转基因乳腺癌动物模型

关于乳腺癌小鼠模型创建的研究进展摘要：乳腺癌作为全球女性的高发恶性肿瘤之一，一直是国内外学者研究的重点领域，而乳腺癌小鼠模型的创建成为人们研究乳腺癌的重要途径。

目前人们已经建立了一系列乳腺癌小鼠模型用于乳腺癌发病机制、侵袭转移、药物应用等方面的研究，其中常用的模型有自发、诱导、移植、转基因和远处转移五种，这些模型在一定程度上模拟了乳腺癌在人体内的发生、转移、侵袭等过程，对乳腺癌疾病的研究具有重要意义。

本文就乳腺癌小鼠五种模型的建模方法及优缺点展开讨论。

关键词：乳腺癌；小鼠模型。

王鹏（1997—），男，江苏连云港，研究方向：药学。

乳腺癌是女性最常见的癌症之一。

全球乳腺癌的发病率一直呈增长趋势，据世界卫生组织国际癌症研究中心（IARC）统计，2008年全球大约有46万女性死于乳腺癌[1]，其高发病率及死亡率严重影响女性的身心健康。

中国不是乳腺癌的高发国家，但近年来我国乳腺癌的发病率却持续增长，尤其农村增长趋势更为明显。

乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤，目前关于乳腺癌的发病因素尚未完全清楚。

为了进一步探明乳腺癌的发病机制及治疗方式，人们选取小鼠作为动物模型展开研究。

小鼠在生理行为和遗传信息上与人极其相似，也是人类疾病研究最适宜的动物模型之一。

随着研究深入，人们已经积累了非常多的遗传资源，并且拥有能够对小鼠基因组内的任何基因进行异位表达或进行种系突变的转基因技术，同时复杂的遗传病分析方法也已建立[2]。

目前，用来创建乳腺癌小鼠模型的小鼠品系主要有3种：1）Balb/c小鼠；2）C3H小鼠；3）FVB小鼠，这三种小鼠均为近交系小鼠，作为乳腺癌动物模型具有遗传基因同源性和可重复性高等特点，这是其他乳腺癌动物模型无法比拟的[3]。

1、Balb/c小鼠的乳腺癌发病率较低，多用于乳腺肿瘤细胞诱导的建立和应用，广泛用于免疫学、生理学的动物实验。

2、C3H小鼠在交配或未交配的情况下都具有极高的乳腺癌发病率，一般用于癌症研究、心血管研究、免疫和炎症研究。

乳腺癌动物模型构建乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，临床表现为乳房肿块、乳房异常分泌物、乳房皮肤红肿等症状。

