苏木精伊红染色手工操作程序

细胞染色操作细胞染色是一种广泛应用于生物学研究的技术方法，通过染色剂将细胞的结构、组成以及功能等信息可视化。

细胞染色操作是进行细胞染色的关键步骤，下面将介绍细胞染色操作的基本流程和常用染色方法。

一、细胞染色操作的基本流程1. 固定：细胞染色前，需要将细胞固定在载玻片上，以保持其形态和结构。

常用的固定剂有甲醛和乙醛等，将细胞浸泡在固定剂中，使细胞膜和细胞内部结构固定。

2. 渗透：细胞固定后，需要将染色剂渗透到细胞内部，以便染色剂能够与细胞内的目标物质结合。

常用的渗透剂有甲醇、乙醇和醋酸等，将细胞浸泡在渗透剂中，使染色剂能够进入细胞内。

3. 染色：在细胞渗透后，可以选择合适的染色方法进行染色。

常见的染色方法包括荧光染色、核染色和蛋白质染色等。

荧光染色是利用荧光染料对细胞进行标记，常用的荧光染料有荧光素和荧光蛋白等。

核染色可以用来观察细胞核的形态和数量，常用的核染色剂有伊红和苏木精等。

蛋白质染色则是用来检测细胞内特定蛋白质的分布和表达水平，常用的蛋白质染色方法有免疫组织化学染色和免疫荧光染色等。

4. 洗涤：染色后，需要将细胞表面的多余染色剂洗去，以减少背景噪音的干扰。

洗涤的次数和时间可以根据具体染色方法和试剂的要求来确定。

5. 固定封片：细胞染色完成后，需要将载玻片固定在显微镜片上，以便观察和保存。

常用的固定封片剂有海藻糖溶液和透明胶等，将载玻片浸入固定封片剂中，使其固定在显微镜片上。

二、常用的细胞染色方法1. 荧光染色：荧光染色是利用荧光染料对细胞进行标记，以实现对细胞内目标物质的可视化。

常用的荧光染料有荧光素、荧光蛋白和荧光标记的抗体等。

荧光染色可以用于观察细胞内特定分子的分布和定位，例如观察细胞内的细胞器如线粒体、内质网和高尔基体等。

2. 核染色：核染色是用来观察细胞核的形态和数量。

常用的核染色剂有伊红、苏木精和荧光染料DAPI等。

核染色可以用于观察细胞核的大小、形状和染色性质，从而研究细胞的生长和增殖过程。

He染色介绍苏木精—伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。

苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

染色分类易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia ) 。

组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。

在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。

而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。

如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。

所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。

去氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中称蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

