非抗-D所致新生儿Rh溶血病的实验室诊断与输血治疗的血液选择

母婴血型不合导致的新生儿溶血病实验室分析目的对母婴血型不合导致的新生儿溶血病实验室检测进行探讨，为新生儿溶血病（HDN）的临床诊断提供有力依据。

方法选取疑为HDN患儿不抗凝血液标本364例，均展开Rh、ABO血型鉴定、游离液抗体检测、直接抗人球蛋白试验与放散液抗体试验。

结果364例患儿HDN总阳性率60.16%，其中ABO-HDN 99.54%，非ABO-HDN 0.46%；ABO-HDN患儿中A型42.20%，B型57.80%。

在多种检测方法中，释放试验阳性检出率为100%，对新生儿溶血病具有最高敏感度，是对新生儿溶血病进行准确判定的有力依据。

结论母婴血型不合所致HDN中以ABO-HDN居多，尤其是母体血型为O型、新生儿血液B型最为常见，且释放试验是HDN最有效检测方法。

标签：新生儿溶血病；母婴血型不合；实验室分析新生儿溶血病（HDN）是因为母体内有和胎儿红细胞不相配血型抗体，这一抗体经胎盘进至胎儿血液循环中，导致胎儿、新生儿出现同种被动免疫性溶血疾病[1]。

HDN只在胎儿时期与新生儿早期发生，HDN血清学检测在这一疾病诊断中有较高临床价值。

为对母婴血型不合所致新生儿溶血病实验室检测进行分析，现选取该院于2010年5月—2012年收治疑为HDN患儿不抗凝血液标本364例，分别展开Rh、ABO血型鉴定、游离液抗体检测、直接抗人球蛋白试验与放散液抗体试验，现报道如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选取该院收治的疑为HDN患儿不抗凝血液标本364例，患儿出生时间为1 h～3 d，且均有高胆红素血症，母体血型为Rh阴性或ABO型。

在需要时将患儿母体血液样本送检。

1.2 方法在检测中所用试剂主要有抗-A（B）血清、单抗C3、单克隆IgG、普细胞、筛选细胞、抗-D与广谱抗人球蛋白试剂等，上述试剂均购自上海血液生物医药有限责任公司。

检测所用ABO标准红细胞由本院实验室自行制作。

对患儿血液标本展开血清学检测，必要时对其母体血液展开检测。

RhD阴性和其它稀有血型患者用血管理制度Rh(D)阴性和其它稀有血型患者用血管理制度1.一般情况：择期手术或平诊Rh（D）阴性患者需要输血时，要求提前3天申请并向血站预约，尽可能输注Rh（D）阴性血。

2.紧急情况：患者为Rh（D）阴性，没有检测到抗-D，如需紧急输血抢救生命，又无同型血时，应本着抢救生命第一的原则，先输Rh（D）阳性血抢救。

同时应向患者家属说明征得同意并在输血同意书上签字确认。

3.自身输血：Rh（D）阴性患者如符合自身输血条件，根据需要采集自身血备用。

XXX（D）阴性育龄妇女及女童输血时，尽可能使用Rh（D）阴性血液。

5.血小板输注：尽管血小板表面无D抗原，但血小板制品中有一定量的红细胞（可使患者致敏），故Rh（D）阴性育龄期的女性患者（包括女童）应输注Rh（D）阴性血小板。

Rh（D）阴性男性患者及不再生育的中老年妇女，只要体内无抗-D可输Rh（D）阳性血小板。

6.血浆及冷沉淀：Rh（D）阴性患者需要输注血浆及冷沉淀时，Rh（D）血型可忽略。

XXX（D）阴性冰冻红细胞：由于冰冻红细胞在使用前需要洗涤脱甘油，而且洗涤的速度很慢，故要提前预约。

XXX（D）阴性血液成分的费用是Rh（D）阳性成分的3-5倍，预约时应向经治医师和受血者或家属说明，预约血液须及时输用。

临床需要对患者说明的书面情况一、如无抗-D的Rh阴性患者输注RhD阳性血液时，必须书面向患者说明后果和并发症：1、不会出现溶血性输血反应；2、由于该类Rh阴性红细胞缺乏，不输Rh阳性红细胞危及生命，此时抢救生命是第一位的，输注Rh阳性红细胞是抢救生命的必要条件；3、输Rh阳性红细胞后可能会给以后用血带来困难（由于产生抗-D抗体而不能再输Rh阳性红细胞）；对于女性患者，可能会给妊娠带来不良后果，如妊娠的流产、早产或新生儿溶血等；4、患者因本身原发病不治而非输血治疗所能挽回时，不能借口归罪输血治疗不当。

患者或家属知情后签字认可。

新生儿溶血病血清学检查标准操作规程(一)检验目的检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG 抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗提供可靠的实验室依据。

(二)检验原理新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的新生儿黄疸。

新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A ／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD 血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步采取治疗手段提供可靠的依据。

