第２８卷第４期 水 利 渔 业 ２００８年７月 ・１２１・
常用抗菌渔药对副溶血弧菌的作用效果比较
王晓洁，杨立红，梁建光，王建明，孙东红
（鲁东大学生命科学学院，山东烟台２６４０２５）
摘要：测定市场上８种常用抗菌渔药ｘ，／￣ｌＪ溶血弧菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）以及比较这８种常用抗菌渔
药单独用药与联合用药ｘ，／￣ｌＪ溶血弧菌的抑杀菌效果。采用２倍稀释法及抑菌圈法测定。８种常用抗菌渔药 对副溶血弧菌的ＭＩＣ分别为：甲砜霉素、氟哌酸为３．２ ｍＬ，氟甲砜霉素６．４ ｍＬ，土霉素１２．８ ｍＬ，
庆大霉素、盐酸诺氟沙星和链霉素为２５．６ Ｉｘｇ／ｍＬ，而新诺明在２５．６ Ｉｘｇ／ｍＬ时仍无抑杀菌效果；８种常用抗菌 渔药在１０倍ＭＩＣ下，抑菌圈直径分别为氟甲砜霉素２．０５ ｅｍ，氟哌酸１．７５ ｅｍ，盐酸诺氟沙星１．３５ ｅｍ，土霉
素１．２３ ｅｍ，甲砜霉素１．１７ ｅｍ，链霉素１．１０ ｅｍ，庆大霉素１．Ｏ０ ｅｍ；联合用药的抑菌圈直径分别为：氟甲砜霉
素与氟哌酸１．５５ ｅｍ，氟甲砜霉素与土霉素１．４３ ｅｎｑ，氟甲砜霉素与盐酸诺氟沙星１．４２ ｅｍ，盐酸诺氟沙星与
甲砜霉素１．３０ ｅｍ，链霉素与庆大霉素１．２３ ｅｍ，氟甲砜霉素与链霉素１．１８ ｅｍ，土霉素与氟哌酸１．１２ ｅｍ，链
霉素与土霉素１．Ｏ０ ｅｍ。通过对抗菌渔药筛选中最佳参数的探讨以及临床用药量与药物的负荷量的关系探
讨，结论是抑杀副溶血弧菌氟哌酸为首选，其次为土霉素和甲砜霉素；３组联合用药效果与单独用药相比敏
感度不变，５组联合用药则敏感度变低。
关键词：抗菌渔药；副溶血弧菌；ＭＩＣ；抑菌圈
中图分类号：￥９４８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００３—１２７８（２００８）０４—０１２１—０３
副溶血性弧菌是我国沿海地区最常见的食物中毒病
原菌，曾多次在食物中毒爆发事件中分离到该细菌。近 年来我国及其它国家有多起副溶血性弧菌食物中毒发
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副溶血弧菌对于常见养殖鱼类的影响
作者：魏盟智 郝晨光 赵子晨
来源：《食品界》2017年第09期
一氧化氮是一种广泛分布在生物体内各处的信息分子。生物体内的每种信号分子，都有着自己明确的分工与任务，以此保证生物生命活动有序进行。一氧化氮就充当了生物的信使、效应分子和免疫调节分子，发别在生物的信息处理、应对与免疫系统上发挥着作用，其中最重要，也最显著的方面就是免疫调节功能。一氧化氮是一种化学物质，能通过其非特异性杀死细菌、病毒等对生物健康有害的物质，促进生物机体的非特异性免疫功能；同时，一氧化氮也因它信号分子的身份控制生物机体的特异性免疫。经研究表明，一氧化氮在许多病理状态下，可以充当调节许多免疫活性的介质，影响机体免疫功能。
一氧化氮的合成是由一氧化氮合酶催化。一氧化氮合酶催化L-精氨酸，在生物体内合成一氧化氮，可以改变机体的免疫能力。本文为研究副溶血弧菌感染常见养殖鱼类石斑鱼后体内一氧化氮合酶的变化情况，为今后人类合理使用副溶血弧菌提供数据。
材料与方法
材料。
（1）药品
副溶血弧菌，一氧化氮合酶测定试剂。
（2）实验鱼
取自同一水域，相同体长，相同体重，且无疾病的石斑鱼。
实验方法。
（1）设计方案
将石斑鱼都放在相同水位的培养桶里，分别注射浓度为6×10∧6cfu/ml、6×10∧7cfu/ml、6×10∧8cfu/ml的副溶血弧菌悬液，向对照组注射相同量的生理盐水，每组设置三个平行对照组。注射方法为腹腔注射，在注射后24h、48h、72h、120h用0.1ml一次性注射器采血，所取血液放于4℃恒温冰箱里一夜后，利用转速离心法以4000r/min离心5分钟，后储存于-20℃恒温冰箱里待测。
（2）检验方法 龙源期刊网
第 1 页 副溶血性弧菌食物中毒诊断技术
