透析膜要求
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透析袋如何选择透析的基本原理透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直至渗透压达到平衡。
由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可高效用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。
如图透析袋透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析袋透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二***乙烯(PVDF)。
但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。
o生物技术纤维素酯(CE)膜生物学惰性和超纯的生物技术CE膜,用于带电荷分子的分离及大分子纯化。
生物技术CE膜对条件及溶剂要求较高。
一般而言,CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇,MWCO只有轻微改变。
**直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。
生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。
即用透析装置中也可使用CE膜。
性质:亲水、孔径均一生物技术再生纤维素(RC)膜生物技术RC膜通过再生过程制得,物理抗性与化学相容性得到改良,具有与生物技术CE膜一样高纯度与均一的MWCO。
RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的或低浓度有机溶剂共用,**直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。
生物技术RC膜能在pH2-12与4-60℃条件下使用。
性质:亲水、孔径均一生物技术聚偏二***乙烯(PVDF)膜疏水、惰性及无电抗性,生物技术PVDF膜是实验室透析的革命性进步,能够耐极端高温(130℃)及溶剂条件。
透析袋相关知识原理:透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
是利用小分子能够通过而大分子不能够通过半透膜的原理将分子分离。
通常是将小分子和大分子的混合物放进用半透膜制成的透析袋并浸入大量的缓冲液中,袋内小分子就不断通过膜,大分子则被截留。
透析袋选择:1. 材质选择,多考虑蛋白吸附性:CE纤维素酯<RC再生纤维素<PVDF聚偏氟乙烯。
其次是化学耐受性及热稳定性,顺序CE <RC <PVDF。
PVDF为疏水膜,目前已停产。
市场上CE 膜也只有为数不多的厂家生产,如Spectrum Labs(俗称美国光谱)。
RC膜比较普遍。
2.分子量:为保证收率,一般选择的分子量至少为需要截留分子量的50%-80%,只有当需要分离的集中分子的分子量差至少5倍,才能使用透析有效达到分离的目的。
目前RC膜分子量规格较少,不过能满足大部分用户需求。
CE膜的分子量较为齐全,从0.1 KD到1000KD 都有。
3.前处理类型:廉价的膜出厂时都会有甘油并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,对蛋白及其他活性物质有害,使用前需去除。
即用型的膜生产工艺改进后基本不含上述杂质,可纯水浸泡活化后直接使用。
4.品牌选择:建议选择专业的能提供支持的厂商,要是一问三不知那就不好了,有些商家连自己卖的品牌都不清楚,更别提什么认证之类的了。
实际上膜的材料并不值钱,制作工艺比较重要。
不同厂家生产的膜孔径均一性差别很大,样品截留效率相应不同,而这些并不是肉眼所能观察出来的,如若选择不当,很浪费时间,样品如果珍贵就后悔莫及。
Some tips助您提高透析效率:1.采用直径较小的透析膜:透析速度正比于透析浓度梯度差及膜比表面积。
同样长度的膜,扁平宽小的比表面积大。
2.透析温度升高可加快透析:根据布朗运动原理,温度越高,液体分子运动越剧烈,分子的扩散速度也越快。
此条仅限于对温度不敏感的膜及样品。
3.搅拌加速:使用搅拌棒或者磁力搅拌器,加速膜两侧的分子浓度差,能有效提高透析效率。
