生物人教版高中选修1 生物技术实践《课题二 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》知识点归纳
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《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学历案(第一课时)一、学习主题本课学习主题为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”。
我们将通过实验操作和理论学习,探究土壤中存在哪些能够分解尿素的细菌,并学习其分离与计数的科学方法。
二、学习目标1. 掌握细菌培养的基本原理和方法;2. 学会如何从土壤中分离出分解尿素的细菌;3. 理解选择性培养基在细菌分离中的作用;4. 学会用稀释涂布平板法进行细菌计数;5. 培养实验操作能力和科学探究精神。
三、评价任务1. 观察学生在实验操作过程中的规范性和准确性;2. 评价学生对细菌培养原理和方法的理解程度;3. 考察学生能否正确使用选择性培养基进行细菌的分离;4. 通过学生完成的实验报告和计数结果,评价其分析问题和解决问题的能力。
四、学习过程1. 导入新课通过介绍生活中的尿素分解现象,引出本课学习主题——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。
同时,简单介绍细菌培养的基本原理和方法。
2. 理论学习讲解细菌培养的基本原理、方法及注意事项,重点介绍选择性培养基的作用及如何利用其进行细菌的分离。
同时,介绍稀释涂布平板法进行细菌计数的原理和方法。
3. 实验操作学生进行实验操作,从土壤中分离出分解尿素的细菌。
教师在此过程中应进行巡回指导,及时纠正学生的错误操作。
4. 结果观察与讨论学生观察培养皿中的菌落生长情况,并讨论如何进行菌落的计数和记录。
教师引导学生分析实验结果,提出问题和解决方案。
五、检测与作业1. 完成实验报告:学生需根据实验过程和结果,撰写实验报告。
报告应包括实验目的、原理、步骤、结果分析和结论等部分。
2. 练习题:布置相关练习题,巩固学生对细菌培养方法和原理的理解。
3. 预习作业:预习下一课时的内容,为下一课时的学习做好准备。
六、学后反思1. 反思实验操作过程:学生在完成实验后,应反思自己在实验操作过程中的规范性和准确性,总结经验教训。
2. 分析实验结果:学生应分析实验结果与预期的差异,探讨可能的原因和改进措施。
专题1微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【学习目标】1.研究培养基对微生物的选择作用2.进行微生物数量的测定【重点难点】重点:对土壤的选取和选择培养基的配制难点:对分解尿素的细菌的计数【预习案】任务一、筛选菌株1.尿素只有被分解成之后,才能被植物吸收利用。
2.以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象,要达到的两个主要目的是:⑴;⑵。
3.PCR()是一种在体外将。
此项技术的自动化,要求使用耐高温的DNA聚合酶。
4.实验室中微生物的筛选应用的原理是:人为提供有利于生长的条件(包括等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
5.选择培养基是指。
任务二、统计菌落数目1.常用来统计样品中活菌数目的方法是。
即当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确,一般选择菌落数在的平板进行计数。
另外,也是测定微生物数量的常用方法。
2.一般来说,统计的菌落数往往比活菌的实际数目。
这是因为。
因此,统计结果一般用而不是活菌数来表示。
任务三、设置对照设置对照实验的主要目的是,提高实验结果的可信度。
任务四、实验设计1.实验设计包括的内容有:、、和,具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。
2.不同种类的微生物,往往需要不同的培养和培养。
在实验过程中,一般每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以。
任务五、操作提示1.无菌操作应注意什么问题?⑴⑵⑶2.在进行多组实验过程中,应注意做好标记,其目的是。
【探究案】探究点一分析教材P22两位同学测定细菌数量的做法,回答相关问题。
、探究点二解决教材P23关于设置对照的问题。
、探究点三土壤中分解尿素的细菌的分离实验的大致步骤是怎样的?实验操作过程中还要注意、哪些事项?【训练案】1.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( )A. CO和NB. 葡萄糖和NHC. CO和尿素D.葡萄糖和尿素22232.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )KHPO、NaHP0、MgS0·7H0、葡萄糖、尿素、琼脂、水.A222444KHPONaHP0MgS0·7H0、葡萄糖、琼脂、水B.、、242244KHPONaHP0MgS0·7H0、尿素、琼脂、水、.C、244422KHPONaHP0MgS0·7H0、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水;、.、D2224443.使用选择培养基的目的是()A. 培养细菌 C. 使需要的微生物大量繁殖B. 培养真菌 D. 表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别6的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每克样品中的菌落数是(涂4.某同学在稀释倍数为10布平板时所用稀释液的体积为0.1ml)( )89 C. 234 B.2.34×10 D. 23.4 A. 2.34 ×106培养基上筛选出大约150同学从对应10个菌落,而其他同学只选择5.在做分离分解尿素的细菌实验时,A出大约50个菌落。