为了更好地研究乳腺癌的发病机制和寻找新的治疗方法，科学家们通过构建乳腺癌动物模型来模拟乳腺癌的发展过程。

本文将介绍乳腺癌动物模型的构建方法和研究价值。

一、乳腺癌动物模型的构建1. 细胞系移植模型细胞系移植模型是构建乳腺癌动物模型的常用方法之一。

研究人员可以选择已知的乳腺癌细胞系，将其移植到小鼠的乳腺组织中，观察肿瘤的生长和转移情况。

这种模型可以模拟乳腺癌的肿瘤生长、浸润和转移过程，为进一步研究乳腺癌的发病机制提供了可靠的平台。

2. 基因工程小鼠模型基因工程小鼠模型是通过基因突变或基因操纵技术，使小鼠表达人类乳腺癌相关基因，从而模拟乳腺癌的发展过程。

这种模型可以精确控制乳腺癌发生的时间和位置，研究人员可以观察到乳腺癌的发展过程以及与基因突变相关的病理变化。

基因工程小鼠模型在研究乳腺癌的发病机制和筛选治疗靶点方面具有重要意义。

3. 化学诱导模型化学诱导模型是通过给小鼠注射化学物质，如致癌物质DMBA （7,12-二甲基苯[α]蒽）或NMU（N-甲基-N-亚硝基脲），诱导乳腺癌的发生。

这种模型可以模拟乳腺癌的致癌过程，研究人员可以观察到肿瘤的生长速度、转移能力以及对化疗药物的敏感性。

化学诱导模型的优势在于可以快速诱导肿瘤形成，是进行大规模筛选实验的理想模型。

二、乳腺癌动物模型的研究价值1. 研究乳腺癌的发病机制乳腺癌动物模型能够模拟乳腺癌的发展过程，帮助研究人员深入理解乳腺癌的发病机制。

通过观察肿瘤的生长、浸润和转移过程，研究人员可以揭示乳腺癌的发展规律，寻找新的治疗靶点。

2. 评估抗癌药物疗效乳腺癌动物模型是评估抗癌药物疗效的重要工具。

研究人员可以在动物模型中测试新的抗癌药物，观察肿瘤的生长速度、转移能力以及对药物的敏感性，从而评估药物的疗效。

3. 验证分子靶向治疗方法乳腺癌动物模型对于验证分子靶向治疗方法的有效性具有重要作用。

乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠模型的生物学特性及病理学研究佘锦雯;亓翠玲;杨永霞;张敏;唐富天;吴晓云;张希敏;王尽淘;王丽京【摘要】目的研究乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠的生物学特性及病理学改变.方法 MMTV-PyMT小鼠饲养于SPF级环境中,观察小鼠的繁育情况.观察小鼠乳腺癌的数目、体积及生存率,研究MMTV-PyMT小鼠乳腺癌的生物学特性.通过组织病理学切片,观察MMTV-PyMT小鼠乳腺癌的病理学变化、肺转移情况、细胞增殖和血管形成情况.结果乳腺癌MMTV-PyMT小鼠已经成功繁育9代,共产仔约400只.小鼠乳腺9周即可触摸到肿瘤,并随着周龄的增加,肿瘤的数目逐渐增加,体积逐渐增大,最多可达10个;大部分11周出现肺转移;通常最长生存时间为15周.乳腺癌MMTV-PyMT小鼠为浸润性导管癌,PCNA免疫组化结果显示乳腺癌有较多的增殖细胞;vWF结果表明乳腺癌有明显的新生血管.结论乳腺癌MMTV-PyMT转基因小鼠已被成功保种和扩群,可稳定自发性乳腺癌,其生物学特性和病理学改变与人乳腺癌相近,可作为研究乳腺癌发生发展的经典动物模型.%Objective To investigate the biological features of the transgenic mouse model and the pathological changes during its life span. Methods The MMTV-PyMT mouse raised in SPF conditions, and the mice breed was recorded everyday. Mast adenoma of MMTV-PyMT mice have been observed by counting and measuring the tumors, and H&E staining for pathological development. Results MMTV-PyMT mice were well bred in our lab for nine generations and totally 400 offspring were obtained. The tumor biological feature was obvious in MMTV-PyMT mice, palpable Mast adenoma occur in 9 week old and pulmonary metastasis was occur in 11 weeks old.Number and size of tumors increased when the mice grow up. Conclusions The MMTV-PyMT transgenic mouse model was well kept and bred, breart tumors can be spontaneuos stably. This can be a typical animal model for breast carcinoma research.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2011(027)002【总页数】5页(P178-182)【关键词】乳腺癌;MMTV-PyMT转基因小鼠;动物模型;生物学特征;病理学改变【作者】佘锦雯;亓翠玲;杨永霞;张敏;唐富天;吴晓云;张希敏;王尽淘;王丽京【作者单位】广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006;广东药学院血管生物学研究所,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】R737.9;R965.1癌症是当今世界上引起死亡的一个重要因素,并且发病率有逐渐升高的趋势[1]。

MMTV-PyMT转基因小鼠模型介绍
基因敲除小鼠是什么？是否就是我们平日所说的实验室用的小白鼠?其实小鼠有很多种，小白鼠只是其中一种，通常普通的小白鼠多被药厂用作临床试验，而基因敲除的小鼠，则用于更尖端的生物医学研究。

基因敲除小鼠技术原理：是先在小鼠的胚胎干细胞上通过基因重组的办法进行基因修饰——就是将胚胎干细胞中的靶向基因改掉,然后将“修饰”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎,生成嵌合体小鼠。

