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结核感染T细胞检测及意义PPT课件

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结核病实验室检查及意义PPT课件

结核病实验室检查及意义PPT课件
IGRA都要检查
BCG接种者（如果也属于其 它风险人群）
推荐用IGRA
与传染性肺结核患者密切接 触
TST或IGRA
医务工作者
TST或IGRA
无法再来确认TST结果的人 群（例如，流浪汉，注射吸
毒者或交通不方便）
推荐用IGRA
TST，如果TST阴性要用 IGRA确认
没有特定的推荐
TST，用IGRA进一步确认 TST阳性 推荐用TST
非血 样本 的T-SPOT结果 很 强的话 （即 存 在大量 的结 核 效应 T 细 胞）,揭示在这个器官或部位存在活动性结核。
各国对潜伏感染风险人群的筛查指南
风险人群
美国指南Hale Waihona Puke 加拿大指南英国指南
免疫力抑制人群（例如， HIV感染者，使用强的松或
TNF-α抑制剂治疗）
TST或IGRA；如果是阴 性或高度怀疑的，TST和
与BCG的交叉反应
存在
存在的可能性较小
与NTM的交叉反应
存在
存在的可能性较小
与M.TB暴露的相关性
存在
相关性较PPD皮试大
阳性结果与随访期间罹患结核的相互关 系
可重复性
中到显著的正相关 中等，但可变
无充足的证据 较高，但证据较少
T-SPOT实验
阴性结果 提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。假阴性结 果： ①感染阶段不同；②少数免疫系统功能不全/疾病；③实验非正 常操作。
结核分枝杆菌-实验室检查
适用于多种标本；操作简便，价格低廉。 2份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性。
结核杆菌培养
传统方法：L-J固体培养基 快速培养法: 检测细菌生长过程中代谢产生的CO2或消耗的O2， 显微镜直接观察、变色液体培养基等BACTEC MGIT960系统等。

结核感染T细胞TBIGRA检测及意义 ppt课件

结核感染T细胞TBIGRA检测及意义 ppt课件

Dheda K, et al.The immunology of tuberculoisis:From bench to beside.Respirogy,2010,15:433-450
2020/11/29
11
结核检测的方法比较
• 不能区分卡介 苗接种者
• 不能区分NTM • 48-72小时复诊
接触史 临床症状 病原/病理
2020/11/29
16
TB-IGRA 产品特性
➢高灵敏度，检出率85%以上
➢高特异性
RD1区编码的ESAT-6和CFP-10两个特异性抗原
该抗原具 有较强的Thl细胞免疫原性，且在所有制备卡介 苗的菌株及环 境中绝大多数非结核分枝杆菌中均不存在该抗原，不受卡介苗和非分
支杆菌影响
IFNg
TNFa
CK
电镜下的结核杆菌
3
2020/11/29
4
2010年新发880万例结核患者，59%在亚洲，26%在非洲
World Health Organization.Global tuberculosis control:epidemiology,strategy, financing:WHO report 2011(WHO/HTM/TB/2011.16).Geneva:WHO,2011
尚未发病的一种特殊状态
结核分枝杆菌（MTB）
注：感染后发病与否和机体易感性有关！
暴露 感染
1%
疾病进展
9%
L潜ate伏ncy
LTBI
90%
自愈
复燃
活动性结核病
2-5% 5-10% HIV>10%
一直存在活菌 需预防性服药
未根治
细菌全部被清除

骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件

骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件
分类
根据感染部位，骨科结核感染可 分为脊柱结核、关节结核和骨结 核等。
临床表现与诊断
临床表现
早期症状可能不明显，随着病情发展 可能出现疼痛、肿胀、活动受限等症 状。
诊断
结合临床表现、影像学检查和实验室 检查进行诊断，其中T细胞斑点检测（ SPOT）是一种常用的实验室检查方法。
骨科结核感染的流行病学
采用其他检测方法进行确认。
05 SPOT检测的案例分享
案例一
患者情况
一位中年男性，因髋关节疼痛就诊，疑似髋 关节结核感染。
诊断结果
结合患者临床表现和SPOT检测结果，最终 诊断为髋关节结核感染。
SPOT检测
对患者进行T细胞斑点试验（SPOT），检测 结果显示阳性，提示存在结核感染。
治疗方案
患者接受抗结核药物治疗，并进行髋关节手 术治疗，术后恢复良好。
案例二
患者情况
一位青年女性，已确诊为脊柱结核感 染。