人教版选修1生物技术实践《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计一、实验目的通过本实验,学生能够了解:1.微生物在土壤中的关键生态功能;2.了解微生物的分离、鉴定和计数方法;3.了解土壤中的氮循环和微生物对氮转化的影响。
二、实验原理1. 土壤微生物的分离和计数微生物是土壤生态系统中至关重要的组成部分。
在这个系统中,微生物分解有机物和参与氮物质的循环和固定。
对土壤中微生物的研究有助于我们更好地了解这个生态系统和功能变化。
分离微生物并计数的方法有很多种。
一般来说,有两种类型的菌落形态识别方法:传统菌落计数和PCR基因识别。
在本实验中,我们将使用传统方法来分离和计数土壤细菌。
这种方法包括将土壤样品用含有特定营养物的富营养琼脂板上进行培养、分离和计数。
2. 土壤中尿素的分解在全球土壤中,尿素是一种常见的提供有机氮的物质。
尿素的分解可以释放出有机氮和氨,同时产生植物所需的营养物质。
尿素分解的主要微生物是革兰氏阴性菌,包括细菌和放线菌。
在土壤中,不同的细菌发挥分解尿素的作用,这是我们需要进行分离和计数的对象。
三、实验材料和设备•富营养琼脂培养基(NA琼脂):10g/L peptone,5g/L sodium chloride,3g/L beef extract,15g/L agar •需加气时间:15分钟•土样:4个•无菌蒸馏水:每个班次需准备500mL•灭菌吸管:25支•离心管:10mL,4支•稀释液:9g/L氯化钠水溶液•蒸馏水淋滤过•榨汁器:1台•常温振荡器:1台•称量盘和纸巾:无菌•疏水性微量吸管(1μm~10μm)•柠檬酸氨基溶液:2.5g柠檬酸钠在100mL酸化浓度为2.2N的盐酸中加水到2L,过滤灭菌•均质器•洗手盆、手套、实验外套、口罩等实验室操作用品四、实验步骤实验控制组1.通过了解实验流程,掌握实验的环节,安全注意事项等,着装、洗手、佩戴外套、手套和口罩等实验用品;2.根据实验设计方案,出示需要的实验器材、试剂、土壤样品等,对实验材料和设备进行清点和准备;3.环绕准备好的物品清单进行讲解,让学生掌握一些用具、试剂、土壤样品等基本操作常识,以便进行后面的实验步骤。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(第一课时)一、教材分析本节作为菌种分离与提纯的入门课,教材从研究思路入手,根据生物与环境相适应的特点来说明筛选菌种的原理,也为学生配制选择培养基提供了思路。
至于选择培养基是否具有选择作用,教材通过设置对照来完善学生对于知识点的理解。
对于菌落数目的统计,可利用课题1中学习过的稀释涂布平板法,还可以利用酵母菌种群数量统计中涉及的显微镜直接计数法,两种方法各有千秋,学生可以对比选择,构建完整的知识框架。
二、教学目标1.知识与技能(1)利用选择培养基分离细菌;(2)运用相关技术解决生产生活中有关微生物技术的问题。
2.过程与方法分析研究思路的形成过程,找出共性和差异性。
3.情感、态度与价值观形成无菌不在的概念,养成讲究卫生的习惯。
三、教学重难点1.重点对土样的选取和选择培养基的配置。
2.难点对分解尿素的细菌的计数。
四、教学准备多媒体课件。
五、课时安排2课时。
六、教学过程【课程导入】在传统发酵技术应用专题,我们强调过,产品制作是否成功很大一部分取决于菌种是否纯净。
在大自然中,如何提取出我们所需要的菌种并加以纯化应用于生产实践,是我们本课时要学习的内容。
在本节,我们先从基础入手,掌握某种菌种提纯的思路以及细菌数目的统计方法,这些内容分也是我们下一课时提取分解尿素的细菌的基础知识。
首先,我们要做的就是思考:如何从土壤所含的众多微生物中分离到我们所需的微生物呢?【研究思路】(一)筛选菌株1.阅读课本,总结Taq DNA聚合酶发现的原理(1)DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术。
此项技术的自动化,要求使用耐高温的DNA聚合酶,这种酶要能忍受93℃左右的高温;(2)科学家从热泉中的水生耐高温细菌Taq中分离到耐高温的Taq DNA聚合酶,是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物;(3)案例启示:在寻找目的菌株时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找;2.由点到面,小结微生物的筛选原理(1)实验室筛选微生物的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长;(2)在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基;(3)配制选择培养基的依据:根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、教材分析“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”是选修1专题2《微生物的培养与应用》中的第2个课题,主要介绍了微生物培养过程中如何筛选菌株、统计菌落数目、设置对照、培养与观察并初步鉴定,既是课题1中所学基本技术在实践应用中的深化,同时也为课题3的学习打下基础。
