第一章无菌操作技术实践章末检测(B卷)(苏教版选修1)

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第1章无菌操作技术实践章末综合测评(时间：45分钟，分值:100分)一、选择题（共8小题,每小题5分,共40分)1．对无菌操作转接培养物的叙述中，正确的是（）①接种环在火焰上灼烧灭菌②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞③打开棉塞的试管口通过火焰④将已冷却的接种环伸入菌液，蘸取一环菌液转移到一装有无菌培养基的试管中⑤将试管口塞上棉塞⑥接种环进行灭菌A．①②④⑤⑥ B．①②③④⑤C．①②③④⑤⑥ D．①②③④【解析】在无菌操作转接培养物的过程中，刚开始应灼烧接种环进行灭菌，在操作过程中应在酒精灯火焰旁进行，转接完成后还应对接种环进行灭菌，以防止培养物扩散到环境中。

【答案】C2．在农田土壤的表层自生固氮菌较多。

将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（）①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦37 ℃恒温箱中培养⑧28～30 ℃温度下培养A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦【解析】自生固氮菌有固氮功能,因此培养基中不需要加氮素；细菌对抗生素敏感,因此，不能加抗生素；自生固氮菌是异养型的，应加葡萄糖;其生长繁殖的适宜温度是28～30 ℃。

苏教版高中生物选修一第一章无菌操作技术实践单元测试一、单选题1.下列关于刚果红染色法的说法中，正确的是（）A. 先培育微生物，再到场刚果红举行颜色反响，不需用氯化钠溶液洗去浮色B. 倒平板时就到场刚果红，可在培育皿中先到场1mlCR溶液后到场100ml培育基C. 纤维素分化菌菌落周围出现刚果红D. 倒平板时就到场刚果红，长期培育刚果红有可能被其他微生物分化形成透明圈2.下列关于植物组织培育的叙述，错误的是（）A. 培育基中增加蔗糖的目的是提供营养和调理渗透压B. 培育基中的生长素和细胞破裂素影响愈伤组织的生长和分化C. 离体器官或组织的细胞议决脱分化形成愈伤组织D. 联合株绿色着花植物不同部位的细胞经培育获得的愈伤组织基因型相同3.欲分散筛选出能排泄脂肪酶的细菌，应选择下列固体培育基（仅列出了碳氮源）中的（）A. 卵白胨、柠檬酸铁铵B. 植物油、牛肉膏C. 植物油、硫酸铵D. 葡萄糖、卵白胨4.下列有关微生物的叙述中正确的是（）A. 病毒的致病性是由衣壳决定的B. 微生物的繁殖方法都是二破裂C. 诱变育种可以抵达人工控制微生物代谢的目的D. 微生物的次级代谢产物是其自身生长繁殖所必需的5.下面与发酵工程有关的叙述中，不正确的是（）A. 发酵罐中必须通入无菌空气B. 不经处理排放的废弃培育液是一种混浊物C. 培育新菌种，可用于分化更多种类的有机混浊物D. 发酵工程在医药产业、食品产业和环境保护等方面均有普遍应用6.下列对月季花药培育的有关明白，错误的是()A. 质料的选择与培育基的组成影响花药培育的成功率B. 选择花药时最常用的要领是醋酸洋红法C. 幼小植株形成前不需要光照D. 培育形成的愈伤组织可连续在原培育基中分化形成植株7.对分化纤维素的微生物选择培育时，应将锥形瓶稳定在_____振荡培育一段时间，直到培育液变_ ___时为止．（）A. 桌子上红色B. 温箱里产生透明圈C. 窗台上清亮D. 摇床上混浊8.“分散泥土中以尿素为氮源的微生物”实验，配制LB全营养培育基的目的是（）A. 作为实验组，分散尿素分化菌B. 作为比较组，检测培育基灭菌是否彻底C. 作为比较组，查看尿素分化菌在含有酚红培育基上的菌落形态D. 作为比较，查看全营养条件下能生长的泥土微生物的种类和数目9.为从富含纤维素的泥土中分散获得纤维素分化菌的单菌落，某同砚设计了甲、乙两种培育基（成分见下表）．下列关于培育基甲和乙是否能用于分散和鉴别纤维素分化菌说法正确的是（）注：“+”表示有，“﹣”表示无．A. 培育基甲能，培育基乙不能B. 培育基甲不能，培育基乙能C. 培育基甲和乙都能D. 培育基甲和乙都不能10.接种和培育花药时应注意的事项全对的一组是( ) ①不损伤花药②彻底去除花丝③幼小植株形成后需要光照④花药开裂释放出的幼小植株会分别发育成单倍体，无需破裂A. ①②③B. ①②④C. ②③④D. ①③④11.下图表示利用划线分散法分散和纯化大肠杆菌的部分操纵步骤，下列相关叙述正确的是（）A. 步骤①倒平板操纵时，只需要在超净台中不需要在酒精灯火焰旁举行B. 步骤②③使用的工具是接种环，接种前需在明火上烧红后冷却C. 步骤④恒温培育箱培育后的终于说明整个历程中蘸取菌液4次D. 该要领使单菌落更简略破裂，但操纵纷乱些12.下列高中生物的实验中必须使用无菌水的是A. 将大肠杆菌培育液举行系列梯度稀释B. 毁坏鸡血细胞获得含有DNA的滤液C. 配制培育大肠杆菌的固体培育基D. 冲洗葡萄榨取制作果酒的葡萄汁二、填空题13.利用纤维素办理能源标题的要害，是高性能纤维素酶的获取．请完善实验方案，并回答相关标题．实验目的：比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性．实验原理：纤维素酶催化纤维素分化为葡萄糖，________ ，葡萄糖的生成量表示酶活性巨细．实验质料：三种微生物（A、B、C）培育物的纤维素酶提取液，提取液中酶卵白浓度相同．实验步骤：（1）取四支试管，分别编号．（2）在如表各列的一个适当位置，填写相应试剂的体积量，并按表内要求完成相关操纵．（3）将上述四支试管插进37℃的水浴中，保温1小时．（4）在上述四支试管中分别到场________ 试剂，摇匀后，举行滚水浴2分钟．（5）查看比较实验组的三支试管与比较组试管的颜色及其深浅．实验终于：剖析讨论：①上述终于表明：不同来源的纤维素酶，虽然酶卵白浓度相同，但活性不同．若不思虑酶的最适pH和最适温度的差异，其可能原因是________ ．②你以为上述三种微生物中，最具有应用开辟代价的是________ ．③从办理能源标题的角度，开辟这种纤维素酶的意义在于________ ．14.研究职员成功地从泥土中筛选到能产生纤维素酶的微生物．请就怎样从泥土中获得纤维素分化菌回答以下标题：（1）纤维素酶是一种复合酶，一般以为它至少包括三种组分，即________（2）若获得纯净的菌株，常采取________ 举行接种，此历程所用的接种工具是接种环，操纵时采取________ 灭菌的要领．（3）刚果红可以与纤维素等多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的________ 和葡萄糖产生这种反响．常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培育微生物，再到场刚果红举行颜色反响；第二种是在________ 时就到场刚果红．________ （填“第一种”或“第二种”）要理解使菌落之间产生混杂．（4）要是查看到产生________ 的菌落，说明可能获得了纤维素分化菌．为了确定是纤维素分化菌，还需要举行发酵产纤维素酶的实验．（5）如图为实验室培育和纯化菌种历程中的部分操纵步骤，下列说法错误的是________A．①②③步骤操纵时需要在酒精灯火焰旁举行B．步骤③中，每次划线前后都需对接种环举行灼烧处理C．步骤①中待倒入的培育基冷却后盖上培育皿的皿盖D．划线接种完成后，将图④平板颠倒后插进培育箱中培育．15.将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产．请剖析回答下列标题：（1）对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后，议决________ 酶相连形成重组质粒．为获得耐酸的醋酸菌，用________ 法接种于含高浓度醋酸的培育基举行筛选．将筛选________ 纯化的菌种用的要领长期保存．（2）图1表示温度尧乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响．①醋酸菌能将乙醇转变为________ ，再将其转变为醋酸．②研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为________ ℃，如温度过高，醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是________③酒精发酵后议决出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调理到________ 左右，才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是________ ．（3）为检测发酵历程中醋酸菌数量，将1mL发酵液稀释100倍后，分别取0.1mL稀释菌液均匀涂布在4个平板上曰经适当培育后，4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为________ 个/mL．三、解答题16.如图是某细菌纯化培育历程中划线接种的培育终于．回答标题：（1）在________（填图中编号）地区出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是________个细菌．据图剖析，在培育基上划线接种时，划线的顺序依次是________（用编号表示）．（2）如表是某微生物培育基成分．①若培育从泥土中分散出来的自生固氮菌，该培育基应增加________，去除________．②若要鉴别纤维素分化菌，可用________法，若要鉴别尿素分化菌，可在培育液中到场________．四、综合题17.回答下列有关微生物培育的标题．（1）为了观察某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并举行了细菌的分散等劳动．①该小组采取稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取多少灭菌后的空平板先行培育了一段时间，这样做的目的是________ ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培育后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为________ ．实验中的接种工具称为________ ．②该小组采取平板划线法分散水样中的细菌．操纵时，接种环议决________ 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是________ ．（2）为从富含纤维素的泥土中分散获得纤维素分化菌的单菌落，某同砚设计了甲、乙两种培育基（成分见下表：“+”表示有，“﹣”表示无）．（注：在含纤维素的培育基中到场刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成红色复合物．）据表鉴别，培育基甲________ （填“能”或“不能”）用于分散和鉴别纤维素分化菌，原因是________ ；培育基乙________ （填“能”或“不能”）用于分散和鉴别纤维素分化菌，原因是________ ．18.为获取可降解高盐度产业废水中有机物的耐盐菌，研究职员举行了如下实验：①制备含3%NaCl的固体培育基，以及含3%、5%和7%NaCl以高盐度产业废水中有机物为碳源的液体培育基；②将高盐度废水采取平板划线法接种于含3%Nacl的固体培育基，如图一．然后置于适宜条件下培育一段时间，查看形成的菌落特性；③将分散纯化后的菌株接种到试管固体斜面培育基上，适宜条件下培育适当时间，将该试管短期保藏待用；④取固体斜面上的菌株制成菌液，取等量菌液，分别到场到步骤①中制备的3组液体培育基中摇床培育35小时，定时取样统计活菌数目．测定终于如图二所示．回答下列标题：（1）配制培育基时，灭菌、增加NaCl溶液和调理pH的先后顺序是________．（2）步骤②平板划线操纵历程中，第一次划线前灼烧接种环的目的是防备杂菌混浊，第二次及之后的频频划线前灼烧接种环的目的是________．完成图一所示操纵，至少需要灼烧接种环________次．（3）步骤④中统计活菌数目用________法，该要领统计的活菌数________（填“大于”、“即是”或“小于”）实际数值．直接从静置的培育液中取样计数的做法是错误的，正确的操纵是________．若每种浓度设3个重复实验，每次统计活菌数目时需要从________个培育瓶中取样．（4）由图二可知，该耐盐菌最适合处理含________ （浓度）NaCl的废水．答案剖析部分一、单选题1.【答案】D【剖析】【解答】刚果红可以在菌落形成后到场，需要洗去浮色，A错误；可以将刚果红与培育基分别灭菌，按一定的比例将刚果红到场到培育基中，然后倒平板，B错误；刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分化后，红色复合物无法形成，C错误；到平板时就到场刚果红，长期培育刚果红有可能被其他微生物分化形成透明圈，D正确。