02
SPOT检测
对患者进行T细胞斑点试验（SPOT）， 检测结果显示阳性，提示结核感染活 动期。
01
治疗方案
继续抗结核药物治疗，并定期进行复 查。
05
03
病情变化
经过一段时间的抗结核药物治疗后， 患者病情得到控制，再次进行SPOT检 测。
04
检测结果
结合其他技术
扩大应用范围
探索将SPOT检测与其他诊断技术相结合， 提高诊断的全面性和准确性。
研究SPOT检测在骨科其他疾病诊断中的应 用价值，拓展其应用领域。
感谢您的观看
THANKS
监测疗效
治疗后，SPOT检测可以监测治疗效 果，评估病情恢复情况。
预测复发
通过长期监测SPOT检测结果，可以 预测结核感染的复发风险。

(精选课件)结核感染T细胞斑点试验

(精选课件)结核感染T细胞斑点试验
7
T-SPOT-TB—应用
在结核性脑膜炎、结核性胸膜炎中的诊断意义 1.敏感性优于ADA、TB-DNA，约在62-75%，特异性无
统计学差异。 在结核病治疗中的评价意义
1.其数值高低与严重程度无关。 2.效应T细胞随结核杆菌的清除而消失，其阴性及阳 性结果可作为评估治疗效果的手段之一 。
8
1
由来----γ干扰素释放试验（IGRAs）
在2001年前，美国仅批准结核菌素 皮肤试验（TST）用于结核分支杆 菌的检测。在认识到IFN-γ在调节 对结核分支杆菌的细胞介导的免疫 反应中起重要作用，从而使得 （interferon gamma release assays） IGRAs用于检测结核感染。IGRAs通 过检测代表结核分支杆菌的抗原刺 激T淋巴细胞反应后释放IFN-γ的量 来判断是否存在结核杆菌感染。
2001年—QFT Quanti FERON -TB 2005年—QFT-G 2007年—QFT-GIT 2008年—T-Spot-TB
2
T-SPOT-TB—定义
以结核特异的混合抗原A和混 合抗原B（分别为ESAT-6和 CFP-10的部分多肽片断）刺 激结核杆菌感染者外周血单 核细胞中存在结核特异的活 化T淋巴细胞分泌γ干扰素， 从而应用ELISPOT方法检测 对结核杆菌反应的效应T细胞 数量，对结核杆菌感染进行 辅助诊断。

T-SPOT-TB—示意
阴性对照 阳性对照 A试验组 B试验组
5
T-SPOT-TB—解释
非黄金标准 定性检测而不是定量检测 敏感性95.3%-98.8% 特异性94.1%-100% 萨斯分枝杆菌( My cobacter ium kans asii ) 、海
分枝杆菌(My cobacter ium mar inum ) 、斯氏分枝 杆菌( My cobacter ium sz ul gai ) 等少数分枝杆 菌中也存在完整RD1区，编码ESAT������ 6 和CFP������ 10, 可造成检测结果成假阳性。

骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件

骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件
02
报告格式应规范、清晰，易于阅 读和理解。建议使用表格、图表 等形式展示数据和结果。
SPOT检测结果的沟通与交流
医生应向受检者详细解释SPOT 检测结果的含义，并根据结果制
定相应的诊疗方案。
对于阳性或灰区结果，医生应进 一步询问受检者的结核病史、接 触史、临床表现等信息，以便更 好地评估病情和制定治疗方案。
病患者都有症状。
结核病对肺部、骨骼、肾脏等器 官均可造成损害，其中骨科结核
感要发生在脊柱、 髋关节和膝关节等部位，其中 脊柱结核是最常见的。
骨科结核感染的发病率呈逐年 上升趋势，主要与人口老龄化、 免疫系统疾病增多等因素有关。
骨科结核感染的流行病学特征 包括地域差异、人群分布和传 播途径等。
实验环境
确保实验室环境清洁、无 菌，符合进行细胞培养和 检测的要求。
样本采集与处理
采集样本
根据实验需求，采集患者的血液或淋巴结样本。
样本处理
将采集的样本进行离心，分离出血清或淋巴结组织。对血清或组织进行预处理，如去除杂质、过滤等。
SPOT检测实验步骤
细胞培养
将处理后的样本加入细胞培养板或瓶中，进行细胞培养。
T细胞斑点检测的优势与局限性
优势
T细胞斑点检测具有较高的特异性和敏感性，能够早期检测结核感染，尤其对 于潜伏感染者；该方法操作简便、快速，适合大规模筛查。
局限性
T细胞斑点检测无法区分活动性结核感染与潜伏感染，对于已经接受抗结核治疗 的患者可能出现假阴性结果；此外，该方法对于免疫抑制人群的准确性有待提高。
SPOT检测的未来发展方向与挑战
提高灵敏度和特异性
针对不同病种和人群，进一步 提高SPOT检测的灵敏度和特异
性，减少误诊和漏诊。