学生通过学习,应当掌握微生物培养的一般方法,生产生活中关于微生物的分离、计数、培养等实际问题。
在教材中占有重要的地位。
二、学情分析在知识方面,学生已经掌握微生物实验室培养时所用到的技术——培养基的制备、接种技术和无菌技术,但对于微生物培养的生产生活方面的应用方面,尚缺乏一定的理论知识和操作技能。
在能力方面,高二学生思维敏捷,求知欲望强,思考问题有一定的深度,具备一定的自主学习及合作探究能力,但发现问题和创新意识还有待提高。
三、课题目标知识与能力目标通过实施“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”教学,让学生学会微生物的选择培养、分离、计数等技术的原理和方法,能够简述选择性培养基和鉴别性培养基的作用。
学科素养(1)基础知识(选择培养基对微生物的选择作用;微生物数量的测定);(2)基本技能(通过分析研究思路的形成过程,提高实验设计的能力。
通过对实验结果的分析,培养推理和计算能力);(3)基本思想(对生产生活中的尿素的介绍,认同“科学、技术、社会”息息相关);(4)基本活动经验(培养学生养他们保护、利用土壤微生物资源的意识)。
四、课题重点与难点1.课题重点:对土样的选取和选择培养基的配制。
2.课题难点:对分解尿素的细菌的计数。
五、教学策略采用课前和课中相结合的案例式教学策略。
课前,社团成员在老师的指导下,完成实验案例;课堂上,社团成员进行案例展示;老师引领学生以问题探讨的方式,拆分知识结构,细化知识内容,分析社团活动各个环节中存在的问题,以实践带动理论,深化理解,使得学生能够建立完整知识体系。
这种教学策略可以有效落实教学目标,破解理论脱离实践的教学困难,解决教师表述难与学生理解难之间教学矛盾。
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数尿素是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸收。
只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为他们能合成脲酶尿素最初是从人的尿液中发现的筛选菌株(1)实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)选择性培养基在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
(3)配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如,培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养能固氮的微生物;加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
统计菌落数目(1)测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此,统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
采用此方法的注意事项:1.一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数2.为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入TTC(在计数琼脂中加入适量的TTC% TTC 1ML加到100ML琼脂中),细菌菌落长成红颜色,对去除食品本底颗粒物干扰非常有意义).3.本法仅限于形成菌落的微生物设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
对照实验是指除了被测试的条件以外,其他条件都相同的实验,其作用是比照试验组,排除任何其他可能原因的干扰,证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验目的:1.学习固体培养基的制备方法2.学习土壤微生物的分离的方法3.学习细菌平板记数的方法实验意义:农业中所使用的化学配料绝大多数都能够被植物直接吸收,而尿素在土壤中则需要先经微生物的分解作用才能够被植物吸收。
通过对土壤中分解尿素的细菌的分离过程,可以让学生对微生物有更深课的了解和直观的认识,培养学生学习微生物学的初级实验技能,还可以引发学生学习微生物学的学习兴趣。
实验原理:将细菌接种到以尿素为唯一氮源的选择培养基上进行培养。
在这种情况下,其他微生物因缺少氮素而不能生长,只有分解尿素的微生物或者自生固氮微生物才能正常生长繁殖。
经稀释的单个细菌在固体培养基会形成菌落,菌落的数量可以反映稀释液中细菌的浓度。
实验过程:1.土样的采集在长期使用尿素的农田内采集3-8 cm深的土样200 g用信封或牛皮纸袋带回实验室。
2.培养基的制备培养基配方将上述前5种物质溶解后,用容量瓶定容至1000 mL。
然后倒入大搪瓷烧杯中,并向其中加入琼脂15.0 g,用电炉加热至琼脂完全溶解。