2019-2020学年高中生物第一章无菌操作技术实践单元检测苏教版选修1一、选择题(本题包括15小题，每小题3分，共45分)1.下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是( )A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源答案 C解析天然培养基是指用天然物质制成的培养基，但也需要加工；实验操作者的双手应消毒，不能灭菌；分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有机物(如葡萄糖)作为碳源。

2.微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质，并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。

下列有关微生物营养的说法，正确的是( )A.纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B.在纤维素分解菌生长的培养基中只需碳源、氮源、水、无机盐即可正常生长C.培养基中的营养物质浓度越高对微生物的生长越有利D.生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往不足答案 D解析纤维素分解菌是异养型微生物，其碳源为有机物，如纤维素等。

硝化细菌是自养型微生物，其碳源物质为CO2，因此A错误；纤维素分解菌的培养基中需加入维生素做生长因子，才能正常生长，因此B错误；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，因此C错误。

3.下列说法错误的是( )A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C.在统计菌落数目时，为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落答案 C解析样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目，土壤中各类微生物数量不同，含量最多的是细菌，大约占70%～90%，其次是放线菌，最少是真菌，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离；一般选择菌落数目在30～300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性；验证选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨固体培养基作为对照，若后者上的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛选作用。

【课堂新坐标】（教师用书）2013-2014学年高中生物第1章无茵操作技术实践综合检测苏教版选修1时间：45分钟满分：100分一、选择题(共12个小题，每题5分，共60分)1．(2013·淮安高二检测)生产实践中配制微生物发酵所需要的培养基时，一般遵循“经济节约”的原则。

如“以野(野生植物)代家(栽培植物)”、“以纤(秸秆)代糖(淀粉)”、“以氮(非蛋白氮)代朊(蛋白氮)”、“以烃代粮”等。

下列表述不正确的是( ) A．“以野代家”培养微生物时，需要加入更多的生长因子B．“以纤代糖”能为某些微生物的生长提供碳源和能源C．“以氮代朊”是因为铵盐、硝酸盐等是微生物常用的氮源D．“以烃代粮”培养的微生物可以用于净化被石油污染的海域【解析】从题干给出的提示内容可以看出，“以野代家”就是以野生植物的原料代替栽培植物的原料，实际上野生植物含有的营养成分比栽培植物更丰富，而且生长因子在培养基中加入的量本来就不多，所以根本不用加入更多的生长因子。

【答案】 A2．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎，还能引起食物中毒，下列有关金黄色葡萄球菌的培养过程中正确的操作是( )A．带菌的培养基必须经灭菌处理后才能倒掉B．接种完成后，接种人员必须进行灭菌处理C．液体培养基表面可形成由单个微生物生长、繁殖而来的菌落D．可在培养基中加青霉素选择培养金黄色葡萄球菌【解析】观察菌落的形态特征应在固体培养基上进行。

接种完成后，接种人员必须进行消毒处理，而不是灭菌，因对人无法灭菌，只能消毒。

青霉素可杀灭金黄色葡萄球菌。

【答案】 A3．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( ) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取106、107、108倍的土壤稀释液和无菌水各1 mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数【解析】为防止培养皿盖上凝结的水珠落在培养基表面造成杂菌污染，应将平板倒置。

第一章无茵操作技术实践同步测试苏教版选修一1. (2014河南焦作一模)急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。

因此检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控疾病发生的必要措施。

请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1) 检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为__________ 。

下图所示的四种菌落分布图中，不可能由该方法得到的是__(2) _______________________________________________ 用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？_____________________________________________________ 。

为什么?(3) 有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手。

其中需要消毒的是(4) 已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？解析：(1)平板划线法所得菌落集中呈线状，D的菌落分布情况可判断为平板划线法接种。

(2) 为判断培养基灭菌是否合格，本实验需要对照。

(3) 消毒是指使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。

灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

对人的手不能进行灭菌。

(4) 根据题目意思大肠杆菌能产生气体，对培养基进行接种观察有无气泡产生来判断大肠杆菌的有无。

答案：(1)稀释涂布平板法D(2) 需要因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)(3) ③①②(4) 通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37C恒温箱培养24 h。

第 1 章无茵操作技术实践章末测试(苏教版选修 1 )1. 平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是( )A. 都要将菌液进行一系列的梯度稀释B. 平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C. 稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D. 都会在培养基表面形成单个的菌落解析平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。