(三)适用范围适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。

(四)设备性能参数参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Ortho BioVue离心机及各全自动血型／配血系统使用说明书。

(五)器材与试剂1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Or-tho BioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液枪、一次性移液枪头。

2.试剂DiaMed ABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO ／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。

(六)标本要求1.夫妇标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。

2.患儿标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。

分析Rh抗D血型检验是临床安全输血的关键【摘要】目的：分析Rh抗D血型检验是临床安全输血的关键。

方法：通过收取输血科的患者共计1375例作为研究对象，采用D（IgM）单克隆抗体对受检者的红细胞直接凝聚反应作为鉴定Rh血型标准，对Rh阴性血的抗体进行检测。

结果：通过对Rh血型系统不同抗原检出率进行比较，其中阳性中E抗原、C抗原、D抗原分别为20.0％、42.0％、38.0％，阴性中E抗原、C抗原、D抗原分别为16.0％、21.0％、0.5％。

结论：Rh抗D血型检验能够有效预防溶血性输血反应，并改善输血治疗的效果。

关键词：Rh抗D血型；检验；输血；关键临床输血科的主要任务即为进行血型鉴定，在保证生命、输血安全的同时，其具有重要作用[1]。

在血型配型中符合血液才能给受血者使用。

ABO型血、Rh血型的抗原性较强，在输注无法相合血液时，导致溶血性输血反应产生较为严重抗体。

在受血者输血前，进行血型鉴定具有重要价值。

本文通过对血型受检者进行对应研究，具体研究情况如下。

1.资料与方法1.1一般资料通过收取输血科的患者共计1375例作为研究对象，就诊时间为2022.1月-2023.1月间，患者年龄均值为56.24±13.20岁。

Rh阴性375例患者中男性患者210例、女性患者165例。

纳入标准：第一，患者进行输血、备血治疗。

第二，临床资料完整。

排除标准：第一，患者存在免疫系统疾病患者。

第二，患者资料不完整。

1.2方法采用D（IgM）单克隆抗体对受检者的红细胞直接凝聚反应作为鉴定Rh血型标准，其中凝聚者为阳性，不凝聚这为弱D型、阴性。

在选择不同批号IgG抗D血清对弱D型、阴性者进行检测，Rh抗D阴性受检者显示为阴性。

Rh阴性抗体检测：采用凝聚胺、盐水法以及抗人球蛋白法对Rh阴性血的抗体进行检测，利用自身细胞就筛选细胞进行抗体筛查，在放置专用定时、定速的离心机内，时间在9min。

在离心机完成后进行观察。

在凝聚胺以及抗人球蛋白法试验中出现了凝集、溶血情况。

输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程1、目的：规范血液免疫学产前检查操作，确保试验过程及结果的准确性与可靠性。

2、范围：本规程适用于实验室血液免疫学产前检查试验操作。

3、职责：经授权的血型实验室试验人员负责血液免疫学产前检查试验过程及报告的发出。

4、原理孕妇和丈夫ABO血型不合（O/A、O/B、O/AB、A/B、A/AB、B/A、B/AB）时，孕妇体内的IgG抗A（B）可能会引起新生儿溶血病的发生。

本试验通过检测孕妇血清中有无IgG性质的抗A（B）抗体及其效价（应用巯基试剂破坏IgM抗体，检测IgG抗体效价）即可预测ABO系HDN发生的可能性。

应用筛选红细胞可检测孕妇血清中是否存在不规则抗体，如果存在，应用谱细胞进行抗体鉴定，确定抗体的特异性，进一步检测非ABO系新生儿溶血病。

5、所需设备、材料或试剂：37℃恒温水浴箱、细胞洗涤离心机、抗-A抗-B血型定型试剂（单克隆抗体）、抗-D RH血型定型试剂（单克隆抗体）、凝聚胺介质试剂、抗人球蛋白试剂（抗-IgG、C3d）、（A、B、O）型标准红细胞悬液（2—5%）、商品化筛选细胞、谱细胞、2—ME试剂、12×75mm试管、塑料滴管。

6、检测环境条件：温度：18—25℃；湿度：30—70%7、标本要求7.1标本接收在接收标本时，应尽可能的了解、核对、记录患者的相关资料，包括受血者姓名、年龄、性别、临床诊断、输血史、用药史、妊娠史、标本编码等；7.2检验人员收到被检者产前检查申请按照申请单内容在试管上做标记(用记号笔在试管上标明被检者姓名、性别)，保留申请记录。

7.3按照要求进行血液采集。

将采好的血液沿试管壁注入已标识的抗凝试管中，反复颠倒混匀，放入2-8℃冰箱待用。

并填写《外来标本交接记录》及相关记录。

7.4标本的种类与数量：产前检查需送夫妇血样，血样均需抗凝（EDTA抗凝），女（母）5ml，男3ml。

7.5标本的保存与处理：完成所有试验内容后，要仔细核对实验结果，发出实验报告后，将实验所用的标本原始送检管存于2-8℃冰箱内至少7天以便进行查找和核对，之后交由单位相关部门统一处理。

