真菌培养常用培养基
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真菌用的培养基
真菌的培养基根据其特点和需求不同,可以分为以下几种常见的培养基:
1. 薄膜培养基:如麦芽琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于革兰氏阳性真菌和某些革兰氏阴性真菌的培养。
2. 液体培养基:如液体麦芽琼脂、液体马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于真菌的液体培养、发酵和产生次级代谢产物。
3. 饲养基:如麦麸葡萄糖培养基、马铃薯糖蛋白胨培养基等。
适用于饲养虫化真菌和真菌的寄生菌株。
4. 高营养培养基:如琼脂葡萄糖培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等。
适用于真菌菌株的快速生长和高产菌。
5. 特殊培养基:如选择性培养基、鉴定培养基等。
根据不同的真菌种类和需求,可以添加抗生素、抑菌剂或特定的营养成分。
此外,还可以根据真菌的特殊要求,进行改良和添加其他成分,从而满足其生长和繁殖的需要。
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,(一) 组成 40.0g 10.0g12.0- 15.0g 1000ml(二) 制法 上述混合后加入 200mg 氯霉素, 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
(三) 目的 是常用的分离或保存菌种的培养基。
[ 沙氏液基, SDB](一) 组成 葡萄糖 40.0g 蛋白胨 10.0g 蒸馏水1000ml(二) 制法 上述混合后加入 200mg 氯霉素, 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
[ 加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic](一) 组成 葡萄糖 40.0g 蛋白胨 10.0g 琼脂 12.0〜15.0g 蒸馏水 1000ml(二) 制法上述混合后加入 200mg 氯霉素。
250mg 放线菌酮, 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA](一) 组成 葡萄糖 20.0g 蛋白胨 10.0g 琼脂 12.0〜15.0g 蒸馏水1000ml(二) 制法 上述混合后 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
(三) 目的 保存菌种培养基。
[ 马铃薯葡萄糖琼脂, PDA](一) 组成 马铃薯 200.0g 葡萄糖 20.0g 琼脂12.0〜15.0gSDA]葡萄糖 蛋白胨 琼脂 蒸馏水蒸馏水1000ml(二)制法先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml ,煮沸30 分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml ,121 摄氏度灭菌后备用。
(三)用途此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80 琼脂,CMA with T w80](一)组成玉米粉琼脂蒸馏水吐温80(二)制法40.0g15.0g1000ml10ml先将玉米粉混于水中,65 摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10 分钟灭菌后备用。
酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。
学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。
二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。
马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。
豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。
察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。
麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。
培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
三、实验材料(一)药品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HPO4、KCI、MgSO4 7H2O, FeSQ、琼脂。
(二)仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。
(三)玻璃器皿移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。
(四)其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。
