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地震等自然灾害过后水体会被大量微生物所污染,特别是被粪便污染。
如水体中含有肠道病原菌株,人饮用后会暴发严重疾病。
粪大肠菌群是一类能使乳糖发酵、产酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌,是水体受人畜粪便污染的最直接指标。
对于粪大肠菌群检测的方法主要为滤膜法和多管发酵法,但试验过程较为繁琐,因此亟需一种快速简便的检测方法。
酶底物法也可用来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌,操作方便,检测时间短,无需确认试验。
但该方法尚未正式列入国家标准,因此,该文通过与多管发酵法相比较,对酶底物法进行验证分析。
1材料与方法1.1试验材料仪器及试剂:乳糖蛋白胨;EC 肉汤;灭菌锅;科立得TM (Colilert R )试剂(美国爱德士生物科技股份有限公司);酒精灯;100mL 无菌取样瓶(里面装有1.5%硫代硫酸钠去除水样中的余氯);3mm 接种环;无菌培养定量盘(97孔);封口机(带97孔定量盘橡胶托垫);97孔阳性标准比色盘;培养箱。
1.2试验方法1.2.1多管发酵法。
参考《生活饮用水标准检验方法(GB/T5750.12-2006)》和《水和废水监测分析方法(第四版)》,将水样分别接种到发酵管中,发酵管中盛有乳糖蛋白胨,在(37±0.5)℃条件下培养(24±2)h ,如果试管产酸或产气,说明试验呈阳性(初发酵试验),将呈阳性结果的发酵管轻微振荡,用灭菌棒或3mm 接种环将培养物转接至EC 培养液中,在(44.5±0.5)℃水浴下培养(24±2)h ,如果发酵管产气即可确认呈阳性(复发酵试验)。
1.2.2酶底物法。
将科立得TM (Colilert R )试剂加入100mL 装有水样的取样瓶中,待试剂完全溶解后,倒入无菌培养定量盘(97孔)中,对其进行封装,然后置于(44.5±1)℃恒温培养箱中培养24h 。
取出后与97孔阳性标准比色盘进行比较,如果为阳性反应,则黄色孔颜色较标准比色盘深,如果有疑虑,可将可疑阳性的试管继续培养4h ,然后观察,之后出现的颜色反应无效。
中国卫生产业有资料表明:酶底物法试剂盒弥补了多管发酵法的不足,是现代微生物快速检测的发展方向,超过90%以上的美国国家实验室都使用此方法[1]。
目前,国内越来越多的实验室采用酶底物法用于水质大肠菌群的检测,但总体规模还不大,还未被绝大多数检测机构所采用;特别是基层实验室因条件受限,采用酶底物法的比例更少。
作者所处的属于基层实验室,我们借助较为简易的基层条件,分别使用酶底物法和多管发酵法对饮用水中的总大肠菌群进行检测,分析发现两种方法的检测结果有高度的一致性。
现总结报告如下。
1材料与方法1.1样品大英县农村饮用水22份。
1.2试剂酶底物法由株洲鸿润检测技术有限公司提供的总大肠菌群-大肠埃希氏菌测定试剂盒,十管法,批号为20150416。
多管发酵法的乳糖培养基由杭州滨和微生物试剂有限公司提供,批号为20150822,EC 肉汤由北京奥博星生物技术有限责任公司提供,批号为20141222,伊红美蓝琼脂由北京奥博星生物技术有限责任公司提供,批号为20141222。
1.3原理酶底物法是利用大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶,该酶能分解试剂盒中底物邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG),而生成黄色的邻-硝基酚,使培养基呈现颜色变化,颜色会从无色变成黄色,指示有大肠菌群的存在;而大肠埃希氏菌可产生β-葡萄糖醛酸酶,而β-葡萄糖醛酸酶能对试剂中的4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)成份进行代谢,使其产生荧光,可在紫外灯下进行鉴别。
多管发酵法是根据大肠菌群能发酵乳糖,产酸产气及具备革兰氏染色阴性,无芽孢呈杆状等有关特性的菌群组。
1.4方法每份水样分成两份接种以下两种方法,根据污染程度进行稀释。
1.4.1酶底物法采用十管法,直接将水样100mL 加入含有“科立德”酶底物试剂的无菌瓶中,盖上瓶盖,颠倒混匀,使酶底物试剂充分溶解,加样:使用10mL 无菌刻度吸管吸取上述处理好的水样10mL 加入到试剂盒的方格中,共十格,盖上盖子(36±1)℃,培养24h 后进行判读,如果结果可疑,可延长培养时间到28h 进行结果判读,查MPN 检索表报告水样中的MPN 值。
