Zn2+和金属硫蛋白在细胞内表达的关系

zn离子诱导蛋白
答：Zn2+离子可以诱导某些蛋白的表达。

例如，在线粒体中，Zn2+离子的异常累积会导致线粒体膜电势丧失、电子传递链复合体I和III功能抑制、高ROS产生以及诱导细胞凋亡等。

在这个过程中，SLC-30A9/Znt-9蛋白控制Zn2+由线粒体向细胞质的转运，它的功能缺失导致线粒体Zn2+异常积累，并损害线粒体的结构和功能。

为了进一步揭示Zn2+进入线粒体的调控机制，研究者们以线粒体形态和未折叠蛋白应激反应（UPRmt）两种策略对slc-30A9突变体进行抑制因子（suppressor）筛选，获得的5个突变体均导致了同一个Ca2+激活型Mg2+-ATP转运蛋白SLC-25A25/SCaMC-2突变。

在HeLa细胞中异源表达线虫或人类SLC-25A25蛋白，也可以看到线粒体片段化，且线粒体中Zn2+水平显著升高。

Zn2+和Cd2+单独及联合作用对青蛤消化酶活性的影响摘要以酶学分析的方法研究了两种金属离子单独及联合作用对青蛤蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力的影响，两种金属离子单独及联合作用时的浓度分别设置为10mg/L、20mg/L、40mg/L和80mg/L，染毒时间为4天。

实验结果表明，青蛤3种消化酶活力大小为淀粉酶＞蛋白酶＞纤维素酶；在实验设置的染毒浓度范围内，Zn2+、Cd2+单独及联合作用对青蛤的蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力均产生显著影响。

其中，40mg/L的Zn2+对蛋白酶有显著的激活作用，3种较高浓度的Zn2+及2种中间浓度的Zn2++Cd2+对纤维素酶表现出显著的激活作用，其余的均对青蛤的这3种消化酶表现为抑制作用，且不同浓度的金属离子对这3种消化酶的抑制作用表现出不同的变化趋势。

关键词金属离子青蛤蛋白酶淀粉酶纤维素酶中图分类号：Q5 文献标识码：AThe Individual and Combined Effects of Zn2+andCd2+ to the Activity of Clam Digestive EnzymeZHANG Yujie, NI Xiaoying, YING Xueping(College of Life and Environmental Sciences, Wenzhou University, Wenzhou, Zhejiang 325027) Abstract Enzymatic method for the analysis of two metal ions separate and combined effects of clam protease, amylase and cellulase activity of the two separate and combined effects of metal ion concentrations were set at 10mg / L, 20mg / L, 40mg / L and 80mg / L, exposure for 4 days. The results show that clam three kinds of digestive enzymes amylase size> protease> cellulase; set exposure concentrations in the experimental range, Zn2+, Cd2+ separate and combined effects of clam protease, amylase and cellulose enzyme activity were a significant impact. Which, 40mg / L of Zn2+ significant protease activation, three kinds of high concentrations of Zn2+ and two kinds of intermediate concentrations of Zn2+ +Cd2+ cellulase showed significant activation, and the rest are for the three clam showed inhibition of digestive enzymes, and different concentrations of metal ions in these three kinds of inhibition of digestive enzymes showed a different trend.Key words metal ions; clam; protease; amylase; cellulase青蛤，是一种常见的底栖贝类，具有很高的营养价值和经济价值，是我国南北沿海滩涂传统养殖的主要贝类之一。

锌是一种重要的人体必需的微量元素（日需要量是１０～１５ｍｇ），广泛的分布于人体的细胞和体液之中。

Ｚｎ２＋是人体内２００多种酶的组成成份，直接参与体内细胞生长发育，生殖、组织修复等各种生命代谢过程。

Ｚｎ２＋在细胞的生命活动中起着非常重要的作用，在基因转录，金属酶的一些功能中，在神经传递中等等都必须有Ｚｎ２＋的参加［１］。

若缺少了Ｚｎ２＋的参与，就会导致一些疾病的产生如：免疫系统受损，免疫功能缺陷等。

随着人们对锌在生命活动中的作用的认识越来越深，细胞内Ｚｎ２＋的研究已成为化学，生物学和临床医学等学科重要的前沿热点研究课题。

近年来，人们开始研究测定细胞内Ｚｎ２＋的方法和技术，先后建立和发展了多种方法，如锌离子传感器法，Ｚｎ２＋荧光探针法，核磁共振法和微电极法等，其中Ｚｎ２＋荧光探针法是目前最常用的一种方法。

其主要特点是选择性好、灵敏度高、简便快捷。

本文主要就近年来该领域的研究进展作了一个比较系统的回顾。

１Ｚｎ２＋荧光探针１．１喹啉类荧光探针喹啉及其衍生物已经被广泛用来作为一个荧光试剂对锌和其他一些离子进行一些定量的测定。

其中８－氨基喹啉和８－羟基喹啉是最具代表性的种类［２］。

在他们之中，８－氨基喹啉作为基体更为广泛一些．下面我们具体介绍几种以８－氨基喹啉为基体的探针．主要有以下几种，分别是：ＴＳＱ、ＺｉｎｑｕｉｎＡ、ＴＦＬＺｎ、Ｄａｎｑｕｉｎ等。

ＴＳＱ［３］是１９８７年由Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋｓｏｎ等发展起来的。

它首先用于二价锌离子的成像，这个工作被认为在生物锌荧光探针发展上一个里程碑式的工作。

它和Ｚｎ２＋结合后，吸收波长和发射波长分别位于３３４ｎｍ和４９５ｎｍ。

在４９５ｎｍ，它能够发出很强的荧光，量子产率达到了０．１。

作为一个中性ｐＨ值的荧光探针，它已经被证明是一个具有很好的选择性，无毒的荧光探针。

当然它也有很多的局限性，ＴＳＱ虽然可以用于在生理条件下较高浓度的Ｃａ２＋和Ｍｇ２＋存在时Ｚｎ２＋的检测，但是ＴＳＱ－Ｚｎ２＋合物的结构和稳定常数尚不清楚，ＴＳＱ－Ｚｎ２＋可能以１：１或２：１的形式结合，并且荧光强度在不同的介质中变化较大，所以用ＴＳＱ进行定量分析Ｚｎ２＋还有待于进一步研究，另外它的水溶性不好，就使它不适合在活组织中对锌进行测定和成像。

