3-1 亚硝酸盐的测定

食品中亚硝酸盐检测关键影响因素探究王强立（厦门市食品药品质量检验研究院，福建厦门 361013）摘　要：目的：运用《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》（GB 5009.33—2016）第二法分光光度法对食品中亚硝酸盐进行检测，分析影响检测结果的关键因素。

方法：将标准溶液和待测溶液在同等条件下进行测定，扩展标准曲线线性范围，将检测过程分为4个步骤，分别进行加标回收试验，结合氧化还原反应标准电极电势分析影响检测结果的关键因素。

结果：亚铁氰化钾溶液久置后可能分解产生Fe3+，Fe3+可氧化亚硝酸根导致检测结果偏低，其他溶液相对稳定。

结论：GB 5009.33—2016中分光光度法稳定可靠，亚铁氰化钾溶液的稳定性是影响检测结果的关键因素。

关键词：食品；亚硝酸盐；亚铁氰化钾；分光光度法Research on Key Influencing Factors of Determination ofNitrite in FoodsWANG Qiangli(Xiamen Institute for Food and Drug Quality Control, Xiamen 361013, China) Abstract: Objective: To detect nitrite in food by GB 5009.33—2016 second method spectrophotometry, and analyze the key factors affecting the test results. Method: The standard solution and the solution to be tested were measured under the same conditions, and the linear range of the standard curve was expanded. The detection process was divided into four steps, and the standard recovery test was carried out respectively. Combined with the standard electrode potential of the redox reaction, the key factors affecting the detection results were analyzed. Result: The potassium ferrocyanide solution may decompose to produce Fe3+ after a long time. Fe3+ can oxidize nitrite, resulting in low detection results, and other solutions are relatively stable. Conclusion: The spectrophotometric method in GB 5009.33—2016 is stable and reliable, and the stability of potassium ferrocyanide solution is the key factor affecting the test results.Keywords: food; nitrite; potassium ferrocyanide; spectrophotometry亚硝酸盐主要以钠盐和钾盐的形式存在于食品中，食品中的亚硝酸盐主要来源于人工添加和食品本身。

亚硝酸盐检测标准亚硝酸盐是一种常见的水质污染物，其存在对人体健康和环境造成严重影响。

因此，对亚硝酸盐的检测和监测显得尤为重要。

为了保障水质安全，各国纷纷制定了亚硝酸盐的检测标准，以便对水体中的亚硝酸盐含量进行准确测定和评估。

本文将介绍亚硝酸盐检测的标准方法和相关内容。

一、亚硝酸盐的来源与危害。

亚硝酸盐通常来源于水体中的硝酸盐通过微生物还原作用而生成，也可能来自工业废水、农业污染以及自然环境中的其他因素。

亚硝酸盐对人体的危害主要表现在其可与氨基化合物反应生成致癌物质亚硝胺，长期摄入会增加患癌风险。

此外，亚硝酸盐还会影响人体的血红蛋白，导致缺氧和中毒症状。

二、亚硝酸盐的检测方法。

亚硝酸盐的检测方法主要包括分光光度法、离子色谱法、电化学法等。

其中，离子色谱法是目前应用最为广泛的一种方法，其原理是利用离子色谱仪对样品中的亚硝酸盐进行分离和检测。

此外，还有一些快速检测试剂盒可以用于现场快速检测，但准确性和灵敏度相对较低。

三、亚硝酸盐的检测标准。

各国针对亚硝酸盐的检测制定了相应的标准，例如中国《地表水环境质量标准》（GB3838-2002）规定了地表水中亚硝酸盐的限值为0.015mg/L，美国环保署（EPA）对饮用水中亚硝酸盐的限值为10mg/L。

这些标准的制定旨在保障水质安全，预防亚硝酸盐对人体健康和环境造成的危害。

四、亚硝酸盐的监测与控制。

为了保障水质安全，对亚硝酸盐的监测和控制显得尤为重要。

一方面，需要建立健全的水质监测网络，定期对水体中的亚硝酸盐含量进行监测，及时发现问题并采取相应的控制措施。

另一方面，也需要加强对工业废水、农业污染等源头的治理，减少亚硝酸盐的排放，从源头上控制亚硝酸盐的污染。

五、结语。

亚硝酸盐作为一种常见的水质污染物，其检测和监测对于保障水质安全至关重要。

各国纷纷制定了相应的亚硝酸盐检测标准，并加强对亚硝酸盐的监测和控制工作，以预防亚硝酸盐对人体健康和环境造成的危害。

希望本文能够对亚硝酸盐的检测工作有所帮助，促进水质安全管理工作的开展。

亚硝酸盐的测定一、实验目的：测定水溶液中德亚硝酸盐二、实验原理：在酸性条件下，水样中的亚硝酸氮与磺胺反应，形成重氮化合物，继而再与-奈乙二胺偶联，形成重氮-偶氮化合物（红色染料），其最大吸收波长为540nm。