平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。

答案D2. 分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是( )A •经选择培养后即可将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B •选择培养这一步可省略，但纤维素分解菌少C.经稀释培养后，用刚果红染色D •此实验中需设置对照组解析经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；选择培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈；设置对照能证明经选择培养的确得到了欲分离的微生物。

答案A3. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上C. 将实验组和对照组平板倒置，37 C恒温培养24〜48 hD. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析在细菌计数时，为保证实验结果的准确性，一般选择菌落数在30〜300 的平板进行计数，求出平均数，再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。

答案D4. 通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。

在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。

利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出(多选)()A.固氮细菌 B •霉菌C.大肠杆菌 D •放线菌解析缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，霉菌能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌，放线菌能生长。

2023-2024学年苏教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计15小题每题3分共计45分）1.“筛选”是生物学中培育生物新类型常用的手段下列有关技术过程中不可能筛选成功的有（）A. 在无氮培养基上筛选圆褐固氮菌B. 在不含精氨酸的培养液中筛选能合成精氨酸的杂交细胞C. 用含青霉素的培养基筛选酵母菌和霉菌D. 用不含碳源的培养基筛选根瘤菌【答案】D【解析】解 A.可以在无氮培养基上筛选固氮菌只有固氮菌才可以生存 A正确B.可以利用不含精氨酸的培养液筛选能合成精氨酸的杂交细胞因为只有能合成精氨酸的杂交细胞才能生存 B正确C.用含青霉素的培养基筛选抗青霉素的菌抗青霉素的微生物才可以存活 C正确D.应该利用不含氮源的培养基筛选根瘤菌（固氮微生物） D错误故选 D2.为了寻找某种抗寒能力比较强的生物寄生细菌下列叙述正确的是（）A. 为了筛选出该细菌需要配制液体培养基常温培养B. 利用涂布分离法计数的结果比实际值往往偏大C. 培养该细菌时培养皿应倒置放在恒温培养箱内摇床上培养D. 该细菌为异养型生物培养基上的碳源、氮源均为有机物【答案】D【解析】解 A.为了筛选出该细菌需要配制固体培养基低温培养 A错误B.由于两个及以上的细菌可能形成一个菌落故利用涂布分离法计数的结果比实际值往往偏小 B错误C.培养该细菌时培养皿不能放在摇床上培养 C错误D.该细菌为异养型生物培养基上的碳源、氮源均为有机物 D正确故选 D3.为了筛选出能产生脲酶的微生物应当从下列哪一种环境中选择（）A. 施用尿素较多的农田B. 施用氨肥较多的农田C. 施用磷肥较多的农田D. 落叶较多的地方【答案】A【解析】解脲酶可以将尿素分解为二氧化碳和氨气其底物为尿素应当从尿素较多的农田中获得故选 A4.下列有关真核细胞内DNA复制、转录和翻译的说法正确的是（）A. DNA复制、转录只能发生在细胞核中翻译发生在细胞质中B. DNA复制、转录过程需要酶催化翻译过程不需要酶催化C. 三个过程都发生了碱基互补配对形成了相同的碱基对D. 三个过程的产物都不相同但都进行了遗传信息的传递【答案】D【解析】5.将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时下列条件中不需要的是（）A. 具有完整细胞核的细胞B. 一定的营养物质和植物激素C. 离体状态D. 导入指定基因【答案】D【解析】解 A、植物组织培养的原理是细胞具有全能性这就要求细胞具有完整的细胞核 A正确B、植物组织培养需要一定的营养物质和植物激素其中植物激素可以诱导细胞分裂和分化 B正确C 、植物组织、细胞或器官只有在离体的条件下才能表现出全能性 C正确D、导入指定基因是基因工程的操作步骤不是植物组织培养所需的条件 D错误．故选 D．6.在分离分解纤维素的微生物实验中下列关于土壤取样的叙述不正确的是（）A. 可选取富含纤维素的土壤作为样品B. 可选取树林中多年落叶的腐殖土或枯枝败叶作为样品C. 可把滤纸条埋于深约50cm左右的腐殖土壤中再选取已腐烂的滤纸作为样品D. 把滤纸埋在土壤中经过30d左右再选取已腐烂的滤纸作为样品【答案】C【解析】解纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中因此采样时可选择B、C两项所述的环境或者将富含纤维素的物质如滤纸埋在土壤中经过30天左右再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌绝大多数细菌分布在距地表3∼8cm的土壤层故不可选取深层土壤作样品否则细菌数目很少故选 C7.嗜热菌又称高温细菌是一类生活在火山口及其周围区域、温泉、工厂高温废水排放区等高温环境中的微生物研究者从温泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌其筛选过程如图1所示将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养得到若干菌落后用碘液作显色处理结果如图2所示下列说法错误的是（）A. 过程①是对菌液进行稀释过程②的接种方法是稀释涂布平板法B. 图2中周围显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌C. 丙中噬热菌数量迅速增加培养过程中需保证充足的营养和高温条件D. Ⅰ号培养基属于选择培养基淀粉为作为唯一碳源【答案】B【解析】解 A.过程①是对菌液进行稀释过程②的接种方法是稀释涂布平板法以获得单菌落 A正确B.图2中周围不显蓝色的菌落说明其产生的淀粉酶可以在高温下分解淀粉所以周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌 B错误C.丙为富集培养丙中噬热菌数量迅速增加培养过程中需保证充足的营养和高温条件 C 正确D.为筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌Ⅰ号培养基应以淀粉为作为唯一碳源属于选择培养基 D正确故选 B8.空气中的微生物在重力等作用下会有一定程度沉降某生物兴趣小组欲利用平板培养基测定教室内不同高度空气中微生物的分布情况下列关于该实验的叙述正确的是（）A. 该实验不需要用接种工具进行接种B. 实验组和对照组都要持续打开皿盖C. 将平板培养基放置在教室不同地点的不同高度D. 实验过程中需要开门开窗通风确保接种的效果【答案】A【解析】解该实验需要将平板放置在教室相同地点的不同高度进行实验实验组需要持续打开皿盖对照组则不能打开皿盖实验利用重力使微生物沉降而自然接种不需要使用接种工具进行接种实验过程中尽量减少开门开窗通风以免无关变量对实验结果造成干扰 A正确、BCD错误故选 A9.平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法下列相关叙述中错误的是（）A. 平板划线法接种时每一次划线前都要挑取菌种B. 除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外以后的每一次划线也都需要灭菌C. 如果菌液本来浓度不高则可以适当降低稀释倍数D. “充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单一细胞繁殖而成的菌落【答案】A【解析】解 A.平板划线法接种时只需在第一次划线前挑取菌种 A错误B.除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外以后的每一次划线也都需要灭菌 B正确C.如果菌液本来浓度不高则可以适当降低稀释倍数 C正确D．“充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单一细胞繁殖而成的菌落 D正确故选 A10.下列有关微生物的培养或纯化的叙述错误的是（）A. 微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种B. 培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径C. 分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法D. 分离自养型微生物的方法是用纤维素作为唯一碳源的培养基【答案】D【解析】解 A.微生物在培养前要先对培养基进行灭菌处理再接种防止其他微生物混入A正确B.酵母菌是兼性厌氧的因此培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径 B 正确C.分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法 C正确D.用纤维素作为唯一碳源的培养基是用来分离纤维素分解菌的分离自养型微生物要用不加有机碳源的培养基 D错误故选 D11.研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量每一个浓度涂布四个平板并且设置空白对照组下列关于操作步骤的叙述正确的是（）A. 涂布前将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃燃尽后还要冷却8～10sB. 涂布完成后在培养皿的皿盖上做标记以避免混淆并将培养皿倒置培养C. 计算平板上的菌落数时四个培养皿上的菌落数无论多少都要全部平均D. 若空白对照组上有7个菌落则在实验组数据基础上减去7 以获得最准确数据【答案】A【解析】A、使用涂布器在酒精灯下涂布时要先将涂布器沾有少量酒精进行灼烧灭菌燃尽后还要冷却8～10s再进行涂布 A正确B、涂布完成后在培养皿的皿底上做标记以避免混淆并将培养皿倒置培养防止冷凝水倒流污染培养基 B错误C、计算平板上的菌落数时应选择菌落数在30﹣300平板进行计数 C错误D、若空白对照组上有7个菌落说明培养基灭菌不彻底需要重新进行实验 D错误12.以下关于分离纤维素分解菌的实验操作错误的是（）A. 经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B. 选择培养这一步可省略但得到的纤维素分解菌会较少C. 可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量D. 对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到含葡萄糖的培养基上【答案】A【解析】解 A.经选择培养后再经梯度稀释才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 A错误B.富集培养可省略但培养分离的纤维素分解菌少 B正确C.纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定 C正确D.实验组和对照组遵循单一变量原则对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素的培养基上设置对照能证明经“浓缩”培养得到了欲分离的微生物 D正确故选 A13.下列叙述错误的是（）A. 培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B. 培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件C. 培养细菌时需将pH调至中性或微碱性D. 培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性【答案】D【解析】解 A.维生素是乳酸菌生长繁殖所必须的在体内又不能合成因此需要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素 A正确B.厌氧微生物在有氧时无氧呼吸受到抑制因此培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件 B正确C.细菌生长繁殖所需要的pH是中性或微碱性所以培养细菌时需要将pH调至中性或微碱性 C正确D.霉菌生长所需要的pH是酸性培养霉菌时应将pH调至酸性在碱性情况下不易繁殖甚至会导致霉菌死亡培养霉菌时应将pH调至酸性 D错误故选 D14.关于酸奶制作下列说法正确的是（）A. 含抗生素的牛奶更容易发酵B. 温度越高制作酸奶需要的时间越长C. 牛奶变酸的同时其中的糖类发生了变化D. 所有物质都装瓶后再加热灭菌酸奶凝固的会更好【答案】C【解析】解 A.乳酸菌是细菌抗生素具有杀菌的作用含抗生素的牛奶不容易发酵 A错误B.乳酸菌发酵过程中酶的活性受温度影响在最适温度时制作酸奶需要的时间最短 B错误C.酸奶制作过程中乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸 C正确D.消毒灭菌工作应在装瓶前进行确保乳酸菌活性不受影响 D错误故选 C15.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质自然界中存在着降解苯酚的微生物某工厂产生的废水中含有苯酚为了降解废水中的苯酚研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株筛选的主要步骤如下图所示①为土壤样品下列相关叙述错误的是（）A. 