金属硫蛋白研究进展作者：王文君吕娜尹锐马吉胜李晓薇徐赫韩张晶来源：《江苏农业科学》2016年第01期摘要：金属硫蛋白（MT）是一类富含巯基、具有金属结合特性的低分子量蛋白质，广泛存在于动物、植物、微生物体内，在个体生长发育及环境适应方面发挥着重要作用。

就金属硫蛋白的来源、生理功能、检测方法、应用前景进行综述，为后继的开发应用提供依据。

关键词：金属硫蛋白；来源；生理功能；应用中图分类号：Q51 文献标志码：A 文章编号：1002—1302（2016）01—0013—03金属硫蛋白（metallothionein，简称MT）是分子量介于2～8 ku之间的存在于动物、微生物、植物中的一类低分子量蛋白，其中半胱氨酸占总含量的20%～30%，富含金属（Ag、Au、Bi、Cd、Hg、Zn、Cu等），并极少含有组氨酸和芳香族氨基酸的蛋白质。

金属硫蛋白最早是Margashes和Vallee于1957年在马肾中发现的。

研究结果表明，金属硫蛋白广泛存在于各种微生物，高等动、植物和人类的各种组织、器官。

但是目前尚未从禽类动物中分离得到金属硫蛋白。

1975年Prinz首次从酿酒酵母中分离得到Cu-MT，因其基本结构、特性和功能与哺乳动物MT类似而成为类金属硫蛋白。

1977年科学家又首次从大豆的根中分离出富含Cd2+的复合物，由于它在功能、性质以及柱层析上的表观分子量与动物体内金属硫蛋白十分相似，故将其称为类金属硫蛋白。

第2届金属硫蛋白国际会议对金属硫蛋白的具体定义作出了明确规定，将以前称之为类金属硫蛋白的蛋白质和动物产金属硫蛋白统称为金属硫蛋白。

1金属硫蛋白的来源及制备方法1.1动物来源金属硫蛋白由于哺乳动物源的金属硫蛋白与人的金属硫蛋白无论是结构、活性还是功能都很相似，因此在实际生产中，主要用镉或锌等金属诱兔、老鼠等动物肝脏合成，经过分离纯化得到纯品MT。

随着研究逐步深入，发现环毛蚓、两栖类动物大鲵等，都可诱导产生金属硫蛋白。

在锌硫或二硫化合物的吸附结合交换下氧化态金属从金属蛋白上的脱离聚甲醛; 谷胱甘肽; 金属基团; 放射色谱法生化生理科学医学中心,哈弗医学院,长木大街250号,波士顿,邮编02115与伯特L.瓦特合作,1993年9月20日.摘要:哺乳动物体内的金属蛋白已经被认为在细胞锌元素代谢过程中起了重要的作用.所有的7种金属原子都具有高热力学稳定性,可分成两组深深隐藏在细胞内。

如果这些蛋白质在金属传递过程中起到重要作用，那么就必然有一种机理来解释金属的释放。

其中一种方法来实现就是用适当的细胞配合基于金属硫因的相互作用，为了研究这样一个中间过程，我们设计了一个用放射性色谱技术的方法，能够探测到含有65Zn标记的Zn-金属硫因对其他生物分子的影响。

利用这种方法，我们能确定兔子肝脏中随着金属蛋白-2与谷胱甘肽二硫化合物的结合对锌离子的释放，在假定动力学条件下，单一反应与谷胱甘肽二硫化合物的浓度成线性关系，从5到30毫摩尔每分钟以二级反应速率常数K=4.9×10-3S-1M-1L(PH=8.6,25℃),显然锌的解离并不直接与谷胱甘肽二硫化合物相联系，而是溶剂胶熔基锌硫醇盐在金属硫因的两方面[Robbins, A. H., McRee, D. E., Williamson, M.,Collett, S. A., Xuong, N. H., Furey, W. F., Wang, B. C. &Stout, C. D. (1991) J. Mol. Biol. 221, 1269-1293]参与了硫醇或二硫化合物与谷胱甘肽二硫化合物之间的交换，这种发生在不能区分的两组速率上速率限制作用很低S-thiolation，然后引起金属离子的解离和脱落。

这样一种解离机制要把控制金属包含它的金属硫因与细胞的谷胱甘肽氧化还原作用和加大生理学观测问题的提出和谷胱甘肽中锌金属蛋白的代谢和锌离子对其他生化分子自价值的研究。

Phaem Sci,1989,78(5):370[3]　Haga M,Akatain M,K ikuchi J,et al.T ransdermal iontophoretic deliv2ery of insuli using a photoetched microdevice[J].J Controlled Release ,1997,43(2):139[4]　Preat V,Vanbever R,Jadoul A,et al.Skin electroporation for trans2dermal drug delivery[C].in:2nd w orld congress for E M BM abstract book,Bologna’Italy,1997.44[5]　Srinivas on V,H iqucki I,S ims S M,et al.T ransdermal iontophoreticdrug delivery[J].J Pharm Sci,1989,78(5):370[6]　H irv onnen J,G uy RH.T ransdermal iontophoresis:m odulation of elec2troosm osis by polypetides[J].J Controlled Release,1998,50(1):283 [7]　W illmas P L,Riviere J E.M odel describing transdermal iontophoretic de2livery of lidocaine incorporating cansideration of custaneous microvascu2 larstate[J].J Pharm Sci,1993,82(11):1080[8]　S ingh P,R oberts M.I ontophoretic transdermal delivery of salicylic acidand lidocaine to local subcutaneous structures[J].J Pharm Sci,1992, 82(2):127[9]　Y uri G,Anissim ov M ichael SR.Diffusion m odebing of percutaneous ab2s orption kinetics:2.Finite vehicle v olume and s olvent deposited s olids [J].J Pharm Sci,2001,90(4):504[10]　Hert MC,W illimas P L,Jayes F L,et al.T ransdermal iontophoreticpeptide delivery in vitro and viv o studies with luteinizing horm one re2 leasing horm one[J].J Pharm Sci,1993,82(3):240[11]　T erz o S D,Behl RA.I ontophoretic transport of a hom olog ous series ofionized and nonionized m odel com pound:in fluence of hydrophobicity and mechanistic interpretation[J].Pharm Res,1989,(6):85(收稿日期:2002-08-09)(本文编辑　刘贺之)文章编号:1008-9926(2003)04-0285-03 中图分类号:R962 文献标识码:A硒与金属硫蛋白的研究进展雍　政①,何　冰,郭军华(中国人民解放军第307医院,临床药理室　北京　100039)摘　要:非金属元素硒和金属硫蛋白是近年来研究的热门课题,二者在生物体内与金属元素的代谢、抗重金属中毒、抗辐射、抗氧化和消除自由基等方面都发挥重要作用。