四、实验内容(一)麦芽汁培养基的配制1培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2.配制方法(1) 用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15C阴凉处发芽,上盖纱布, 每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。
(2) 取一份麦芽粉加四份水,在65C水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。
(3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清, 加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。
(4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH 至6. 4。
如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。
常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
这些是一些常用的培养基配方,适用于细菌和真菌的培养。
常用培养基配方范文培养基(Culture medium)是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。
常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。
下面列举了一些常用的培养基配方。
1. LB培养基(Luria-Bertani medium)成分:-牛肉提取物:10克-酵母提取物:5克-热可溶性淀粉:10克-氯化钠:10克-水:1升2. NB培养基(Nutrient broth)成分:-牛肉提取物或肉蔻精:8克-酵母提取物:4克-葡萄糖:4克-水:1升3. MacConkey培养基成分:-水解动物蛋白:17克-中和胆盐:1.5克-中性红:0.03克-水:1升4. TSB培养基(Tryptic soy broth)成分:-大豆胨:17克-酵母提取物:3克-水:1升5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)成分:-脑心汤固体:37克-水:1升6.R2A培养基成分:-水解酵母提取物:0.5克-蛋白胨:0.5克-葡萄糖:0.5克-脱脂乳粉:0.5克-黄豆粉:0.5克-高氯酸钠:0.3克-多聚体1466:0.05克-水:1000毫升7.比尔斯氏培养基(BHI培养基)成分:-大豆胨:37克-脑心汤固体:2克-水:1升8. 培养基199(Medium 199)成分:-高锰酸钾:0.015克-硫酸:1.55克-磷酸一氢钠:0.184克-高氯酸钠:8.0克-溴酚蓝:0.4克-d-葡萄糖:5.55克-l-谷氨酸:40.525克-苏打粉:0.84克-水:1升9. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)成分:-苔藓胶原酸:1克-乳糖:1克- 谷氨酸:584mg- 水:1000ml这只是一小部分常见的培养基配方,实际上有很多种不同的培养基,它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。
不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境,其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一,其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下:-琼脂:15g-蔗糖:10g-牛肉膏粉:3g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化镁:0.5g-氯化钾:0.2g-高锰酸钾:0.0001g-蛋白胨:3g-酵母提取物:3g- 菜子油:0.5ml- 蒸馏水:1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基,其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下:-牛肉膏粉:3g-蛋白胨:5g-葡萄糖:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:2g-氯化镁:0.5g- 蒸馏水:1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基,其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下:-紫砂:15g-蔗糖:30g-蛋白胨:2g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基,其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下:-麦芽粉:10g-蔗糖:30g-蛋白胨:5g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g- 蒸馏水:1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基,其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下:-铁蛋白:10g-蔗糖:10g-蛋白胨:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:1g-氯化钙:0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良,以提高微生物的生长和培养效果。