TSPOT相关ppt课件

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• 利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存
在结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异
抗原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。 • 检测外周血中受结核特异抗原刺激释放r干扰素的T淋巴
细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计算出抗原 特异性细胞的频率。
基于T淋巴细胞检测结核感染的原理
包
基于T淋巴细胞检测结核感染的原理
• T-SPOT.TB高灵敏度Βιβλιοθήκη • T-SPOT.TB高特异性
ESAT-6＆CFP 10均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域 仅结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）存在 RD1区基因 卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因 T-SPOT.TB不会受卡介苗接种影响
TSPOT.TB的原理及临床应用
基于T淋巴细胞检测结核感染的原理
• 结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核感染后 体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞
• 当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放r干扰 素
• r干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要 的细胞因子
T-SPOT.TB技术：

TB-IGRA结核感染T细胞检测ppt课件

TB-IGRA结核感染T细胞检测ppt课件

昆明三院
TB-IGRA 90.0% 90.7% 80.0%
QFT-GIT 86.8% 87.3% 80.0%
总标本数 342
322
20
老年医院
TB-IGRA 76.6% 76.5% 78.6%
QFT-GIT 67.3% 66.2% 85.7%
总标本数 248
234
14
厦门CDC
TB-IGRA 70.9% 70.6% 100.0%
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6
特异性T细胞体外释放酶联免疫法检 测
TB-IGRA
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7
TB-IGRA原理、方法
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8
特异性T细胞体外检测在发达国家已广泛应用
• IGRA技术目前已获得美国FDA批准，在欧洲获得了CE标志认证，在日 本已经被MHLW批准
• “特异性T细胞体外检测”方法在国际上被越来越多地应用于TB感染 的辅助诊断，已成为欧美国家结核常规检测方法之一。
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18
消化科/心内科/肾内科/骨科
肺外结核免疫学辅助诊断
40％的结核感染者存在肺外病灶，1/4的结核患者为肺 外结核。而对肺外结核取样难度大，用IGRA检测为阳性时，高 度怀疑结核。单肺外结核不具有传染性，可分布在综合医院的 呼吸科外的其他科室。
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19
儿科
可判断传染 可进行定性
优点 性高低
及半 定量分 析
分子诊断
核酸检测
特异性高， 涂阳标本检 出率高
检出率20-
30%，不能
区分非结核
缺点
分枝杆菌； 取样难
检出率59% ，耗时长（ 2-6周）；缺 陷的活菌无 法培养；肺 外结核病人 取样困难

结核感染T细胞检测ppt课件

结核感染T细胞检测ppt课件
注意事项
采血量：6-10ml 采血管：肝素抗凝 样本保存：当天送样，常温运输 注意：PET-CT与输血
*
方法学优点
特异性95%左右，不受卡介苗（BCG）接种与环境分枝杆菌影响 灵敏度95%左右，几乎不受个体免疫功能低下影响 快速，24小时报告结果 国内外指南推荐，多篇文献数据支持 斑点数意义：斑点越多越倾向活动性结核、现症感染、能反应疗效 送样的注意事项
*
——Ribeiro S, Dooley K, et al. BMC Infect Dis, 2009 （IF=3.02）
方法：在肺结核治疗中，用T-SPOT.TB方法评估治疗效果。在治疗开始前，治疗16周和24周后，分别计数ESAT-6和CFP-10刺激产生的斑点数
图1. 所有研究对象ESAT-6, CFP-10和总RD1在治疗前，16周后和24周后的平均斑点数（n=58）
*
方法学缺点
不能够提示临床患者的病变部位，需要结合临床的判断 目前还不能够根据斑点数量的多少来判断患者是活动性结核病或是潜伏感染者
*
内容
结核病基础概念 T-SPOT.TB 产品知识 T-SPOT.TB 临床应用 病例分享
*
肺外结核
结核分枝杆菌能侵染全身大部分器官，其中有20%发生在肺外
100.0% (12/12)
Ferrara et al Lancet 2006 376;1328-34*
83.3% (20/24)
Lee et al Eur Respir J 2006 28;24-30*
96.6% (84/87)
Goletti et al Clin Microbiol Infect 2006 12;6:544-50*
活动性与潜伏性结核感染患者中，T-SPOT.TB斑点数比较