植物修复技术的理解植物修复技术(Phytoremediation)是近年来发展起来的一种主要用于清除土壤重金属污染的绿色生态技术。

重金属超富集植物(hyperaccumulator)及植物修复技术是当前学术界研究的热点领域,目前虽已有Cd、Co、Cr、Cu、Mn、Ni、Pb、Zn等超富集植物发现的报道,但尚无一例报道来自于中国。

中国具有广袤的国土面积、丰富的植物类型和多种(处)古老的矿山开采与冶炼场所,在中国开展超富集植物的寻找、研究与开发工作,将会有重要突破,并具有重要的理论与实践意义。

在工业废水、汽车尾气、农药和化肥施用的过程中都会排出大量重金属。

金属矿山中的尾矿库也是环境体系中重金属污染的重要来源。

随着土壤重金属污染的加重,农用耕地面积锐减,相当数量农田的土壤质量也日趋下降。

尤为严重的是,有毒重金属在土壤系统中所产生的污染具有隐蔽性、长期性和不可逆性的特点。

进入土壤的重金属元素在一定时限内不表现出对环境和作物的危害,但当其积累量超过土承受能力或土壤容量时,就会对作物和人体产生危害,从而导致严重的生态问题。

传统的土壤污染治理方法主要有基于机械物理或物理化学原理的工程措施,包括客土换土法、隔离法、清洗法、热处理法、电化学法等;基于污染物土壤地球化学行为的改良措施,如添加改良剂、抑制剂降低土壤污染物的水溶性、扩散性和生物有效性,以减轻污染物对生态环境的危害。

土壤污染治理的工程学方法往往需要将污染土壤挖运后处理,不仅耗资大,而且破坏土壤微生物和土壤结构。

因此,传统的治理方法并不能有效地解决重金属污染。

近年,生物修复技术已经成为热点。

其机制是植物对土壤中的污染元素具有特殊的吸收富集能力。

具体包括:植物提取作用(Phytoextrac2tion),即植物对重金属的吸收;植物挥发作用(Phytovolatiliza2tion),即利用植物将土壤中的某些重金属转化成气态而挥发出来;植物滤除作用(Pdaizotriltmtion),即利用植物根孔通过水流移出土壤中重金属;植物稳定化作用(Phytostabilization),即利用植物将土壤重金属转变成无毒或毒性较低的形态(生物无效态),但并未从土壤中真正去除重金属。

Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白的研究进展 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。

论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解决您在论文写作中的难题。

 Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白的研究进展 【关键词】Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白转录因子真菌 锌指(zinc fingers)是指含有Zn2+的可与DNA相互作用的蛋白质基序(motif)，含有锌指基序的转录因子是一个大家族。

目前已发现10多种不同种类的锌指基序，Zn(Ⅱ)2Cys6型锌指基序就是其中的一种，其组成是CysX2CysX6CysX5-12CysX2CysX6-8Cys，此基序中的半胱氨酸与2个锌离子结合。

含有此基序的转录因子被称为Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白，仅存在于真菌中。

1982年分离出的第一个Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白是Gal4p[1，2]，Gal4p是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)半乳糖代谢相关基因的转录调节因子，在半乳糖存在下可以激活半乳糖代谢相关基因的转录。

 Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白可参与调节真菌的基础代谢、次级代谢、药物抗性及减数分裂等过程，其中对真菌次级代谢中相关的Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白的研究将有助于了解真菌的次级代谢的调控过程。

 1 Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白的结构及其作用方式 对已知的多种真菌的Zn(Ⅱ)2Cys6锌簇蛋白的结构分析表明，从蛋白质的氨基端到羧基端分别由DNA结合域(DBD，DNA?binding domain)、调控域(regulatory domain)和酸性域(acidic region)组成。

其中DBD又可分为锌指结构域(Zinc finger domain)、连接区域(linker region)以及二聚化区域(dimerization region)，在二聚化区域常含有螺旋的螺旋结构(Coiled?coil)。