同时,在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作,以避免试验的污染和杂质的干扰。
.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。
如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。
(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。
(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼20g脂水1000mLpH7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
细菌和真菌的培养过程一、培养基的准备培养基是细菌和真菌生长必需的营养物质和环境条件。
常用的培养基分为无机培养基和有机培养基两类。
1.无机培养基无机培养基以无机盐和水为基础。
常用的无机培养基有普通营养盐基础培养基、肉膏蛋白水解物培养基、大肠杆菌培养基等。
2.有机培养基有机培养基则以富含有机物质的基质为基础,如土壤、植物提取物等。
有机培养基对一些特殊的细菌和真菌的培养更为适用。
二、无菌技术无菌技术是细菌和真菌培养中至关重要的一步。
通过无菌技术,可以杜绝外界的微生物污染,保证实验结果的准确性。
1.器具的消毒所有用于培养的器皿、培养基和培养试管等都要经过高温高压灭菌法或化学消毒法进行消毒处理。
三、菌种的选取对于细菌和真菌培养初期,通常会选择纯菌株进行培养。
纯菌株是指在培养基上生长的单一物种的菌落,可以确保实验的可靠性。
菌种可以通过分离自自然环境中的样品,例如土壤、水体、植物和动物组织等。
2.菌种的分离菌种的分离需要在无菌条件下操作。
将样品接种于含有适当培养基的平板上,然后在恰当的温度下培养,使不同的细菌和真菌产生单独的菌落。
四、菌落的鉴定菌种鉴定是培养过程中的关键步骤。
通过鉴定可以确定菌种的物种和特性,有助于后续实验的开展。
1.形态学鉴定首先,观察菌落的形态、颜色、质地等特征。
接着,通过显微镜观察细胞形态等微观特征。
2.生理生化鉴定通过菌落的生长特点和代谢产物来进行鉴定。
使用特殊培养基和试剂,判断菌种的生理特性和代谢产物。
五、菌种的保存为了长期保存和使用菌种,必须进行菌种的冻存和液氮保存。
1.冻存法将菌株培养液混合稀葡萄糖溶液制成菌株悬浮液。
然后将悬浮液分装到无菌的冻管中,使用低温冷冻冷藏保存。
2.液氮保存法将菌株培养液以10%的甘油进行保护,分装到无菌的冻管中,然后迅速放入液氮罐中进行冷冻保存。
此文档下载后即可编辑[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,SDA](一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基,SDB](一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic] (一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA](一)组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA](一)组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。
(三)用途此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
][玉米吐温80琼脂,CMA with Tw80(一)组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml(二)制法先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml(二)制法将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
146种常用培养基配方以下是一些常见的培养基配方:1.LB培养基:-牛肉浸液:10g-酵母浸粉:10g-纯化水:1L-加热溶解牛肉浸液和酵母浸粉在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。
2.菌落计数培养基:-蛋白胨消化物:5g-酵母浸粉:2.5g-葡萄糖:1g-纯化水:1L-加热溶解蛋白胨消化物、酵母浸粉和葡萄糖在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。
3.大肠杆菌选择性培养基:-精制豆粉精:10g-纵剖海藻酸钠:10g-氯化钠:5g-硫酸镁:0.2g-活性炭:1g-纯化水:1L-加热溶解精制豆粉精、纵剖海藻酸钠、氯化钠、硫酸镁和活性炭在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。