酶底物法和多管发酵法检测水中的总大肠菌群的比较研究作者：蒋玲李雪来源：《中国卫生产业》2016年第18期[摘要] 目的比较酶底物法和多管发酵法对饮用水中的总大肠菌群检测结果的一致性。
方法使用酶底物法和多管发酵法对指定水样进行检测，观察结果。
结果两种方法的检测结果有一致性，两者差异无统计学意义（P>0.05）。
结论酶底物法可替代多管发酵法用于评价水质微生物。
[关键词] 大肠菌群；酶底物法；多管发酵法[中图分类号] R19 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2016）06（c）-0120-02Comparative Research on Enzyme Substrate Technique and Multi-tube Zymolytic Method in Detecting Total Coliform Group in WaterJIANG Ling， LI XueCenter for Disease Control and Prevention of Daying， Daying， Sichuan Province， 629300 China[Abstract] Objective To compare the consistency of test results of enzyme substrate technique and multi-tube zymolytic method for total coliform group in water. Methods The appointed water sample was detected by the enzyme substrate technique and multi-tube zymolytic method， and the results were observed. Results The test results of the two methods were consistent， and the difference between the two groups had no obvious significance， P>0.05. Conclusion The enzyme substrate technique can replace the multi-tube zymolytic method to evaluate the water quality and microorganism.[Key words] Coli group； Enzyme substrate technique； Multi-tube zymolytic method有资料表明：酶底物法试剂盒弥补了多管发酵法的不足，是现代微生物快速检测的发展方向，超过90%以上的美国国家实验室都使用此方法[1]。
两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比论述发布时间：2021-03-23T04:11:47.963Z 来源：《学习与科普》2020年19期作者：邱磊[导读] 文章首先分析了实验时所使用的材料和试验方法，其次阐述了试验结果，最后对试验结果进行了总结。
谱尼测试集团江苏有限公司摘要：文章首先分析了实验时所使用的材料和试验方法，其次阐述了试验结果，最后对试验结果进行了总结。
通过结果，得出结论，在水中，对总大肠菌、大肠埃希氏菌进行实际试验检测的过程中，通过两种方法来对其检测，这两种方法是酶底物法和多管发酵法。
通过试验检验结果来看，酶底物法检测的时间比较短，操作简单，方便进行观察，是值的普及和推广的一种检测方法。
关键词：大肠埃希氏菌；总大肠菌；酶底物法；多管发酵法1.材料和方法1.1使用材料、仪器试验检测的过程中，使用材料及仪器有MMO-MUG培养基，EC-MUG、乳糖蛋白胨培养基。
还有培养箱36℃±1、44.5℃±0.5℃；紫外灯，其波长是366m.1.2方法（1）试验前准备在试压之前，要先做好相应的准备工作，试验正式开始前，准备好实用性菌株和加标水样等，同时还要准备培养基粉末（2.7±0.4）g；然后在结合配置有关要求，将EC-MUG、乳糖白胨培养液制作好。
（2）方法原理在检测总大肠菌的时候，应用MMO-MUG来检测，能够产生胨半乳糖苷酶，其能够分解ONPG，分解完成后，这个时候，会出现颜色上的变化，在检测大肠埃希氏菌的时候，应用MMO-MUG及EC-MUG培养基来检测，这个时候会产生β-葡萄糖醛酸酶，然后在进行分解，分解后挥释放荧光，而且通过紫外线照射，特征性荧光也十分的明显[1]。
（3）试验方法在进行适用性实验的时候，要先把分装好的MMO-MUG以及EC-MUG等培养液取出来，取出来后，将混悬液分别加入到各个管中，其结果要在二十四小时后来进行观察。
