沙门氏菌检验原始记录
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XXX中心
沙门氏菌鉴定原始记录
报告单号:共页第页样品名称: 样品数量:
生产厂家:样品性状及包装:
样品来源:检测地点:
采或送样单位:采或送样人:
检验依据:编号或批号:
收样日期:检验日期:
检验项目:分离鉴定致病菌
一、危险性评估:
二、样品前处理
共页第页
血清学凝集试验:
菌种处理:
终末消毒:
四、使用设备、标准菌株和主要试剂:
1、使用设备
恒温培养箱:
恒温培养箱:
显微镜:
高压蒸汽灭菌器:
生物安全柜:
2、标准菌种来源、菌号及代数
沙门氏菌标准菌株:
3、主要试剂、批号及配制记录
SC增菌液:
TTB增菌液:
BS琼脂平板:
科玛嘉沙门氏显色培养基:
三糖铁琼脂:
沙门氏菌诊断血清:
生化鉴定管:
五、检验结果
检毕时间年月日检测者:复核者:
XXX中心
沙门氏菌鉴定原始记录
报告单号:共页第页样品名称: 样品数量:
样品性状及包装:检测地点:
收样日期:检验日期:
检验依据: GB4789.4-2010
检验项目:分离鉴定沙门氏菌
一、样品前处理
用0.45um滤膜过滤500ml水样,将滤膜无菌手续剪碎,分别取适量滤膜进行如下操作。
共页第页
血清学凝集试验:
盐水对照:
沙门氏菌A-F多价O血清:
O4:
O5:
H多价2:
Hf:
三、检验结果
检毕时间年月日检测者:复核者:。
第 页,共 页沙门氏菌检验原始记录表检测员: 校核人: 审核人:年 月 日 年 月 日 年 月 日样品编号检测类别环境条件温度: ℃ 湿度: %检测标准 医疗水污染物排放标准 医疗机构污水和污泥中沙门氏菌的检验方法 GB18466-2005 附录B设备名称设备编号增菌□ 污水 移取200mL 污水,用灭菌滤膜抽滤,用100mL 二倍浓度SF 增菌液将滤膜上的杂质洗脱到灭菌三角烧瓶中,摇匀。
37℃下培养12~24h□ 污泥 称取20g 污泥,加200mL 灭菌水,制成1:10混悬液,移取100mL 混悬液,加入到装有100mL 二倍浓度SF 增菌液的已灭菌三角烧瓶中,摇匀。
37℃下培养24h检验项目现象初判断分离 培养SS 培养基平板 37℃培养, h (24~48h )BS 培养基平板 37℃培养, h (24~48h )生化试验表1 在TSI 试验培养基内的反应结果TSI 培养基 37℃培养, h (18~24h )初步判断斜面 底层 产气 硫化氢注:K :产碱,A :产酸;+:阳性,—阴性:初步判断:可疑沙门氏菌或非沙门氏菌。
表2 生化反应初步鉴定表葡萄糖甘露醇 麦芽糖乳糖 蔗糖 靛基质 硫化氢 动力 尿素酶注:+阳性;-阴性;+/-阳性或阴性表3 补做试验(选做)侧金盏花醇水杨素 氰化钾结果判断注:+:阳性,-:阴性;结果判断:沙门氏菌或非沙门氏菌。
血清学鉴定盐水 ,多价抗O 型抗血清( A-F ) 。
结果 mL 样品中 沙门氏菌 备注。
德州市德城区疾病预防控制中心
检测原始记录之一
共页第页检品编号物态/颜色
检测项目沙门氏菌检验检测依据GB 4789.4-2010 食品微生物学检验沙门氏菌检验
设备名称隔水式电热恒温培养箱设备编号
1 检验方法:
1.1 前增菌:加225mL BPW增菌液均质混匀,℃培养小时,日时至日时。
1.2 增菌:轻轻摇动培养物,取1mL接种于10 mL TTB内,℃培养小时,日时至日时。
同时另取1mL接种于10mL SC内,℃培养小时,日时至日时。
1.3 分离:分别用接种环取增菌液1环划线接种BS琼脂平板一个,℃培养小时,日时至日时。
同时另取增菌液1环划线接种沙门氏菌显色培养基平板一个,℃培养小时,日时至日时。
观察菌落生长状况:可疑菌落生长。
1.4 初步生化:若有可疑菌落生长,挑取各选择性平板上2个以上典型或可疑菌落,接种三糖铁琼脂,赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板,于℃培养小时,日时至日时,也可同时接种蛋白胨水(供作靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN),于℃培养小时,日时至日时,必要时进行系统生化鉴定及血清学凝集。
初步生化结果:
葡萄糖乳糖蔗糖H2S 产气动力靛基质pH7.2尿素氰化钾赖氨酸脱羧酶
1.5系统生化鉴定:API 20E 生化条:
1.6 血清学凝集:
2 检验结果:根据GB 4789.4-2010食品微生物学检验沙门氏菌检验,在中沙门氏菌。
检测起止时间:年月日时至年月日时
检测人:审核人:
检测原始记录、检测报告存根、检测申请及受理单等合并归档保存。
DCQJY/JLBG 127。
检验原始记录(沙门氏菌)样品编号:疾控检[201 ] 号_______________________________________________检验依据:《年国家食品污染和有害因素风险工作手册》___________ 检验项目:沙门氏菌_________一、培养基及试剂:1、缓冲蛋白胨水(BPVV:生产厂家____________________ 批号 _________________2、四硫磺酸盐煌绿增菌液(TTB):生产厂家 ___________ 批号 _________________3、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC):生产厂家_____________ 批号 _________________4、沙门氏菌显色平板:生产厂家_________________ 配置日期 __________________5、BS平板:生产厂家 ___________________________ 配置日期 __________________6、三糖铁琼脂(TSI):生产厂家 _________________ 配置日期 _________________7、革兰氏染液:生产厂家___________________________ 批号 __________________&沙门氏菌属诊断血清:生产厂家______________________ 批号 __________________二、样品处理:无菌操作取检样g (mL加入盛有—BPW的无菌均质袋内,固体样品用拍击式均质器拍打1 mins 2min,制成1:10均匀稀释液备用。
液体样品不需均质,振荡混匀。
如需要,测定pH 值,用1mol/L无菌氢氧化钠或盐酸调pH至±。
冷冻产品,应在45C以下不超过15min或2Cs 5C不超过18h解冻。
三、实验记录:25g 检样+BPW225mL------------- BS显色培养基°C放入时间: 取出时间: C放入时间: 取出时间: C放入时间:取出时间:C放入时间:取出时间:C放入时间:取出时间:菌落形态观察1、菌落形态观察:SC转显色培养基:SC转BS平板:TTB转显色培养基:TTB转BS平板:2、鉴定:四、结果报告:沙门氏菌(/25 (g/mL)):检验者:复核者:。
大肠菌群、沙门氏菌GB/T23780检测原始记录1.样品名称:样品编号:洁净室编号:温度: ℃ 湿度: %2.检测标准:GB/T 23780-2009附录A A.23.检测仪器:恒温水浴锅KJ-E-WSW-025-18恒温培养箱□KJ-E-WSW-001-17 □KJ-E-WSW-002-17 □ KJ-E-WSW-044-18□KJ-E-WSW-023-17 □KJ-E-WSW-041-18 □ KJ-E-WSW-048-19□KJ-E-WSW-101-20□KJ-E-WSW-102-204.培养基:LST肉汤BPW肉汤TTB增菌液SC增菌液BS琼脂沙门显色琼脂XLD琼脂培养基5.检测项目及步骤:采样方法:□涂抹法将经过灭菌的方框(框内面积为50cm2)放在待测面上,用经过灭菌的镊子取无菌医用棉拭子,蘸上无菌生理盐水擦拭方框中间部分后,将棉球投人盛有50mL无菌生理盐水的三角瓶中送检。
贴纸法将无菌规格纸(5X5cm2,纸质要薄而软)用无菌生理盐水泡湿后,用经过灭菌的镊子取两张分别贴合于待测面后,取下放人盛有50mL无菌生理盐水的三角瓶中送检。
大肠菌群:检测步骤:采样生理盐水即为待测原液,选取2个~3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种3管LST肉汤,每管1 mL至与LST 肉汤中,36 ℃培养( )。
沙门氏菌:检测步骤:取取样生理盐水25mL到225mL BPW中于36℃培养( ~ );移取1mL前增菌培养液,转种于10mL TTB内,于42℃培养,同时另取1mL,转种于10mL SC内,于36℃培养( ~ );分别用接种环取增菌培养液1环,划线接种BS琼脂平板和沙显琼脂平板。
挑取平板上5个可疑菌落进行鉴定。
检测员/日期:复核人/日期:。