图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B. 若图中④为对照实验则其中应以苯酚作为唯一碳源C. 如果要测定②中活细菌数量常采用稀释涂布平板法D. 使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落【答案】B【解析】解 A.图中②中的选择培养基中应加入苯酚作为碳源以增大降解苯酚细菌的浓度 A正确B.④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源⑤培养基的中加入苯酚作为碳源 B错误C.测定②中活细菌数量常采用稀释涂布平板法 C正确D.分离单菌落还可以用平板划线法接种所以用平板划线法可以在⑥上获得单菌落 D正确故选 B二、多选题（本大题共计5小题每题3分共计15分）16.科研人员对脱落酸（ABA）调节干旱环境下拟南芥气孔开闭的机制进行了研究结果如下图所示（气孔阻力与通气能力呈负相关）下列相关叙述正确的是（）A. ABA是一种植物激素主要由根冠和萎蔫的叶片等合成可以调节气孔开闭B. 恢复浇水后ABA含量减少有利于减少水分的散失C. 给植物叶片喷洒ABA 短时间内叶绿体内\ C_5的含量将增加D. 干旱处理会增大叶片细胞的渗透压进而促进ABA的合成和分泌【答案】A, C, D【解析】解 A.脱落酸的合成部位主要是根冠和萎蔫的叶片具有促进脱落、抑制生长、调节气孔开闭等作用 A正确B.由图可知恢复浇水后ABA含量减少相应气孔阻力也下降气孔阻力与通气能力呈负相关气孔阻力下降则通气能力提高所以是有利于水分的散失 B错误C.喷洒脱落酸可以导致气孔关闭、二氧化碳浓度下降二氧化碳的固定受到影响 C_5的含量短时间内增加 C正确D.干旱处理即停止浇水由图可知气孔阻力增加通气能力下降叶片细胞渗透压增加 ABA 含量上升 D正确故选 ACD17.下图为植物组织培养过程示意图下列叙述错误的是（）A. 从理论上讲①可以是植物体的每一个活细胞B. ②包裹上人工种皮即可获得人工种子C. ①→②的过程通过有丝分裂产生一团具有特定结构和功能的薄壁细胞组成的愈伤组织D. ②→③的再分化过程中细胞增殖的方式为有丝分裂【答案】B, C【解析】解A.①表示外植体可以是植物体的每一个活细胞 A正确B.通过植物组织培养得到的胚状体③等为材料通过人工薄膜包装得到的种子为人工种子而非愈伤组织 B错误C①→②的过程为脱分化过程是将一些分化的细胞经激素的诱导脱分化为具有分生能力的薄壁细胞进而经有丝分裂形成愈伤组织 C错误D.②→③的再分化过程中细胞增殖的方式为有丝分裂 D正确故选 BC18.高通量筛选是获得高性能微生物菌种的重要途径其生产流程简图如下下列说法错误的是（）A. 对出发菌株的选育也可以借助于基因工程等技术实现B. 将配置好的培养基倒人锥形瓶中宜采用干热灭菌法进行灭菌C. 图中的单菌落一定是微生物繁殖形成的纯培养物D. 多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测【答案】B, C【解析】解 A.对出发菌株的选育可以借助于基因工程等技术实现 A正确B.将配置好的培养基倒人锥形瓶中宜采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 B错误C.涂平板时可能不同种的细菌会重合在一起形成的单菌落不属于纯培养物 C错误D.多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测 D正确故选 BC19.紫草素对急慢性肝炎的治疗有较好的疗效利用植物组织培养技术从紫草根细胞提取紫草素下列操作或叙述正确的是（）A. 用适当的激素诱导愈伤组织分化成胚状体或丛芽B. 培养紫草根细胞的培养基中需要添加琼脂C. 需用聚乙二醇诱导根细胞的原生质体融合D. 选取合适的外植体并要进行快速消毒【答案】B, D【解析】解 A.本题植物组织培养的目的是获得细胞代谢产物而不是完整植株培养到愈伤组织阶段就可以所以不需要诱导形成胚状体或丛芽 A错误B.培养愈伤组织细胞获得细胞代谢产物使用固体培养基需要加入琼脂 B正确C.该过程中紫草素是从紫草细胞培养的愈伤组织细胞中提取的不需要诱导根细胞的原生质体融合 C错误D.外植体接种前需要进行消毒处理 D正确故选 BD20.微生物为了研究防治微生物传染病的有效方法生物课外课题研究小组的同学要研究板蓝根（一种药用植物）的汁液是否具有抑制大肠杆菌的作用指导老师为他们提供材料、仪器和试剂有大肠杆菌菌种接种环无菌滴管无菌玻璃刮铲无菌圆纸片镊子记号笔直尺酒精灯牛肉膏蛋白胨琼脂板蓝根汁等实验步骤（1）他们应当配制的培养基是（）A. 通用液体培养基B. 通用固体培养基C. 选择液体培养基D. 选择固体培养基（2）制备培养基的操作步骤是bedca（用下列字母排序）a．倒置培养基b．计算和称量c．灭菌d．调pHe．溶解和熔化（3）如果他们要观察单个的大肠菌菌落应该用划线法接种在如图圆内（表示培养皿）画出接种环的运行路线（带箭头）（4）通常培养基采用121℃灭菌原因是杀灭培养基中的细菌芽孢接种后必须将培养皿倒置倒置的原因是防止冷凝水滴落影响细菌生长（5）如果要探究板蓝根汁液是否具有抑菌作用可以有以下的实验方案第一步接种用无菌滴管吸取菌液滴在培养基表面第二步实验过程若干圆纸片浸泡板蓝根汁放入与无菌水圆纸片做对照（各放入几张）第三步现象观察看圆纸片周围是否出现抑菌圈测试并记录第四步结果预测及分析若浸入板蓝根汁的圆纸片周围有抑菌圈浸有无菌水的圆纸片无清晰区说明板蓝根汁液有抑制大肠杆菌的作用 2.如浸有板蓝根汁液圆纸片和无菌水一样无清晰区说明板蓝根汁液没有抑制大肠杆菌的作用【答案】（1）B（2）bedca（3）划线（4）杀灭培养基中的细菌芽孢防止冷凝水滴落（5）用无菌滴管吸取菌液滴在培养基表面若干圆纸片浸泡板蓝根汁放入与无菌水圆纸片做对照看圆纸片周围是否出现抑菌圈测试并记录若浸入板蓝根汁的圆纸片周围有抑菌圈浸有无菌水的圆纸片无清晰区2.如浸有板蓝根汁液圆纸片和无菌水一样无清晰区【解析】三、解答题（本大题共计5小题每题10分共计50分）21.（1）植物组织培养常用的MS培养基是________（液体/半固体/固体）培养基菊花茎段的组织培养________（必须/不必）添加植物激素21.（2）无菌技术是影响植物组织培养能否成功的重要因素用体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞对外植体________ 接种时每次使用器械后都需要________ 灭菌接种3~4d后观察外植体的生长情况若发现外植体被污染分析其原因可能是________、________ （答出两点即可）21.（3）再分化过程中若愈伤组织在诱导生根的培养基中来形成根但分化出了芽其可能的原因是________21.（4）为了获得脱毒植株外植体往往取自植物的________等处的分生组织【答案】（1）固体, 不必【解析】解（1）植物组织培养常用的MS培养基属于固体培养基菊花组织培养过程中自身内源激素即可调节其生长无需添加植物激素但每日必须12h的日光灯照射【答案】（2）消毒, 灼烧, 外植体消毒不彻底, 培养基灭菌不彻底【解析】（2）植物组织培养中用体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞对外植体消毒用无菌水清洗接种时每次使用器械后都需要灼烧灭菌接种3~4d后观察外植体的生长情况若发现外植体被污染其原因可能是外植体消毒不彻底培养基灭菌不彻底【答案】（3）培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低【解析】（3）生长素与细胞分裂素的比值低有利于芽的分化生长素与细胞分裂素的比值高有利于根的分化愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根但分化出了芽其原因可能是培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低【答案】（4）花芽、叶芽【解析】（4）植物的芽尖、茎尖分生组织分裂快很少被病毒感染甚至无病毒故常用作培育无病毒植株的材料22.（1）甲同学用涂布平板法检测大肠杆菌数配制的培养基中含有蛋白胨、酵母膏、NaCl、 H_2O和X 其中蛋白胨可为大肠杆菌提供________和维生素 X是________22.（2）乙同学用滤膜法检测大肠杆菌数用滤膜将已知体积的水过滤后放在________ 培养基上培养在该培养基上大肠杆菌菌落呈现________色该方法所统计样品中含菌数往往偏低的原因是___________________________________22.（3）丙同学检测水样中的细菌总量时先随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间这样做的目的是______________________ 接种后需要将平板 ________（填“正置”或“倒置”）培养统计菌落总数时也可以根据 ________对菌种进行初步的鉴定【答案】（1）碳源、氮源, 琼脂【解析】解（1）蛋白胨可以为大肠杆菌提供碳源、氮源以及维生素用涂布平板法检测大肠杆菌数时所用培养基为固体培养基故X表示琼脂【答案】（2）伊红美蓝, 黑, 当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落【解析】（2）在伊红美蓝培养基上大肠杆菌菌落呈黑色当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落因此用滤膜法得到的统计值往往要比实际值偏低【答案】（3）检验培养基灭菌（或制备）是否合格, 倒置, 菌落特征【解析】（3）检测培养基的细菌总量时都要先随机取灭菌后的空白平板进行培养这么做是为了检测培养基平板灭菌是否达标接种之后为了防止污染和利于观察计数需要将平板倒置在统计菌落总量时可以根据菌落的特征对菌种进行初步判定23.（1）过程①的接种方法为________________ 从培养基成分分析基本培养基与完全培养基存在差异的成分是________23.（2）进行②过程培养时应先将丝绒布转印至基本培养基上从________培养基上获得相应的营养缺陷型菌株23.（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次直到各类菌落数目稳定以防止培养时间不足导致________________________ 或培养时间太长导致________________________________________________23.（4）为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定实验人员进行了如下操作①用接种针挑取________（填“菌落A”或“菌落B”）接种于盛有完全培养液的离心管中28℃振荡培养1~2天后离心取沉淀物用无菌水洗涤3次并制成菌悬液②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中倾注15mL融化并冷却至50℃左右的基本培养基待其冷凝后用记号笔在________（填“皿盖”或“皿底”）划分五个区域标记A、B、C、D、E③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末（如下表所示）经培养后观察生长圈出现的区域从而确定属于何种氨基酸缺陷型在上述鉴定实验中发现在培养基A、D区域出现生长圈说明该营养缺陷型菌株属于________【答案】（1）稀释涂布平板法, 氨基酸【解析】解（1）根据过程①所得培养基中菌落的分布结果可以判断该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法图示为利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程据此可知与基本培养基（只含碳源、无机盐、水）相比完全培养基中的特有的成分为氨基酸【答案】（2）完全【解析】（2）为了防止将特定营养成分带入培养基进行②过程培养时应先将丝绒布转印至基本培养基上在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长而在完全培养基中能够生长因此从完全培养基上可获得相应的营养缺陷型菌株【答案】（3）遗漏菌落的种类和数目, 菌落黏连影响计数、培养基表面干燥脱水、微生物衰败菌落特征不易观察【解析】（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次直到各类菌落数目稳定以防止因为培养时间不足遗漏菌落的种类和数目或培养时间太长导致菌落黏连影响计数、培养基表面干燥脱水、微生物衰败菌落特征不易观察【答案】（4）①菌落A, ②皿底, ③天冬氨酸缺陷型【解析】（4）①在基本培养基中氨基酸缺陷型菌株不能生长而在完全培养基中能够生长因此图中菌落A应该为氨基酸缺陷型菌株则用接种针挑取菌落A接种于盛有完全培养液的离心管中 28℃振荡培养1～2天后离心取沉淀物用无菌水洗涤3次并制成菌悬液②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中倾注15mL融化并冷却至45～50℃的基本培养基待其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域标记A、B、C、D、E③根据表中信息显示 A、D区域含有、其他区域不含有的氨基酸是天冬氨酸而实验结果只有A、D区域出现生长圈说明该营养缺陷型菌株属于天冬氨酸缺陷型24.（1）培养基的配制和灭菌根据目标微生物的特性配置相应的培养基熔喷布主要成分为聚丙烯纤维（PP 组成仅含有C、H两种元素）用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为________外还应加入水、氮源、无机盐和琼脂等配置好后进行高压蒸汽灭菌影响高压蒸汽灭菌效果的因素有________等（答出2点即可）24.（2）目的菌的获取、选择、扩大培养目的细菌大多分布在距地表约5~10cm的潮湿土壤层因此土壤取样时一般________ 在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂。