这种嵌合体小鼠长大后,体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。

下面是，MMTV-PyMT转基因小鼠介绍
MMTV-PyMT转基因小鼠是一种人类乳腺癌动物模型。

该小鼠使用MMTV-LTR驱动多瘤病毒中间T抗原（PyMT）在小鼠乳腺组织的表达，使小鼠出现乳腺肿瘤的表型。

可用于研究乳腺肿瘤的发生、发展及转移，及乳腺肿瘤相关药物的筛选。

乳腺癌实验动物模型的研究进展李日飞;袁娜;冶冬阳;李日勇;李姚涵;左儒楠;时晰;陈强;李引乾【摘要】乳腺癌是女性最常见的自发性恶性肿瘤,给女性健康造成了严重威胁.而对乳腺癌的相关研究及治疗方法的探索上,在一定程度上需要依赖于乳腺癌实验动物模型得以实现.理想的乳腺癌实验动物模型应与人类乳腺癌在肿瘤分子特性及生物学行为等方面存在共性,以便于研究各种乳腺癌的发病机制及治疗新药的开发.本文对5种乳腺癌实验动物模型的研究进展进行了综述,以期为人乳腺癌的诊断和治疗提供依据.%Breast cancer is the most common spontaneous malignancy in women, causing a serious threat to women's health. Experimental animal models have been important research tools in bringing insights into the related mechanisms of breast cancer, as well as in delivering improved therapies for the disease. To reveal the pathogenesis of various breast cancers and facilitate the development of new drugs,ideal animal models of breast cancer should share some common tumor molecular characteristics and biological behavior with that of human breast cancer. In this review,five types of experimental animal breast cancer models were included, which may provide a basis for research on diagnosis and treatment of human breast cancer.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2018(028)002【总页数】6页(P113-118)【关键词】乳腺癌;实验动物模型;研究进展【作者】李日飞;袁娜;冶冬阳;李日勇;李姚涵;左儒楠;时晰;陈强;李引乾【作者单位】西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;徐州医科大学,听觉与平衡医学研究所,江苏徐州 221004;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100;江苏沿海地区农业科学研究所,江苏盐城 224002;北京大学医学部,北京100191;徐州医科大学,听觉与平衡医学研究所,江苏徐州 221004;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;徐州医科大学,听觉与平衡医学研究所,江苏徐州221004;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100【正文语种】中文【中图分类】R-33乳腺癌是全球第二大最常见的癌症，2012年全球乳腺癌新发病例达1670万[1]，且乳腺癌的发病率每年呈逐渐攀升趋势。

乳腺癌实验动物模型的研究及发展历程摘要：乳腺癌动物模型根据建立方法可分为自发性、诱发性和移植性，以及转基因乳腺癌动物模型、乳腺癌远处转移动物模型。

并列举现已发现的通过实验动物模型确定的有效治疗方法。

关键词：乳腺癌、实验动物模型、治疗作用乳腺癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤，全世界每年新发乳腺癌约150万例，死亡57万例，而且发病率目前有增高趋势。

乳腺癌动物模型的制作进一步研究乳腺癌的病因、发病机理，这对于乳腺癌的治疗效果和预防有着极大的影响作用。

一个理想、完整的的动物模型，首先应与人体内肿瘤病理生理过程相似，还要便于生产、观察及对各种处理方法进行监测和优选。

1.目前关于乳腺癌动物模型的建立方法有以下几个方面。

1．1 自发性乳腺癌实验动物模型实验动物种群中自然发生或通过遗传育种培养而保留下来的一类肿瘤称为自发性肿瘤。

这种模型的特点为实验动物未经过人为处理，到一定时间发生乳腺肿瘤，多采用近交系小鼠。

自发性肿瘤从其发生来看，与人类肿瘤更相似，因此，在自发性肿瘤中，影响肿瘤发生发展的因素更有可能被发现，但缺点在于应用时，肿瘤的发生情况可能参差不齐，不能在短时间内获得大量肿瘤学资料，观察时间长，实验耗费较大。

1.2 诱发性乳腺癌实验动物模型所谓诱发性模型即使用化学物质、物理、生物因素等可在实验动物中诱发乳腺癌的发生，多数利用强化学致癌物，通过经口、涂抹、注射、埋藏等方法应用于实验动物使之发生乳腺癌。