!第!"卷!第"期!#$$"年"月锌对水稻金属硫蛋白基因家族的表达以及重组酵母细胞耐受性的影响"徐玉凤!周功克!李一勤!刘进元""清华大学生命科学与技术系分子生物学与蛋白质科学实验室!北京&’’’%(!!’’*$&’$!(收稿!!’’*$&!$!#收修改稿!"国家重点基础研究发展计划"批准号#!’’*H 9&’&"’*$和国家自然科学基金"批准号#)’!"’"#)!)’)"’%’($资助项目!""通信作者!+$,-./#/.@1]!,-./4C <.78^@-4?[@457!摘要!!采用>6:C ^?:7杂交和酵母功能互补实验!分析了&’个水稻I 类金属硫蛋白基因%_:8W 1?:&在水稻幼苗和重组酵母细胞中与‘7!U 的应答反应4‘7!U处理后样品的杂交结果显示"在幼苗的地上部分!除了)个(型_:8W 1?基因%_:8W 1?1‘G !_:8W 1?1‘L !_:8W 1?1‘2&的表达不受‘7!U的影响外!其余*个基因的表达都有不同程度的增加#而在根中!‘7!U 明显增加了_:8W 1?1X L 和_:8W 1?1a 2的转录!但_:8W 1?1X G 和_:8W 1?1[G 的转录却受到了抑制4将_:8W 1?:转化‘7!U敏感酵母突变体并获得异源表达后!&’个成员都可以在一定程度上提高酵母细胞的‘7!U耐受力!而且表现出重组酵母体内‘7!U 积累的增加4上述结果表明a <AP $I 家族的成员均能够对外加的‘7!U 产生反应!可能是通过螯合‘7!U 来增加了生物体对‘7!U 耐受性4关键词!!水稻!金属硫蛋白!诱导表达!锌离子!耐受性!!锌是生物体所必需的微量元素!是许多酶的辅因子!也是许多蛋白质活性的构成要素&&’4在缺乏锌的培养基上!当细胞内的‘7!U水平下降到每个细胞约为’4!0,6/时!细胞就会停止生长&!’4但如果细胞内游离的‘7!U 浓度过高!它又会造成对细胞的毒性4一般认为锌的毒性机理可能是由于抑制了关键代谢酶的活性!或干扰了蛋白质的正常折叠&&’4体内过量的游离‘7!U 必须被隔离或者储存起来!直到能被新合成的锌结合蛋白所利用!这样才不会造成对生物体的伤害4因此!生物在进化过程中!已经形成了一整套平衡体系来严格控制体内‘7!U 水平4生物体内普遍存在的金属硫蛋白",?C -//6C ^.6$7?.7!AP $是一类低分子量-富含半胱氨酸-具有金属结合能力的蛋白质4研究表明这类小分子蛋白质在哺乳动物控制‘7!U动态平衡中起重要作用&)’4当细胞内‘7!U 过量时!AP 能与‘7!U 结合从而解除‘7!U 的毒性%而当细胞内‘7!U 缺乏时!AP 又可作为锌的储存库释放出‘7!U或者作为锌的供体!释放给其他锌结合蛋白如锌指蛋白利用&)’4对植物AP 的研究则相对比较落后4第一个植物AP 于&3%"年才从小麦中分离出来!是一种‘7!U结合蛋白"+5$&(’4此后随着分子克隆技术的进步!从许多植物包括单子叶!双子叶植物中都克隆到了AP 基因&#(&%’4并且发现这类AP 基因的表达受到金属离子-氧化胁迫-植物激素等因子以及发育时期的调控!其表达特征随着植物的种类-AP类型的不同而表现出特异性&#(&%’4例如!‘7!U 对香蕉8W [基因表达有明显的诱导作用&%’!菊芋F 518W a 基因表达受到‘7!U 的抑制&&&’!而豌豆AP 的表达则不受‘7!U 的影响&#’4虽然植物AP 的研究大都集中在其表达特征的分析方面!但是也有一些研究发现将植物AP 转化微生物细胞!异源表达的植物AP 具有提高重组细胞对重金属离子如H @或H [的耐受性&&*(&%’4但是在植物‘7!U的动态平衡和耐33%受过程中植物AP所起作用的报道却很少!尤其是还未见有关于同一植物AP家族的各成员在‘7!U的代谢过程中所起作用的报道4在水稻基因组中!我们发现了一个由&&个AP 基因组成的AP基因家族!其中的&’个基因属于I 类AP&&(’4序列比对与表达特征分析结果表明这些基因不仅有不同的氨基酸序列!而且表达的组织特异性也不相同!暗示这些基因可能在不同的组织中行使不同的功能&&(!&#’4由于I I类AP基因"_:8W1 ??1X G$不受金属离子的诱导!在本文中我们重点研究了‘7!U对I类AP基因各成员"_:8W1?:$表达的诱导特征!并且将&’个水稻I类AP基因转化‘7!U敏感的酵母突变体!测定了表达_:8W1?:的重组酵母细胞对过量‘7!U的耐受性及其体内的锌含量4结果表明水稻I类AP基因不但受‘7!U诱导表达!而且能赋予转化酵母细胞一定程度的‘7!U耐受性!其结果将有助于更好地了解水稻AP家族不同成员在锌离子的平衡和耐受过程中的作用4!!材料与方法!"!!植物材料$生长条件和胁迫处理水稻"_"E U G:G54<H T45=4中花&’号$种子经表面消毒后!浸入稀释的A@:-<^.8?和D Y668液体培养基"&.!nA D$中!在光照培养箱中培养&![4水稻幼苗的生长条件为#&(^光照.!#h H!&’^黑暗.!’h H循环4进行‘7!U处理时!将&![的水稻幼苗的根浸泡在不同浓度的‘7H/!水溶液中!(^!然后分别收集根和地上部分!液氮速冻!贮存于G"’h H4!"’!酵母菌株$培养基和转化本研究所用的酵母菌株分别是野生型9d("(& "AF P-F4:[-X A H I a-Q$H5X Z-QI"G[-Q$和‘N H X$缺失的突变体-U"2X"AF P-F4:[-X A H I a-Q$H5X Z-Q I"G[-Qb J.X###G%8Y‘$+培养酵母细胞的培养基为d L M或含有!f葡萄糖或半乳糖的D M"<]7$ C^?C.5[?0.7?[$培养基!并根据需要补充所需营养成分&&3’4一种含有@’-X启动子"受半乳糖诱导$的穿梭载体R d+D!"I7=.C:68?7!D-7M.?86!K D F$用作目标基因在酵母中表达的载体!携有该质粒的酵母细胞可在缺乏尿嘧啶的D M固体培养基"D M$K:-)$上生长4!"(!水稻总B3C的分离与3A D P F N D@杂交使用N>?-<]L/-7C A.7.试剂盒"W.-8?7! J./[?7!V?:,-7]$提取水稻组织的总N>F!具体操作按试剂盒的说明书进行4>6:C^?:7杂交按文献&&(!&#’所述方法进行4!",!酵母功能互补实验&’个水稻I型AP基因&&(’由本室保存4为了将_:8W1?基因插入表达载体!采用外加;G$J I和M2K N I酶切位点"其中对_:8W1?1a G引入的酶切位点为c4%[I I I$的引物对克隆基因进行L H N扩增4扩增产物克隆到R d+D!载体的相应酶切位点!