HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。

【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。

因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。

【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。

【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。

He染色介绍苏木精—伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。

苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

染色分类易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia ) 。

组织内构成蛋白质的氨基酸种类很多，它们有不同的等电点。

在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。

而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。

如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。

所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。

DNA两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

伊红是细胞浆的良好染料。

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。

经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。

再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。

故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

染色结果细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。

苏木素-伊红染色（HE）【染色原理】苏木素染液中带正电荷的蓝色色精与细胞核中带负电荷的脱氧核糖核苷通过正、负电荷的极性吸附而守成染色；伊红是带负电荷的酸性染料，通过渗透或弥散作用而使组织着色。

【组织固定与切片】4%甲醛固定，石蜡切片厚度4~6μm。

【染色用具】常规染色用具一套：染色皿或染色缸、刻字笔、标签、树脂胶、盖玻片、鸭嘴镊、绸布或纱布。

滴管数支。

【试剂配制】1. Harris苏木素液苏木素2.5g，无水乙醇25ml，钾明矾50g，蒸馏水500ml，氧化汞1.25g，乙酸20ml。

将苏木素溶于乙醇（加热）后加入预先已加热溶解明矾的蒸馏水中，煮沸1~2min，改用小火加热，慢慢加入氧化汞（注意防止产生大量气泡和溶液溅出）再煮沸2min后立即浸于冷水中，冷却后加入乙酸，过滤后使用。

2. 伊红液（1) 水溶性伊红染液：伊红0.5g，蒸馏水100ml。

（2）醇溶性伊红染液：伊红0.5~1g，80%~95%乙醇100ml。

3. 分化液: 盐酸0.5~1ml，80%乙醇100ml。

4. 返蓝液: 氨水1ml，蒸馏水100ml。

5. 各级乙醇、二甲苯【注意事项】1. 石蜡切片在脱蜡前要烘烤使组织与切片粘贴。

烘烤温度50℃，时间30min 或30℃，24h。

2. 脱蜡要彻底，应定期更换脱蜡液。

3. 分化的时间要恰当掌握，可镜下观察着色情况。

4. 透明要充分。

【染色步骤】1. 石蜡切片二甲苯Ⅰ脱蜡10~15min。

2. 二甲苯Ⅱ脱蜡10~15min。

3. 无水乙醇5min。

4. 95%乙醇5min。

5. 80%乙醇5min。

6. 自来水冲洗1min。

7. 蒸馏水洗1min。

8. 苏木素染液5~15min。

9. 自来水冲洗1~5min。

10. 化液分化数秒至数分钟。

11. 自来水冲洗1~3min。

12. 返蓝液返蓝30s~1min。

13. 自来水冲洗。

14. 伊红液5~10min。

15. 自来水冲洗。

16. 80%乙醇脱水30s。

苏木素伊红(HE)染色试剂盒北京华越洋----------------------------------------------------------------------------------------- -产品简介：Ø华越洋生物生产的苏木素伊红(HE)染色试剂盒(Hematoxylin and eosin staining kit)综合了多种经典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。

可以用于组织切片或培养细胞的染色。

Ø 苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。

Ø 本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用。

使用的苏木素伊红染色试剂盒，染色后可以进行免疫荧光染色或其它染料的染色。

Ø 染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。

本试剂盒至少可以染色300个样品。

包装清单：苏木素染色液: 200毫升伊红染色液:200毫升说明书:1份保存条件：室温保存，至少一年有效。

注意事项：Ø 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。

如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。

如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇、无水乙醇以及二甲苯。

Ø 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。

样品数量很多时，可以使用碧云天生产的染色架和染色缸，便于操作。

Ø 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：1.样品处理a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。

无水乙醇5分钟。

90%乙醇2分钟。

70%乙醇2分钟蒸馏水2分钟。

b) 对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。

c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。

苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书【产品名称】通用名称：苏木素-伊红（H-E）染色液英文名称：Hemaxytolin-Eosin(HE)Staining kit【包装规格】500mL/瓶，5瓶/盒【预期用途】用于对石蜡切片和冰冻切片的细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，苏木红与三价铝离子结合形成带正电荷的蓝色色精，便可与细胞中带负电荷的脱氧核糖核酸结合。

苏木素染液主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红Y为酸性胞质性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

【主要组成成份】每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒是由高清恒定液（A液）、苏木素染液（B液）、分化液（C液）、返蓝液（D液）、伊红染液（E液）组成。