可编辑修改精选全文完整版消毒医疗器材微生物检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:□菌落总数□沙门氏菌检测依据:GB 15982-2012□β型溶血性链球菌□铜绿假单胞菌□金黄色葡萄球菌可整件放入无菌试管的,用洗脱液浸没后震荡30s以上,取洗脱液1.0ml接种平皿,将冷至40℃—45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml—20ml,36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数(CFU/件),必要时分离致病性微生物。
可用破坏性方法取样的,在100级超净工作台称取1g—10g样品,放入装有10ml采样液的试管内进行洗脱,取洗脱液1.0ml接种平皿,计数菌落数(CFU/件),必要时分离致病性微生物。
对不能用破坏性方法取样的医疗器材,在100级超净工作台,用浸有无菌生理盐水采样液的棉签在被检物体表面涂抹采样,被采表面<100cm²,取全部表面,被采表面≥100cm²,取100cm²,然后将除去手接触部分的棉签进行洗脱,取洗脱液 1.0ml接种平皿,将冷至40℃—45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml—20ml,36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数(CFU/cm²),必要时分离致病性微生物。
消毒后内镜:取清洗消毒后内镜,采用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂的洗脱液,从活检口注入冲洗内镜管路,并全量收集(可使用蠕动泵)送检。
将洗脱液充分混匀,取洗脱液1.0ml接种平皿,将冷至0℃—45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml—20ml,36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数(CFU/件)。
将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜(0.45μM)过滤浓缩,将滤膜接种于凝固的营养琼脂平板上(注意不要产生气泡),置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数.当滤膜法不可计数时:菌落总数(CFU/件)=m(CFU/平板)×50式中:m—两平行平板的平均菌落数。
公共场所消毒餐具微生物检验原始记录
样品编号: 检验开始时间: 年 月 日 样品名称: 检验完成时间: 年 月 日
检测项目: 大肠菌群 沙门氏菌 检验依据:GB 14934-2016 GB 4789.3(第一法).4-2016 一、大肠菌群:
纸片法:将已采样的纸片置37℃培养箱培养 小时,观察结果。
纸片保持蓝色不变,则报告为大肠菌群阴性;
纸片变黄,并在黄色背景上有红色斑点或片状红晕,则报告为大肠菌群阳性。
发酵法:将采集的样液/棉拭子/纸片置于10ml 双料LST 肉汤/10mlLST 肉汤内36±1℃培养24±2h ,观察倒管内
是否有气泡产生,对于24±2h 产气者,用接种环从产气的LST 肉汤中分别取培养物一环,移种到BGLB 管中,36±1℃培养48±2h 进行复发酵实验,观察产气情况,产气者记为大肠菌群阳性,对于未产气者,则继续培养48±2h ,观察,产气者进行复发酵实验,未产气者为大肠菌群阴性。
注:○+产气;-不产气;
二、沙门氏菌:
注:+生长或有可疑菌落;-未生长或无可疑菌落。
电子天平
编号: 使用状况 试验前: 试验后: 培养箱编号: 使用状况 试验前: 试验后: 检测人: 校核人: 审核人:。
培养基及试剂的验证原始记录
检测日期:至
检测项目:沙门菌培养基及试剂验证
检测方法名称及依据:GB 4789.4—2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》
仪器设备:恒温培养箱(编号JYSJY081)生物安全柜(编号JYSJY075)精密PH试纸仪器设备均已检定合格培养基:营养肉汤SC XLD TSI
试剂:蛋白胨水氰化钾赖氨酸硫化氢尿素微生物生化鉴定条诊断血清
一:样品处理:用接种针挑取一粒德尔卑沙门氏菌磁珠于营养肉汤中培养h,摇动培养过的样品混合物,分别移取1ml转种于5mlSC内培养h,然后按下表步骤操作。