经测序验证后采用常规方法转化酵母细胞4转化后的酵母细胞在含有!f葡萄糖缺乏尿嘧啶的D M固体培养基"D M$K:-)$上进行选择性培养!!()[后挑取克隆!提取质粒进行L H N验证!正确的重组菌株于G"’h H保存备用4为了对重组菌株进行‘7!U耐受性测定!将重组酵母菌株在含!f葡萄糖的D M$K:-)液体培养基中培养至_B*’’S&4’!经梯度稀释后取!4#%T点样于含有不同浓度‘7!U的D M$K:-)"含!f半乳糖$固体培养基上!于)’h H培养)(([!观察菌落生长状况并照相4在用液体培养基进行测定时!将重组酵母细胞在D M"!f半乳糖$液体培养基中培养至_B*’’S’4!#!加入不同浓度‘7!U!并选取不同时段测量培养液的_B*’’值!以观测‘7!U对重组酵母细胞生长的影响4!"5!酵母细胞中R@’S含量的测定重组酵母细胞在!f半乳糖D M$K:-)液体培养基上培养到_B*’’S’4!#!加入‘7H/!到最终浓度",,6/5T G&!!(^后收集细胞!用冰冷的#’",,6/5T G&P:.<$J H/"R J*4#$!&’,,6/5T G& +M P F洗#次菌体细胞!最后用去离子水洗一次!然后用体积比#m!的硝酸#高氯酸!’’%T在%’h H 消化菌体细胞&^4消化后的样品用灭菌的去离子水稀释成&4’,T!使用质子偶联的原子发射光谱仪"I H L$F+D#a R C.,-))’’N T%T F9D!J@[<67! K D F$进行样品中‘7!U含量的测定4取)个独立的酵母样品进行检测并取平均值4’’3!第!"卷!第"期!#$$"年"月’!结果与讨论’"!!R@’S对45(678基因在水稻幼苗中表达的影响为了分析‘7!U对_:8W1?基因家族成员表达的影响!将培养&![的水稻幼苗用不同浓度"’!’4!#!’4#!&4’!!4’,,6/5T G&$‘7!U的水溶液处理!(^!然后分别提取根和地上部分的总N>F进行>6:C^?:7杂交分析4‘7!U的最高浓度的选择是依据植物研究中常用的‘7!U处理浓度&&&!!’’来确定的%而选择_:8W:基因的)e末端的非翻译序列作为基因特异性的探针4>6:C^?:7杂交结果如图&所示4在水稻幼苗的地上部分!除了(型_:8W1?基因的)个基因"_:8W1?1‘G!_:8W1?1‘L!_:8W1?1‘2$的表达不受‘7!U的影响外!_:8W1?基因家族其他*个成员的表达水平都有不同程度的上调!特别是_:8W1?1X L和_:8W1?1a G的表达还呈现出‘7!U浓度依赖的上调模式4_:8W1?1[G是在地上部分中响应‘7!U胁迫应答最强的基因!在!#’%,6/5T G&‘7!U处理!(^后即被强烈诱导4虽然‘7!U对于地上部分(型_:8W1?基因,N>F的水平没有影响!但是在根中(型_:8W1?基因的表达在!#’%,6/5T G&‘7!U处理!(^后也被诱导表达4在根中‘7!U处理还明显增加了_:8W1?1X L和_:8W1?1a2的转录!但却明显抑制了_:8W1?1X G和_:8W1?1[G的转录4而‘7!U对_:8W1?1a G!_:8W1?1a L和_:8W1?1[L 基因在根中的表达要么没有影响要么仅有轻微影响4这些结果一方面揭示了‘7!U对_:8W1?:基因的表达调控是一个复杂的过程!也说明了家族成员之间在水稻不同组织‘7!U的动态平衡和耐受过程中!所起的作用既有差别!又有重叠4在水稻幼苗的地上部分!‘7!U可以增加大部分_:8W1?家族成员的表达!说明它们可能参与水稻‘7!U的耐受!储存和地上部分组织之间的转运过程4而在根中! _:8W1?1X G和_:8W1?1[G在根中的表达受‘7!U的下调!表明它们可能参与‘7!U从土壤中的吸收!而其他的_:8W1?:"除了_:8W1?1[L外$!在根中的表达受‘7!U的正向调控!暗示它们可能参与了根中‘7!U的贮存和耐受过程4图!!R@’S对45(678基因家族成员表达的影响每泳道上样量为!’%8总N>F%所用探针分别为&’个_:8W1?基因的)e末端特异序列4溴化乙锭"+9$染色的凝胶":N>F$作为指示上样量的对照’"’!水稻45(678基因互补酵母R@’S敏感细胞的功能研究基因功能的方法通常是制作基因缺失或过量表达的稳定转基因株系或者植物细胞来进行的!然而单个AP基因缺失的重组植物与野生型植物之&’3 !第!"卷!第"期!#$$"年"月间在表型上并没有差别&"’!给a<AP功能的检测带来了困难4在已经获得了许多金属离子敏感的酵母突变体的基础上!人们常常用酵母作为分析金属离子平衡和耐受相关基因功能的模式系统&!&’4b J.X 编码了一个阳离子转运蛋白!参与酵母细胞‘7!U向图’!重组酵母菌株所含质粒的%7B验证经营养缺陷筛选出的酵母菌株中的重组质粒和空载体R d+D!"依次标记为a<A P$I$&-!&;!!-!!;!!5!)-!);!(-!(;!(5!d+D!$的扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图4引物采用材料与方法中所述的各基因的特异引物4A为M T!’’’M>F标准图(!转化45(678基因的重组#9"0:酵母突变体细胞对R@!U耐受性&’个_:8W1?基因分别插入载体R d+D!!并转入-U"2X突变体细胞4野生型"9d("(&$细胞和转化R d+D!空质粒的-U"2X重组细胞作为对照4当细胞生长到_B*’’S&4’时!经系列稀释!分别取!4#%T点到含有!f半乳糖且缺失尿嘧啶的D M平板上!并加入&’,,6/5T G&的‘7H/!!于)’h H培养([后照相4每个重组质粒选取两个独立的转化子重复)次进行锌耐受性实验液泡运输的过程&!!’%而缺失b J.X基因会导致酵母突变体对‘7!U敏感!其原因可能是敲除‘N H&后使细胞内游离的‘7!U增多!从而对酵母突变体细胞产生毒性!使其生长受阻&!&’4在本研究中!我们分别将_:8W1?克隆到受半乳糖诱导表达的酵母R d+D!载体上!经序列分析确定插入序列的正确性4然后将确认插入正确序列的重组载体导入‘7!U敏感的酵母突变株-U"2X中!在添加!f葡萄糖并缺乏尿嘧啶的D M固体培养基上行选择性培养!对长出来的克隆提取质粒并进行L H N鉴定!结果如图!所示!所有扩增片段与目标片段的长度一致4最后将得到确认的重组菌株在添加不同浓度‘7!U的D M$K:-)固体培养基"!f半乳糖$上进行了功能互补实验4结果在添加&’,,6/5T G&‘7!U的培养基上!转化_:8W1?:的突变体细胞比只转化空载体R d+D!突变体细胞生长状况要好"图)$!说明所有a<AP$I<可以在一定程度上提高细胞锌的耐受能力4在‘7!U 浓度超过&#,,6/5T G&的培养基上!