4.SDA培养基(用于真菌培养):-磷酸二氢钾:1g-葡萄糖:20g-氯化钠:5g-氯化钠:5g-酵母浸粉:10g-酪蛋白胨:5g-地蜡:20g-纯化水:1L-加热溶解磷酸二氢钾、葡萄糖、氯化钠、酵母浸粉、酪蛋白胨和地蜡在纯化水中,煮沸溶解后,灭菌。
5.霍乱弧菌选择性富营养培养基:-精制海藻剖面:23g-麦芽浸粉:10g-氯化钠:10g-磷酸二氢钠:1.5g-纯化水:1L-加热溶解精制海藻剖面、麦芽浸粉、氯化钠和磷酸二氢钠在纯化水中,煮沸溶解后,过滤灭菌。
这只是一些常用的培养基配方的例子,根据不同的微生物需要,还有更多类型的培养基配方可供选择。
每个培养基的配方具体组成和浓度可以根据实验需要进行调整和优化,以获得最佳的培养条件。
同时,配方中的成分应根据实验目的和研究对象的特性进行选择,以确保培养基能够提供必要的营养物质和环境条件,促进微生物的生长和培养。
牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。
用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。
简述真菌的培养和菌落特点
一、真菌的概述
真菌是一类生物,属于生物界中的真核生物,与植物、动物并列为三大生命界。
真菌包括单细胞菌和多细胞菌两种类型,它们在自然界中广泛分布,可以生长在土壤、水体、空气等各种环境中。
真菌在生态系统中具有重要的作用,既可以分解有机物质,促进营养循环,还可以制造食品、药品等。
二、真菌的培养方法
1.选择培养基
真菌培养需要选择适合其生长和繁殖的培养基。
常用的培养基有马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、玉米粉葡萄糖琼脂(CMD)、麦芽琼脂(MA)、Sabouraud琼脂等。
2.接种方法
将纯净的真菌孢子或菌丝接种到含有营养成分的培养基上,并放置在适宜温度下进行培养。
3.温度和湿度控制
不同种类的真菌对温度和湿度要求不同,在进行培养时需要根据实际情况进行调节。
三、真菌菌落特点
1.颜色
真菌菌落的颜色因不同种类而异,一般来说,常见的颜色有白色、灰色、黄色、红色、棕色等。
2.形状
真菌菌落的形状也因不同种类而异,常见的形状有圆形、半圆形、不规则形等。
3.质地
真菌菌落质地通常为柔软或硬质,取决于真菌种类和培养条件。
4.边缘
真菌菌落边缘一般为光滑或毛状,也有些是波浪状或分叉状。
5.表面特征
真菌表面通常具有一定的纹理和纹路,并且会产生一些绒毛或污点。
这些特征可以帮助鉴别不同种类的真菌。
四、结语
通过以上内容的介绍,我们可以了解到真菌的培养方法以及其在培养过程中表现出来的一些特点。
这对于我们深入了解和应用真菌具有重要意义。
细菌和真菌的培养方法
1. 细菌的培养方法
(1)液体培养法:将细菌接种在适当的液体培养基中,可使细菌在含有适当营养的液体中生长。
常用的液体培养基有肉汤、营养液、大肠杆菌悬浮液等。
(2)固体培养法:将细菌接种在含有适当营养的固体培养基上,可使细菌在表面和深层生长。
常用的固体培养基有营养琼脂、血琼脂、马铃薯蔗糖琼脂等。
(3)混合培养法:将两种或多种不同细菌接种在同一培养基上,通过它们之间的相互作用,观察细菌之间的关系及生长状况。
2. 真菌的培养方法
(1)液体培养法:将真菌接种在含有适当营养的液体培养基中,可使真菌在含有适当营养的液体中生长。
常用的液体培养基有马铃薯葡萄糖液、麦芽琼脂液等。
(2)固体培养法:将真菌接种在含有适当营养的固体培养基上,可使真菌在表面和深层生长。
常用的固体培养基有马铃薯葡萄糖琼脂、米曲等。
(3)混合培养法:将两种或多种不同真菌接种在同一培养基上,通过它们之间的相互作用,观察真菌之间的关系及生长状况。
培养基按用途可分为培养基按照用途可分为多种类型,下面我将对常见的几种培养基进行介绍。
1. 常规培养基:常规培养基适用于细菌、酵母和真菌等微生物的培养。
常见的常规培养基包括肉汤蛋白胨培养基、青霉素-糖-蛋白胨培养基等。
常规培养基的特点是成本低、制备简单、适用范围广。
2. 选择性培养基:选择性培养基是以抑制某些微生物的生长而利用另外一些微生物的生长来进行筛选和分离。
例如,MAC培养基能够抑制大肠杆菌的生长,而选择性地培养肠杆菌属。
3. 不菌培养基:不菌培养基是为了满足细菌外源性DNA的重组和测序等需要而设计的。
不菌培养基中一般不添加碳源,细菌需要通过外源性DNA提供的基因来合成相应的代谢产物,以维持生长。
4. 富集培养基:富集培养基是以某些微生物对特定物质的利用能力为基础,通过添加特定的小分子物质来促进有利菌种生长,从而快速富集目标微生物。
例如,含有硫酸铁的培养基可以富集含铁硫蛋白的微生物。
5. 分离培养基:分离培养基主要用于分离和鉴定微生物。
分离培养基常采用琼脂或琼脂糖作为固体化剂,以便于分离单个菌落。
6. 差氧培养基:差氧培养基适用于厌氧微生物的培养。
差氧培养基通过控制氧气的含量来创建低氧或无氧的环境,以促进厌氧微生物的生长。
7. 无菌培养基:无菌培养基用于无菌操作和微生物共培养的需要。
无菌培养基在制备过程中要采取严格的无菌操作,以确保培养基不受外源性微生物污染。
8. 工业培养基:工业培养基适用于工业化生产需求,如发酵、酿造等。
工业培养基要满足生产微生物的需求,包括碳源、氮源、微量元素等。
总的来说,培养基按照用途可以分为常规培养基、选择性培养基、不菌培养基、富集培养基、分离培养基、差氧培养基、无菌培养基和工业培养基等多种类型。
