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仪器及试剂电转槽，电泳仪，0.45um（适用于20KD以上蛋白）及0.22um（适用于20KD 以下蛋白）孔径的PVDF膜，切成略大于凝胶大小，两张Whatman 3MM 滤纸，切成与凝胶大小，甲醇（100%），DD水试剂配制CAPS电印迹缓冲液（母液）10×CAPS（100mmol/L）CAPS 22.13g加去离子水至900ml用2mol/L NaOH （约20ml）将pH值调至11.0，然后定容至1L，贮存于4ºC。
CAPS电印迹缓冲液（工作液，含10％甲醇的1×CAPS，临用前混合）10×CAPS 200ml甲醇200ml去离子水1600ml染色液0.1％考马斯亮蓝G-25040％甲醇/1％乙酸脱色液50%甲醇1 . 转膜操作1.1 制备足够的转移缓冲液以充满电转槽，一次大概1L就行。
1.2 从玻璃板上取下凝胶，去除所有浓缩胶。
1.3 将凝胶侵入电转缓冲液30min。
1.4 滤纸在电转缓冲液中浸泡1 min。
1.5 准备膜，在甲醇中浸泡15s，膜均匀地由不透明变成透明，然后将膜放于DD水中5min，再小心将放于转移缓冲液中平衡10min。
2. 组装转移叠层2.1 打开转移夹子，黑孔板朝下，放一块泡沫（纤维）垫子，泡沫垫子用缓冲液泡一下。
2.2 在泡沫垫上放一张滤纸。
2.3 将凝胶放在滤纸上。
2.4 将膜放在凝胶上。
（如果有气泡，可以用玻璃棒轻轻赶一下。
）2.5 在叠层上再放一层滤纸。
2.6 在滤纸上再放一块泡沫垫子。
2.7 合上转移夹子。
此操作最好放在转移缓冲液中进行3. 蛋白质转移3.1 将转移夹放入转移槽中，黑孔板面对准支撑板的负极（黑色），白孔板对准支撑板的正极（红色）。
3.2 在转移槽中加入适量缓冲液，确保将转移槽全部浸没。
3.3 将黑色阴极引线插入转移装置的阴极插孔，红色阳极插入阳极插孔。
3.4 连接阳极和阴极引线对应的电源输出端。
3.5 装置冷却单元，确保电转在低温下进行。
新华1-5号滤纸片WHATMAN定性滤纸用于定性分析技术中鉴定物质的性质。
折叠好的定性滤纸与相同型号平整的小组相比，回忆了流速和增加了负载力。
WHATMAN定性滤纸-标准级分类Grade1（1号）:11μm 在日常过滤中最经常使用的，中等保留力的流速。
非常广泛地用于实验室应用，澄清液体。
典型地用于沉淀物的定量分析分离，如硫酸铅、草酸钙和碳酸钙。
在农业方面，它用于土壤和种子测试：在食品方面，Grade1滤纸常用于从相关液体和抽离液体分离固体食品的常规方法。
并且广泛用于教学中简单的定性分析分离。
在空气污染监测方面，有圆片和卷状可供使用，从气流中收集大气灰尘然后用光度计测量；在气体探测中滤纸用发色剂浸湿，用光反射来定量。
Grade2（2号）:8μm 比Grade1保留力略强，但过滤时间却相对长些（即过滤速度相对慢些），吸附性比Grade1强，已折叠好的为Grade2V。
除8μm大小颗粒的普通过滤之外，它额外的吸附性能也派上用场，例如，在植物生长实验中截留土壤营养，也用于监测空气和土壤测试中的特殊污染物。
已折叠好的为Grade2V。
Grade3（3号）6μm 厚度是Grade1的两倍。
负载力好，颗粒保留较小。
由于其湿强度好适合放在布氏漏斗中使用。
其高吸附性能可用作为样品的载体。
Grade4（4号）：20-25μm 非常适用于分析中常规生物液体和有机浸出物澄清的快速过滤，空气污染监测中只要求高流速但对细小颗粒收集要求不严的采样。
Grade5（5号）:2.5μm 最高效的定性滤纸，用于收集小颗粒，流速慢。
适用于化学分析、澄清悬浮物和水/泥土分析。
Grade6（6号）:3μm 流速是Grade5的两倍，但颗粒保留度相等。
常被指定用于锅炉水分析。
鞣质定实验报告引言鞣质是植物细胞壁中的一种重要成分，具有增强细胞壁的稳定性和抗病性的作用。