伊红是细胞浆的良好染料。

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。

经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。

再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。

故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

染色结果细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。

苏木素伊红染色原理
苏木素伊红染色是一种常用的生物组织染色方法，广泛应用于组织学、病理学和细胞学等领域。

这种染色方法的原理是利用苏木素和伊红两种染料的互补作用，将细胞核和细胞质染色成不同的颜色，以便于观察和分析。

苏木素是一种碱性染料，可以与细胞核中的核酸结合形成复合物，从而使细胞核染色成紫色或蓝色。

伊红是一种酸性染料，可以与细胞质中的蛋白质和酸性物质结合形成复合物，从而使细胞质染色成红色或橙色。

苏木素和伊红的染色效果是互补的，可以清晰地显示细胞结构和组织形态。

苏木素伊红染色的步骤一般包括以下几个方面：
1. 组织固定：将待染细胞或组织用4%的中性缓冲福尔马林固定，使其保持原始形态和组织结构。

2. 脱水：将固定的细胞或组织逐渐浸入不同浓度的乙醇中，使
其脱水并逐渐溶解脂质和蛋白质。

3. 清洗：将脱水后的细胞或组织用去离子水清洗干净，以去除
残留的乙醇和其他杂质。

4. 染色：将清洗后的细胞或组织分别浸泡于苏木素溶液和伊红
溶液中，使其分别染色成紫色和红色。

5. 脱色：将染色后的细胞或组织在去离子水中漂洗，直到颜色
变浅或消失。

6. 固定：将脱色后的细胞或组织用乙醇固定，使其保持染色效
果和组织形态。

苏木素伊红染色可以用于多种细胞和组织的染色，包括血液、骨骼肌、神经组织、肝脏、肺、肾脏等。

在病理学中，该染色方法可用于诊断和鉴别肿瘤、癌变、肝炎、肾炎、心肌梗塞等疾病，有助于医生进行正确的诊断和治疗。

总之，苏木素伊红染色是一种简单、易行、经济、可靠的组织染色方法，具有广泛的应用前景和丰富的研究价值。

它为生物学研究和临床医学提供了重要的技术手段和理论基础。

血细胞的染色方法
血细胞的染色方法有以下几种：
1. Wright染色法：这是最常用的一种染色方法。

首先将薄片
经过固定、脱水、清洁等处理，然后放置在含有Wright染料
的溶液中染色，之后再用清水洗去多余的染料。

这种方法可以使红细胞呈粉红色，细胞核呈紫色。

2. Giemsa染色法：这种染色方法与Wright染色法类似，但染
料的浓度和染色时间稍有不同。

这种方法可以使红细胞呈橙红色，细胞核呈紫色。

3. 苏木精-伊红染色法：首先将薄片经过固定、脱水、清洁等
处理，然后将薄片放入苏木精溶液中染色，之后再用酒精漂洗，最后用伊红染料染色。

这种方法可以使红细胞呈红色，细胞核呈蓝色。

4. 嗜酸性染色法：这种方法可以用来染色嗜酸性粒细胞。

常用的嗜酸性染料有尤伯霉素、柠檬酸镉等。

5. 免疫染色法：这是一种利用抗体与细胞特定抗原的特异性结合来标记细胞的染色方法。

它可以用来检测一些特定的细胞类型或疾病标志物。

以上是一些常用的血细胞染色方法，在实际应用中选择染色方法会根据具体需要和目的来决定。

石蜡切片制作(苏木精-伊红对染法)实验原理：石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。

苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。

这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。

经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。

一、器材及试剂：1. 器材：切片刀，切片机，恒温箱，蜡杯，酒精灯，解剖刀，解剖剪，解剖盘，培养皿，镊子，单面刀片，毛笔，包埋盒，染色缸，盖玻片，载玻片，玻片盘，树胶，树胶瓶，显微镜，温度计，脸盆，水浴锅。

切片机，切片刀，温台，恒温箱，解剖刀，镊子，剪刀，解剖针，单面刀片，小台木，洒精灯，包埋纸盒，染色缸，烧杯，水盆，熔蜡炉，蜡杯。

2．试剂：中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液， 1%伊红酒精溶液，1%盐酸酒精溶液，甘油蛋白粘片剂，中性树胶。

卡诺（Carnoy）固定液，埃利希苏木精染液，1%伊红酒精溶液，1%盐酸乙醇液，各级酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%），二甲苯，甘油蛋白粘片剂，中性树胶。

3. 材料：鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。

二、实验原理：石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。

苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。

这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。

经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。

三、试剂配法：1．中性甲醛固定液：甲醛（37%-40%，市售，本所购买即为此浓度） 100mL磷酸氢二钠 6.5磷酸二氢钾（钠） 4g双蒸水 900mL 2．苏木精、伊红染色液为碧云天产品3．1%盐酸乙醇液盐酸 1份70%酒精 100份4．甘油蛋白贴片剂：蛋白 50 ml甘油 50 ml水杨酸钠（防腐剂） 1g配制时将鸡蛋一个打破入碗或杯中，去蛋黄留下蛋白，用玻棒调打成雪花状泡沫，然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中，经数小时或一夜，即可滤出透明蛋白液。

