下载文档原格式
目录一. 细菌检验的基本技术1.1无菌技术1.2细菌形态学检查方法1.3培养基1.4消毒灭菌二.日常检验工作涉及的项目2.1菌落总数2.2大肠菌群2.3金黄色葡萄球菌2.4沙门氏菌2.5大肠埃希氏菌2.6志贺氏菌三.生物安全基本知识3.1生物安全柜的使用3.2移液管和移液辅助器的使用3.3废弃物处理3.4感染性物质防护技术3.5微生物实验室容器破碎及感染性物质溢出的应急处理一. 细菌检验的基本技术1.1 无菌技术无菌：指物体上不存在活菌。
无菌操作：防止微生物进入机体或其他物品的操作技术。
微生物检验样品的全部过程必须保证无菌操作，必须严格执行无菌操作技术，防止污染和病原菌的扩散。
在进行无菌操作时应注意以下要点：1.1.1进行接种、倾注琼脂平板等均须在无菌室或超净工作台内进行。
以防杂菌污染。
1.1.2无菌室在使用前，用紫外灯照射30min至1h或用5%石炭酸或5%来苏喷雾消毒。
1.1.3所用的物品均应在使用前严格进行灭菌，在使用过程中不得与未经灭菌的物品接触，如不慎碰着应立即更换无菌物品。
1.1.4 、所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。
1.1.5 接种环（针）在每次使用前后，应在火焰上彻底烧灼灭菌。
1.1.6 应采用机械移液器。
禁止用口移液，注射器不能用于吸取液体。
1.1.7从培养瓶或试管培养物中取标本或移种时，在打开瓶塞后及塞回前，管（瓶）口部应通过火焰1～2次，以杀死可能附着管口或瓶口的细菌。
开塞后的管口或瓶口应尽量靠近火焰，试管及烧瓶应尽量平放，切忌口部向上和长时间暴露于空气中。
1.2细菌形态学检查方法细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一。
它可用于细菌的分类与鉴定，并为进一步作生化反应、血清学鉴定提供依据。
在我们检验中经常会遇到对所要鉴别的细菌进行染色。
细菌染色的基本程序是：涂片（干燥）→固定→染色（媒染）→（脱色）→（复染）常用的细菌染色法：单染色法复染色法：1．革兰染色法是细菌学中最经典、最常用的染色法之一。
《微生物学检验》教学大纲课程代码：00031025课程名称：微生物学检验课程总学时：136学时（其中理论68学时，实验68学时）课程类别：必修课课程性质：专业课面向专业：医学检验技术专业开设单位：基础教学部病原生物与免疫学教研室一、课程的性质、地位和任务《微生物学检验》是医学检验技术专业的一门专业课程。
本课程总论部分主要介绍微生物学及微生物学检验的基本知识，各论部分主要介绍常见病原微生物的生物学特性，包括形态染色特征、培养特性、生化反应特点、抗原性和分类，致病性和免疫性，微生物学检验的标本采集要求与方法、检验鉴定程序、具体的鉴定方法及鉴定要点和报告方式。
通过实验课程的学习，巩固和加强对微生物学及微生物学检验理论知识的认识和理解，提高学生的实际操作能力，培养学生创新思维和实事求是的科学态度。
二、课程教学目标（一）理论、知识方面1.明确微生物学检验的研究内容，学习微生物学检验的目的，认识医学微生物分类的意义及各类医学微生物的主要特性。
2.掌握医学微生物的主要生物学性状、遗传与变异机理、理化因素及生物因素对医学微生物的影响。
3.熟悉病原微生物的主要传播途径、致病性及免疫性。
学会对各类病原性微生物感染的常用实验室诊断方法。
4.明确病原微生物感染的特异性防治和药物治疗原则。
5.掌握常见的微生物所致疾病的临床症状和诊断指标6.了解对各类病原微生物的防治原则。
（二）能力、技能方面1.熟练掌握显微镜的使用和保养。
2.正确阐述常见的病原微生物的生物学性状，致病物质，主要传播途径及引起疾病的类型。
3.掌握常见的病原微生物感染的诊断方法。
4.将理论知识与具体的实验操作相结合，熟练掌握各种基本的医学微生物学诊断方法的机理，熟练各种基本实验的操作。
5.能运用学到的微生物学及微生物学检验专业知识，对各类临床标本进行病原微生物学的鉴定，及时地发出规范、准确的鉴定报告。
三、课程教学内容和要求第一篇微生物学检验基础绪论（1学时）1.教学内容及基本要求【教学内容】（1）微生物与微生物学（2）医学微生物学发展简史（3）微生物学及微生物学检验【基本要求】：掌握:微生物的定义与特点;微生物的分类。
细菌鉴定及检测方法
1、首先要获取被鉴菌种的纯培养菌落；
2、其次利用革兰染色或者抗酸染色确定其染色；
3、根据形态及其排列，按照科、属、类次序继续鉴定；
4、最后利用知识、经验等方法做出判断，得出结果，给出鉴定。
细菌鉴定方法：
1、生化鉴定：为细菌鉴定中最重要的一种鉴定手段，主要借助细菌对营养物质分解能力的不同及其代谢产物的差异对致病菌进行鉴定，生化鉴定包括蛋白质分解产物实验、酶触实验、堂分解产物实验等等方法。
2、血清鉴定：一般用于含有较多血清型的细菌，常用玻片凝集试验，也可以用免疫荧光法、协同凝集实验、间接血凝试验等方法灵敏的检测样本中致病菌的特异性抗原。
用已知的抗体检测未知待检测的细菌，或者采用已知抗原检测患者血清中的抗细菌抗体的效价，特异性比较高，一般在生化鉴定基础之上给出确定诊断结果。
3、分子生物学检测：一般适用于人工培养基无法生长或者生长速度过于缓慢以及营养要求高不容易培养的细菌，检测方法含有核酸杂交、生物芯片以及基因测序等等；其中核酸杂交包括斑点杂交等等技术。
4、微生物自动鉴定系统鉴定
5、质谱技术：利用新兴的电力生物质谱对细菌核酸、蛋白质、堕胎等物质进行质谱分析。