第一章无菌操作技术实践测评(时间:60分钟满分:100分)一、选择题(每小题2.5分,共50分)1.不同的微生物对养分物质的需求各不相同。

下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物养分的描述中,不正确的是( )A.氮源物质为该微生物供应必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不行缺少的养分物质D.水是该微生物的养分要素之一解析:CO2是自养微生物的碳源,但由于CO2是无机物,因此不是该类微生物的能源物质。

答案:B2.下列不属于MS基本培育基的主要组成成分的是( )A.大量元素B.微量元素C.蔗糖D.植物激素解析:MS基本培育基是一种基础培育基,主要成分包括大量元素、微量元素和有机物。

答案:D3.高温灭菌的原理是( )A.每种微生物生长的最适温度是肯定的B.微生物对高温环境不适应C.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度解析:相对于动植物来说,微生物的耐高温实力是很强的。

灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢),所以要采纳更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性,以使其恒久丢失生活实力。

答案:C4.用人工培育基来培育圆褐固氮菌。

当向无菌培育箱中充入氮气时,其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时( )A.多和大B.多和小C.少和大D.少和小解析:圆褐固氮菌为异养需氧型,当向无菌培育箱中充入氮气时,会使其有氧呼吸受到抑制,生命活动所须要的能量供应不足,生命活动减弱,分裂、生长减缓,因此其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时少和小。

答案:D5.美国探讨人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使它将植物纤维渐渐转化为生物燃料。

这种细菌不仅能以传统生物能源技术中运用的蔗糖为原料,还能将广泛存在于植物纤维中的半纤维素分解合成为燃料物质。

若要将这种大肠杆菌分别出来,应将它们接种在( )A.不含氮源的培育基上B.含有蛋白胨的固体培育基上C.只含半纤维素而无其他碳源的选择培育基上D.不含养分要素的培育基上解析:微生物生长繁殖所需的养分物质分为碳源、氮源、水和无机盐。