化学诱导乳腺癌发生的动物模型可用于乳腺癌的病因学研究及预防性研究。

但由于化学诱导乳腺癌发生的动物模型建立的过程长，个体差异很大；而且肿瘤细胞的形态特征差别也很大，所以较少作为肿瘤药物治疗的动物模型。

1.3 移植性乳腺癌实验动物模型移植性乳腺癌模型的移植物来源于自发性或诱发性乳腺肿瘤细胞株或人类乳腺癌细胞株。

根据肿瘤来源不同可分为同种移植和异种移植。

通过瘤细胞悬液注射、瘤组织小块接种等方法将肿瘤原位或异位植入动物体内。

•96•DOI:10.3969/j.issn.l672-9463.2017.05.032中国现代医药杂志2017年5月第19卷第5期MMJC,May 2017，V〇119，No.5•综述.乳腺癌骨转移实验动物模型研究进展石佳佳韩倩倩王白燕朱艳琴乳腺癌是女性最常见的肿瘤相关死因，骨體是 其最常见的转移组织[1]。

流行病学显示，大约85% 的患者承受着骨转移的痛苦[2]。

近年来，乳腺癌骨 转移日益成为肿瘤领域研究的热点,专家学者对此 进行了大量的实验研究以期为乳腺癌骨转移的预 防和治疗提供有效方法，本研究查阅近十年相关文 献总结乳腺癌骨转移的相关实验动物模型,现将其 阐述如下。

1乳腺癌骨转移实验模型细胞株的选择目前常用于乳腺癌骨转移实验造模细胞株，主 要包括人源性乳腺癌细胞株和动物源性乳腺癌细 胞株。

1.1人源性乳腺癌细胞株运用于动物实验造模的 人源性乳腺癌细胞株主要包括MDA-MB-231、MDA-MB-435、MCF-7、ZR-75-1和 SUM1315 等，大部分取材于乳腺癌转移位置的渗出液，具备恶性肿 瘤的特点[3'多数人源性乳腺癌细胞株可在动物体内形成乳腺癌恶性肿瘤，并形成乳腺癌骨转移 灶。

MCF-7虽然广泛应用于体内实验，但在乳腺癌 骨转移动物造模实验中少见。

查阅近十年相关文 献发现，应用于乳腺癌骨转移动物模型的HBC主要 为 MDA-MB-231 或者 MDA-MB-435 细胞株，二者 不仅能够形成骨转移亦可以转移到肺、脑等其他器 官。

1.2动物源性乳腺癌细胞株目前应用的动物源性▲基金项目：河南中医药大学科研苗圃工程项目（编号：MP2016-02、MP2016-07);河南中医药大学2016年研究生创新基金项目（编号:2016YCX002)作者单位:450046河南郑州，河南中医药大学通讯作者:朱艳琴乳腺癌细胞株多为小鼠或大鼠乳腺癌细胞株，主要 包括小鼠乳腺癌细胞株4T1、MRMT- I大鼠乳腺癌 细胞株、MADB-106大鼠乳腺癌细胞株和大鼠Walker256乳腺癌细胞株等。

乳腺癌的转移模型构建乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，其转移是导致患者死亡的主要原因之一。