Spectrum Laboratories Inc. ChinaMail Suite 1509 No.58 Changliu Rd. Shanghai, ChinaTel (+86) 21 6881 0228 Fax (+86) 21 6091 9246*********************************Technical Support 400 628 4448实验室透析常见问题解答Q1:如何准备透析膜管?透析膜管的准备因膜管材质和生产工艺的差别而有所不同。
注意,我们不推荐煮沸处理,因其可能损坏膜管并改变膜孔径。
A)生物技术级RC、CE及PVDF膜可以用DI水冲洗15-30分钟,去除防腐剂叠氮化钠。
B) Spectra/Por R 7标准级RC膜已经预处理,去除了重金属和硫化物,只需在去离子水中浸泡15-30分钟,去除叠氮化钠即可。
C) Spectra/Por R 1-6标准级RC膜,一般情况下,在水中漂洗足以去除甘油或防腐剂,而对于亲和研究之类极其敏感的透析应用或者重金属及硫化物会影响透析样品下游分析的应用,可能需要一些额外的处理以去除在生产过程中引入的痕量水平重金属及硫化物,仕必纯提供两种膜预处理溶液:重金属漂洗液及硫化物清除液,具体产品信息请参考“膜透析配件”网页说明。
Q2:透析的原理是什么?一般需要多长时间才能完成?透析是指溶质在浓度梯度的驱使下,选择性扩散通过半透膜,从而达到大/小分子分离,膜两侧浓度平衡,即小颗粒的溶质通过膜,而大分子物质不能通过,被截留在膜另一边。
如果将样品置于透析膜管内,通过置换膜管外部的透析缓冲液,可将小颗粒物质清除,从而达到纯化大分子物质的目的。
一般来说,一天之内置换3-5次缓冲液,然后在室温条件下,放在搅拌台上隔夜透析,即可达到高效的透析结果。
标准的透析操作一般需要16-24小时。
许多因素会影响透析效率,包括:扩散系数、pH值、温度、时间、物质浓度、样品体积、透析缓冲液体积、透析缓冲液的置换次数、膜表面积、膜厚度、分子带电荷及缓冲液搅拌速率。
血液透析专科知识测试试题库及答案1、尿路感染常见的致病菌()A、变形杆菌B、副大肠杆菌C、大肠杆菌D、粪链球菌E、葡萄球菌答案:C2、透析患者营养不良的干预对策有()A、充分透析B、纠正代谢性酸中毒C、改善炎症状态D、营养指导E、以上都对答案:E3、枸橼酸在血液中的正常浓度()A、0.02-0.04mmol/LB、0.04-0.06mmol/LC、0.06-0.10mmol/LD、0.07-0.14mmol/LE、0.14-0.2mmol/L答案:D4、血液透析机漏血传感器监测每分钟大于()毫升时,报警器发出声光报警A、0.2B、0.3C、0.4D、0.5E、0.6答案:D5、蛋白A免疫吸附疗法临床应用广泛,治疗中可能发生的并发症不包括哪些()A、失衡综合征B、凝血C、破膜答案:A6、血液透析滤过治理模式的主要原理()A、弥散和对流B、超滤C、弥散D、对流E、吸附答案:A7、患者女性,原发性高血压,为其测量血压时正确的做法是()A、若采取立位测量,手臂应平第6肋间B、放气时听到最强音时汞柱所指刻度即为收缩压C、缓慢放气,速度4mmHg/sD、听到变音时汞柱所指刻度即为舒张压E、听到舒张压后保持放气速度,直到汞柱回到零位答案:C8、妊娠透析患者舒张压应控制在()mmHg。
A、60-70B、70-80C、80-90D、90-100E、100-110答案:C9、血液透析患者在治疗过程中发生溶血,体外循环血液的典型症状为()A、头疼B、恶心呕吐C、静脉管路内血液为葡萄酒色D、寒战.低血压E、脉搏细速答案:C10、透析液成分中铝中毒的毒性表现不包括()A、小细胞贫血B、骨病C、脑病痴呆答案:D11、血液透析器复用()A、可用于不同患者B、经彻底消毒可用于不同的患者C、无使用次数限制D、只能用于同一患者E、以上都对答案:D12、24小时尿蛋白持续超过()称为蛋白尿A、3.5gB、150mgC、1.5gD、2gE、1g答案:B13、老年血液透析患者容易发生的并发症有()A、心脑血管系统疾病B、透析失衡综合症C、感染D、营养不良E、以上都对答案:E14、中心静脉留置导管失功的原因有()A、以下都对B、导管内血栓形成C、导管断裂D、导管周围纤维鞘形成E、感染答案:A15、观察休克病人每小时尿量,以下哪项表示组织灌流合适的最低限度()A、20mlB、30mlC、40mlD、50mlE、60ml答案:B16、胸腔镜检查发现某患者胸膜腔持续与外界相通,空气自由进入胸腔,考虑该患者是( )A、单纯性气胸B、胸腔积液C、血气胸D、交通性气胸E、张力性气胸答案:D17、血液透析患者皮肤瘙痒如何预防()A、针对病因采取相应的治疗措施B、控制血清钙.