①灵敏度试验在试验之前，将培养后的侵袭性培养物取出来，这种培养物培养了二十四个小时，取出来之后，在将制成0.5适度菌液，然后在进行稀释，稀释的时候要对其菌液进行十倍稀释，一直稀释到1500MPN/100mL～1MPN/100mL，在开始灵敏度试验。
I节能环保LOW CARBON WORLD2021/6三种监测地表水中粪大肠菌群标准方法的比较唐微微，罗娅敏，陈瀚,赵志友(四川省成都生态环境监测中心站，四川成都610066)【摘要】多管发酵法、纸片法和酶底物法是目前测定地表水中粪大肠菌群的常用标准方法，通过三种方法对粪大肠菌群标准物质和实际地表水样进行分析检测，结果表明：多管发酵法、纸片法和酶底物法用于粪大肠菌群的检测结果具有一致性；通过三种方法优缺点的对比，多管法成本低适用于常规检测，纸片法高效方便更适用于大批量快速检测，酶底物法操作简单，不受场地限制可直接现场检测,更适用于应急现场监测遥【关键词】多管发酵法；纸片法；酶底物法；粪大肠菌群;地表水【中图分类号】X132【文献标识码】A【文章编号】2095-2066(2021)06-0034-020前言粪大肠菌群又称耐热大肠菌群，是在44.5益能生长并发酵乳酸产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌⑴。
环境地表水中的粪大肠菌群主要来自粪便的污染，因此通过测定水中粪大肠菌群的含量，可间接得出水体受粪便污染的情况囚,是当前国内外环境监测部门主要监测项目之一，是评价水体污染程度和环境卫生的重要指标，在《地表水环境质量(GB3838—2002)》中，规定I、域、芋、郁及吁类水粪大肠菌群的含量依次臆200、200〜2000、2000〜10000、10000~20000及20000~40000个/L,我国地表水体粪大肠菌群含量普遍较高，部分水域含量甚至超过吁类水质标准。
多管发酵法叫纸片法⑷和酶底物法间是目前国内测定地表水中粪大肠菌群常用的标准方法。
多管发酵法早在1985年就列入《生活饮用水标准检验方法(GB5750-85)》，并于2018年发布修订版，是粪大肠菌群测定的经典方法,它作为《水和废水监测分析方法(第四版)》中的推荐方法向，美国公共卫生协会(APHA)出版的《水和废水标准检验方法(20版)》中方法9221E也采用的是多管发酵法；纸片法在西方发达国家运用较少，主要在一些发展中国家使用，环保部在2015年发布了纸片法的标准方法，它作为《水和废水监测分析方法(第四版)》中的推荐方法(C类方法)叫酶底物法是一种新型酶技术检测方法，已在美、日、韩和欧洲许多国家使用孔2003年从美国引入我国，环保部在2018年发布了酶底物法的标准方法。
两种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌检测的对比分析邓婷;梁漪莲;骆琼;黄慧清【摘要】利用多管发酵法和酶底物法检测水中的总大肠茵群与大肠埃希氏菌,对比两种方法的适用性、灵敏度等,对比分析多管发酵法和酶底物法2种方法对水中总大肠菌群和大肠埃希氏茵的检测情况.结果表明,2种方法对适用性菌株存在差异;在1 MPN/100mL浓度下,酶底物法更加灵敏;在加标样和平行样检测中,酶底物法表现更为稳定.由此可得,在水中检测总大肠菌群与大肠埃希氏茵可应用多管发酵法和酶底物法,但与多管发酵法相比,酶底物法优势显著,用时较短、操作简单、便于观察,值得推广.【期刊名称】《食品工程》【年(卷),期】2017(000)001【总页数】3页(P52-54)【关键词】多管发酵法;酶底物法;总大肠菌群;大肠埃希氏菌;检测结果【作者】邓婷;梁漪莲;骆琼;黄慧清【作者单位】广西桂林市自来水公司,广西桂林541001;广西桂林市自来水公司,广西桂林541001;广西桂林市自来水公司,广西桂林541001;广东食品药品职业学院,广东广州510520【正文语种】中文【中图分类】TS207.4随着人们生活水平的提高，人们对自来水水质提出了更高的要求。
目前，自来水微生物污染问题严峻，相关问题得到了社会各界的高度关注。
近几年，我国学者报道了因自来水传播传染性疾病的诊治与预等。
为了改善水质，为广大群众提供安全与健康的自来水，我国实行《生活饮用水卫生标准》，其中微生物指标有：菌落总数、总大肠菌群、大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群。
《生活饮用水标准检验方法微生物指标》中提供了几种不同的检测方法，总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检测方法有滤膜法、多管发酵法、酶底物法，各方法均以发酵乳糖为基础。