野生型酵母能够生长!突变体细胞则不能生长!而转化有_:8W1?的突变体在这种条件下也不能生长!说明a<AP$I<只能在一定程度上提高细胞‘7!U的耐受性"结果未显示$4这一结果与另一种植物AP"P5AP)$也只能部分缓解‘7!U对酵母细胞的毒性&!)’的报道是一致的4为了进一步验证互补实验!我们对重组细胞在添加不同浓度‘7!U的液体培养基中的生长速率和细胞内锌的含量也进行了测定4因为_:8W1?:不同家族成员表达的酵母细胞在固体培养基上的表型相似!所以本实验只选取了_:8W1?1X G和_:8W1?1X L 作为代表进行了分析4在添加有#,,6/5T G&‘7!U 的液体培养基中!-U"2X细胞生长良好!不同重组酵母之间的生长并没有差别4但是当‘7!U浓度提高到",,6/5T G&时!可以明显地观察到含有_:8W1 ?1X G和_:8W1?1X L的-U"2X重组细胞生长明显好于转化空载体的-U"2X对照细胞!这个结果和固体培养基的结果一致"图("-$$4同时对细胞内锌含量的测定结果表明含有_:8W1?1X G或者_:8W1?1X L的重组细胞内的锌浓度!比对照细胞有略微的增加"图(";$$4这些暗示出表达a<AP$I<酵母细胞的‘7!U耐受性的提高可能是由于AP蛋白螯合了细胞内游离‘7!U的结果!或者参与了‘7!U向细胞器比!’3!第!"卷!第"期!#$$"年"月如液泡的区域化隔离过程!而不是促进了‘7!U的外排4另外!有研究报道豌豆中的&型AP"7:8W’$基因和拟南芥的!型AP"8W a$基因在细菌中与@>W基因融合表达时能以不同的亲和力与锌离子结合&!(!!#’%我们对水稻&&个成员的蛋白序列进行了生物信息学分析!并没有找到它们含有定位于亚细胞器的信号肽4这个预测结果和B678等通过实验将a<AP!;"a<AP$I$!;$定位于植物细胞的细胞质的结果一致&!*’4T??等人将拟南芥F C AP)和V X L 融合在保卫细胞中表达!证明F C AP)也定位在细胞质中&&"’4这些都暗示AP有可能在植物的细胞质中与锌离子结合4因此我们相信a<AP$I<与细胞质中‘7!U的结合可能是其参与水稻体内锌的动态平衡和耐受的机制之一4但是_:8W1?:家族成员在水稻‘7!U动态平衡中的确切生理学和生物化学机制还需要做进一步研究4图,!45(678基因对#9"0:酵母突变体细胞中积累R@’S的影响不同转化细胞在添加",,6/5T G&‘7!U"黑柱$和不添加‘7!U"白柱$的D M$K:-)液体培养基"!f葡萄糖$中培养到_B*’’S&4’!随后用D M$K:-)"!f半乳糖$稀释这些细胞以达到起始密度约为_B*’’S’4!#!然后培育!(^后!检测_B*’’"-$和用I H L$F+D测量酵母内‘7!U的含量";$!!近年来!分析基因家族内成员之间的功能差异已成为解析基因功能研究的热点4本文分析了_:1 8W1?基因家族各成员在水稻幼苗应答‘7!U的表达特征!虽然_:8W1?家族成员之间的序列高度相似!但家族各成员的表达不仅具有不同的组织特异性&&(’!而且对‘7!U的应答反应也有所不同"图)$4但有意思的是这些基因在酵母中的异源表达却表现出相似的‘7!U耐受性4这些结果进一步提供了植物AP蛋白在应答‘7!U和提高生物体‘7!U耐受性的证据!也为进一步研究a<AP$I<参与了水稻体内‘7!U的平衡和耐受的过程的分子机理打下了坚实的基础4致谢!作者感谢法国J?7:.L6.75-:?大学的A.5^?/H^-/6C博士为本实验提供酵母菌株%9d("(&野生型!U"2X突变体&!感谢清华大学分子生物学实验室的部分成员所给予的帮助与有意义的讨论4参!考!文!献&!9?:8\A!D^.d4P^?8-/=-7.E-C.6760;.6/68]#F8:6Z.78-R R:?$5.-C.6706:C^?:6/?<60E.754D5.?75?!&33*!!"&#&’%&(&’%#!!L-/,.C?:N M!X.7[/?]D M4H/67.78-7[0@75C.67-/5^-:-5C?:.E-$C.6760-,-,,-/.-7E.75C:-7<R6:C?:C^-C5670?:<:?<.<C-75?C6E.754+A9a\!&33#!&(#*)3(*(3)!H6]/?L!L^./56Q\H!H-:?]T H!?C-/4A?C-//6C^.67?.7#P^?,@/C.R@:R6<?R:6C?.74H?//A6/T.0?D5.!!’’!!#3#*!"(*(" (!T-7?9V!b-1.6Y-N!b?77?[]P M4P^?Z^?-C8?:,+5R:6C?.7 .<-E.75567C-.7.78,?C-//6C^.67?.749.65^?,H?//9.6/!&3%"!*##&’’&(&’’##!X6:[^-,$D Y?/C67F L!T.//?]H!K:Z.7L+!?C-/4V K D?Q R:?<$ <.67.7’"G L4!K C:4:[.:?5C?[;]#e:?8.67<60C^?R?-,?C-//6C^.6$ 7?.7$/.Y?8?7?L<AP F4L/-7CA6/9.6/!&33"!)(#*#3(**%*!N-@<?:B+4D C:@5C@:?-7[0@75C.6760,?C-/5^?/-C6:<R:6[@5?[ ;]R/-7C<#P^?5-<?606:8-7.5-5.[<!-,.76-5.[<!R^]C.7-7[ ,?C-//6C^.67?.7<4H?//9.65^?,9.6R^]<!&333!)&#&%((%"!H6;;?C C H!V6/[<;:6@8^L4L^]C65^?/-C.7<-7[,?C-//6C^.6$ 7?.7<#N6/?<.7^?-=],?C-/[?C6Q.0.5-C.67-7[^6,?6<C-<.<4F7$ 7@N?=L/-7C9.6/!!’’!!#)#&#3(&%!%!T.@L!V6^H\!T6^H D!?C-/4M.00?:?7C.-/?Q R:?<<.67-7[5^-:$)’3 !第!"卷!第"期!#$$"年"月-5C?:.E-C.6760C^:??,?C-//6C^.67?.7$/.Y?8?7?<.75-=?7[.<^;-$ 7-7-"8I:G G2I$4%G5G$4L^]<.6/L/-7C!!’’!!&&(#!(&(!#’3!H^?7J\!J6@B H!d-78H d!?C-/4A6/?5@/-:5/67.7860C Z6 ,?C-//6C^.67?.7$/.Y?R:6C?.78?7?<Z.C^[.00?:?7C.-/?Q R:?