*导读：副溶血弧菌营养要求不高，普通培养基、蛋白胨水中均可生长。在含盐3.5%的培养基上生长良好，0.5%盐时可生长，12%以上及无盐的培养基中不能生长。……
(一)检验方法
1.样品采集
以无菌方法采取具代表性的样品，置灭菌的容器内。一般采集患者粪便、呕吐物和中毒的可疑原因食品。常见可疑的食品有鱼、虾、蟹、贝等海产品及其他有关的食品。若上述食品均为煮熟品，也可检验它们的包装物、烹调用具等。
副溶血弧菌不宜在低温环境中生存，故采集到的样品应尽快送往实验室，不宜冷冻保存运送，以免影响检验结果。
2.分离培养
副溶血弧菌营养要求不高，普通培养基、蛋白胨水中均可生长。在含盐3.5%的培养基上生长良好，0.5%盐时可生长，12%以上及无盐的培养基中不能生长。发育温度为30-37~C，以37~C最佳。生长的pH范围是7.0-9.5，最适pH为7.7～8.0，需氧性强，厌氧生长很缓慢。多数菌株于肉汤、蛋白胨水等培养基中呈浑浊表面形成菌膜。R型菌发生沉淀。厌氧培养48h以上，才见生长。固体培养基上菌落常呈圆形隆起，不透明，表面光滑、湿润，多数菌株继代后，呈不正圆。粗糙型菌落，灰白半透明或不透明， 第 2 页 在EMB琼脂上不生长。某些菌株在麦康凯培养基上不生长;生长者，其菌落为圆形、平坦、半透明或浑浊略带红色。从腹泻病例初次分离到的菌落多较典型一般不形成色素。食品中分离到的菌株，多为R型。胆酸盐稍有阻止该菌扩散的作用，血平板上可见溶血环。在氯化钠蔗糖平板上菌落呈绿色。S.S琼脂上菌落中等大，无色透明、扁平、有动性，不易被接种环挑起。 该菌对乙酸，90%以上菌株对0/129抑制弧2，4-二氨基-6，7-二异丙基喋啶)敏感。该菌的溶血作用是因其具有耐热性溶血素，这种溶血素是相对分子质量约为42000的酸性蛋白质，对心脏有毒性，是一种即时型致死毒。
(二)动物试验
413※分析检测食品科学2010, Vol. 31, No. 20
Ｗｅｓｔｅｒｎ斑点印迹法检测致病性副溶血弧菌
杨靖亚，张 建，赵 勇，陶 妍，陆小凡，晁若瑜
(上海海洋大学食品学院，上海 201306)
摘 要：目的：对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus，VP)的直接耐热溶血毒素(thermostable direct hemolysin，
TDH)进行分离纯化，建立Western斑点印迹法技术检测致病性副溶血弧菌的方法。方法：用直接耐热溶血毒素免
疫小鼠得到特异性抗血清，利用棋盘方法确定免疫血清最佳工作浓度，并对致病性与非致病性副溶血弧菌分别进行
特异性测定。结果：最佳免疫血清最佳工作浓度为1:3200；检测致病性副溶血弧菌为阳性，非致病性副溶血弧菌
属呈阴性。结论：Western斑点印迹法技术可以特异性检测致病性副溶血弧菌，灵敏度高、操作简单，可用肉眼
判定结果。
关键词：耐热直接溶血毒素；Western斑点印迹；致病性副溶血弧菌；检测
Detection of Pathogenic Vibrio parahaemolyticus by Western Blotting
YANG Jing-ya，ZHANG Jian，ZHAO Yong，TAO Yan，LU Xiao-fan，CHAO Ruo-yu(College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China)
Abstract: Objective: To purify thermostable direct hemolysin (TDH) from the culture of Vibrio Parahaemolyticus and to establish
western blotting method for determining pathogenic Vibrio parahaemolyticus. Methods: The specific anti-serum was obtained
