透压还可 以减轻组织水肿。因 此维持血浆的 胶体渗透 压是 H SA 直接保护重症病人的机制之一。 2. 2 维持血清白蛋白的水平及蛋白质营养 健康人血液中 H SA 的含量为 35~ 50 g/ L , 主 要由肝脏合成。肝功能损伤、 营养不良、 肾脏排泻过 多以及恶病质等重症病人 常伴随 H SA 减少 , 因此 它也成为检测肝肾功能、 营养不良、 癌症晚期等严重 病症的一个非特异性的指标。研究表明, 血清白蛋 白含量过低, 急性病例的康复率也较低。重症病人 中, H SA 每减少 10 g/ L , 病人的死亡率升高 37% , 当其含量低于 2 g / L 时 , 死亡率接近 100% 。临床 上 H SA 作 为非治 疗性药 物广 泛用 于许 多重症 病 人, 以维持血液中 H SA 的含量 , 减少死亡率。 2. 3 作为转运分子 由于血清白蛋白能与许多化合物结合, 这些物
2
HSA 在临床中的应用
血清白蛋白是血液系统的重要组分, 具有结合、
运输内源性及外源性物质 , 维持血液胶体渗透压, 清 除自由基, 抑制血小板的功能 , 抗凝血, 及影响动脉 血管的渗透性等生理功能。 H SA 在现代医学中是 一种重要的临床生物制品, 主要作为血浆容量扩充 剂广泛应用于出血性休克、 烧伤、 癌症、 红白细胞增 多症、 白蛋白过少症等。 2. 1 维持胶体渗透压 , 增加血容量
[ 2]
加。但目前临床上使用的 H SA 主要靠收集人的血 液分级过滤获得。由于人血浆来源有限, 价格昂贵, 最主要的是有可能携带血液传染疾病 , 如肝炎、 H IV 等弊端 , 而重组人血清白蛋白 ( Recom binant H SA, r H SA) 具有不含动物源性、 人源性病毒以及其它物 质污染的特性, 因此国际上许多实验室及公司陆续 通过基因工程 手段研究开发 H SA, H SA 基因已被 引入细菌、 真菌、 植物及动物体中进行体外表达。目 前研究最多的是酵母表达系统, 其表达的 rH SA 已 进行临床试验。 3 . 1 原核表达系统 H SA 最初在大肠杆菌中 ( Escher ichi a. coli ) 表 达成功 。表达的重组蛋白为 H SA 前体 , 含有 585 个氨基酸及 24 个氨基酸的前导肽, 并在细胞内形成 包涵体。rH SA 在其中的表达量为细胞蛋白的 7% , 但由于 H SA 含有大量的二硫键, 使大肠杆菌表达的 蛋白难以正确折叠, 未得到有生物功能的重组蛋白。 随后用枯草杆菌为宿主菌进行 H SA 的表达 , 得到的 r H SA 不能穿过细胞壁, 但可将信号肽切除 , 且表达 量越高信号肽的切除率就越低
摘要
人血清白蛋白 ( H uman serum albumin, H SA ) 是现代医学中一种重要的临床生物制品 , 主要用于维持血
浆胶体渗透压及作为血浆容 量扩充剂 , 广泛应用于出血性 休克、 烧伤、 癌症、 白细胞增多 症、 白蛋白 过少症等。 H SA 主要靠收集人的血液分级过滤获得 , 有可能被病 毒、 致病蛋白粒子等污染。目前人们利用生物工程技术表 达重组人 血清白蛋白 ( Recombinant HSA , rH SA) , 其结构和功 能与血 浆来源 的血清 白蛋白 ( P lasma derived H SA , pdH SA ) 相似。预临床和临床试验已证明 r HSA 可安全地应用于多种疾病治疗。 关键词 重组人血清白蛋白 Q512. 1 功能 临床 A 文章编号 1001 5155( 2009) 04 0900 04 中图分类号 文献标识码
Abstract
Human ser um albumin ( HSA ) is an impor tant bio log ical pro duct in clinical pharmacy practice at pres
ent. It s main clinical use is in maintaining co llo id osmotic pr essure and increasing circulating plasma v olume so as to cure hemor rhag ic sho ck, burn, cancer , hypercyto sis, hypoalbuminosis, etc. H SA is iso lated by fr act ionating human plasma, w hich entails possible co ntamination by viruses o r prions. Recombinant human ser um albumin ( rH SA) has been successfully pro duced by biolog ical eng ineering . T he st ruct ur al and functio na l pr operties of r HSA are similar to tho se of plasma der ived human ser um albumin ( pdH SA ) . P reclinical and clinical t rials have confir med the safety and eff icacy of using this r HSA preparation in the t reatment of certain diseases. Key words Recombinant human ser um albumin ( rH SA) F unction Clinic