结核感染t细胞检测课件

结核感染t细胞检测课件
自动化和智能化
开发自动化和智能化的T细胞检测系 统，提高检测的效率和可重复性。
T细胞检测与其他检测方法的联合应用
与细菌学检测联合
将T细胞检测与传统的细菌学检测方法相结合，以提高结核病的诊 断准确性。
与免疫学检测联合
将T细胞检测与其他免疫学指标（如抗体水平）相结合，以提供更 全面的免疫反应信息。
与分子生物学检测联合
04
结核感染T细胞检
测的临床应用
诊断结核病
诊断准确性
结核感染T细胞检测通过检测体内是否存在结核特异性抗原，能够准确诊断结 核病，尤其对于肺外结核和痰菌阴性肺结核的诊断具有重要意义。
早期诊断
由于结核感染T细胞检测具有较高的灵敏度，能够在结核病早期阶段就检测出阳 性结果，有助于早期诊断和治疗，减少疾病传播。
临床验证
进行大规模的临床验证研 究，以评估新型T细胞检 测方法的性能和实用性。
THANKS
感谢您的观看
T细胞检测通常采用 酶联免疫法（ELISA） 或酶标仪进行定量检 测。
通过检测IFN-γ水平， 判断是否存在结核特 异性T细胞反应。
T细胞检测的优势与局限性
优势
T细胞检测具有较高的灵敏度和特异 性，能够早期发现结核感染，尤其适 用于潜伏性结核感染的诊断。
局限性
T细胞检测无法区分活动性结核与潜伏 性结核感染，且受免疫系统功能状态 、年龄、疫苗接种等因素影响，可能 出现假阳性或假阴性结果。
结核感染T细胞检测 课件
目录
CONTENTS
• 结核感染概述 • 结核感染的检测方法 • 结核感染T细胞检测原理 • 结核感染T细胞检测的临床应用 • 结核感染T细胞检测的未来发展
01
结核感染概述

结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义

结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义

THANKS
感谢您的观看
与免疫学指标关联
分析TB-IGRA检测与免疫学指标（如CD4+T细胞计数、干扰素-γ释放等）的关系，发现这些 指标在结核病患者中异常表达，且与TB-IGRA检测结果相互印证。
与临床表现及预后关联
探讨TB-IGRA检测结果与结核病患者临床表现及预后的关系，发现阳性结果与患者病情严 重程度、治疗反应及预后密切相关。
完善相关法规和政策支持
01
制定行业标准
建立TB-IGRA检测技术的行业标 准和质量管理体系，确保检测结 果的准确性和可靠性。
02
加强政策扶持
03
完善医保报销政策
政府应加大对TB-IGRA检测技术 的投入和支持力度，推动相关产 业的发展和创新。
将TB-IGRA检测技术纳入医保报 销范围，减轻患者的经济负担， 提高检测的可及性。
05
临床案例分析与解
读
不同类型结核病患者案例分析
活动性结核病案例
通过对比活动性结核病患者的TB-IGRA检测结果，发现其 阳性率较高，表明该检测对于活动性结核病的诊断具有较 高敏感性。
潜伏性结核病案例
分析潜伏性结核病患者的TB-IGRA检测结果，可见部分患 者呈现阳性反应，提示存在结核分枝杆菌感染，但无明显 临床症状。
加强国际间合作与交流
分享经验与技术
加强与其他国家和地区的交流与合作，分享TB-IGRA检测技术的研 发和应用经验，共同推动技术的进步和发展。
参与国际标准制定
积极参与国际标准的制定和修订工作，推动TB-IGRA检测技术的国 际化和标准化进程。
加强科研合作
鼓励科研机构和企业加强合作，共同开展TB-IGRA检测技术的基础 研究和应用研究，推动技术的不断创新和发展。