2023-2024学年苏教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计20小题每题3分共计60分）1.如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程下列有关叙述错误的是（）A. ①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源B. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C. ①﹣③过程是梯度稀释稀释溶剂是无菌水D. 可用酚红染料鉴定菌落周围是否出现红色圈【答案】C【解析】A、尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解从而能利用尿素其它微生物不能因此要分离纯化尿素分解菌培养基都应以尿素为唯一氮源 A正确B、对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法 B正确C、①﹣③过程是梯度稀释该过程用来选择培养尿素分解菌因此稀释溶剂应该是含有尿素为唯一氮源的培养基而不是无菌水 C错误D、分解尿素的菌能将尿素转化成氨气使培养基碱性增强 PH升高酚红指示剂会变红因此可用酚红染料鉴定菌落周围是否出现红色圈来鉴定 D正确2.下列操作必需在严格无菌条件下进行的是（）A. 称量牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分B. 利用平板划线法接种大肠杆菌C. 用酒精擦拭双手D. 溶化牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分【答案】B【解析】解 A、称量牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分要求清洁和消毒 A错误B、利用平板划线法接种大肠杆菌必需在严格无菌条件下进行否则混入杂菌不能提取到目的菌 B正确C 、用酒精擦拭双手为清洁和消毒 C错误D、配制好的培养基还要进行灭菌所以溶化牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分无需灭菌 D 错误．故选 B．3.泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化的正确曲线的是（）A.B.C.D.【答案】C【解析】泡菜制作过程中亚硝酸盐是先增加然后逐渐减低稳定在较低水平故选C4.下列有关用平板划线法纯化微生物的叙述正确的是（）A. 平板划线法可用于微生物的分离、纯化和计数B. 划线过程中对接种环用\ 75%的酒精进行消毒处理C. 接种微生物前要对接种环灭菌划线过程中无须再灭菌D. 划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连【答案】D【解析】解 A.平板划线法不能用于微生物的计数 A错误B.划线过程中需要对接种环进行灼烧灭菌 B错误C.接种微生物前要对接种环灭菌划线过程中仍须再灭菌 C错误D.划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连 D正确故选 D5.植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术具有广泛的应用前景和实用价值下列对这些操作或应用描述错误的是（）A. 可用PEG诱导植物细胞融合再生出细胞壁是融合成功的标志B. 利用植物组织培养技术可大量获得人参皂甙干粉且已投入规模化生产C. 植物培养基中常用的植物生长调节剂一般可以分为生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类D. 获取植物原生质体时需在蔗糖浓度高于细胞液浓度的缓冲液中进行以使细胞发生质壁分离便于观察【答案】D【解析】解 A.植物细胞（或原生质体）融合可用PEG进行诱导融合成功的标志是再生出细胞壁 A正确B.用植物组织培养技术生产人参皂甙干粉已投入规模化生产 B正确C.植物生长调节剂在植物组织培养中具有极其重要的作用根据其功能特点可分为生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类 C正确D.获取植物原生质体时除使用纤维素酶和果胶酶外还要在蔗糖浓度与细胞液浓度相当的缓冲液中进行以免细胞过度吸水或失水此时原生质体已无细胞壁无法观察到质壁分离 D错误故选 D6.利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌下列叙述错误的是（）A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透明圈则说明已筛选出了纤维素分解菌【答案】B【解析】解 A.刚果红能与纤维素形成红色复合物 A正确BC.刚果红是一种染料它可以与多糖物质形成红色复合物但不能和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应 BC错误D.在培养基中加入刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物当纤维素被分解后红色复合物不能形成培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈从而可筛选纤维素分解菌 D正确故选 B7.下列有关分离纤维素分解菌的实验叙述有误的是（）A. 选择培养后先将样品梯度稀释再涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B. 选择培养这一步可省略但培养的纤维素分解菌少C. 菌液经稀释后可先涂布到培养基上后再加刚果红染色D. 透明圈一定是以纤维素分解菌为中心形成的【答案】C【解析】解 A、经选择培养后再经梯度稀释才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 A正确B、选择培养可省略但培养分离的纤维素分解菌少 B正确C 、经稀释培养后将样品涂布于含刚果红的鉴别纤维素分解菌的固体培养基上进行观察 C错误D、刚果红可以与纤维素结合形成红色的复合物而纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖因此在纤维素分解菌的菌落周围由于缺少纤维素而出现透明圈 D 正确．故选 C．8.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是（）A. \ CO_2和\ N_2B. 葡萄糖和\ NH_3C. \ CO_2和尿素D. 葡萄糖和尿素【答案】D【解析】解能合成脲酶的微生物是尿素分解菌该细菌是异养微生物不能直接以二氧化碳或氮气、氨作为碳源和氮源只能以葡萄糖和尿素等有机物作为碳源和氮源故选 D9.养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝酸这两种物质可由硝化细菌吸收利用研究人员从养殖池池泥中分离出硝化细菌并进行了计数有关叙述正确的是（）A. 需配制一定浓度含氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基以分离硝化细菌B. 配制的培养基经高压蒸汽灭菌后通常还需要调节pH才能使用C. 涂布时用涂布器沾取少量菌液并均匀地涂布在培养基的表面D. 使用涂布平板法统计得到的菌落数目往往比活菌的实际数目少【答案】D【解析】解 A.要分离硝化细菌需要用只以氨和亚硝酸为氮源的选择培养基进行培养 A 错误B.配制的培养基需要先调节pH再进行高压蒸汽灭菌 B错误C.涂布时取少量菌液滴加在培养基表面再用涂布器涂布 C错误D.用稀释涂布平板法统计的菌落数目时有些细菌靠在一起形成一个菌落这样统计的菌落数往往比活菌的实际数目少 D正确故选 D10.某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解会对环境造成污染只有某些细菌能降解X 研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株实验过程中需要甲、乙两种培养基甲的组分为无机盐、水和X 乙的组分为无机盐、水、X和Y 下列相关叙述中错误的是（）A. 甲、乙培养基均属于选择培养基乙培养基组分中的Y物质是琼脂B. 若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源C. 步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液要有一定的浓度梯度D. 步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高某菌株对X的降解量可能下降【答案】C【解析】解 A.甲、乙培养基均以X为唯一碳源和氮源属于选择培养基其中乙培养基为固体培养基因此其组分中的Y物质是琼脂 A正确B.若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源和氮源 B正确C.步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液的浓度要相同 C错误D.步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高时可能会导致细菌细胞失水过多而失活因此对X的降解量可能下降 D正确故选 C11.我国的酿酒技术历史悠久古人在实际生产中积累了很多经验《齐民要术》记载将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发如鱼眼汤净淘米八斗炊作饭舒令极冷” 意思是将酒曲浸到活化冒出鱼眼大小的气泡把八斗米淘净蒸熟摊开冷透下列说法错误的是（）A. “浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快B. “鱼眼汤”现象是微生物呼吸作用产生的\ CO_2释放形成的C. “净淘米”是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施D. “舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡【答案】C【解析】解 A.酒曲浸到活化酒曲中的微生物代谢加快 A正确B.“鱼眼汤”是指酵母菌在呼吸过程中产生 CO_2 使溶液中出现气泡 B正确C.“净淘米”可以消除杂质在做酒过程中为消除杂菌的影响主要靠“炊作饭” 即蒸熟 C错误D.蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡所以要“舒令极冷” D正确故选 C12.金丝楸是珍贵的古老树种在多个方面具有重要的应用价值金丝楸在自然状态下很难通过种子繁殖为尽快推广种植可以通过相关技术获得优质苗种下列技术应用不合理的是（）A. 采用根段诱导其生根发芽快速育苗B. 采集幼芽嫁接到其它适宜的植物体上C. 采用幼叶或茎尖部位的组织生产人工种子D. 采用花朵中的花粉粒经组织培养获得试管苗【答案】D【解析】解 A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗属于无性生殖的营养生殖能保持亲本的优良性状 A正确B.幼芽嫁接属于无性生殖能保持亲本的优良性状 B正确C.采用幼叶或茎尖部位的组织生产人工种子属于无性生殖能保持亲本的优良性状 C正确D.花粉粒通过减数分裂产生再离体培养形成的是单倍体一般高度不育 D错误故选 D13.将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱是很多人日常储藏西瓜的办法有这样一种说法盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比未用保鲜膜的多研究小组针对上述说法进行探究他们用保鲜膜保存了三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液研究细菌的种类和数量下列说法错误的是（）A. 需要设置两组实验作为对照B. 应该采用稀释涂布平版法进行接种C. 涂布接种时要待涂布器上酒精燃尽后冷却再使用D. 主要通过显微镜观察细菌的结构特征初步判断细菌的种类【答案】D【解析】解 A.该实验是比较两种不同处理方式下西瓜上菌体的种类和数量所以除需要设置盛有培养基的空白平板作对照还需要设置不盖保鲜膜同样条件保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液后接种的平板做对照即需要设置两组实验作为对照 A正确B.要研究细菌的种类和数量需要采用稀释涂布平板法进行接种才能计数 B正确C.涂布接种时要待涂布器上酒精燃尽后冷却再使用 C正确D.主要通过观察菌落的特征初步判断细菌的种类 D错误故选 D14.产生的废水中含有苯酚为了降解废水中的苯酚研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株筛选的主要步骤如下图所示①为土壤样品下列相关叙述错误的是（）A. 使用平板划线法可以在⑥上获得单个菌落B. 如果要测定②中的活细菌数量常采用稀释涂布平板法C. 图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源D. 微生物培养前需对培养基和培养皿进行消毒处理【答案】D【解析】解 A.分析图解可知实验经过选择培养基培养获得目的菌株然后经过⑤的纯化培养使用平板划线法可以在⑥上获得单个菌落 A正确B.如果要测定②中的活细菌数量常采用稀释涂布平板法 B正确C.要筛选获得只能降解利用苯酚的细菌菌株图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为唯一碳源 C正确D.微生物培养前需对培养基和培养皿进行严格的灭菌处理培养基采用高压蒸汽灭菌法培养皿使用干热灭菌法 D错误故选 D15.