World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2021 Vo1.21 No.28240投稿邮箱：zuixinyixue@·医学检验·探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病实验室检查及临床输血策略徐辉（新泰市妇幼保健计划生育服务中心，山东 泰安 271200）0　引言随着二胎政策的实施，多次妊娠史的高龄产妇、稀有血型产妇不断增多，母婴血型不合就会导致新生儿溶血病，现已成为新生儿科常见病。

不规则抗体指的是血清中除抗-A 、抗-B 外的血型抗体，常见的是母体内含有不规则抗体进而引发新生儿溶血病。

该病能够引起患儿贫血、肝脾大，甚至心衰，影响智力发育、运动功能。

所以，当发现新生儿溶血病时需要给予高度重视。

本文选择我院收治的HDN 的患儿为研究对象，对实验室检查和临床输血做进一步探究。

1　资料与方法1.1　一般资料。

研究时间：2019年8月至2020年8月；研究对象：我院收治的不规则抗体导致的新生儿溶血病患儿56例，回顾性分析HDN 实验室检查结果并提出临床输血策略。

其中，男21例，女35例。

Rh 系统50例，Rh 系统合并ABO 系统溶血3例，抗D 抗原遮蔽现象所致HDN1例。

其他抗体引起HDN 中MNS 血型系统、Diego 血型系统各1例。

1.2　方法。

选择KA-2200型免疫血清学离心机，恒温水浴箱，微柱凝胶仪离心机，微柱宁交易空气浴，微柱凝胶卡，抗-A 、-B 标准血清，谱细胞。

O 型筛选细胞、抗-M 单克隆抗体、抗-N 单克隆抗体，直接抗人球蛋白（抗-IgG+C3d ），抗-D （IgG/IgM 单克隆抗体）、谱细胞、A 细胞、B 细胞均为自制。

1.3　评价指标。

①不规则抗体所致HDN 抗体分布分析。

②Rh 系统合并ABO 系统溶血病的溶血3项实验结果分析。

③分析抗-M 导致的HDM 谱细胞检测结果。

1.4　数据处理。

根据观察指标统计相关数据，分别使用均数（Mean Value ）加减标准差（Standard Deviation ）和例（n ）、百分率（%）来表示计量资料和计数资料，将有效数据输入到SPSS 18.0软件中进行统计分析，进行T 值和χ2检验，当P<0.05时组间比较具有统计学意义。

新生儿溶血病的诊断与鉴别诊断发表时间：2019-08-09T13:52:14.520Z 来源：《中国蒙医药》2019年第4期作者：张如婧1 许梅花2 廖常希1[导读] 新生儿溶血病是指母胎血型不合而引起的胎儿或新生儿的免疫性溶血性疾病[1]。

张如婧1 许梅花2 廖常希11莆田学院附属医院福建省莆田市；2 莆田学院福建省莆田市新生儿溶血病是指母胎血型不合而引起的胎儿或新生儿的免疫性溶血性疾病[1]。

本文针对新生儿溶血病的发病机制、实验室相关诊断及新生儿黄疸鉴别诊断的现状作简要概述。

1.新生儿溶血病的发病机制在妊娠晚期，部分胎儿红细胞经胎盘进入母体循环，其红细胞表面抗原可刺激母体产生相应的IgG类免疫抗体，随后再次通过胎盘进入胎儿的血液循环，并与胎儿红细胞膜上的相应抗原结合，使红细胞发生凝集，于胎儿脾脏中被巨噬细胞破坏导致溶血[2]。

在人类30多个血型系统中，可引起新生儿溶血病的血型系统有ABO、RhD、Kidd、Duffry、Kell、MNS等血型系统，我国以ABO血型不合最常见，约占新生儿溶血病的85％，Rh血型不合约14.6％，MN血型不合约0.1％[3-5]。

ABO血型不合溶血病多见于O型孕产妇产非O型胎儿，第一胎即可发病，这是自然界的食物、植物、细菌中广泛存在类A、B抗原物质，孕妇在孕前接受过类A、B物质的刺激，机体针对该物质产生IgG抗A（B），因此在初次妊娠时体内的IgG抗A（B）即可通过胎盘导致胎儿或所产新生儿发生溶血病[6]。

与ABO血型系统不同的是，Rh血型系统中的Rh抗体必须由Rh抗原阳性红细胞免疫刺激后产生，因此第一胎不发病，往往从第二胎起发病。

由于D抗原在胎儿红细胞上表达较早且免疫原性强，Rh血型不合引起的新生儿溶血病症状较严重、预后差[7]。

新生儿溶血病的临床表现一般为贫血、黄疸、胎儿水肿、胆红素脑病、肝脾肿大，甚至死亡[8]，严重威胁新生儿的生命安全。

2.实验室检查2.1外周血常规检查外周血检查可见红细胞计数降低，血红蛋白降低（<145g/L），网织红细胞升高，研究表明RET%升高时提示患新生儿溶血病的概率大[9]。