装片染色方法在生物学和医学领域中，装片染色是一种常用的实验技术，用于观察细胞和组织的微观结构。

本文将详细介绍几种常见的装片染色方法，以供参考。

一、苏木精-伊红染色（H&E染色）1.装片准备：将固定好的组织样本切成薄片，粘贴在载玻片上。

2.染色步骤：a.使用苏木精染液对装片进行初染，约5-10分钟。

b.用清水冲洗，去除多余染料。

c.使用1%的盐酸酒精分化，约30秒。

d.用清水冲洗，去除多余分化液。

e.使用伊红染液复染，约1-3分钟。

f.用清水冲洗，去除多余染料。

g.晾干装片，进行显微镜观察。

二、免疫荧光染色1.装片准备：将细胞或组织样本固定在载玻片上。

2.染色步骤：a.使用适当浓度的封闭液，室温封闭1小时。

b.加入一抗，室温或4℃孵育过夜。

c.用PBST（磷酸盐缓冲液+吐温-20）清洗装片，重复3次。

d.加入荧光二抗，室温孵育1小时。

e.用PBST清洗装片，重复3次。

f.晾干装片，进行荧光显微镜观察。

三、银染法1.装片准备：将细胞或组织样本固定在载玻片上。

2.染色步骤：a.使用银染液进行初染，室温孵育5-10分钟。

b.用清水冲洗，去除多余染料。

c.使用显影液进行显影，约1-3分钟。

d.用清水冲洗，去除多余显影液。

e.使用定影液进行定影，约3-5分钟。

f.用清水冲洗，去除多余定影液。

g.晾干装片，进行显微镜观察。

四、甘油醛-苏丹黑染色（Golgi染色）1.装片准备：将细胞或组织样本固定在载玻片上。

2.染色步骤：a.使用甘油醛溶液进行初染，室温孵育5-10分钟。

b.用清水冲洗，去除多余染料。

c.使用苏丹黑溶液进行复染，室温孵育1-3分钟。

d.用清水冲洗，去除多余染料。

e.晾干装片，进行显微镜观察。

总结：以上为几种常见的装片染色方法，适用于不同类型的细胞和组织样本。

在实际操作过程中，可根据实验需求选择合适的染色方法。

苏木染色方法
苏木染色是一种常用的组织染色方法，广泛应用于生物学和医学领域。

它可以用于染色细胞核、细胞质、胶原纤维、肌纤维等，是一种简单易行、效果明显的染色方法。

下面将介绍苏木染色的方法和步骤。

首先，准备好实验材料和试剂。

所需材料包括玻璃片、玻璃片夹、显微镜载玻片、苏木精染液、脱水酒精、蜡烛或加热平台等。

苏木精染液的配制方法为将苏木精溶解于75%酒精中，制成0.1%的苏木精染液。

接着，取细胞组织标本，将其固定在玻璃片上。

固定方法可以采用甲醛固定或乙醇固定等方法。

固定后的组织标本要经过脱水、透明和浸蜡等步骤，以便组织切片。

然后，将组织切片放置在玻璃片上，用苏木精染液浸泡片上的组织。

浸泡时间一般为5-10分钟，可以根据需要适当延长。

浸泡后，将组织切片在脱水酒精中脱水，然后透明，最后在载玻片上封片。

最后，将封好的载玻片放置在显微镜下观察。

苏木染色后的组织细胞会呈现出深蓝色或紫色，细胞核染色明显，细胞质和胶原纤维也能清晰显示。

苏木染色方法简单易行，适用于各种类型的组织标本。

它不仅可以用于常规的生物组织染色，还可以用于病理组织学的研究。

在实际操作中，需要注意控制好染色时间和浓度，以保证染色效果的稳定性和一致性。

总之，苏木染色是一种重要的组织染色方法，具有操作简便、染色效果好的特点。

掌握好苏木染色的方法和技巧，对于生物学和医学研究都具有重要意义。

希望本文介绍的苏木染色方法能对您有所帮助。

苏木染色方法苏木染色是一种常用的组织切片染色方法，常用于生物医学领域的组织学研究中。

苏木染色可以清晰地显示细胞核和细胞质，有助于观察细胞结构和组织形态。

下面将介绍苏木染色的方法步骤和注意事项。

1. 材料准备。

苏木染色所需材料包括，苏木精溶液、甲醛固定液、酒精、蜡块、切片、显微镜等。

其中，苏木精溶液和甲醛固定液是必不可少的试剂，其浓度和保存条件需严格控制。

2. 样本处理。

首先，将待染色的组织样本进行固定处理，一般采用甲醛固定液固定组织，固定时间视样本大小而定，一般为6-24小时。

固定后，进行脱水和透明化处理，使组织脱水透明。

3. 切片制备。

将处理后的组织样本进行包埋、切片，制备出5-8μm厚的切片。

切片后，将其放置在温水中，使切片展开并粘附在载玻片上。

4. 染色步骤。

将载玻片放置在苏木精溶液中浸泡，时间一般为5-10分钟，然后取出晾干。

接着，将载玻片放入蜡熔点略高于60℃的热蜡中，使切片蜡块包埋。

包埋后，切片放入苏木精溶液中浸泡，时间一般为2-5分钟。

最后，将切片取出，经过脱水、透明化处理后，封片即可。

5. 注意事项。

在进行苏木染色时，需要注意苏木精的浓度和染色时间，过浓的苏木精会使细胞核染色过深，影响观察效果；染色时间过长也会导致染色过深。

此外，切片的制备过程中要保持刀片锋利，切片厚度均匀，以确保染色效果。

总结。

苏木染色方法是一种简单易行的组织切片染色技术，通过对组织样本的固定、切片和染色处理，可以清晰地显示细胞核和细胞质的结构，为细胞学和组织学研究提供了重要的技术支持。