为了深入了解鞣质的特性和定量方法，本文进行了鞣质定实验。
本实验以青梅叶为材料，通过提取鞣质并使用铁氯化法定量，从而获得了青梅叶中鞣质的含量。
本文将详细介绍实验步骤、实验结果以及相关讨论。
实验步骤1.取青梅叶片50克，洗净并切碎成小片。
2.将青梅叶片加入300 mL的95%乙醇中，密封容器。
在60°C的水浴中反复提取8小时，并定期摇晃容器。
3.用Whatman No. 1滤纸过滤提取液，收集滤液。
4.取得的提取液中加入10% FeCl3溶液，溶液中铁离子与鞣质结合形成蓝黑色的沉淀。
5.通过Whatman No. 1滤纸过滤产生的沉淀，并用去离子水洗涤沉淀。
6.将滤纸上的沉淀干燥至恒定重量，称量记录干燥后沉淀的质量。
实验结果通过以上实验步骤，我们成功地从青梅叶中提取出鞣质，并使用铁氯化法定量。
实验样品的质量为50克，干燥后沉淀的质量为0.25克。
根据实验结果，计算出鞣质的含量为0.5%。
讨论本实验使用了铁氯化法对青梅叶中的鞣质进行定量分析。
铁氯化法是鞣质定性和定量的常用方法之一，其原理是铁离子与鞣质结合形成特征的沉淀。
实验结果显示，青梅叶中鞣质的含量为0.5%。
这证明了青梅叶具有较高的鞣质含量，表明青梅叶具有较好的抗氧化和抗病性能力。
这对于进一步研究青梅叶的药用价值和开发相关产品具有重要意义。
然而，本实验存在一些可改进的问题。
首先，实验中使用的提取时间较长，需要8小时，可以考虑优化提取方法以减少时间和提高效率。
其次，铁氯化法虽然常用且简便，但也有一定的局限性，可能会对样品产生一定的干扰平移现象。
总而言之，本实验成功地通过提取和定量方法获得了青梅叶中鞣质的含量。
这为进一步研究鞣质的特性和在医药领域的应用奠定了基础。
结论在本次鞣质定实验中，我们通过提取和使用铁氯化法成功地获得了青梅叶中鞣质的含量。
根据实验结果，青梅叶中的鞣质含量为0.5%。
实验目的】掌握DNA印迹技术的基本原理，学习DNA印迹技术的操作方法，了解DNA 印迹技术的应用范围。
【实验原理】DNA印迹是1975年由英国Southern创建的。
其基本原理是：DNA分子经限制性核酸内切酶酶切后，由琼脂糖凝胶电泳将所得DNA片段按分子质量大小分离，然后将DNA片段变性，并使凝胶中的单链DNA片段转移到尼龙膜、硝酸纤维素膜(NC)或其他固相支持物上，此法中DNA片段由液流携带通过虹吸作用由下向上抽吸，从凝胶转移印至滤膜表面。
然后与相对应结构的已标记的探针进行杂交反应，用放射性自显影或酶反应显色来鉴定待测DNA分子。
DNA印迹技术主要用于对基因组DNA的定性和定量分析、克隆基因的酶切图谱分析、基因突变分析及限制性片段长度多态性(RFLP)等。
【实验对象】待测DNA。
【试剂与器材】(1) 水平电泳装置，电泳仪，紫外灯，摇床。
(2) 待测DNA，琼脂糖，溴化乙啶，DNA探针，保鲜膜，缓冲液。
(3) 0.25 mol/L HCl(4) 变性液：1.5 mol/L NaCl; 0.5 mol/L NaOH (保存于室温)。
(5) 中和液：(pH 7.0) 5 mol/L NaCl; 0.5 mol/L Tris-HCI (保存于室温)。
(6) 转移液(20×SSC pH 7.0)：用800 ml H2O溶解175.3 g NaCl和88.2 g 柠檬酸钠，以浓HCI调pH至7.0，用双蒸水定容至1 L。
分装后高压灭菌。
(7) 2×SSC。
(8) 尼龙膜或硝酸纤维素(NC) 膜。
【实验方法与步骤】(1) 取适量已酶切充分的待测DNA (1 μg左右) ，于0.8%~1.25％的琼脂糖凝胶上与合适的DNA分子量标准一同进行稳压电泳。
(2) 切去凝胶一角以标记方向，用溴化乙啶染色后拍照记录电泳结果(拍照时，凝胶旁放一尺子，便于以后对照电泳带在膜上的位置) ，再切下一侧DNA 分子量标准带。
1．5．2过滤：在水质分析中，常用滤纸、玻璃砂芯滤器、古氏坩埚等过滤水样。
(1)滤纸分为定性滤纸与定量滤纸，用棉花等纤维制成。