下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述正确的是（）A. 高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓B. 选择培养基可以鉴定某种微生物的种类C. 待培养基冷却至室温时倒平板D. 统计样品中活菌数量时接种方法可采用稀释涂布平板法【答案】D【解析】A、高压蒸汽灭菌锅加盖时将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓使螺栓松紧一致勿使漏气 A错误B、鉴别培养基可以鉴定某种微生物的种类 B错误C、待培养基冷却至50℃左右时倒平板 C错误D、统计样品中活菌数量时接种方法可采用稀释涂布平板法 D正确16.某课外兴趣小组的同学探究阿莫西林对细菌的选择作用首先取少量含细菌的培养液均匀涂抹在平板上并将平板均等的分为四个区然后在1号区放1张不含阿莫西林的圆形纸片 2、3、4号区放等大的含有阿莫西林的圆形纸片在37℃的恒温箱中培养12~16h（第一代）观察并测量抑菌圈的直径从抑菌圈边缘的菌落上挑取菌体接种到液体培养基中培养然后取菌液重复上述操作获得第二代、第三代并记录每代抑菌圈的直径相关叙述错误的是（）A. 耐药菌的出现是基因突变的结果B. 每代都需计算2、3、4区抑菌圈的平均值C. 培养过程中细菌的耐药性基因频率发生定向改变D. 培养过程中抑菌圈越小说明细菌的耐药性越弱【答案】D【解析】17.关于分离土壤尿素分解菌并计数的叙述正确的是（）A. 应选取肥沃、湿润的土壤先铲去表层土3~8cm左右再取样B. 土壤取样、称取土壤、稀释、涂布培养都在酒精灯火焰旁进行无菌操作C. 用平板划线法计数得到的结果往往会比实际活菌数目要低D. 取\ 10^4、 10^5、10^6倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL 分别涂布于各组平板上【答案】D【解析】解 A.应选有尿素分解菌的土壤肥沃湿润的土壤里面不一定有尿素分解菌 A错误B.在土壤中尿素分解菌的分离与计数中取样用的小铁铲和信封需要灭菌所取的土壤样品不能灭菌称取土壤样品时和进行梯度稀释及涂布平板时需要在酒精灯火焰旁进行 B错误C.平板划线法不能用于活菌计数 C错误D.取 10^4、 10^5、10^6倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL 分别涂布于各组平板上 D正确故选 D18.研究小组利用稀释涂布平板法来估测大肠杆菌的数量每一个浓度涂布四个平板下列关于操作步骤的叙述正确的是（）A. 因为实验前后形成对照因此本实验不必设置空白对照组B. 为避免混淆应在培养皿的皿盖上做标记并将培养皿倒置培养C. 涂布前将沾有少量酒精的涂布器引燃待涂布器冷却后再涂布D. 除上述方法外还可以用平板划线操作对大肠杆菌进行分离和计数【答案】C【解析】解 A.需要一个空白对照来判断出是否被杂菌污染 A错误B.在皿盖做标记倒置后就看不到了 B错误C.涂布器灭菌时需要沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃冷却8~10s后使用 C正确D.平板划线操作不能对大肠杆菌进行计数只能进行分离操作 D错误故选 C19.下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤下列说法正确的是（）A. 制备①步骤使用的培养基要先灭菌再调pHB. ②步骤接种环经火焰灭菌后应立即取一环菌液以防污染C. 操作③到④的全过程中接种环共灼烧处理了 5 次D. 接种结束后将④倒置培养并在培养皿上标注菌种及接种日期等信息【答案】D【解析】解A.①步骤表示倒平板在倒平板之前是先调pH再灭菌 A错误B②步骤应将灼烧灭菌后的接种环冷却后再蘸取菌液以防止高温杀死菌种 B错误C.接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌接种结束后还需灼烧灭菌1次防止造成污染由此可见完成步骤②③④④共需灼烧接种环6次 C错误D.图中操作结束后为了防止培养皿盖上的水珠滴落到培养基造成污染需要将培养皿倒置培养且同时在培养皿上标注菌种及接种日期等信息 D正确故选 D20.某科研小组欲从土壤中筛选能分解除草剂A（组成元素为C、H、O、N 在水中溶解度低含除草剂A的固体培养基不透明）的细菌用于生产实验流程如下图所示下列相关叙述错误的是（）A. 从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌B. 实验中培养基1为液体培养基此操作的主要目的是增加除草剂A分解菌的数量C. 培养基2为选择培养基其中以除草剂A作为唯一碳源便于分离除草剂A分解菌D. 挑选菌落时透明圈直径与菌落直径比值越大表明目标细菌分解除草剂A的能力越强【答案】C【解析】解 A.由于除草剂A对微生物进行了选择经常使用除草剂A的土壤中除草剂A 分解菌的数量相对较多因此从经常使用除草剂A的土壤取样比从其他土壤取样更容易筛选到除草剂A分解菌 A正确B.实验中培养基1为液体培养基此操作的主要目的是增加除草剂A分解菌的数量 B正确C.培养基2为选择培养基其中以除草剂A作为唯一氮源便于分离除草剂A分解菌 C错误D.挑选菌落时透明圈直径与菌落直径比值越大表明目标细菌分解除草剂A的能力越强D正确故选 C二、解答题（本大题共计4小题每题10分共计40分）21.（1）酒精发酵阶段需添加酵母菌在操作过程中发酵罐先通气后密闭通气的作用是__________________________21.（2）醋酸发酵阶段独流老醋采用独特的分层固体发酵法发酵30天工艺如下①发酵过程中定期取样测定醋酸杆菌密度变化与颠倒前相比 B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是______________②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因发酵过程中发酵缸中__________层醋醅有利于乳酸菌繁殖积累乳酸③为检测发酵过程中乳酸菌的含量取不同稀释度的样品各0.1mL涂布到固体培养基上在适宜条件下培养一段时间统计得到 10^6、 10^7、 10^8三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为317个、125个、16个据此估算每毫升样品中的乳酸菌数约为___________个上述统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________ 原因是_________________________________________【答案】（1）能提高酵母菌的数量有利于密闭时获得更多的酒精产物【解析】解（1）酵母菌是兼性厌氧型生物既能进行有氧呼吸又能够进行无氧呼吸在酒精发酵过程中先通气使酵母菌在有氧环境下大量增殖有利于密闭时获得更多的酒精产物【答案】（2）①先快速增长后趋于稳定, ②颠倒前的B层和颠倒后的A（或不翻动或下）, \ 1.25×10^10, 低（或少）, 当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落【解析】（2）①由图可知颠倒后 B层先快速增长后趋于稳定②乳酸菌的呼吸方式为无氧呼吸颠倒前的B层和颠倒后的A层处于无氧环境有利于乳酸产生由于统计得到10^6、 10^7、 10^8三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为317个、125个、16个符合30~300条件的只有125 则每毫升样品中的乳酸菌数约为 1.25×10^10个因为当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落所以上述统计的菌落数往往比活菌的实际数目低22.（1）伊红美蓝培养基含有大肠杆菌生长繁殖必须的________四类营养物质大肠杆菌的代谢产物会和伊红、美蓝发生反应使菌落呈现________色．伊红美蓝培养基属于________（填“选择”或“鉴别”）培养基．22.（2）某水样的大肠杆菌严重超标需采用稀释涂布平板法统计样品中活菌数．当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的________．一般选择菌落数在________的平板进行计数这样统计的菌落数________（填“大于”、“等于”或“小于”）活菌的实际数目．22.（3）用大剂量紫外线照射大肠杆菌获得了变异菌株这种变异来源于________．利用平板划线法对该变异菌株进行纯化在第二次以及其后的划线操作时菌体来自________．【答案】碳源、氮源、水和无机盐, 黑, 鉴别【解析】解（1）用于检测水中大肠杆菌的数量的伊红美蓝培养基需含有大肠杆菌生长繁殖必须的四类营养物质即碳源、氮源、水和无机盐大肠杆菌的代谢产物会和伊红美蓝发生反应使菌落呈现黑色伊红美蓝培养基可用于检测水中大肠杆菌的数量从培养基的用途上看伊红美蓝培养基属于鉴别培养基．【答案】一个活菌, 30sim 300, 小于【解析】（2）用稀释涂布平板法统计样品中活菌数时当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌为了保证结果准确一般选择菌落数在30\sim 300的平板进行计数由于在培养过程中两个或多个细胞也可能生长在一起而形成一个菌落所以这样统计的菌落数小于活菌的实际数目．【答案】基因突变, 上一次划线的末端【解析】（3）用大剂量紫外线照射大肠杆菌可使大肠杆菌的部分DNA发生改变这样获得的变异菌株的变异来源于基因突变利用平板划线法对该变异菌株进行纯化在第二次以及其后的划线操作时总是从上一次划线的末端开始划线因此在第二次以及其后的划线操作时菌体来自上一次划线的末端．23.（1）培养基中加入的化合物A是________ 本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养目的是________________________________________23.（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物向培养基中加入________溶液等培养基上长出菌落后能产生纤维素酶的菌落周围会出现________23.（3）为在培养基表面形成单个菌落若将平板分为5个区域进行划线理论上需要灼烧接种环________次若用稀释涂布平板法进行接种在涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是________________________________________________23.（4）用三种菌株对秸秆进行处理并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定（结果如图）可以得出的结论是 ________________（写出两点）【答案】（1）纤维素, 增加能产纤维素酶的微生物的浓度【解析】解（1）由题干信息分析可知该实验是为了分离筛选降解纤维素能力强的微生物故培养基中加入的化合物A是纤维素本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养目的是增加能产纤维素酶的微生物的浓度【答案】（2）刚果红, 透明圈【解析】（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物在培养基中加入刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物当纤维素被分解后红色复合物不能形成培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈从而可筛选纤维素分解菌【答案】（3）6, 培养基表面的菌液会出现积液导致菌体堆积影响分离效果【解析】（3）为在培养基表面形成单个菌落若将平板分为5个区域进行划线理论上需要灼烧接种环6次在每次接种前和最后一次接种后都需要进行灼烧若用稀释涂布平板法进行接种在涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是培养基表面的菌液会出现积液导致菌体堆积影响分离效果【答案】（4）三种菌株对半纤维素的降解作用最强与第5天结果相比第10天秸秆各组分中纤维素的降解率变化最大【解析】（4）据图分析可知三种菌株对半纤维素的降解能力最强与第5天结果相比第10天秸秆各组分中纤维素的降解率变化最大24.（1）要从土壤中分离目标菌最关键的实验操作步骤是用以尿素为唯一氮源的培养基进行选择培养这样做的理由是________ 根据培养基的成分判断该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌原因是________24.（2）该培养基中添加葡萄糖的原因是________ 接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养可以防止________ 防止造成污染若要验证该培养基具有选择作用需要设置________作为对照当________时即可说明该培养基具有选择作用24.（3）鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时可在培养基中加入酚红指示剂如果有尿素分解菌存在培养基的pH会________ 该菌落的周围会出现________色24.（4）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量将1mL样液稀释100倍在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液经适当培养后 3个平板上的菌落数分别为39、38和37 据此可得出每升样液中的活菌数为________24.（5）该同学还做了不同稀释倍数的实验且实验操作都正确规范但通过菌落计数计算后发现稀释倍数低的组计算结果往往比稀释倍数高的组计算结果略低可能的原因是。