为了明确不同方法的应用价值，本文对自来水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的2种检测方法展开了对比分析，以期为自来水中微生物检测方法的选择提供参考。
MMO-MUG培养基，美国DEXX公司；乳糖蛋白胨培养基、EC-MUG培养基，青岛海博生物技术有限公司；培养箱，36℃±1℃、44.5℃±0.5℃；紫外灯，波长为366nm。
多管发酵法和酶底物法在总大肠菌群检测中的比较
卜晓红
【期刊名称】《医疗装备》
【年(卷),期】2016(029)010
【摘要】目的：比较生活饮用水标准 GB／T5750．12－2006中总大肠菌群检测方法多管发酵法和酶底物法的优劣和结果的一致性。
方法依据 GB／T5750．12－2006生活饮用水标准检验方法中总大肠菌群多管发酵法及酶底物法对30份样品进行检测，比较两种方法试验结果。
结果两种检验方法检测水中总大肠菌群，结果无显著性差异。
结论使用酶底物法相对简便、快速，可以提高检测速度，更适合用作评价水质总大肠菌群污染的标准方法。
【总页数】2页(P99-100)
【作者】卜晓红
【作者单位】辽宁省鞍山市岫岩满族自治县疾病预防控制中心辽宁鞍山 114300【正文语种】中文
【中图分类】R446.5;R123
【相关文献】
1.检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌成本分析比较——多管发酵法和DST-酶底物法比较 [J], 张风云
2.酶底物法和多管发酵法检测水中的总大肠菌群的比较研究 [J], 蒋玲;李雪
3.水中粪大肠菌群快速检测方法-固定底物酶底物法与多管发酵法的比较 [J], 高瑞坤;汤琳;付强
4.酶底物法与多管发酵法在水中总大肠菌群测定中的应用价值比较 [J], 李娜
5.多管发酵法和酶底物法检测总大肠菌群的结果差异性 [J], 楼小平;林增飞
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粪大肠菌群检测的结果偏差及影响因素摘要：介绍了目前城镇污水处理消毒后的出水中粪大肠菌群指标的检测方法原理，对检测结果偏差产生的原因进行了分析和阐述，提出了检测过程中的质量保证措施，对基层实验室提高粪大肠菌群检测结果的精确性具有实际指导意义。
关键词：粪大肠菌群；质控；影响因素；偏差目前，粪大肠菌群的检测作为城镇污水处理厂排放标准的重要指标之一，经常被环保督查部门抽检。
而各厂在进行日常出水检测时，也存在着实验室内及实验室间实验结果差异性较大的问题。
由于微生物检测技术、方法、水样等的特殊性，导致影响其检测数值偏差大的因素较多，本文结合实际检测工作，从实验方法、培养基的质量控制、检测环境条件及现场采样等多方面进行分析，阐述这些因素的影响及质控措施。
目前，污水类的粪大肠菌群的检测，常采用多管发酵法、滤膜法和酶底物法。
三种方法的生物学培养机理是相同的，由于使用的培养基成分、培养介质和菌落形成的特征和方式的不同，最终导致了粪大肠菌群检测结果的差异，这是由于检测方法导致的偏差。
下面简单介绍一下这三种常用方法：1 常用粪大肠菌群的检测方法1.1 多管发酵法多管发酵法是以最可能数来表示试验结果的。
实际上它是根据统计学理论估计水体中大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。
如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。
不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阴性又显示阳性的稀释度。
因此在实验设计上，水样检验所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度而定。
多管发酵法是先在37度下培养，产酸产气则为阳性，也就是总大肠菌群。
然后再进行复发酵，从37℃培养出来的总大肠菌群，再接种到EC培养基中，45℃下产酸产气的则为粪大肠菌群。
1.2 滤膜法滤膜是一种微孔性薄膜。
将水样注入已被灭菌的放有滤膜（孔径0.45μm）的抽滤器中，经过抽滤，细菌即被截留在膜片上，然后将滤膜贴于M-FC培养基上，在44.5℃温度下恒温培养，对微生物细胞染色后，对滤膜上生长的此特性菌落进行计数，计算出每1L水样中含有粪大肠菌群的个数。
酶底物法与多管发酵法测定水中粪大肠菌群的对比分析作者：杨虹刘金冠郭玉敏来源：《现代农业科技》2015年第20期摘要通过测定各类水质，对酶底物法与多管发酵法用于水中粪大肠菌群检测进行了方法验证与分析，结果表明：两者在结果一致性方面无统计学意义上的显著性差异。