在培养基半冷却时分装至经高压灭菌的培养皿中。
冷却备用。
3. 样品的稀释取10 g土样容于90 g水中,充分摇匀,然后在此溶液中取菌液1 mL加无菌水9 mL中继续稀释。
以此方式继续将菌液稀释成一定浓度梯度。
将稀释10 000倍,100 000倍及1 000 000倍的菌液各取0.1 mL分别加入到事先加入培养基的培养皿中,轻轻摇动培养皿使菌液分布均匀。
每种浓度重复3次。
分别标记为104,1#;104,2#;104,3#;105,4#;105,5#;105,6#;106,7#;106,8#;106,9#;再取一个未接种的培养皿标记为:空白,10#。
4. 培养将1#--11#培养皿标记后室温培养48~72小时。
5. 记数记录各浓度(菌液稀释倍数)下每培养皿内菌落的数目,计算3个培养皿内的平均值,进而计算出每克土壤中所含的细菌的数目,填写下表。
土壤中分解尿素的细菌的分别与计数【课题目标】研究培育基对微生物的选择作用,进行微生物数目的测定。
【课题重难点】重点:对图样的选用和培育基的配置难点:微生物的计数【知识重点和教课方法】一、挑选菌株知识重点:微生物的选择培育,是指利用培育基的构成使适合生长的特定微生物获得较快生殖的技术,也称为微生物的“选择培育” 。
在有些微生物能够利用其余微生物的代谢产物生长生殖,所以能够在选择培育基上生长的微生物不必定是所需要的微生物,还需要进一步的考证。
教课方法:依据教材上的案例,剖析找寻菌株的重点,再依据书上的培育基配方,剖析选择培育的方法。
二、统计菌落数目知识重点:统计菌落数目的理论依照是:当样品的稀释度足够高时,培育基表面生长的一个菌落,根源于样品稀释液中的一一个活菌。
所以,适合的稀释度是成功地统计菌落数目的重点。
为了保证结果正确,往常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上,培育后再选择菌落数在 30~300 的平板进行计数。
教课方法:教材顶用楷体字编排的实例是为了说明设置重复组的重要性。
依据这个实例,启迪学生。
【教课过程】★课程导入上一节课我们学习了微生物的实验室培育方法,本课题和下一课题都是在此基础上对详细微生物进行分别和纯化培育。
卫生么想到研究分解尿素的微生物呢?我们看一看教材课题背景部分。
★课题背景1.尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。
尿素不可以直接被农作物汲取。
只有土壤中的细菌将尿素分解成氨以后才能被植物利用。
2.细菌能分解尿素的原由土壤中的细菌能分解尿素是因为它们能合成脲酶。
CO(NH2) 2 +H2O脲酶→2NH3+CO23.课题目的①从土壤中分别出能够分解尿素的细菌;②统计每克土壤样品中终究含有多少这样的细菌。
★研究思路1.挑选菌株2.统计菌落数目3.设置比较★挑选菌株1.实例:DNA多聚酶链式反响(PCR)是一种在体外将少许DNA大批复制的技术,此项技术要求使用耐高温( 930C)的 DNA聚合酶。
土壤中分解尿素的细菌的分别与计数教课目的:(一)知识与技术利用选择培育基分别细菌,运用有关技术解决生产生活中有关微生物的计数(二)过程与方法剖析研究思路的形成过程,找出共性和差别性(三)感情、态度与价值观形成无菌不在的观点,养成讲究卫生的习惯教课要点:对土样的选用和选择培育基的配制教课难点:对分解尿素的细菌的计数教课过程:(一)引入新课上节课我们学习了培育基的配置以及接种技术。
下边我们来学习怎样进行细菌的分别,获取所需要的目的微生物。
(二)进行新课来[1.基础知识1. 1 尿素是一种重要的氮肥,农作物不可以(能,不可以)直接汲取利用,而是第一经过土壤中的细菌将尿素分解为氨和 CO2,这是由于细菌能合成脲酶。
1. 2 科学家能从热泉中把耐热细菌挑选出来是由于热泉的高温条件裁减了绝大部分微生物,这样也合用于实验室中微生物的挑选,原理是人为供给有益于目的菌株生长的条件(包含营养、温度、 PH 等),同时克制或阻挡其余微生物生长。
评论:生物适应必定环境,环境对生物拥有选择作用。
所以经过配制选择培育基、控制培育条件等选择目的微生物。
〖思虑1〗在该培育基配方中,为微生物的生长供给碳源的是葡萄糖,供给氮源的的是尿素,琼脂的作用是凝结剂。
〖思虑2〗该培育基对微生物拥有(拥有,不拥有)选择作用。
假如拥有,其选择体制是只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培育基上生长。
1. 3 在统计菌落数目时,常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。
除此之外,显微镜直接计数也是测定微生物数目的常用方法。
【增补】显微镜直接计数是测定微生物的方法。
公式:察看到的红细胞均匀数∶察看到的细菌均匀数=红细胞含量∶细菌含量1. 4 采纳稀释涂布平板法统计菌落数目时,培育基表面生长的一个菌落,根源于样品稀释液中一个活菌。
经过统计平板上的菌落数,就能推断出样品中大概含有多少活菌。
为了保证结果正确,一般选择菌落数在30~ 300 的平板进行计数。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1.筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。
2.统计菌落数目(1)活菌计数法:常用稀释涂布平板法。