磷和iPTH于适当水平C、使用生物相容性好的管路和透析器D、衣物选用全棉制品E、以上都是答案:E18、代谢性酸中毒常见的原因是()A、肺气肿、哮喘B、肠瘘、肠梗阻C、低钾血症D、急性胃扩张E、持续胃肠减压答案:B19、人工血管动静脉内瘘穿刺时,关于穿刺针头的置入方向,哪项不正确()A、动脉穿刺针头可同血流方向一致B、连接血路管注意动静脉的方向C、静脉穿刺针应予静脉血流相同的方向,指向心脏D、静脉穿刺针可逆血流方向穿刺E、动脉穿刺针头可同血流方向相反置入答案:D20、治疗肝硬化腹水时,如利尿过快,尿量过多,最易诱发()A、上消化道出血B、肝性脑病C、感染D、急性肾衰竭E、酸碱失衡答案:B21、下列哪项不适合血液透析患者的运动()A、举重B、游泳C、慢走D、太极拳E、伸展运动答案:A22、肾衰竭的患者由于代谢产物的蓄积对造血功能的损害及促红细胞生成素的(),使血红蛋白(),血细胞比容()正常值。
用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectr um,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Uni on Carbid e (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)最小分子量,缩写为MwC O)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
10mi n。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10m in。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
一文读懂透析器性能参数超滤透析高通透析液mg展开全文溶质渗透示意图(来源于网络)熟悉的透析器,陌生的参数。
说明书上的各种参数究竟代表什么,你真的了解吗?今天,我们分享一篇文章,一起认识一下每天使用的透析器......01超滤系数(Kuf)--透水性能每 mmHg TMP下,每小时通过膜转运的液体的体积,该值因膜类型不同而异。
单位:ml/h/mmHgkuf与两个因素有关,膜面积A与膜的水力渗透性(Lh)膜的超滤系数(Kuf)是代表透析膜透水性的参数。
Kuf越大,液体透过膜材料阻力越小。
举个例子:当KUf为2.0时,每小时脱水1000ml,需要500 mmHg的TMP。
如果KUf是4.0,每小时脱水1000ml,只需要250mmHg的TMP。
超滤系数用来划分高、低通透析器:低通:< 8 ml/h/mmHg中通:8-20 ml/h/mmHg高通:> 20 ml/h/mmHg实际的Kuf可能与厂商标注值不同,说明书上的标注值是体外实验的数值。
在实际透析中,体内的Kuf通常会低5%-30%。
患者的红细胞压积、白蛋白水平等影响膜表面积和透水性的因素也会对Kuf有影响。
当血液在透析器中流动时,由于持续脱水,使HCT和血浆蛋白质含量沿透析器的长度增加。
随着透析的进展,膜的超滤系数下降。
02 尿素传质系数(KOA)--效率KOA为传质系数(Ko)和膜表面积(A)的乘积,单位为mL/min。
该参数是小分子(通常为尿素)清除率的最大值(即无限大血液和透析液流量的最大清除量) 。
KOA理论上应该为常数,但中空纤维透析器纤维束内部的液体流动对KOA曲线产生了影响,实际研究发现KOA与透析液流量与血流量有关。
KOA可以直接对比不同透析器的溶质清除效率。
不同透析器在一定条件下的实际KOA值KoA值用来评价透析器效率:低效透析器 KoA< 500mL/min中效透析器 KoA: 500--600mL/min高效透析器 KoA>600 mL/min高效透析器(KOA>600)与高通透析器(Kuf >20),实际上是两个概念,尽管高通透析器通常高效。
血液透析常见种类血液透析基本治疗模式仍可根据透析膜的超滤系数(Kuf)指标大体上分为两大类:低通量血液透析和高通量血液透析。
一、低通量血液透析使用Kuf≤15m1/(h.mmHg)的透析膜进行血液透析,可称为低通量血液透析,低通量膜的共同特点是以弥散清除小分子物质为主。
包括:(一)标准的血液透析1.透析器透析膜Kuf<~15ml/(h·mmHg),膜面积通常在1·2~1·5m2之间。
2.血液流速血液流速多取干体重(kg)的4倍数值,通常在200~300ml/min,成年透析患者应>180ml/min。
3.透析液一般采用碳酸氢盐透析液,其流速为血液流速的2倍,通常是500ml/min。