<<.67 R-C C?:7<0:6,<Z??C R6C-C6"?C K$K H GL G5G5G:$/?-=?<4\L/-7C L^]<.6/!!’’)!&*’##("(###&’!A-A!T-@L D!\.-d P!?C-/4P^?.<6/-C.67-7[5^-:-5C?:.E-C.67 60C]R?&,?C-//6C^.67?.7"AP$5M>F0:6,-^?-=]$,?C-/$C6/?:$ -7C R/-7C!P H:5I2G"I L"G5=4$H"A4%4L/-7CD5.!!’’)!&*("&$# #&(*’&&!H^-78P!T.@_!_@J!?C-/4F,?C-//6C^.67?.7$/.Y?8?7?^C$A P!<C:678/]?Q R:?<<?[.7.7C?:76[?<-7[76[?<60c H A4G%5F I:5I L H"K:I:-7[?00?5C<60,?C-/.67C:?-C,?7C67.C<?Q R:?<<.674 L/-7C-!!’’(!!&%#((3((##&!!A.:V!M6,?7?5^\!J@8@?CV!?C-/4F R/-7C C]R?!,?C-//6$ C^.67?.7"A P$0:6,56:YC.<<@?:?<R67[<C66Q.[-C.=?<C:?<<4\ +Q R96C!!’’(!###!(%)(!(3)&)!A@:R^]F!‘^6@\!V6/[<;:6@8^L!?C-/4L@:.0.5-C.67-7[.,$ ,@76/68.5-/.[?7C.0.5-C.6760,?C-//6C^.67?.7<&-7[!0:6,’"G1 L4!K C:4:5F G A4G%G4L/-7C L^]<.6/!&33"!&&)#&!3)(&)’&&(!‘^6@V!_@d!T.\!?C-/4A6/?5@/-:-7-/]<?<60C^?,?C-//6$ C^.67?.78?7?0-,./].7:.5?"_"E U G:G54<G T4$4\9.65^?,A6/9.$ 6/!!’’*!)3##3#(*’*&#!‘^6@V b!_@d X!T.@\d4H^-:-5C?:.E-C.6760-:.5?5/-<<I I ,?C-//6C^.67?.78?7?#P.<<@??Q R:?<<.67R-C C?:7<-7[.7[@5C.67.7 :?<R67<?C6-;.6C.50-5C6:<4\L/-7CL^]<.6/!!’’#!&*!#*%*( *3*&*!=-7J660>F T A!J-<<.7?7O J!J-Y=66:CJ!?C-/4+7^-75?[ 56R R?:C6/?:-75?.7>4A H%H<I A0G"4:"A6?75^$0G"2#H R6R@/-C.67< 0:6,56R R?:,.7?<.<-<<65.-C?[Z.C^.75:?-<?[C:-7<5:.R C/?=?/<60 -!;$C]R?,?C-//6C^.67?.78?7?4L/-7C L^]<.6/!!’’&!&!*#&#&3$ &#!"&"!T??\!D^.,M!D678Bd!?C-/4F:-;.[6R<.<,?C-//6C^.67?.7<!--7[)?7^-75?:?<.<C-75?C65-[,.@,Z^?7?Q R:?<<?[.7\424G/G1 L G8@-:[5?//<4L/-7CA6/9.6/!!’’(!#(#%’#(%&#&%!N66<?7<>J!9?:7-:[H!T?R/-?N!?C-/4+=.[?75?06:56R R?: ^6,?6<C-<.<0@75C.6760,?C-//6C^.67?.7"AP)$.7C^?^]R?:-55@$ ,@/-C6:W F A G:C42G H"I A H:2H%:4X+9DT?C C!!’’(!#""#3(&*&3!D^?:,-7X4V?C C.78<C-:C?[Z.C^]?-<C4A?C^6[<+7E],6/!&33&!!%#)(!’!’!T.7H B!H^-78J9!J@-78J\4‘.75.7[@5?<,.C68?7$-5C.=-C?[ R:6C?.7Y.7-<?-5C.=-C.67,?[.-C?[;]:?-5C.=?6Q]8?7<R?5.?<.7 :.5?:66C<4L/-7C L^]<.6/9.65^?,!!’’#!()#3*)(3*%!&!M?X:?.C-<\!B.7C EJ!b.,\J!?C-/4d?-<C!-,6[?/6:8-7.<, 06:.:67-7[56R R?:,?C-;6/.<,<C@[.?<9.6,?C-/<4!’’)!&*# &%#(&3"!!!A-5M.-:,.[H B!A./-7.5YAF!+.[?M\49.65^?,.5-/R:6R?:C.?< 60=-5@6/-:E.75C:-7<R6:C<]<C?,<60>G22F G"K$E2H:2H"H<4:4G H4\9.6/H^?,!!’’!!!""#)3&%"()3&3(!)!N66<?7<>J!9?:7-:[H!T?R/-?N!?C-/4+=.[?75?06:56R R?: ^6,?6<C-<.<0@75C.6760,?C-//6C^.67?.7"AP)$.7C^?^]R?:-55@$ ,@/-C6:W F A G:C42G H"I A H:2H%:4X+9DT?C C!!’’(!#""#3(&*!(!N6;.7<67>\!B./<67\N!P@:7?:\D4+Q R:?<<.6760C^?C]R?!,?C-//67C^.67?.7$/.Y?8?7?AP!0:6,’"G L4!K C:4:5F G A4G%G.7‘7!U$,?C-//6C^.67?.7$[?0.5.?7C>E%H2F K2K22I:L H H"3(!#L@C-$C.=?:6/?06:A P!.7‘7!U,?C-;6/.<,4L/-7C A6/9.6/!&33*!)’#&&*3(&&"3!#!P6,,?]FA!D^.\!T.7[<-]B L!?C-/4+Q R:?<<.6760C^?R?-8?7?L<A P-.7M+2K A4,?C-/;.7[.78R:6R?:C.?<60C^??Q R:?<<?[ R:6C?.74X+9DT?C C!&33&!!3!#(%(#!!*!B678J T!D-Y-,6C6P!b-Z-<-Y.P!?C-/4M6Z7$:?8@/-C.6760 ,?C-//6C^.67?.7!-:?-5C.=?6Q]8?7<5-=?78?:!;]C^?<,-//V P$ L-<?_:J G2X.7:.5?4L/-7CL^]<.6/!!’’(!&)##&(("(&(#*(’3!第!"卷!第"期!#$$"年"月。