为了更好地研究乳腺癌的转移机制以及提高其治疗率，科研人员一直在探索乳腺癌的转移模型构建。

本文将介绍几种常见的乳腺癌转移模型构建方法，并探讨其优缺点。

一、乳腺癌的转移模型构建1. 细胞系模型构建细胞系模型是通过从患者中提取肿瘤细胞并纯化培养得到的。

这种方法的优点是操作简单、成本低廉，可以在体外研究肿瘤细胞的生物学特性。

然而，由于体外环境与体内环境差异较大，细胞系模型无法完全模拟患者体内的复杂情况，因此其研究结果需要进一步验证。

2. 动物模型构建动物模型是通过将乳腺癌细胞或组织移植到小鼠等实验动物体内，使其形成原位瘤或者转移瘤。

这种方法可以更好地模拟乳腺癌在体内的生长和转移过程，能够为研究乳腺癌的发生机制以及筛选新的治疗方法提供重要依据。

然而，动物模型的建立相对复杂，需要专业的技术人员和条件，并且由于动物与人体之间的差异，其研究结果也需要谨慎解读。

3. 化学诱导模型构建化学诱导模型是通过给实验动物注射特定的药物或致癌物质，诱导其形成乳腺癌病变。

这种方法能够模拟一部分乳腺癌的发生过程，但与自然发生的乳腺癌仍有一定差异。

因此，化学诱导模型常常作为乳腺癌转移模型构建的补充手段，帮助科研人员更全面地了解乳腺癌的发病机制。

二、乳腺癌转移模型构建方法的优缺点1. 细胞系模型构建的优缺点优点：- 操作简单、成本低廉。

- 可以在体外研究肿瘤细胞的生物学特性。

缺点：- 无法完全模拟患者体内复杂的病理情况。

- 研究结果需要在动物模型或患者体内进一步验证。

2. 动物模型构建的优缺点优点：- 能够更好地模拟乳腺癌的生长和转移过程。

- 可以为研究乳腺癌的发生机制以及筛选新的治疗方法提供重要依据。

缺点：- 建立相对复杂，需要专业的技术人员和条件。

- 动物与人体之间存在差异，结果需要谨慎解读。

3. 化学诱导模型构建的优缺点优点：- 能够模拟一部分乳腺癌的发生过程。

肿瘤动物模型的构建——乳腺癌篇导读乳腺癌是发生在乳腺上皮组织的恶性肿瘤。

最新数据统计，近10年中国乳腺癌新发病率，一直逐年递增，严重威胁着女性身心健康。

乳腺癌动物模型能够模拟出人体乳腺癌的病程发生发展，在研究乳腺癌发病机制和临床治疗中十分重要。

本期我们根据多年的实战经验，为大家倾囊相授乳腺癌研究中那些最实用的动物模型。

在中国近10年乳腺癌在女性中的发病率[1]首先，让我们先了解一下乳腺癌分型和乳腺癌细胞的分类不同分子分型的乳腺癌细胞根据其靶点的表达量对应不同类型的乳腺癌研究，我们需要根据实验研究目的选择正确的细胞株进行动物实验。

如需研究三阴性乳腺癌的生长和转移，常选择基底样的人源细胞株MDA-MB-231或者鼠源细胞株4T1。

乳腺癌分型：临床上，乳腺癌根据分子分型：ER（雌激素受体）、PR（孕激素受体）和HER-2（人类表皮生长因子受体2），可将乳腺癌划分为以下四大类：进一步，根据这些靶点又分了多种细胞株，如下表我们列举了研究中常用到的细胞株：了解到上述乳腺癌分型，那研究中的乳腺癌动物模型有哪些呢？乳腺癌动物模型根据肿瘤发生原理，主要分为四种：1. 自发型乳腺癌动物模型（很少使用）实验动物未经任何有意识的人工处理，自然发生乳腺癌。

多采用近交系小鼠，如C3H、SHN小鼠，生长到一定年龄便自然发生乳腺癌肿瘤。

此动物模型更贴近人类肿瘤的发展，但构建时间长，误差大，一般不建议使用等。

2. 诱发型乳腺癌动物模型（较少使用）使用化学物质、物理、生物因素通过经口、涂抹、注射等方法应用实验动物，使之发生乳腺癌。

常见化学诱导方式是以二甲基苯蒽（DMBA）和甲基亚硝酸基脲（MNU）为诱导剂诱发乳腺癌。

这种方法诱发成瘤率较高，但诱癌过程较长，个体差异较大，不易同时获得病程或者肿瘤大小均一的动物模型，不利于应用于抗肿瘤药物的筛选研究。

以DMBA诱导大鼠乳腺癌模型为例：取7周龄的健康雌性SD，根据体重将80mg/kg DMBA稀释在0.5ml玉米油中，灌胃一次，12周后，可建立乳腺癌病变动物模型[2]。