T-SPOT.TB-PPT精选课件

T-SPOT.TB-PPT精选课件
结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介 与临床应用
1
• 科室需求与结核检测现状 • T-Spot·TB 简介 • T-Spot·TB的临床应用
4
临床对结核检测的需求如何
• 结核病发病比例近些年不降反升，多种疾病合并发病— —多科室需求
• 菌阴肺结核比例高——灵敏 • 阴影待查情况较多——特异 • 呼吸系统（肺癌、肺间质病等）、神经系统、消化系统
27
基本要素
• 原理：干扰素释放试验 • 方法：酶联免疫斑点法 • 抗原： ESAT-6与CFP 10
28
γ-干扰素释放实验（IGRA）
γ干扰素 检测阴性
γ干扰素 检测阳性
TB抗原多肽
T细胞
活化T细胞
γ 干扰素
29
酶联免疫斑点技术（ELISPOT）
30
结核杆菌特异抗原
Tuberculosis Complex
M. tuberculosis M. africanum M. bovis BCG substrain
gothenburg moreau tice tokyo danish glaxo montreal pasteur
Antigens
ESAT-6 CFP 10
+
+
+
+
+
+
-
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-
非结核分枝杆菌病是指感染了NTM，并引起相应器 官或组织病变。 迄今为止，共发现NTM菌种154种，NTM可以侵犯人 体肺脏、淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等组 织器官并可引起全身播散性疾病。人可从环境中感 染NTM而患病，水和土壤是重要的传播途径。 NTM病发病率明显增长，其发病约占结核病的十分 之一。已成为人们关注的重要课题。

结核感染T细胞检测在结核病潜伏感染中的临床应用-PPT

结核感染T细胞检测在结核病潜伏感染中的临床应用-PPT
血:肝素抗凝血（5ml绿头管抽1管）
成人4-6ml;儿童2-3ml 常温送检（不可冰浴、冰冻） 4h内送达实验室 注意：输血及PET-CT（2周后） 浆膜腔积液样本（胸水，腹水，脑积液,
心包积液等）： 50ml离心管（无菌）加0.2ml肝素抗凝剂 与血标本同时送检。
酶联免疫斑点试验（T-SPOT-TB）
193 participants from 39 countries 20120513-18,非洲乌干达，坎帕拉
国家“十二五”科技重大专项
感染与免疫
“一旦感染，终生感染” 结核病发生、发展和转归与机体的免疫状态密切相关
1882年 柯赫：细菌不是结核病的全部病因
潜伏感染的再认识
WHO 2014年《结核潜伏感染管理指南》： 潜伏感染：
Ø 入院18小时出现发热，体温最高达 39.6℃，行头孢呋辛皮试阳性，交待
Ø 后2拒01绝3使-1用2-其06他出抗现2生0阴1素道3；-1流2液-16，找到羊齿2014-03-18 状结晶，考虑难免流产，放弃保胎；
Ø 2013-12-07 排出死婴，仍高热；
2015-05-25
Ø TB-IGRA（+）； Ø 2013-12-20病理诊断：子宫内膜结核； Ø HRZE/Lfx抗结核药物治疗18月。
伏立康唑”抗感染治疗 症状无缓解。 • 肺部弥漫性大B淋巴细胞瘤
IGRA的临床应用：发热原因排筛
原因不明发热（FUO）患者的结核感染排筛；
定义：发热持续2～3周以上，体温几度超过38.5 ℃， 经完整的病史询问、体格检查以及常规的实验 室检查不能明确诊断者。
病因：感染 肿瘤性疾病 结缔组织病 最终诊断不明者
T-SPOT-TB在筛查结核潜伏感染人群中的应用价值