第 26 卷 第 4 期 2009 年 8 月
生物医学工程学杂志 Journal of Biomedical Engineering
Vol. 26 August
No. 4 2009
重组人血清白蛋白的研究进展*
满初日嘎
1
张英霞
2
综述
张
云
3
审校
1 ( 海南大学 农 学院 , 海口 570228) 2 ( 海南大学 海洋学院 热带生物资源教育部重点实验室 海南省热带水生生物技术重点实验室 , 海口 570228) 3 ( 中国科学院 昆明动物研究所 , 昆明 650223)
。H SA 分子量较
大 , 在原核生物中表达量不高, 分泌效果不够理想, 许多研究者转而研究 H SA 在真核细胞中的表达。 3. 2 酵母表达系统 随着利用基因 重组表达 外源蛋 白质技术 的发 展 , 酵母作为单细胞低等生物, 它既具有与原核生物 相似的易于培养、 繁殖快、 便于基因 工程操作 等特 性 , 同时又具有真核生物的蛋白质翻译后加工的功 能 , 有适于真核生物基因产物正确折叠的细胞内环 境和糖基化加工系统 , 并能将外源蛋白质分泌到培 养液中 , 利于纯化 , 因此逐渐取代大肠杆菌生产外源 蛋白。在研究 rH SA 过程中, 人们利用了多种酵母 宿主细胞, 如酿酒酵母 ( S acchar omy ces cerevi si ae ) 、 克鲁维 氏 酵母 ( K l uy v eromy ces lact is ) 、 汉逊 酵 母 ( H ansenul a p ol y mor p ha ) 、 毕赤酵母 ( P ichi a p asto r is ) 等 。 在酿酒酵母中, 采用 5 种不同信号肽表达天然 H SA 基因 , 最高表达量为 55 m g/ L , 但在这个表达 体系中 rH SA 难以分泌到细胞外, 且大都形成受体 细胞结合型的表达产物 , 另外采用融合信号肽的表 达量也不高 , 为 30~ 88 m g/ L [ 11] 。在汉逊酵母表达 系统中, 利用天然 H SA 信号肽, rH SA 被分泌到细 胞外, 且具有正确的折叠构象, 但表达量也不高 。 在毕赤酵母表达系统中, 重组蛋白的分泌量高、 表达稳定, 且已基本掌握其生长规律及大规模高密
1
引
言
结构域 ( A 和 B) , 其中结构域 源及外源物质相结合
[ 1]
A 和 ! A 能够与内
。
血清白蛋白是脊椎动物血浆中含量最丰富, 且 极易纯化的蛋白质, 因而是血浆蛋白中研究最早、 最 清楚的组分。人血清白 蛋白 ( H uman serum albu m in, H SA) 由 585 个氨基酸组成 , 单链 , 非糖基化, 分子量为 67 kD, 相对于其它血浆蛋白质, 分子量较 小。 H SA 氨基酸全序列由三个序列相似的 结构域组成( 螺旋 、 和 !) , 每个结构域又包含两个亚
[ 12] [内 , 通过水解 olmesar t an m edoxo mil 成 olmesart an( 抗高血压药物) , 来激 活其活性 [ 5] 。 H SA 的烯 醇酶 活性 也用 于临 床[ 6] 。 其烯醇酶活性能将二氢睾酮由酮式转变成烯醇式, 但这一活性在恶性肿瘤细胞中很低。这是由于血清 白蛋白在恶性肿瘤细胞含量少, 并形成多聚体或与 其它蛋白质结合的缘故。结合血清白蛋白在细胞内 的浓度及其烯醇酶活性 , 为诱导恶性肿瘤向良性分 化提供可能性[ 7] 。
[ 9] [ 8]
质有代谢产物, 如脂肪酸、 色氨 酸、 激素、 神经 递质 等, 因此白蛋白具有转运这些化合物的功能, 可以做 为多种药物及内源性代谢物的转运分子。用于重症 病人的多种药物 , 如丙酮苄羟香豆素、 地高辛及硫喷 妥钠等与 H SA 结合使用, 可 以部分降低药 物的毒 性。有报道, 带有负电荷 的 H SA 能抑制人 免疫缺 + 陷病 毒 ( H IV ) 对 CD 4 淋 巴 细胞 的 攻 击, 可 作 为 [ 3] H IV 感染阻断剂 。许多治疗癌症的药物, 为降低 其对正常细胞的毒性, 也常以 H SA 为载体。 Wolf f 等[ 4] 研究发现, 抗叶酸氨喋呤与 H SA 共价结合后, 其毒性降低了一倍, 并表现出更强的抗肿瘤活性。 2. 4 具有某些酶的活性 在临床上 , 利用 H SA 的酯酶活性激活 一些药