乳腺癌实验动物模型综述乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性的健康。

为了更好地理解乳腺癌的发病机制、评估治疗效果和开发新的治疗策略，建立乳腺癌实验动物模型是至关重要的。

本文将综述乳腺癌实验动物模型的发展历程、种类和特点。

基因工程模型：基因工程模型是通过改变实验动物的基因来模拟人类乳腺癌的发生和发展。

这些基因包括BRCABRCAp53等与乳腺癌发生密切相关的基因。

基因工程模型具有可控性强、发病机制明确等优点，但需要一定的时间和技术条件。

化学诱导模型：化学诱导模型是通过给予实验动物化学物质来诱导乳腺癌的发生。

常用的化学物质包括DMBA、DES等。

化学诱导模型具有操作简单、发病时间短等优点，但发病机制不如基因工程模型明确。

移植模型：移植模型是将人类乳腺癌组织移植到实验动物体内，从而建立乳腺癌模型。

移植模型具有发病机制明确、实验周期短等优点，但需要严格的无菌条件和操作技术。

发病机制研究：乳腺癌实验动物模型可用于研究乳腺癌的发病机制，如细胞增殖、凋亡、血管生成等。

药物筛选：乳腺癌实验动物模型可用于筛选抗乳腺癌药物，为临床治疗提供参考。

放疗和化疗研究：乳腺癌实验动物模型可用于研究放疗和化疗对乳腺癌的治疗效果和副作用。

随着科技的不断进步，乳腺癌实验动物模型将更加精细和多样化，为乳腺癌的研究和治疗提供更多的可能性。

同时，我们也需要加强伦理审查和规范实验动物的使用，确保实验动物的福利和数据的可靠性。

未来，我们期待通过使用先进的基因编辑技术和干细胞技术，创建更加真实的乳腺癌实验动物模型，以推动我们对乳腺癌发病机制的理解和治疗策略的开发。

乳腺癌实验动物模型在研究乳腺癌的发病机制、评估治疗效果和开发新的治疗策略方面具有重要作用。

不同的乳腺癌实验动物模型各有其优点和局限性，需要根据具体的研究目的和条件选择合适的模型。

我们也需要实验动物的福利和使用规范，确保实验结果的可靠性。

未来，随着科技的发展，我们期待创建出更加精细和多样化的乳腺癌实验动物模型，以推动我们对乳腺癌的理解和治疗。

转基因（基因修饰）型肝癌动物模型转基因型动物模型是指把非自身的诱癌或致癌基因通过生信技术导入或整合到实验动物模型的基因染色体中并发挥功能的一类动物模型，近几年随着Crispr-Cas9技术在生物技术领域的广泛应用，大大提高了精确基因组编辑的准确率[48]。

用Crispr-Cas9技术构建转基因型肝癌动物模型，有肝癌发病率高，动物模型稳定的优点，是目前动物模型的研究热点[49]。

目前常用的主要包括以下几种：(1)用猪来构建转基因模型，因猪体型大，在解剖、生理、代谢、免疫和遗传学等方面与人类相似，是发展大型动物癌症模型的理想模式，如Gaba等[50]通过Cre重组酶诱导杂合KRASG12D和TP53R167H转基因的表达，形成定点和细胞特异性肿瘤，即Oncopig癌症模型，此类模型有与人类肝癌相似的细胞周期、AFP的产生、化学敏感性和药物代谢酶的表达等特点；(2)用小鼠来构建转基因模型，如Hassan等[51]通过将纯合金属硫蛋白/TGFα和白蛋白/c-myc单转基因小鼠在CD13B6CBA背景下杂交获得c-myc/TGFα双转基因小鼠，并在后代中挑选雄性小鼠，以饮用水中添加锌加速肝癌发生的方式来构建肝癌动物模型；FRG小鼠是人源化肝脏研究领域最重要的模型，Stone等[52]Crispr-Cas9技术编辑腺病毒(AAV)结合HBV载体(AAV-HBV)，构建HBV过表达病毒，通过尾静脉注射的形式，对FRG小鼠进行肝癌造模。

(3)用斑马鱼来构建转基因模型，斑马鱼有体积小、繁殖发育快、肝脏再生能力强、基因序列与人类基因序列高度相似等特点，在肝癌动物模型的构建中经常选用[53]，如Chen等[54]以Tg[fabp10∶ rtTA2s-M2; TRE2∶ EGFP-kras(G12V)]转基因斑马鱼为实验模型，通过多西环素喂养引发肝癌的方式来构建肝癌动物模型。