二操作记录:
三结果报告:
检验者:复核者:。
________疾病预防控制中心沙门氏菌检验原始记录共 页 第 页检验者: 审核者: 年 月 日样品编号样品名称检验依据 GB 4789.4-2010检验环境温度 ℃ 湿度 %RH检验日期仪器设备名称、规格型号、精度、编号电子天平: YP-1002 0.01g 105 有计量合格标识,并在检定有效期内. 恒温培养箱: DH6000 0.1℃ 88 有计量合格标识,并在检定有效期内.样品复苏 __月__日_____ 无菌操作,将待检样品磁珠置于10mL 无菌营养肉汤中37℃温育24h 复苏。
前增菌 __月__日_____按无菌操作取待检肉汤1mL ,加入到10 mL BPW 增菌液中,充分混匀,于36±1℃培养4h 。
增菌__月__日_____取1mLBPW 增菌液,转种于10mLSC 增菌液中,于36±1℃培养18~24h 。
检验项目现象结果 分离 培养BS 琼脂平板要求 36±1℃,40h-48h培养 ___日____时至__日____时。
HE 琼脂 平板 要求 36±1℃,18h-24h 培养 ___日____时至__日____时。
____显色平板 要求 36±1℃,18h-24h培养___日____ 时至__日___时。
生化 试验三糖铁琼脂要求 36±1℃,18h-24h 培养 ___日____时至__日____时。
普通琼脂平板 要求 36±1℃,18h-24h 培养 ___日____时至___日____时。
赖氨酸脱羧酶试验 API20E 生化试剂盒 要求 36±1℃,18h-24h 编码 结果 培养___日___时至___日___时。
血清学鉴定实验结果 样品中 沙门氏菌备注。
食品中沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌检验记录样品编号: 第 页/共 页 样 品 名 称 样 品 批 号样 品 数 量 样 品 性 状包 装 情 形收 样 日 期 年 月 日 检 测 环 境 温度: ℃ ; 湿度(RH ): % 检 验 日 期 年 月 日 检 测 地 点 □净化室 □BSL-2完 成 日 期年 月 日检 验 项 目 □沙门氏菌 □志贺氏菌 □金黄色葡萄球菌检 测 依 据 □GB 4789.4-2010 □G B 4789.5-2012 □GB 4789.10-2010检 测 仪 器 □电子天平(型号:BSA2202S )□隔水式恒温培养箱(型号:GHP-9270)36℃□隔水式恒温培养箱(型号:GHP-9050)42℃ □厌氧罐□无菌均质器(型号:Scientz-04)中速 时间 □1分钟 □2分钟培 养 基 □BPW □TTB □SC □沙门显色琼脂 □BS 琼脂 □HE 琼脂 □XLD 琼脂 □TSI 琼脂□志贺氏菌肉汤 □MAC 琼脂 □API20E 生化鉴定试剂盒(法国梅里埃公司)□7.5%NaCl 肉汤 □金葡显色琼脂 □B-P 琼脂 □血平板 □血浆凝固酶试剂 (其余为北京路桥公司产品)样 品 制 备□固体和半固体样品: 无菌称取25g 样品放入盛有225ml 灭菌(BPW 、志贺氏菌肉汤、7.5%NaCl 肉汤)的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1mi n ~2min 。
□液体样品:无菌吸取25ml 样品于225ml 灭菌( BPW 、志贺氏菌肉汤、7.5%NaCl 肉汤)中,充分混匀。
□根据样品性质,用无菌4%或40%NaOH 调节样品匀液的pH 值在6.5~7.5之间步骤及结果: 1、沙门氏菌 前增菌/增菌(温度和时间)分离培养菌落形态生化试验选择性平板℃ h TSI API20E 结果 %BPW ℃,h : 日 时 分至 日 时 分二增菌 ℃ h : 日 时 分至日 时 分显色平板结果报告:□XLD □HE 标准菌株2、志贺氏菌增菌(温度和时间)分离培养菌落形态生化试验选择性平板 ℃ h TSI API20E 结果 % 志贺菌肉汤(厌氧培养)℃ h : 日 时 分至 日 时 分显色平板结果报告:□MA C □XLD标准菌株3、金黄色葡萄球菌增菌和分离培养菌落形态鉴定7.5%NaCl 肉汤 ℃,h : 日 时 分 至 日 时 分选择性平板 ℃h镜检 凝固酶试验B-P 平板血平板标准菌株结果报告:其它:检验者: 审核者: 年 月 日。