结核感染T细胞检测PPT课件

结核感染T细胞检测PPT课件

NT P
试剂盒的检测流程
检测管： TB蛋白 阳性管： PHA
阴性管：无
采血，分别加入 阴、阳性对照管 和检测管 1ml
37度封闭培养 22 小时
收集上清 ELISA定量检测上 清中 IFN-γ 含量
检测管
培养液 刺激抗原
阴性对照管
培养液 无刺激原
阳性对照管
培养液 PHA
TST与IGRA
2.3 IGRA应用实例
焦卫〔2014〕185号文件
❖ 2014年12月15日焦卫〔2014〕185号文件， 其核 心内容是进一步加强结核病归口管理工作。
❖ 要求医疗机构严格按照卫生部《肺结核病人转诊和 追踪实施办法》、《河南省结核病归口管理实施细 则》，对肺结核病例或疑似病例，需要住院的患者 必须转至市三医院，仅需门诊治疗的患者转至市或 县疾控中心。
结核感染T细胞检测原理
❖ 通过比较基因组学发现卡介苗和结核分枝杆菌间存 在RD区 RD1区一般只存在于结核分枝杆菌，可能 形成ESX-1分泌机制。
❖ 该分泌系统中有两个重要蛋白，早期分泌抗原6(Байду номын сангаасSAT-6)和培养基滤过蛋白-10(CFP-10)具有较强 的Thl表位。
❖ ESAT-6和CFP-10作为体外刺激抗原来检测结核分 枝杆菌越来越频繁，这种方法被定义为体外T细胞 IFN-γ释放试验（IGRA）。
诊断？
结核感染T细胞检测
❖ 结核感染r干扰素释放实验 ❖ 两种方法：酶联免疫吸附实验
酶联免疫斑点实验
1.传3 统结结核核诊诊断断方法
细菌培养
结核感染T细胞检测原理
•TB感染者血液中特异性T细胞再次接触到TB抗原， 迅速产生IFN-γ •IFN-γ与TB有很好的量对应关系，呈正相关 • TB-IGRA通过检测体外释放的IFN-γ的含量确定 是否感染TB •未感染TB不产生IFN-γ

结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)

结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)

1520文档结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)
一.临床意义：
结核病临床表现复杂多样，可累及全身各个系统，给临床诊断带来很大困难。