①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式:每克样品中的菌株数=(C ÷V )×M 。
C :代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V :代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M :代表稀释倍数。
③统计方法:为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取其平均值。
.1.实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。
3.测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。
稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目,但统计结果往往比活菌的实际数目低。
4.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,因此可用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。
5.鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,依据是否变红进行判断。
(2)显微镜直接计数法:在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。
3.设置对照(1)对照实验:指除了被测试的条件外,其他条件都相同的实验。
(2)主要目的:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
二、实验设计1.土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。
一、研究思路(阅读教材P21~23)1.筛选菌株微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长,该类培养基是选择培养基。
2.统计菌落数目(1)统计菌落数目的常用方法:稀释涂布平板法。
(2)统计依据:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数,能推测出样品中大约含多少活菌。
3.设置对照:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
二、实验设计(阅读教材P23~24)操作步骤:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
1.土壤取样一般要铲去表层土,因为绝大多数细菌分布于距地表约3~8_cm的土壤层。
23.微生物的培养与观察微生物的生长受温度的影响,菌落的数目和特征是观察的主要内容。
三、操作提示(阅读教材P25~26)1.无菌操作:取土样用的小铁铲和盛土样的信封都要进行灭菌。
称取土样要在火焰旁进行。
稀释样品要在火焰旁操作。
2.做标记:对平板和试管进行标记,尤其进行系列稀释时要按照稀释度递增的顺序将试管排列成行。
四、课题延伸(阅读教材P26)1.分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,使培养基的碱性增强。
2.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌,若指示剂变红,可确定该种细菌能够分解尿素。
[共研探究]1.自然界中目的菌株的筛选如图是美国黄石国家公园的一个热泉,从耐热细菌中分离到耐高温的Taq DNA聚合酶。
(1)实例:DNA多聚酶链式反应(PCR)是一种在体外将少量DNA大量复制的技术,此项技术要求使用耐高温(93 ℃左右)的DNA聚合酶。
(2)Taq细菌能从热泉中被筛选出来的原因:热泉温度70~80 ℃,淘汰了绝大多数微生物,而使耐热的Taq细菌被筛选出来。
(3)自然界中目的菌株的筛选依据:寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
人教版高二生物选修一《课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与评价》评课稿一、引言《课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与评价》是高二生物选修一中的一部分,主要通过实验研究来了解土壤中分解尿素的细菌的特征和评价方法。
本文档将对该课题的教学内容进行详细的介绍和分析,并提出适合学生的评价方法。
二、教学目标1.了解土壤中分解尿素的细菌的生物学特征和功能。
2.掌握土壤中分解尿素的细菌的分离方法和培养技术。
3.学会使用评价指标评价土壤中分解尿素的细菌数量和活性。
三、教学内容3.1 土壤中尿素分解的重要性土壤中尿素分解是氮循环中的一环,对农业生产具有重要意义。
教师可通过示意图和实例,让学生了解尿素分解的过程和在农田中的作用。
3.2 土壤中分解尿素的细菌特征教师应以简明的语言介绍细菌的特征,包括形态、结构、代谢途径等。
借助PPT和生动的例子,让学生对细菌有更直观的认识。
3.3 土壤中分解尿素的细菌分离与培养1.分离方法:介绍串珠霉状菌属培养方法等常用细菌分离方法,帮助学生了解如何从土壤样品中分离出目标细菌。