在置信度95%的情况下差异可以被接受，且满足环境监测要求。
酶底物法可以作为评价水质微生物污染的标准方法。
关键词粪大肠菌群；酶底物法；多管发酵法中图分类号 X832.2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）20-0162-01Comparison of Detection of Coliform Group in Water by Enzyme Substrate Technique and Multipletube Fermentation TechniqueYANG Hong LIU Jin-guan GUO Yu-min（Tianjin Environment Monitoring Center，Tianjin 300191）Abstract Through the detection of coliform group for various types of water by enzyme substrate technique and multipletube fermentation technique，there were no significant differences between the two methods.95% confidence interval of the difference could be accepted and met the requirements of environmental monitoring.Enzyme substrate technique could be used as a standard method of water quality assessment of microbial contamination.Key words coliform group；enzyme substrate technique；multipletube fermentation technique地震等自然灾害过后水体会被大量微生物所污染，特别是被粪便污染。
如水体中含有肠道病原菌株，人饮用后会暴发严重疾病。
粪大肠菌群是一类能使乳糖发酵、产酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，是水体受人畜粪便污染的最直接指标。
对于粪大肠菌群检测的方法主要为滤膜法和多管发酵法，但试验过程较为繁琐，因此亟需一种快速简便的检测方法。
酶底物法也可用来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌，操作方便，检测时间短，无需确认试验。
但该方法尚未正式列入国家标准，因此，该文通过与多管发酵法相比较，对酶底物法进行验证分析。
1 材料与方法1.1 试验材料仪器及试剂：乳糖蛋白胨；EC肉汤；灭菌锅；科立得TM（Colilert R）试剂（美国爱德士生物科技股份有限公司）；酒精灯；100 mL无菌取样瓶（里面装有1.5%硫代硫酸钠去除水样中的余氯）；3 mm接种环；无菌培养定量盘（97孔）；封口机（带97孔定量盘橡胶托垫）；97孔阳性标准比色盘；培养箱。
1.2 试验方法1.2.1 多管发酵法。
参考《生活饮用水标准检验方法（GB/T5750.12-2006）》和《水和废水监测分析方法（第四版）》，将水样分别接种到发酵管中，发酵管中盛有乳糖蛋白胨，在（37±0.5）℃条件下培养（24±2） h，如果试管产酸或产气，说明试验呈阳性（初发酵试验），将呈阳性结果的发酵管轻微振荡，用灭菌棒或3mm接种环将培养物转接至EC培养液中，在（44.5±0.5）℃水浴下培养（24±2） h，如果发酵管产气即可确认呈阳性（复发酵试验）。
1.2.2 酶底物法。
将科立得TM（Colilert R）试剂加入100 mL装有水样的取样瓶中，待试剂完全溶解后，倒入无菌培养定量盘（97孔）中，对其进行封装，然后置于（44.5±1）℃恒温培养箱中培养24 h。
取出后与97孔阳性标准比色盘进行比较，如果为阳性反应，则黄色孔颜色较标准比色盘深，如果有疑虑，可将可疑阳性的试管继续培养4 h，然后观察，之后出现的颜色反应无效。
2 结果与分析用单因素方差分析和卡方检验进行统计[1]，比较检出率、阳性率等。
用t-检验、泊松（Pearson）相关系数衡量其相关性。
2.1 试验数据的可信度检验用标准菌株IDEXX-QC（大肠埃希氏菌，MPN值/100 mL在113～1210之间）的纯培养稀释液，分别用酶底物法和多管发酵法进行培养，经显微镜初略记数表明，多管发酵法和酶底物法定性准确，标准菌株检验未出现假阴性或假阳性。