4.透析时间根据残余肾功能(Km)确定。
Kru<2.5ml/min,每周透析3次,每次4小时;Kru>~2.5ml/min,每周2次,每次4小时。
(二)高效血液透析所谓高效血液透析方式在国外完全是针对一部分体形硕大的透析患者而开发并用于临床的,在这部分透析患者中因其尿素氮分布容积增大,若仍采用标准血液透析治疗,透析不充分。
为了提高血液透析的效率,选用大表面积的透析器,同时提高血液流速(>300ml/min)和透析液流速(>700ml/min),以达到小分子尿素氮被充分清除的目的。
在实施高效血液透析时需注意以下几点:1.透析器通常采用膜面积≥1.5m2和尿素转运面积系数>600m1/min的透析器。
2.高血液流速血液流速较透析液流速对尿素氮的清除影响大,增快血液流速较增快透析液流速所获的清除效率更高。
3.再循环率高血液流速的另一问题是透析治疗时的再循环率会随着升高,如此会抵消透析治疗的有效率。
4.透析液采用碳酸盐透析液。
进行高通量血液透析时血压较为平稳。
另外适度地保持透析液中的钠离子在140—142mmol/L,导电度14.O~14·2;或是加入糖分100-200mg/dl也可以增加血液的渗透压,加速组织中水分回流血管中,避免血压下降。
透析袋处理及透析操作透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",袋(膜)外的溶液称为"渗出液"或"透析液"。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm~50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析袋的处理:可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水彻底清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
从此时起取用透析袋必须戴手套。
透析袋在使用前如何处理透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国美国光谱医学公司(spectrum,上海欧韦达仪器科技有限公司是中华区特约总经销)和美国Union Carbide (联合碳化物公司,上海欧韦达仪器科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为8 mm~77 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量)通常为1万左右。
一、透析器的血室容量
四、化学性能
1、还原物质—20mL检验液和空白液消耗高锰酸钾溶液的体积之差不超过2mL。
2、金属离子—透析膜的检验液中金属钡、铬、铜、铅、锡的总量不得超过1μg/mL,
镉的含量应小于0.1μg/mL。
3、酸碱度—透析膜的检验液与同批対照液PH值之差不大于1.5。
4、蒸发残渣—100mL的检验液中蒸发残渣的总量不大于2mg。
5、紫外吸光度—检验液的吸光度应不大于0.1。
6、色泽—检验液应无色透明。
五、生物学评价
1、无菌--透析器采用γ射线或电子束灭菌,以保证产品上的细菌存活概率小于10-6。
灭菌过程的确认应形成文件。
注:GB/T 14233.2规定了无菌试验方法,但该方法不适用于证实灭菌批的灭菌效果,仅适用于型式试验而不适用于出厂检验。
2、无热原--应无热原,细菌内毒素含量应小于0.5EU/mL。
3、细胞毒性--透析器的细胞毒性应不大于1级。
4、致敏反应--透析器应无致敏物。
5、皮内反应--透析器应无皮内反应。
6、急性全身毒性--透析器应无急性全身毒性。
7、血液相容性
7.1血栓形成--应与阴性对照无显著差异。
7.2凝血--应与阴性对照无显著差异。
7.3血小板--应与阴性对照无显著差异。
7.4血液学
a) 白细胞计数/粘附:应与阴性对照无显著差异。
b) 溶血: 透析器溶血率应小于5%。
7.5补体系统--应与阴性对照无显著差异。
7.6遗传毒性--应与阴性对照无显著差异。
7.7亚慢性毒性--应与阴性对照无显著差异。
7.8植入试验--透析器与血液直接接触的材料,进行肌肉植入试验应与阴性对照无显
著差异。
7.9透析器的空心纤维(膜)肌肉植入试验--应与阴性对照无显著差异。
7.10透析器外壳材料肌肉植入试验--应与阴性对照无显著差异。
7.11透析器用封口胶肌肉植入试验--应与阴性对照无显著差异。
7.12透析器用密封圈肌肉植入试验--应与阴性对照无显著差异。