常用的有直径为5．5，7，9，12．5及15cm等规格。
①定性滤纸：定性滤纸含硅、铁、铅等杂质，灼烧后灰分多，供一般过滤用，不能用于常规定量分析及微量金属分析。
常用的定性滤纸分快速、中速及慢速三种。
②定量滤纸：分为单洗及双洗两种。
单洗定量滤纸已经过盐酸处理，除去铁及无机盐等杂质，但灼烧后灰分仍较高，不适合精密分析用。
双洗定量滤纸是用盐酸和氢氟酸处理过的，除去了硅酸盐、金属等杂质，并用纯水洗净。
每一小张滤纸灼烧后，灰分一般<0．01mg，但因厂牌、批号不同，铅、铁等杂质的含量也有差异，用于测定微量金属，使用前还需用稀盐酸、稀硝酸及纯水依次洗涤。
定量滤纸分快速、中速、慢速三种；过去称为白带、蓝带与红带，孔径分别为80-120，30-50和1～3μm。
滤纸的选择应根据沉淀粒度而定。
过滤细微沉淀(如硫酸钡)不能用孔径大的滤纸，大颗粒沉淀亦不能用慢速滤纸。
选择滤纸大小系根据沉淀量而不依溶液体积多少，沉淀的体积不能超过滤液容积的一半。
如溶液体积大而沉淀又少时要用小滤纸。
对微量分析尽可能用较小的滤纸，以减少由滤纸沾污而引起的误差。
根据滤纸的大小选择合适的漏斗，放入的滤纸应比漏斗边缘约低1cm，不容许高出漏斗，以免因张力作用，使沉淀溢出漏斗而损失。
折叠滤纸时应避免沾污滤纸，这对微量分析更为重要。
强酸或强碱溶液不能用滤纸过滤。
(2)过滤与沉淀洗涤将漏斗置漏斗架上，接受滤液的清洁烧杯放在漏斗下面，使漏斗茎下端在烧杯口的边缘以下3-4cm处并与烧杯壁靠紧。
采用“倾注法”过滤，即待沉淀沉降于烧杯底部后，将上层清液沿一小玻棒小心倾人漏斗滤纸中，使清液先通过滤纸，尽可能不搅动沉淀。
在开始过滤时要不断察看是否有细小沉淀进入滤液中。
如有，应反复过滤。
因为滤纸的较大孔隙须待沉淀将其堵塞后方可克服。
洗涤沉淀也可采用倾注法。
常用滤纸的分类介绍与概述一、纤维素纸滤纸和滤片是以纤维素材料和玻璃纤维为原料，利用造纸技术制成的。
造纸用的材料还有合成的聚合物、陶瓷或金属纤维。
纤维素滤纸的用途主要有实验室用、工业用及机动车用三大类。
1.实验室用纤维素滤纸实验室用纤维素滤纸中，有一类是定性滤纸，可截留尺寸为3到30μm的粒子，用来分析指定材料成分的数量。
在这种用途情况下，滤纸的纯度和成分至关重要。
表4-1列出了What-man纤维素滤纸的性质。
Whatman实验室纤维素滤纸使用注意点如下：（1）定性滤纸有6个等级，分别是：Grade1：实验室中的一般用途；Grade2：与Grade1相比，它有较高的截留能力和较低的过滤速度；Grade3：厚的滤纸具有好的负荷能力、可截留细小的粒子、强度高等优点，经常用在瓷漏斗上，它的吸收能力强，常用作过滤介质试样的支撑物；Grade4：流速高、较大粒子的截留性好、能使胶质物沉淀；Grade5：用来收集小粒子的最有效的定性滤纸，流速低；Grade6：粒子截留能力好，指定用于锅炉水的分析。
（2）湿增强的定性滤纸有5个等级，分别是：Grade91：用于要求不高的日常分析，在世界范围内，用来分析甘蔗糖中的蔗糖成分；Grade92：比Grade91厚，截留能力也强，用于甜菜糖的分析；Grade93：类似于Grade91，但表面平滑；Grade113：负荷能力高，流速最快，是最厚的滤纸，强度非常高，用于胶质沉淀物的分析很理想；Grade114：是表面平滑、强度非常高的滤纸，适用于胶质沉淀物。
（3）无灰定性滤纸有5个等级，分别是：Grade40：它是一般用途的无灰滤纸，主要用途包括重力法分析、在原子吸收分光光度测定之前的溶液过滤、空气中污染物的监控；Grade41：它是最坚固的无灰滤纸，用于大粒子或胶质沉淀物的分析，例如铁或铝的氢氧化物的分析；Grade42：它是用来收集小粒子或细的沉淀物的最有效的定性等级滤纸，例如收集硫酸钡；Grade43：用于食品材料分析和土壤分析；Grade44：收集小粒子的效率稍低于Grade42，但流速较高。