每种类型的培养基都有其特定的适用范围和制备要求。
科研和工业生产中的微生物培养需要根据具体情况选择合适的培养基。
真菌细菌的培养原理真菌和细菌的培养原理是指使用合适的培养基和培养条件,将真菌和细菌从最初的样本(如环境中的土壤、水体、食物等)中分离出来,培养成纯种菌株。
以下是真菌和细菌的培养原理的详细说明。
一、真菌的培养原理真菌是一类包含在生物界中真菌门(Fungi)中的单细胞或多细胞生物。
真菌多为丝状菌丝状或酵母状,其生长速度慢,对于培养条件的要求相对较高。
1. 选择合适的培养基:真菌培养通常使用富含碳源、氮源和维生素的培养基。
常用的培养基包括马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、玉米粉葡萄糖琼脂(CMD)等。
此外,还可以添加一些抗生素或抑菌剂以抑制杂菌的生长。
2. 准备培养条件:真菌的培养通常需要一定的温度、湿度和光照条件。
不同种类的真菌对于温度的要求也不同,可以根据不同的菌种选择适宜的培养温度,一般在20-30摄氏度之间。
3. 分离和培养:从环境样品中分离真菌菌株需要进行分离和纯化。
通常采用分层分涂法或稀释法将菌落分离。
将分离出的菌株转移到培养基上,培养一定的时间后即可观察到纯种菌株的形成。
4. 维持菌株的纯度:维持真菌菌株的纯度是培养的关键步骤。
可以通过定期进行菌株的传代分离,或者在培养中添加适当的抑菌剂来防止杂菌的污染。
二、细菌的培养原理细菌是微生物世界中最广泛分布和最多样化的一类生物,其形态多样,包括球状、棒状、螺旋状等。
细菌的培养原理与真菌类似,但由于其生长速度较快,培养条件相对较简单。
1. 选择合适的培养基:细菌培养一般使用较简单的培养基,常用的包括营养琼脂、肉蛹提取物琼脂等。
培养基要包含细菌所需的基本营养物质,如碳源、氮源、矿物盐和维生素。
2. 调整培养条件:不同种类的细菌对于培养条件的要求有所不同,但大多数细菌适宜生长的温度在30-37摄氏度之间。
此外,细菌的生长还受到氧气浓度、酸碱度等环境因素的影响。
3. 分离和培养:与真菌类似,细菌的分离也需要进行分层分涂法或稀释法。
将分离出的单个菌落移植到培养基上进行培养,通常培养时间较短即可观察到细菌的生长。
70种常用培养基配方培养基是用于菌种的生长、繁殖和实验研究的一种基质。
常用培养基种类繁多,各有不同的配方和用途。
下面介绍70种常用的培养基配方,供参考。
1.通用培养基:-营养琼脂培养基:牛肉浸提出液、酵母浸提出液、葡萄糖、琼脂。
-营养蚕豆琼脂培养基:蚕豆提取物、酵母浸提出液、葡萄糖、琼脂。
2.富集培养基:-甘露醇富集培养基:菌落提取物、氯化钠、甘露醇。
-马铃薯富集培养基:马铃薯提取物、氯化钠、琼脂。
3.选择性培养基:-MAC寄生虫选择性琼脂培养基:大肠杆菌寄生虫选择因子、大肠杆菌不可吸收糖、蓝膏染色剂、琼脂。
-SS培养基:硫酸镁、琼脂、碳酸氢钠、硫酸铁。
4.染色选择培养基:-LB琼脂培养基:牛肉浸提出液、酵母浸提出液、葡萄糖、琼脂。
-LB琼脂平板培养基:LB琼脂培养基、琼脂。
5.少培养基:-惠普顿可溶性培养基:肉浸膏、番茄汁、酵母浸提物、葡萄糖。
-惠普顿可溶性培养基+90%乙醇:肉浸膏、番茄汁、酵母浸提物、葡萄糖、乙醇。
6.杂类培养基:-牛血琼脂培养基:立克次体病原质、灭菌牛血、琼脂。
-葡萄酒琼脂培养基:葡萄酒、肉浸膏、酵母提取物、琼脂。
7.病毒培养基:-293改良培养基:DMEM/F-12培养基、胎儿牛血清、L-谷胺酰胺、嘌呤鸟苷、角鲨烷醇。
- Vero细胞培养基:EMEM培养基、羊脑提取物、牛胎儿血清。
8.食品微生物培养基:-SA培养基:牛肉浸取物、蛋葵况乳、葡萄糖、卵巢葡萄糖。
-TCBS琼脂培养基:钠氯化物、蛋黄粉、蔗糖、蓝膏染色剂。
9.植物组织培养基:-MS培养基:硝酸铵、硝酸钾、硫酸镁、硫酸锌。
-B5培养基:硝酸铵、硝酸钙、硫酸镁、硫酸钾。
10.真菌培养基:-SD培养基:蔗糖、酵母氮碱基、L-谷胺酸、琼脂。
-YPD培养基:酵母提取物、葡萄糖、琼脂。
以上是常用的70种培养基配方,涵盖了各种通用、富集、选择性、染色选择、少培养、杂类、病毒、食品微生物、植物组织和真菌培养基。
这些培养基适用于不同类型的实验研究和菌种培养。
LB培养基:是微生物学实验中最常用的培养基,用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
用于培养大肠杆菌、枯草杆菌等细菌,分为液态培养基和加入琼脂制成的固态培养基。
加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。
PDA培养基:马铃薯葡萄糖琼脂培养基,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
改良MC培养基:用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数;原理:大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解,以辨别乳酸菌;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为pH指示剂。
MRS培养基:乳酸菌培养基,由多种成分组成,适用于乳酸菌的生长,用来分离培养乳酸菌的一类培养基,一种常用的培养基,宜培养分离乳酸菌。
由于该培养基十分适于乳酸菌的生长,而且抑制其他菌的生长,因此具有分离乳酸菌的功能。