查MPN表得知，2种方法的测定结果均在质控范围内，测定结果准确可靠，见表1。
对2组数据进行配对t检验，t0.05（n-1）=2.571>1.514-1，表示酶底物法和多管发酵法在测定标准菌株上无统计学意义上的差异。
2.2 水样监测结果比较2.2.1 地表水测定结果比较。
为保证试验结果的方便统计和精确，采取地表水、水源水水样进行检测，要求水样有一定的阳性检出率，同时水样的MPN值应尽量控制在100 MPN/100 mL以下，原因是MPN值本身为统计得出，结果越大差异性就越大。
如样品中菌数大于2400，由于样品稀释造成的分配不均导致的差异会比不稀释的样品大很多[2]。
取40份地表水样品进行试验，分别用酶底物法和多管发酵法进行检测。
地表水、水源水检测结果（MPN值/100 mL）40组数据（多管发酵法，酶底物法）分别为（12，14）（8，12）（34，58）（26，42）（94，78）（8，14）（11，20）（26，20）（33，31）（49，26）（49，36）（79，108）（20，23）（34，49）（22，30）（43，38）（12，19）（63，17）（17，26）（13，34）（21，41）（26，10）（33，44）（34，51）（23，10）（49，59）（26，26）（79，34）（11，36）（26，77）（110，84）（34，54）（26，34）（34，20）（11，24）（23，60）（14，24）（21，27）（49，44）（43，27），见图1。
据计算，2种方法泊松相关系数为0.62，表示中等程度相关。
对2组数据进行配对t检验，d为3.30；Sd为20.0；t=为1.044，t0.05（n-1）=2.021>1.044，表示酶底物法和多管发酵法在测定地表水粪大肠菌群上无统计学差异。
部分研究认为，这种差异是否显著取决于该菌群的组成[3]，粪大肠菌群主要组成为埃希氏菌属，大肠埃希氏菌与人类密切相关。
2种检测方法对埃希氏菌属的检出灵敏度基本一致，而对肠杆菌属的检出灵敏度，酶底物法高于多管发酵法。
2.2.2 污水测定结果比较。
取40份污水样品（包括生活污水、工业废水、医院废水等），分别用酶底物法和多管发酵法检测。
污水检测结果（MPN值/100 mL）40组数据（多管发酵法，酶底物法）为：（220，24）（130，10）（1700，483）（490，95）（230，573）（8，52）（130，436）（330，383）（230，30）（2，1）（790，411）（49，364）（80，20）（20，20）（350，865）（490，860）（170，31）（130，30）（3500，482）（35，66）（230，148）（50，41）（20，10）（50，226）（20，10）（160，450）（20，26）（49，38）（11，100）（26，77）（1100，2420）（220，121）（9200，6294）（34，90）（1400，1986）（170，326）（14，24）（350，205）（1600，1300）（43，110），见图2。
根据计算，2种方法的泊松相关系数为0.90，表示中等程度相关。
对2组数据进行配对t 检验，d为115；Sd为751；为0.968，t0.05（n-1）=2.021>0.968，表示酶底物法和多管发酵法在测定污水粪大肠菌群上无统计学意义上的差异。
大量试验也表明，多管发酵法与固定底物酶底物法检测结果虽然有一定差异，但偏差极小，几乎可以等效。
2.3 检出限比较多管发酵法的最低检出限为每100 mL水样可检测出2 cfu的总大肠菌群。
而酶底物法可以在24 h同时检测出总大肠菌群和大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群（粪大肠菌群），它可以在100 mL水样中抑制2百万个杂菌干扰，最低检出限为每100 mL水样可检测出1 cfu的总大肠菌群、大肠埃希氏菌、耐热大肠菌群（粪大肠菌群）[4-5]。
3 结论与讨论综上所述，多管发酵法与酶底物法在结果一致性方面无统计学意义上的显著性差异。
在置信度95%的情况下差异可被接受，且满足环境监测要求。
酶底物法可作为评价水质微生物污染的标准方法。
酶底物法大大减少了工作量，与多管发酵法比较，操作误差较小，可准确判断水样中的微生物污染状况。
该方法检测技术更快速、简便、特异、灵敏，不仅适合实验室使用，更适合应急突发事件中的现场及大批量水样品中微生物检测，且酶底物法用密封培养技术，在检测医院污水时可减少人员接触而降低检测人员的致病风险[6-7]。
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