whatman DE-52纤维素详细使用方法Whatman DE-52纤维素使用方法1.简介Whatman DE-52纤维素是一种常用的离子交换纤维素，用于分离和净化蛋白质和其他生物大分子。
本文档将详细介绍其详细使用方法。
2.材料准备●Whatman DE-52纤维素●缓冲液：根据实验需要选择适当的缓冲液。
●清洁的实验室仪器和设备：如瓶子、离心机、pH计等。
●实验用具：如滤纸、滤芯、吸引器等。
3.DE-52纤维素的制备过程●首先，在一个干燥的容器中称取适量的DE-52纤维素。
●将DE-52纤维素与缓冲液混合，并用搅拌棒搅拌均匀。
●观察混合物的颜色和质地，确保DE-52纤维素完全悬浮在缓冲液中。
●将混合物从容器中过滤出来，以除去任何残留颗粒。
●检查过滤的液体，确保没有任何不溶性物质。
4.样品预处理●检查待处理样品的pH值，确保其适合使用DE-52纤维素进行离子交换。
●如果需要，可以调整样品的pH值，以最大限度地提高DE-52纤维素的效果。
5.离子交换过程●将DE-52纤维素的适量加入到预处理样品中，并充分混合。
●让样品与DE-52纤维素充分反应，并保持一定的时间来完成离子交换作用。
●过滤样品，以除去DE-52纤维素和已经发生离子交换的物质。
●收集过滤液，这样您就可以分析或进一步处理纯净的样品了。
6.清洗和保存DE-52纤维素●每次使用后，将DE-52纤维素用适当的溶剂进行清洗，以去除任何残留的样品或杂质。
●定期检查DE-52纤维素的质量，并根据需要进行更换。
●储存DE-52纤维素在干燥、阴凉的地方，远离阳光和高温环境。
附件：●本文档没有附带任何附件。
法律名词及注释：●无。
实验一：氨基酸的分离鉴定--纸层析法一、目的：通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法。
二、原理：层析法也叫色谱法，是一种物理分离方法，它是利用混合物中各组分的物理、化学性质的差异，使各组分以不同的程度分布在两个相中，其中一个相为固定相，另一个相则流过此固定相（称流动相）并使各组分以不同的速度移动从而达到分离。
层析法是近代生物化学最常用的分析方法之一，运用这种方法可以分离性质极为相似而用一般化学方法难以分离的各种化合物。
如各种氨基酸、核苷酸、糖、蛋白质等。
层析法有许多种类，根据分离所依据的理化性质不同，可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析等。
纸层析是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定；也是定性或定量测定多肽、核酸碱基、糖、有机酸、维生素、抗生素等物质的一中分离分析工具。
纸层析属于分配层析法。
分配层析法是一种连续抽提法，利用不同的物质在两个互不相溶的溶剂中的分配系数的不同而得到分离。
纸层析以滤纸作为惰性支持物，滤纸纤维素上的羟基具有亲水性，能吸附一层水，把吸附在滤纸上的水作为固定相，展层用的有机溶剂为流动相。
水被吸附在纤维素的纤维之间形成固定相：由于纤维素上的羟基具有亲水性，和水以氢键相连，使这部分水不易扩散，所以能与跟水混合的溶剂仍然形成类似不相混合的两相。
当有机相沿纸流动经过层析点时，层析点上的溶质就在水相和有机相之间进行分配，有一部分溶质离开原点随有机相而进入无溶质的区域，这时，又重新分配，一部分溶质从有机相进入水相。
当有机相不断流动时，溶质就沿着有机相流动的方向移动，不断分配。
溶质中各组分的分配系数不同，移动速率也不同，因而可以彼此分开。
纸上层析法的一般操作是将混合物点到纸上，干后让溶剂从有样品的一端经毛细作用流到纸的另一端。
在密闭的容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向反复抽提，由于混合氨基酸在两相中的分配系数（当把一种物质在两种不相溶的溶剂中振荡时，它将在这两相中不均匀分配。