Zn2+对大肠杆菌蛋白表达的影响摘要：随着社会的发展，环境污染越来越严重。

现在，人们已经把它提升到了一个重要的高度。

环境污染包括许多方面，其中很重要的一项就是重金属盐的污染。

本文中重点介绍了不同浓度重金属盐离子（Zn2+）对大肠杆菌的影响，以及对大肠杆菌蛋白表达的影响。

希望可以通过研究它对大肠杆菌的影响，大致了解其对自然环境中各种生物的影响。

关键词：大肠杆菌；Zn2+浓度；蛋白表达；电泳；灰度扫描；色谱分析1 引言随着人类社会的进步与发展，人类的活动空间逐渐增大，对环境的影响也越来越大，环境就随着人类活动的增加而逐渐的衰退。

目前，环境污染已经是一个很重要的话题，当然，它也包括很多方面，例如，空气污染、水资源污染、噪音污染、土地污染等。

污染源也是方方面面的，如我们都知道的气体（主要是H2S、SO2、NO、NO2、CO等）污染、农药化肥污染以及粉尘飞沫污染等等。

然而，还有一项比较重要的污染一直被大家给忽略了，那就是重金属污染。

目前，对于重金属污染的研究比较少，这方面的研究成果也都不太完善。

现在，在国外有些实验室已经致力于这方面的研究，国内的现状却令人担忧。

本项目就是在此基础上随之而生的。

本项目选用了经济实用的锌离子来进行这次实验，它具有性质简单、容易得到、结果容易分析等特性，【1】这些使本次实验变得简单易行。

本项目中所有的实验都是研究重金属盐离子（Zn2+）对生物生长的影响，重点研究的是微生物（大肠杆菌）的生长。

通过不同浓度的Zn2+的对比试验，我们可以直观的发现微生物生长的变化，得到Zn2+对其生长的影响。

自然界是相通的，我希望大家可以通过重金属对微生物的影响，大致了解其对其他物种的作用。

2 环境变化对生物的生长影响的理论2.1蛋白质的不稳定性生物体中的大分子物质有很多种，其中最为重要的就是核酸和蛋白质，生物的生长发育都离不开它们，本文中重点介绍的是蛋白质。

蛋白质大多都不稳定，很多不适宜的条件（如高温、强酸、强碱等）都会引起它们的形状与功能发生变化，直接影响生物体的正常生长，导致很严重的后果。

金属硫蛋白1、MT命名及定义根据与 MT结合的金属的不同，对只舍一种金属，例如 Cd或 Cu等，可分别定名为镉金属硫蛋白或铜金属碗蛋白等；还可根据结合金属的摩尔含量写成Cd7–MT、Zn7–MT等 (表示每分子结合7个分子Cd或Zn)。

对于含一种以上金属，如同时含 Cd和Zn时，可写成Cd，Zn-MT。

对其分子结构上的差别，可用罗马数字和小写字母标出，例如MT-Ⅱ、MT-Ⅰ、MT-Ⅱa等。

经典MT定义：根据金属硫蛋白命名委员会（Thecommitteeon the Nomenclature of Metallothionein）的建议，1988年，Kagi将具有以下特征的蛋白质或多肽定义为MT（Kagi & Schaffer, 1988）。

1.低分子量，一般为6,000－7,000道尔顿，含60-63个氨基酸残基；2.高金属含量，每分子蛋白质可结合7个二价金属离子，或多至18个一价金属离子；3.特有的氨基酸组成，无芳香族氨基酸及组氨酸；4.富含Cys残基(约23-33%)，无二硫键；特征的氨基酸序列，Cys残基在氨基酸序列中占据相当保守的位置；5.所有的Cys残基均以还原态存在；并通过巯基以硫酯键结合金属离子；从而具有金属巯基化合物的特征吸收光谱。

实际上，这只是对经典MT的一个定义。

现在MT家族所包括的成员远远超出以上定义的范围。

※ Cys半胱氨酸2、MT的分类1.1 根据 MT的结构差异，一般将其分3类第1类：MT的氨基酸序列中的半胱氨酸位置与最先从马肾中分离的 MT的氨基酸序列中的半胱氨酸位置紧密相关的多肽。

所有哺乳动物的 MT都属于这一类。

其它来源的 MT只要其基本结构与哺乳动物的MT相似亦归这一类。

第2类：MT氨基酸序列结构中的半胱氨酸位置与马肾 MT关系较远，与哺乳动物 MT没有或很少有相似的进化关系。

如酿酒酵母和某些高等植物的 MT属于这一类。

第 3类：非典型的 MT。

是一类由非转译合成的金属硫醇盐多肽，由γ-谷氨酰半胱氨酰基单元组成。

Zn(Ⅱ)-锌试剂络合物与蛋白质的显色反应及其应用研究卢业玉;罗宗铭;张焜;梁晓芹;崔英德【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2001(037)007【摘要】在pH 2.8的氯乙酸缓冲溶液中，有Triton X-100存在下，Zn(Ⅱ)-锌试剂络合物与蛋白质结合生成玫瑰红色复合物，最大吸收波长在328nm，蛋白质浓度在0～8.0及10.0～130.0mg·L-1范围符合比耳定律，复合物的表观摩尔吸光系数分别为2.31×105和6.63×105L·mol-1·cm-1。

方法用于麦片、花生、豆类及牛奶中蛋白质的测定，结果满意。

【总页数】3页(P303-304,308)【作者】卢业玉;罗宗铭;张焜;梁晓芹;崔英德【作者单位】广东工业大学轻工化工学院,;广东工业大学轻工化工学院,;广东工业大学轻工化工学院,;广东工业大学轻工化工学院,;广东工业大学轻工化工学院,【正文语种】中文【中图分类】O657.32【相关文献】1.汞-锌试剂-聚乙二醇体系显色反应的研究和应用 [J], 石影;邓凡政;魏星2.钪—铋—三溴偶氮胂混合多核络合物显色反应及其在钪光度分析中应用研究 [J], 李红双;罗庆尧3.以锌试剂显色法测定蛋白质的研究 [J], 迟燕华;李娜;庄稼;李克安;童沈阳4.叶温—80存在下锌试剂与锌的显色反应及其应用 [J], 罗宗铭;岑普诺5.有机溶剂对环糊精存在显色反应的作用及应用研究（Ⅱ）Zn²⁺-5-Br-PADAP-β-CD-乙醇显色体系分析应用 [J], 王华彤;邓文杰;叶晓岚;朱有瑜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。