本项目检测通过将分离标本中的单个核细胞加入结核分枝杆菌特异性抗原A、B分别进行细胞培养后，分别检测分泌γ干扰素的特异性淋巴细胞的数量诊断结核感染。

本检测诊断结核感染的敏感性为90%-95%，特异性为93%-100%。

对临床诊断或排除结核病具有重要的参考价值。

二.标本类型、采集及运送要求：
1.采集要求：标本采集后4小时内必须送到实验室，标本采集后如果超过4小时未送检将严重影响检测结果。

2.静脉血：肝素钠（绿头管）抗凝管采集静脉血4ml，立即颠倒数次，充分混匀，以免血液凝固。

采血后向试管中注入血液时请缓慢进行，避免用力过猛造成细胞破坏影响检测结果。

三．标本采集时间、结果发放时间及检测频率
1.标本采集时间：每周一上午12点之前采血；并于4小时之内送到临床微生物实验室。

（必要时可与临床微生物实验室联系）
2.结果发放时间：周二下午4点半检验报告发出。

3.检测频率：暂定每周检测一次。

. 1。

结核感染T细胞TBIGRA检测及意义课件ppt

结核感染T细胞TBIGRA检测及意义课件ppt
•Gamma（ γ） Indonesia (0.
Tuberculosis（结核TB） 潜伏性结核感染（LTBI）：是宿主感染结核杆菌后尚未发病的一种特殊状态
Release • （释放） 5 million) (26%)
对师生采血进行IGRA检测
•Assay（测定） 结果分析：痰涂片不能区分非结核分枝杆菌，造成假阳性，而TB-IGRA与菌培结果相符，对结核分枝杆菌有很好的特异性。
发病人群前五位的国家
• India(2.0 million–2.5 million) (26%)
38%
• China (0.9 million–1.2 million) • South Africa (0.40 million–0.59 million) • Indonesia (0.37million–0.54 million) • Pakistan (0.33 million–0.48million).
89.11%（90/101）
干扰素释放酶联免疫法（TB-IGRA）用于检测结核分枝杆菌的优越性
96.12%(99/103)
体外γ-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较
90.1%(308/342
干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值
88.6%(39/44)
国外同类试剂
优势
A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and TSPOT.TB in Children
临床应用案例
MTB与其他杆菌感染的鉴别诊断： 肺外结核占整个发病率的10%-20%，死亡率占结核病全部死亡率的14.
电镜下的结核杆菌
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IGRAs
APC
IFN-g release assay
细胞 因子
ELISA
细胞 因子
ELISPOT
活化/细 胞因子
流式细胞术
体外刺激： RD1抗原T cell
IFNg
TNFa
CK
活化标志物
细胞因子
两种TB-IGRA比较
高孟秋,刘菲,纪滨英等.两种γ-干扰素释放分析在结核病临床诊断中的比较研 究.中华结核和呼吸杂志，2012，35（10）：762-765
张华，黄圣文，罗振元.结核分枝杆菌r-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用.中华医学院 感染学杂志 2009年第19卷第14期
国内外相关研究
国内文章
sensitivity
结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用
90.24%（74/82）
TB-IGRA与TST检测菌培阳性肺结核患者比较
潜伏性感染监控
一起小规模结核暴发流行的调查与控制
某中学高三年级小规模结核爆发
疫情发展阶段
结核病例及分布
初始病例
1例（7班）
疫情时间 6月初
第一批疫情
5例（7班）
8-9月
第二批疫情
10例（8例7班）
9月
疫情初处理
自行住院
全年级师生胸透， 胸透阴影预防性
服药
全年级师生PPD试 验
对师生采血进行 IGRA检测
临床应用案例
MTB与其他杆菌感染的鉴别诊断：
➢某院呼吸内科病人，男 ➢临床症状：发热、咳嗽、咳痰、呼吸困难，乏力，多汗，关节疼
痛 ➢检测结果：痰涂片（-），菌培（-），肺部X射线可见肺结节，
胸腔积液 ➢诊断过程：该院诊断为结核但治疗无好转，患者转院检测IGRAs
（-），试管凝集实验++，布病抗体++，确诊布氏杆菌感染，与 该院打官司胜诉。 ➢结果分析：由于痰涂片和菌培检出率低，阴性也未能引起重视， 只凭X片和症状诊断为结核并治疗。治疗无效后，病人转院，检 测IGRAs阴性，考虑排除结核，且病人为牧民，确诊布氏杆菌病。 官司败诉后，该院才开始重视IGRAs检测。 ➢最终确诊：布氏杆菌病
Latent TB检出高
Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Radiographic Lesions Suggesting Old Healed Tuberculosis
Assay
in
Patients
with Latent
TB-IGRA 产品特性
➢高灵敏度，检出率85%以上
➢高特异性
RD1区编码的ESAT-6和CFP-10两个特异性抗原
该抗原具 有较强的Thl细胞免疫原性，且在所有制备卡介 苗的菌株及环
境中绝大多数非结核分枝杆菌中均不存在该抗原，不受卡介苗和非分支
杆菌影响
IFNg
TNFa
CK
国内外相关研究
TB-IGRA快速简便，是一种值得推广的检测方法：
PPD 试验：弱阳性多见，但不能鉴别MTB和NTM感染。 细菌学检查：常规痰涂片无法鉴别MTB和NTM。 培养特性：固体培养基上，NTM菌落常光滑，部分菌落有色素产
生，生长迅速，且在含PNB(对硝基苯甲酸)和含TCH (噻吩二羧 酸肼)选择性培养基上均可生长，而结核分枝杆菌只在TCH选择 性培养基上生长。