在实际操作中，需要严格控制各个步骤的条件和时间，才能获得理想的染色效果。

通过本文的介绍，相信大家对苏木染色方法有了更深入的了解，希望能够在实验操作中取得良好的结果。

祝大家实验顺利！。

苏木染色方法
苏木染色是一种常用的组织学染色方法，适用于对细胞核和胞质进行染色，能够清晰地显示细胞核和细胞器的结构。

本文将介绍苏木染色的方法和步骤，希望能够对您有所帮助。

首先，准备工作。

在进行苏木染色之前，需要准备好所需的试剂和材料，包括苏木精染色液、95%乙醇、脱水醋酸、显微镜玻片、组织切片等。

其次，取组织切片。

将需要染色的组织切片放置在玻片上，确保切片的平整和干燥，以便后续的染色步骤顺利进行。

然后，脱水处理。

将组织切片依次浸泡在70%乙醇、95%乙醇和绝对乙醇中，每次浸泡5分钟，以去除切片中的水分，使得染色效果更加明显。

接着，染色处理。

将脱水后的组织切片放入苏木精染色液中浸泡5-10分钟，然后取出放入脱水醋酸中浸泡1-2分钟，最后用95%乙醇洗涤切片，直至切片表面不再有染色液渗出。

最后，封片。

将染色后的组织切片放入透明胶水中，然后放置
在显微镜玻片上，用玻片压实，使得组织切片与玻片紧密结合，最
后晾干即可进行观察。

需要注意的是，在整个染色过程中，要注意操作的细节和步骤，确保每一个步骤都能够得到严格的执行。

另外，苏木染色后的组织
切片要小心保存，避免受潮或者受到其它污染。

总之，苏木染色是一种简单而有效的组织学染色方法，通过合
理的操作步骤和技巧，可以得到清晰的染色效果，为细胞学研究提
供了重要的帮助。

希望本文所介绍的苏木染色方法能够对您的实验
工作有所帮助。

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。

【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。

因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。

【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。

【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。

he染色方法及步骤HE 染色啊，这可是病理实验里常用的染色方法呢！它就像是给细胞和组织化了个美美的妆，让我们能更清楚地看清它们的模样。

首先呢，得准备好切片。

这切片就像是一张等待上色的画布。

然后把切片放进二甲苯里，让它好好泡个澡，把上面的脏东西都洗掉。

接下来就是染色的关键时刻啦！把切片放进苏木精溶液里，这苏木精就像是神奇的魔法药水，能把细胞核染得蓝蓝的，就像给细胞核戴上了一顶蓝色的小帽子。

染完之后，再用水冲洗一下，把多余的苏木精冲掉。

然后呢，把切片放进盐酸酒精里分化一下，让细胞核的颜色更加清晰、分明。

再用水冲洗干净。

这时候，该伊红上场啦！伊红就像是给细胞穿上了一件红色的外衣，让细胞质变得红红的。

把切片放进伊红溶液里泡一泡，然后再冲洗干净。

经过这么一番折腾，切片就像是化好了妆的美人，变得格外动人啦！你想想啊，这就好像是给细胞举办了一场盛大的化妆舞会。

细胞核穿着蓝色的礼服，细胞质穿着红色的裙子，在显微镜下翩翩起舞。

