技巧 · 培养基母液配制方法之大量元素母液
导读：本文以配制 MS 培养基配方为例，分为上下两部分，上半部分讲解培养基各种母液的配制方法，下半部分讲解固体培养基的配制方法。母液主要分为：大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、铁盐母液、植物生长调节剂母液。
材料与用具
1. 药品与试剂
配制 MS 培养基母液所需的无机盐及有机物（见最后面的 MS 培养基配方表格）；
植物生长调节剂（植物激素）：IAA、IBA、NAA、2，4-D、6-BA、KT；95%
乙醇；1mol/L 氢氧化钠，1mol/L 盐酸；蒸馏水（或去离子水）。
2. 仪器与用具
电子分析天平（感量 0.001g）、普通天平（感量 0.1g），烧杯（100mL、500mL、1000Ml），量筒（100mL），移液管（1mL、5mL、10mL）,容量瓶（250mL、500mL、1000mL），棕色广口瓶（100mL、500mL、1000mL），水浴锅、磁
力搅拌器、冰箱、药勺、标签纸、铅笔等。
配制大量元素母液的方法与步骤
将 MS 培养基配方中的各大量元素的化合物，按其所规定量的 10 倍分别在普通
天平上称重，如下表：
再分别用 100mL 烧杯加蒸馏水将其溶解，待充分溶解后将它们按顺序依次移入
1000mL 容量瓶中，并加蒸馏水定容至 1000mL；此时混合液若出现白色沉淀则
母液配制失败，若清澈透明则已配制成功。然后将已配制好的大量元素母液移入
广口瓶中，并贴上标签（标记母液名称、浓缩倍数、配制日期及以后配制 1L 培
养基时应移取的量）。最后将母液放入冰箱内保存备用。
注意事项
1、配制大量元素母液时，某些无机成分如 Ca2+、SO42－、Mg2+和 H2PO4－
等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少
一、MS培养基母液的配制
注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。
2．微量元素母液的配制
按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，母液
成 分 1倍培养基用量 浓缩
倍数 称取量（mg） 母 液
体积（ml） 配制1升培养基吸取量（ml） 编号 种类
1 大量元素 KNO3 1900 10 19000
1000 100 NH4NO3 1650 10 16500
MgSO4·7H2O 370 10 3700
KH2PO4 170 10 1700
2 CaCl2·2H2O 440 10 4400 1000 100
3 微量元素 MnSO4·4H2O 22.3 100 2230
1000 10 ZnSO4·7H2O 8.6 100 860
H3BO3 6.2 100 620
KI 0.83 1000 830
1000 1 Na2MoO4·7H2O 0.25 1000 250
CuSO4.5H2O 0.025 1000 25
CoCL2.6H2O 0.025 1000 25
4 铁盐 Na2-EDTA 37.3 100 3730 1000 10 FeSO4.4H2O 27.8 100 2780
5 有机物 甘氨酸 2.0 50 100
500 10 盐酸吡哆醇（VB6） 0.5 50 25
盐酸硫铵素（VB1） 0.1 50 5
培养基母液的配制方法
一、实验目的
1.了解无菌操作
2.掌握培养基母液的配制方法
二、实验原理
配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配
制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称
量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸
取母液进行稀释配制即可。
三、实验器材和药品
器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。
药品：NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、
MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、
ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、
CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌
醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素B1)、甘
氨酸。
四、实验步骤1、大量元素母液的配制
各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分
别溶解，按顺序逐步混合。后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，
即为10倍的大量元素母液。到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表1 MS培养基大量元素母液制备序号药品名称培养基浓度
（mg/L）扩大10称量
(mg)
1NH4NO3165016500
2KNO3190019000
3CaCl2·2H2O4404400
4MgSO4·7H2O3703700
5KH2PO41701700
注意：
(1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+
和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现
象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较
高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。特别应将Ca2+、SO42一、Mg
2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
(2)CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O 时，蒸
实验1、培养基母液的配制
一、实验目的
1、了解植物组织与细胞培养基的基本类型和组成。
2、掌握植物组织与细胞培养基各种母液的配制方法。
二、实验原理
离体植物组织和细胞的生长、分化所需要的营养物质都是由培养基供给。基本培养基通常包括大量元素、微量元素、有机物以及糖和水，完全培养基是在基本培养基的基础上，附加植物生长调节剂、椰乳、香蕉汁、番茄汁等天然提取物。迄今为止，基本培养基的配方已有几百种，但较常用的有一二十种，如MS、White、N6、B5等。
实验用的培养基一般是先配成10-100倍的母液，用时再按配方配制培养基。
二、实验用品
1、实验器材：冰箱、电炉、电子天平、移液管、量筒、烧杯（1000mL、500mL、50mL）、容量瓶、玻璃棒、试剂瓶（1000mL）、标签纸等。
2、实验试剂：MS培养基配方中的19种试剂，2,4-D，KT， NaOH，HCl，95%乙醇， HgCl2，次氯酸钠，蒸馏水等。
三、实验方法
1、大量元素母液的配制
按表1-1计算并称取各试剂，用蒸馏水依次溶解，最后定容到1000mL，即为10倍的大量元素母液，倒入试剂瓶，贴好标签，保存于4℃冰箱里。
表1-1 MS培养基大量元素母液试的配制
母液 成份 规定量/(mg·L) 扩大倍数 配制母液体积/L 称取量/mg 备注
大量元素母液 KNO3 1900
10 1L 19000 √
NH4·NO3 1650 16500 √
MgSO4·7H2O 370 3700 √
KH2PO4 170 1700 √
CaCl2·2H2O 440 4400 √
注意1: ①称取量的值（mg）=规定量(mg/L)×扩大倍数×母液体积(L) ②每称量一种试剂，都要在备注栏中相应的部分做好标记，比如写上日期和划出“√”。注意2：
①为避免沉淀现象发生，应将Ca2+、SO42-、Mg2+和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合；