89.11%（90/101）
干扰素释放酶联免疫法（TB-IGRA）用于检测结核分枝杆菌的优越性
96.12%(99/103)
体外γ-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较
90.1%(308/342
干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值
88.6%(39/44)
国外同类试剂
优势
A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and TSPOT.TB in Children
细菌培养
抗体检测
IGRA方法
• 取样操作简便
• 检出率高（活动 分子诊断
结核和潜伏结核） • 区分BCG、NTM • 检测肺外结核
• 特异性差 • 误诊肺炎、肺癌 • 肺外结核难
• 假阳/假阴多； （涂阴45%/35%） • WHO建议禁用
• 操作复杂 • 技术要求高 • 涂阴检出低
34%
• 肺外结核难
临床应用案例
肺炎与肺结核的鉴别诊断：
➢某医院呼吸内科，男，59岁 ➢临床症状：肺部有胸水，高烧发热，初步认定肺炎，抗生素治疗
1周不见效果，高度怀疑结核。 ➢检测结果：痰涂片（-），结核抗体（-），TB-IGRA（-） ➢结果分析：传统结核检测检出率在20%-40%，灵敏度低。IGRA检
出率在90％以上，阴性排除意义高于涂片和抗体。患者继续用药 3周，病情好转。 ➢临床诊断：肺炎
80.3%（118/147)
γ-干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义
88.64%（39/45）
结核分枝杆菌相关γ-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值
90.7%（243/268）
两种结核分枝杆菌相关γ-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究
90.9%（290/319）
体外释放酶联免疫法检测结核杆菌γ-干扰素的实验研究
综上，TB-IGRA： 高特异性，高灵敏性，体外，全血，定量检测
应用方向： 肺结核辅助诊断 肺外结核辅助诊断 结核感染排查 潜伏性感染监控，抗结核治疗追踪
TB-IGRA应用汇总
• 肺结核的辅助诊断，尤其是细菌学检测阴性的肺结核的辅 助诊断：TB-IGRA从细胞水平上检测结核感染，检出率高， 早期感染即可检出，实现早诊断早治疗。
06.16.2011
26
使用抗TNF药物前排查结核的意义
发病率 /100.000 患者/年
100
136
80
发病率 /100.000 患者/年
60
40
20
0 抗TNF药物
14.4
英国普通人群
Dixon W G et al. Ann Rheum Dis 2010;69:522–528. Tubach et al. Arthritis & Rheum 2009; 60: 1884-1894
IGRA阳性者进行预 防性服药
√
×
疫情控制
潜伏性感染、抗结核治疗监控
定量检测γ干扰素释放强度，可用于持续监控：
抗结核治疗效果辅助评估
Kobashi等利用IGRA对50例结核患者的治疗进行追踪检测： • 治疗开始后，结核患者中IGRA的敏感性和反应强度 均有明显的下降趋势
TB-IGRA的临床应用
23
临床应用案例
MTB与NTM的鉴别诊断：
➢ 某院感染科病人，男 ➢ 临床症状：发热1周，咳嗽，少量痰 ➢ 检测结果：两次痰涂片（+），两次TB-IGRA（-），肺部X射线
无异常，后经菌培鉴定为菌培（-） ➢ 结果分析：痰涂片不能区分非结核分枝杆菌，造成假阳性，而
TB-IGRA与菌培结果相符，对结核分枝杆菌有很好的特异性。 ➢ 临床诊断：鸟型分枝杆菌感染
12
目录
contents
1. 结核病的诊断现状 2. TB-IGRA介绍 3. TB-IGRA的临床应用 4. TB-IGRA检测方法及结果解释
TB-IGRA方法介绍
原理: 机体内被结核菌抗原致敏的效 应T细胞，在体外受到相同抗原的 刺激（在APC辅助下）后，会分泌 大量IFN- γ(细胞因子)。通过IFN- γ 的检测，判断结核感染情况。
临床应用案例
肺外结核辅助诊断：
➢某院感染科，女，75岁 ➢临床症状：发热数日，胸痛，干咳 ➢检测结果：X射线胸腔积液影像，积液涂片（-）、积液培养（-
）、TB-IGRA T-N 350pg/ml，积液单核细胞增多，血沉快 ➢结果分析：对于肺外结核的诊断，涂片与培养的阳性率极低，
TB-IGRA（+），结合其他非特异辅助指标可明确诊断肺外结核。 ➢临床诊断：结核性胸膜炎
结核病现状及危害-传播范围广
逐年 增加
全球27个MDR-TB流行严重的国家之一，中国尤其严重
World Health Organization.Multidrug and extensively drug-resistant TB (M/XDR-TB): 2010 global report on surveillance and response. WHO/HTM/TB/2010.3.
• 肺外结核的辅助诊断：TB-IGRA取静脉血进行检测，克服 肺外结核患者痰样找不到结核菌，病灶部位取样难的问题。
• 呼吸系统疾病与结核的鉴别诊断：发热、咳嗽、咳痰>2周； 咯血；胸痛等症状疑似结核，胸片/CT不能明确诊断者； 抗炎治疗治疗效果不佳患者的结核排查，阴性结果在很大 程度上可以排除结核。
原因
• HIV 感染和艾滋病破坏了机体的免疫
系统，加剧了结核的发病， 1/3HIV病人死于结核 • 多菌耐药的结核菌感染率增加 • 贫困、移民等 • 细菌学涂片率低，2/3TB病人菌阴性
结核发病机理
活动性结核： 发病状态 潜伏性结核感染（LTBI）：是宿主感染结核杆菌后
尚未发病的一种特殊状态
结核分枝杆菌（MTB）
结核感染T细胞检测及意义PPT课件
目录
contents
1. 结核病的诊断现状 2. TB-IGRA产品介绍 3. TB-IGRA的临床应用 4. TB-IGRA检测方法及结果解释
发病人群前五位的国家
• India(2.0 million–2.5 million) (26%)