染完色后，还要把切片进行脱水、透明。

就像是给化好妆的美人再喷上一层定妆喷雾，让妆容更加持久。

最后呢，用中性树胶封片，把这美丽的画面永远地保存下来。

HE 染色方法虽然看起来步骤挺多，但只要我们认真细心地去做，就一定能染出漂亮的切片。

这就像是我们做一件事情，只要有耐心，肯下功夫，就一定能做好。

而且啊，HE 染色对于病理诊断来说可是非常重要的呢！医生们通过观察染色后的切片，就能判断出细胞有没有病变，病情严不严重。

所以说呀，HE 染色可真是个神奇的技术呢！它让我们能更深入地了解细胞的世界，为医学研究和临床诊断提供了重要的帮助。

你说，这是不是很厉害呢？。

HE染色操作常规流程
切好的片子应在60~70℃左右的烤箱中烘烤30分钟以上才能进行染色。

HE染色手工程序：
脱蜡
1、二甲苯Ⅰ（AR）5分钟
2、二甲苯Ⅱ（AR）5分钟
3、100%酒精Ⅰ（AR、无水乙醇）1分钟
4、100%酒精Ⅱ（AR、无水乙醇）1分钟
5、95%酒精（工业酒精或医用酒精）1分钟
6、80%酒精（工业酒精或医用酒精）1分钟
7、自来水浸洗1分钟
以上3~7称为进水过程。

染色
1、苏木素染液6分钟
2、水冼1分钟
3、0.5-1%盐酸酒精分化片刻（上下三次颜色由蓝变红）
4、自来水冲冼15分钟以上
（然后95%酒精片刻，主要是避免所带的水份稀释以下的伊红酒精，此步可免）
5、1%伊红酒精浸染1~2分钟
6、水冼1分钟
脱水、透明、封固
95%酒精Ⅰ1分钟
95%酒精Ⅱ1分钟
100%酒精Ⅰ1分钟
100%酒精Ⅱ1分钟
石炭酸二甲苯(1:3) 10秒钟
以上称为脱水。

二甲苯Ⅰ透明1分钟
取出后用中性树胶（上海产，预先用二甲苯溶解，粘稠度适中即可）封固。

染色结果：
核：蓝黑色
胞浆：不同程度的粉红色
肌纤维：较深的粉红色
胶元纤维：淡红色
红细胞：桔红色。

实验十五细胞固定染色法一、实验目的掌握H·E染色法和Giemsa染色法的原理及染色特征。

二、实验原理：细胞固定染色法是用一定的化学物（固定剂）迅速杀死细胞，再进行染色观察。

固定的目的是使细胞内的蛋白质，脂肪，核糖等转变为不溶性物质。

从而避免自溶及腐败。

经过固定的细胞，在相当大的程度上保持了原有的结构，这样的制版一般能保持很长时间。

我数固定剂并具有媒染作用，使细胞容易着色。

清楚地显示细微结构。

固定剂不同，其性能也有差异，一种固定剂对某种结构保存效果好，对别的结构不一定适合，染色剂更是对细胞内的各种化学成分有不同的亲和力。

所以每种组织通常有其特定的固定染色方法。

本实验介绍两种常用的基本染色法。

①常规苏木精-伊红染色法（HE法）：HE法是组织学技术的基本方法，适用于各种组织，各种包埋方式的切片以及培养的组织、细胞。

苏木精是从苏木中提取的天然物质，是染细胞核的优良染料。

而苏木精对组织亲和力很小，不能单独使用，需配以氧化剂如高锰酸钾、过氧化氢、碘酸钠。

等使其脱氢成为苏木红；或令其在空气中自然氧化，并加入带强正电荷的复盐如：铁明矾、铬矾、钾矾等配成混合液使用。

在细胞核染成兰色之后，用伊红复染细胞质。

②Giemsa染色法：Giemsa染料（细胞遗传学家Gustav Giemsa配成此种染料）不是一种单一的染料，而是数种染料的混合物，它们是甲基蓝及其氧化产物——天青（azure）和伊红Y。