当乳酸菌长成后在培养基上显黄色,之后会变淡黑色。
以此分离乳酸菌。
乳酸菌:凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。
这是一群相当庞杂的细菌,目前至少可分为18个属,共有200多种。
除极少数外,其中绝大部分都是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群,其广泛存在于人体的肠道中。
目前已被国内外生物学家所证实,肠内乳酸菌与健康长寿有着非常密切的关系。
乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。
常见菌种有双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌等自配高浓度污水:葡萄糖5550 mg/L+(NH4)2SO4,1170 mg/L+KH2PO4,170 mg/L+COD为5000 mg/L。
自配污水:葡萄糖555 mg/L+(NH4)2SO4,117mg/L+KH2PO417 mg/L+CaC12 0,08 mg/L+MgSO4,1,534 mg/L+NaHCO3 550.8 mg/L+FeC13·6H2O 0.25 mg/L+C0D 500 mg/L+氨氮为30 mg/L.一、LB培养基配制1升LB培养培养基需:蛋白胨10g/L;酵母粉5 g/L、Nacl10 g/L、单/双去离子水、琼脂15~20g/L(配制液体培养基不需要加,配制固体培养基时加入)。
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,SDA](一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基,SDB](一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic](一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA](一)组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA](一)组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。
(三)用途此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80琼脂,CMA with T w80](一)组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml(二)制法先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml(二)制法将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途用于区分奥杜盎小孢子菌和犬小孢子菌,前者在米饭培养基上生长差,犬小孢子菌生长良好,产生黄色素和典型大分生孢子。
[麦芽浸汁琼脂,MA](一)组成麦芽浸膏25.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察酵母产生子囊孢子。
[脑心浸膏琼脂。
BHI](一)组成脑心浸膏35.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途双相真菌可在该培养基上呈酵母相。
[皮肤癣菌鉴定培养基,DTM](一)组成葡萄糖10.0g蛋白胨10.0g琼脂15.0g酚红0.2g0.8N盐酸 6.0g放线菌酮0.5g庆大霉素0.1g氯霉素0.125g蒸馏水1000ml(二)制法将葡萄糖、蛋白胨和琼脂混于1000ml水中,加入40ml酚红并震荡(酚红0.5g溶于15ml 0.1NaOH中加水至100ml),然后加入6ml0.8N HCL并震荡;放线菌酮0.5g溶于2ml 丙酮中,倒入培养基中;庆大霉素及氯霉素溶于2ml水中,然后加入培养基。
121摄氏度15分钟灭菌后备用。
(三)用途分离和鉴定皮肤癣菌。
[尿素培养基,Christensen urea agar](一)组成A溶液:葡萄糖 1.0g蛋白胨 1.0gNaCl 5.0gKH2PO4 2.0g尿素20.0g酚红0.012g蒸馏水100mlB溶液:琼脂15.0g蒸馏水900ml(二)制法将A溶液混匀,过滤灭菌;加热溶解B液,然后121摄氏度15分钟灭菌后。
将B液冷却至50摄氏度后与A液混合后分装。
(三)用途用于鉴定须癣毛癣菌和隐球菌,可使橘红色培养基变成紫红色。
[察氏培养基,CZA](一)组成硝酸钠(NaNO3) 3.0g磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g氯化钾(KCl)0.5g硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)0.01g葡萄糖30.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法将以上成分依次混入1000ml水中,加热直到完全溶解,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途分离和鉴定青霉、曲霉。