2.培养技术:详细介绍无菌技术、培养基配制和菌落计数等实验手段,让学生学会合理且安全地进行实验。
3.4 评价土壤中分解尿素的细菌数量和活性1.评价指标:介绍土壤中分解尿素细菌数量的评价指标,如菌落计数、测定蛋白质含量等。
2.评价方法:提供多种评价方法,如光学密度法、DNA提取与PCR扩增技术等,并指导学生选择适当的方法进行评价。
四、教学方法4.1 探究式教学为激发学生的主动性和创造性,引导学生通过实验和观察探究土壤中分解尿素的细菌。
教师可组织学生分组进行实验,让学生在实践中加深对知识的理解和应用。
4.2 讨论与交流为培养学生的思辨能力和合作精神,教师可组织学生进行小组讨论,并鼓励他们分享实验结果和心得体会。
同时,教师还应提供必要的指导和解答,确保学生获得正确的知识。
4.3 多媒体辅助教学教师可结合多媒体技术,利用图像、动画等形式来展示分解尿素的细菌特征和实验操作过程。
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数尿素是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸收。
只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为他们能合成脲酶
尿素最初是从人的尿液中发现的
筛选菌株
(1)实验室中微生物的筛选应用的原理
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)选择性培养基
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
(3)配制选择培养基的依据
根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如,培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养能固氮的微生物;加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
统计菌落数目
(1)测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微
镜直接计数。
(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此,统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
采用此方法的注意事项:1.一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数
2.为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入TTC(在计数琼脂中加入适量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML琼脂中),细菌菌落长成红颜色,对去除食品本底颗粒物干扰非常有意义).
3.本法仅限于形成菌落的微生物
设置对照
设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
对照实验是指除了被测试的条件以外,其他条件都相同的实验,其作用是比照试验组,排除任何其他可能原因的干扰,证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
实验设计
实验设计包括实验方案,所需仪器、材料、用具和药品,具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。
(1)土壤取样:同其他生物环境相比,土壤中的微生物,数量最大,种类最多。
在富含有机质的土壤表层,有更多的微生物生长。
从富含有机物、潮湿、pH≈7的土壤中取样。
铲去表层土,在距地表约3~8cm的土壤层取样。
(2)样品的稀释:样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目。
在实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板。
测定土壤中细菌的数量,一般选用104 105 106
测定放线菌的数量,一般选用103 104 105
测定真菌的数量,一般选用102 103 104
(3)微生物的培养与观察
不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。
细菌30~37℃ 1~2天
放线菌25~28℃ 5~7天霉菌25~28℃ 3~4天
每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致一楼菌落的数目。
一般来说,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度及培养时间),同种微生物表现出稳定的菌落特征。
形状、大小、隆起程度、颜色
疑难解答
(1)如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?
统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌落数的平均值
每克样品中的菌落数=(C/V)*M 其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数。