其染色的质量随所用染料的比例不同而异。

天青A和天青B都是噻嗪系列的成员，是甲基蓝和重铬酸钾一起氧化的产物。

天青A是一种碱性染料，分子式是C14H14N3SCl，分子量291。

799，它对染色质DNA。

苏木染色方法
苏木染色是一种常用的组织染色方法，主要用于生物医学研究
领域。

它能够使细胞和组织的结构清晰可见，有助于观察和研究细
胞形态、结构和功能。

下面将介绍苏木染色的方法和步骤。

首先，准备工作。

在进行苏木染色之前，需要准备好组织标本、苏木精染液、碱性碘液、脱水、透明和封片所需的试剂和设备。

第二步，固定组织。

将待染色的组织标本进行固定处理，常用
的固定剂有福尔马林、乙醇和醋酸。

第三步，脱水。

将固定后的组织标本经过一系列浓度逐渐增大
的乙醇溶液中脱水，使组织内水分逐渐被乙醇取代。

第四步，透明。

将脱水后的组织标本浸入透明剂中，使其透明
度增加，有利于显微镜观察。

第五步，染色。

将透明后的组织标本浸入苏木精染液中，经过
一定时间后取出，进行脱水、透明和封片处理。

第六步，封片。

将染色好的组织标本放在载玻片上，加入透明剂和封片剂，用封片纸盖好，待封片剂凝固后即可观察。

苏木染色方法简单易行，能够清晰地显示细胞和组织的形态结构，对于生物医学研究具有重要意义。

在进行苏木染色时，需要注意操作规范，避免污染和误操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。

总之，苏木染色方法是一种重要的组织染色技术，能够为生物医学研究提供可靠的实验数据。

掌握好苏木染色的方法和步骤，对于开展细胞和组织学研究具有重要的意义。

希望本文介绍的苏木染色方法能够对您有所帮助。

简述木质化细胞壁染色方法
木质化细胞壁是植物细胞壁中的一种特化结构，主要由纤维素、半纤维素和木质素等成分组成。

为了研究木质化细胞壁的结构和功能，需要对其进行染色处理，以便观察和分析。

常用的木质化细胞壁染色方法有几种，如苏木精-伊红染色法、甲苯胺蓝染色法、乙烯基噻唑蓝染色法等。

其中，苏木精-伊红染色法是最常用的一种方法。

该方法的步骤如下：
1. 取植物样品，切成薄片并用解剖刀刮除表皮和髓质等非木质化部分。

2. 将样品片放入苏木精溶液中，静置20-30分钟，使样品充分染色。

3. 用蒸馏水洗涤样品片，除去多余的苏木精。

4. 将样品片放入伊红溶液中，静置5-10分钟，使样品染红。

5. 用蒸馏水洗涤样品片，除去多余的伊红。

6. 用乙醇、山梨醇等溶液逐渐除去样品中的水分，使样品逐渐变透明。

7. 用显微镜观察和拍照。

苏木精-伊红染色法能够使木质化细胞壁染色明显，对于观察木质化部分的细胞形态和结构有很好的效果。

但是，该方法不能区分纤维素和半纤维素，也不能区分不同类型的木质化细胞壁。

因此，在实际应用中需要根据具体需要选择合适的染色方法。

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he染色目录1HE染色介绍2染色分类3染色结果4常规HE染色步骤1 4.1 试剂配置1 4.2 染色流程1HE染色介绍苏木精—伊红染色法( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。

苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

2染色分类易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia )；而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性（neutrophilia)。

组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。

在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。

而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。

如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。

所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。

脱氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中称蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

伊红是细胞浆的良好染料。

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。

经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。

伊红染色液(醇溶)操作步骤及注意事项规格：100ml/500ml货号：G1108保存：常温避光保存，有效期为1年。

产品说明：伊红(Eosin)又称曙红，属人工合成染料中的呫吨类染料，为桃红色或粉红色的粉末。

伊红(醇溶)分子式为C20H8Br4O5，分子量为649.9。

伊红最适宜不苏木精配合染色以显示正常或病理组织的形态结构。

伊红染色液(醇溶)采用特有防腐剂，操作简单，丌使用汞、甲醇等有毒试剂。

常用于组织切片或培养细胞的染色，染色后细胞浆呈粉红色或红色。

自备材料：系列乙醇、4%多聚甲醛操作说明：1、样品处理a)对于石蜡切片：1)二甲苯（I）中脱蜡5-10min。

2)换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5-10min。

3)无水乙醇5min。

4)90%乙醇2min。

5)70%乙醇2min。

6)蒸馏水2min。

b)对于冰冻切片：经固定的切片置蒸馏水2min。

c)对于培养细胞：①4%多聚甲醛固定10min以上，②蒸馏水洗涤2min，③换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。

2、伊红染色对于上述处理好的样品，伊红染色液染色0.5-2min(根据染色结果和要求调整时间)。

如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。

如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。

3、脱水、透明、封片或进行其它染色a)脱水、透明、封片：1)95%乙醇脱水2min。

2)更换新鲜的95%乙醇再脱水2min。

3)二甲苯透明5min。

4)更换新鲜的二甲苯，再透明5min。

5)用中性树胶或其它封片剂封片。

6)显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。

b)进行其它染色：如果进行免疫荧光染色或进行Hoechst等荧光染料的染色，在伊红染色液染色后：70％乙醇洗涤2次，每次2min。

PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。