每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒的主要成分为：1)高清恒定液（A液），由专用稳定剂等成分组成；2)苏木素染液（B液），主要由苏木素、乙二醇、硫酸铝钾等成分组成；3)分化液（C液），主要由酒石酸等成分组成；4)返蓝液（D液），主要由Tris、氯化钠和防腐剂等成分组成；5)伊红染液（E液），主要由伊红二钠Y和乙醇等成分组成。

【储存条件及有效期】试剂盒应存放于室温（15-30℃），有效期为12个月，在有效期内的已开封试剂使用期限为3个月。

每次用后应及时盖上盖子，以免挥发或变质。

【适用仪器】手动常规染色和全自动染色机染色。

【样本要求】病理组织经取材，福尔马林固定，脱水处理，用石蜡包埋后制成蜡块，用切片机切成2-5μm厚度的组织切片采集到载玻片上（有些特殊类型的组织可能要求不同的切片厚度）。

之后将载玻片放置于烤片机上65℃（±5℃）下烤片10-30分钟，即可染色。

【检验方法】1、二甲苯I、II、III脱蜡各2-4min；2、无水乙醇I、II、III各2min；3、95%乙醇15s；4、75%乙醇15s；5、水洗1min；6、高清恒定液30s-60s；7、苏木素染液3-5min；8、水洗1min；9、分化液3-15s；10、水洗1min；11、返蓝液1-2min；12、水洗1min；13、95%乙醇30-60s；14、伊红染液20-60s；15、无水乙醇I、II、III各2min；16、二甲苯I、II、III各2min。

苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。

苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。

带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。

伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。

此染色法可观察到清晰的细胞结构。

样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。

伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。

返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。

由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。

使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。

【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。

【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。

保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。

产品使用效期为2年，具体效期见标签。

【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。

为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。

根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。

两种染色试剂和方法如下。

000000一、HE染色000000试剂：000000苏木素染液：苏木精1g；无水乙醇25mL；硫酸铝钾10g；蒸馏水350mL；碘酸钾0.1g；冰醋酸10mL。

A 液：用25mL 无水乙醇溶解1g苏木精，摇动即可溶解。

B 液：用350mL 蒸馏水溶解10g硫酸铝钾，摇动或振荡即可溶解。

把A 液和 B 液混合，加入碘酸钾摇动至颜色加深。

最后加入10mL冰醋酸，摇动颜色变为深葡萄酒红色。

染液配制当日即可应用于染色。

酸化液：醋酸20-35mL加蒸馏水至700mL。

000000伊红染液：储液：取1g伊红，溶于100mL 95%的乙醇，待溶解完全后加几滴冰醋酸至染液呈半透明状，避光保存备用。

工作液：取一定量的伊红储液，加入等量70%乙醇，此液即为伊红染液的工作液。

000000染色步骤：000000（1）细胞爬片放用PBS漂洗3次，每次5min，无水乙醇固定5min，风干。

000000（2）95%乙醇1min，75%乙醇1min，三蒸水1min。

000000( 3 ) 浸洗5 % 的醋酸液 ( 酸化液 ) 数秒。

000000( 4 ) 苏木精染液 3 - 5 m i n，胞核呈橙红色。

000000( 5 ) 自来水冲洗至颜色变蓝。

000000( 6) 盐酸乙醇液分化数秒，颜色再次返红。

000000(7) 自来水再次冲洗，返蓝。

000000( 8) 伊红染液5min，流水漂洗15min左右。

000000二、吉姆萨染色000000试剂：000000吉姆萨染液配制：取吉姆萨粉末1g溶于66ml甘油中研磨混匀，然后放置55-60℃水浴2h，冷却后加入66ml甲醇中混匀，过滤后棕瓶分装保存。

0000 00PBS甲醇液：PBS与甲醇一比一混合。

000000染色步骤：000000（1）细胞爬片使用PBS漂洗3次，每次5min。

000000（2）加PBS甲醇液静置2min，去掉PBS甲醇液。

000000（3）加甲醇固定10min，去掉甲醇，加入新无水甲醇漂洗去掉。

苏木素伊红(HE)染色试剂盒产品简介：苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用机器广泛。

苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。

在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。

对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的。

在HE染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。

Leagene苏木素伊红染色试剂盒中，苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成，不含氧化汞、甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好。

其特点：长期保存，不易产生沉淀和金属; 应用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等；苏木素染色液可以重复使用。

染色原理：1、细胞核染色的原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。

细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA 双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。

细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。

当染液的pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。

伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。

【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。

因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。

【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。

【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。

苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。

【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。

【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。

苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。

带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。

伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。

此染色法可观察到清晰的细胞结构。

样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。

伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。

返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。

由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。

使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。

【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。

【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。

保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。

产品使用效期为2年，具体效期见标签。

【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。

为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。

根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。