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微专题突破无菌操作技术实践一、微生物的分离与鉴定微生物的分离方法有很多种，本专题中常用的是：平板划线法、涂抹平板法、微生物的选择培养等。

针对不同微生物的特点选择不同的方法，对目的微生物进行筛选。

以下是尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定比较.项目尿素分解菌的分离与鉴定纤维素分解菌的分离与鉴定分离选择条件利用尿素为唯一氮源利用纤维素为唯一碳源鉴定方法培养基中加入酚红指示剂,变红色在以纤维素为唯一碳源的培养基上，利用刚果红染色法,出现透明圈鉴定原理细菌等微生物合成脲酶，将尿素分解产生NH3，使pH升高,加入酚红变红色分解纤维素的微生物产生纤维素酶,将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素-刚果红复合物降解而出现透明圈步骤土壤取样→制备培养基→样品梯度稀释→涂布平板→培养观察→进一步鉴定土壤取样→制备培养基→选择培养→富集培养→梯度稀释→涂布培养→刚果红染色法→挑取菌落→进一步鉴定1．倒平板与涂布平板法的操作(1)倒平板操作(2)涂布平板操作2．两种纯化细菌的方法比较项目优点缺点适用范围平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少,较麻烦，平板不干燥,效果不好,容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌1．培养材料不同的植物组织，培养的难易程度差别很大,容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养.同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。