[咖啡酸琼脂,CAA](一)组成硫酸铵(NH4)2SO4 5.0g磷酸二氢钾(KH2PO4)0.8g硫酸镁(MgSO4.3H2O)0.7g咖啡酸0.18g枸橼酸铁0.002g酵母浸膏 2.0g葡萄糖 5.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法将以上成分依次混入1000ml水中,枸橼酸铁先配成原液,然后加入。
高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途鉴定新生隐球菌和其他隐球菌。
前者成为黑色或深棕色。
[高盐培养基,Takashio medium](一)组成磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g硫酸镁(MgSO4.7H2O) 1.0g葡萄糖 2.0g蛋白胨 1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml (二)制法将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察皮肤癣菌的有性时期。
[子囊孢子培养基,ascospore agar](一)组成醋酸钾10.0g酵母浸膏 2.5g葡萄糖 1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途鉴定产子囊孢子的真菌。
[酵母浸膏磷酸盐培养基,yeast extract phosphate agar](一)组成A液:酵母浸膏 1.0g琼脂15.0g蒸馏水1000mlB液:磷酸二氢钾(KH2PO4) 6.0g磷酸二氢钠(NaH2PO4) 4.0g蒸馏水30mlC液:氢氧化铵(NH4OH) 1.0g(二)制法先将A液混匀,将B液PH调节至6,然后取2ml加入A液,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用,每次用时加入少许氢氧化铵。
(三)用途鉴定和培养组织胞浆菌,和皮炎芽生菌。
[石蕊牛乳培养基,litmus milk agar](一)组成脱脂奶粉100.0g 石蕊750.0g 酵母浸膏 5.0g葡萄糖 3.0g蒸馏水1000ml (二)制法混合上述物质,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途用于鉴定放线菌。
[Bennett琼脂](一)组成酵母浸膏 1.0g牛肉浸膏 1.0g酪蛋白氨基酸 2.0g葡萄糖10.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml (二)用途用于需氧放线菌产生孢子。
[诺卡菌鉴定培养基,identification agar for Nocardia](一)组成1、液化明胶脑心浸汁25.0g明胶120.0g蒸馏水1000ml(PH 7.4~7.6)2、水解淀粉淀粉 2.0g葡萄糖 6.0g蛋白胨10.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml3、水解酪蛋白A液:脱脂奶粉10.0g蒸馏水90mlB液:琼脂 3.0g蒸馏水17ml分别高压,然后混匀。
4、酪氨酸(黄嘌呤)琼脂营养琼脂23.0g酪氨酸(黄嘌呤) 5.0(4.0)g水1000ml 5、营养琼脂牛肉浸膏 3.0g蛋白胨 5.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用(三)用途用于鉴定诺卡菌和链丝菌。
[合成毛霉琼脂,synthetic agar for Mucor](一)组成磷酸二氢钾(KH2PO4)0.5g硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.25g葡萄糖40.0g天门冬酰胺 2.0g硫胺0.5g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途鉴定接合菌。
[无碳源培养基,yeast nitrogen base](一)组成硫酸铵(NH4)2SO4 5.0g磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.0g硫酸镁(MgSO4.7H2O)0.5g酵母浸膏0.2g琼脂15.0g蒸馏水1000ml(二)制法将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)用途糖同化试验基础培养基。
先转种菌种在培养基上,3天后重复转种一次。
将菌悬液与上述培养基混合后制成平皿。
将含20%的糖滤片置于平皿中,观察同化现象。
先用蔡氏滤液过滤糖溶液。
[Leeming和Notman培养基](一)组成蛋白胨10.0g葡萄糖 5.0g酵母浸膏 1.0g牛胆盐 4.0g甘油 1.0g单硬脂酸甘油酯0.5g吐温60 0.5ml全脂牛奶10.0g琼脂12.0g放线菌酮0.5g氯霉素0.05g蒸馏水1000ml(二)用途用于培养马拉色菌。
[七叶苷琼脂,esculin agar](一)组成Leeming和Notman培养基加入0.2%枸橼酸铁和0.1%七叶苷。
(二)用途用于鉴定马拉色菌。
[橄榄油培养基,olive oil medium for Malassizia sp.](一)组成蛋白胨10.0g葡萄糖40.0g酵母浸膏0.1g单硬脂酸甘油酯 2.5g吐温80 2.0ml橄榄油40.0ml琼脂18.0g氯霉素0.05g蒸馏水1000ml(二)用途用于培养马拉色菌。
其中如果没有橄榄油,也可以用菜籽油代替。