三、实验仪器、（1）分光光度计：unico2000（包括5cm比色皿4只/台）；（2）容量瓶：100cm31只；（3）比色管：50cm38只；（4）移液管：5cm3 1只，1cm31只；（5）洗耳球：1只；洗瓶：1只。

四、试剂及其配制：1、磺胺溶液（1%）：称取10g磺胺（）溶于1000cm311HCl溶液中，贮存于棕色试剂瓶中。

2、-奈乙二胺溶液（%）：称取1.0g-奈乙二胺（）溶于1000cm3去离子水中，贮存于棕色试剂瓶中，有效期为1个月。

3、标准贮备溶液：准确称取在（110～115℃）干燥过的亚硝酸钠0.345g溶于去离子水中，转移至500 cm3容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，其浓度为µmol/cm3。

五、测定步骤：1、配制使用标准溶液：准确移取贮备标准溶液0.50cm3于100毫升容量瓶中用去离子水稀释到刻度，混匀，浓度为µmol/cm3。

2、标准系列：分别移取使用标准溶液，，，，，，cm3于50 cm3比色管中，加去离子水至50 cm3，依次加入1 cm3磺胺溶液，混匀，1min后，加1 cm3-奈乙二胺溶液，混匀，15min 后以去离子水为参比（L=5cm），测定各个溶液的吸光度。

3、水样测定（双样）：取50cm3经µm滤膜过滤的水样于50cm3比色管中，加1cm3磺胺，混匀，1min后，加1 cm3-奈乙二胺溶液，15min后，以去离子水做参比，测定溶液的吸光度（Ew）。

4、液槽校正（Ec ）：将四个比色皿注入去离子水，以其中一个为参比，测定其它三个液槽的吸光度，记录数值，要求Ec 。

六、结果计算：1、绘制标准曲线，计算F 值： NO2-N y = 5.2276x + 0.0005R 2 = 100.511.522.533.544.500.20.40.60.81E V样使V C E E V V F 1000)(1212⨯⨯--= µmol/dm 3 E V 1、V 2：分别是所加入标准的cm 3数，E 1、E 2：分别是V 1、V 2所对应的“吸光度”；C 使：使用标准溶液的浓度µmol/cm 3；2、样品含量的计算： C 样=F Ew (µmol/dm 3)七、技术指标：1、检测下限：µmol/dm 3。

实验三亚硝酸盐中毒的复制和解救一、实验目的掌握亚硝酸盐中毒的诊断要点。

了解亚硝酸盐中毒的解毒原理和治疗措施。

二、实验方法教师讲解后、学生分组操作。

三、实验属性和学时验证，3学时。

四、实验材料和器械兔若干只、一次性注射器、胃管、听诊器、体温计、亚硝酸盐钠、美兰、酒精棉球等。

五、实验内容（一）高铁血红蛋白检验1、原理亚硝酸盐（钾）离子，在血液中使血红细胞内正常的低铁血红蛋白（氧化）氧化为异常的高铁血红蛋白（正铁），从而失去携氧作用。

2、方法（1）取血5mL于试管中，在空气中用力振荡15min。

在有高铁血红蛋白的情况下，血液仍保持棕色，健畜则由于血红蛋白与氧结合而变为鲜红色。

（2）取血5mL于试管中，滴加1%氰化钾（钠）溶液数滴，在有高铁血红蛋白的情况下，血液立即变为鲜红色。

（3）血液分光镜检验：取血用水稀释10-20倍后置于分光镜上检验，可在红色区640-650nm波长发现高铁血红蛋白的吸光谱带。

当加入5%氰化钾（钠）溶液数低后，由于氰血蛋白形成，此吸光带立即消失。

但经急救治疗过的家畜，高铁蛋白大部分已被还原，故用此法检验宜早进行。

（二）治疗措施可用特效解毒药甲蓝或甲苯胺兰溶液静脉注射，若与Vc和高渗葡萄糖（亦有较弱的还原作用）溶液合用，则疗效更佳。

1、亚甲蓝又名美蓝，为一种氧化还原剂，是治疗本病的特效药物。

原理小剂量美蓝进入机体，在还原型辅酶Ⅰ脱氢酶的作用下，还原成“白色美蓝”，可使高铁血红蛋白还原为正常的低铁血红蛋白。

在此同时，本身被氧化成美蓝并重又参与反应，但大剂量美蓝进入机体，却养具有氧化作用，反使正常的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白。

因此，治疗只宜用小剂量。

反映如下：剂量标准剂量为每公斤体重1-2mg，浓度为1%的酒精生理盐水或水溶液。

给药途径静脉注射或分点肌肉注射。

2、甲苯胺蓝原理同美蓝，但其还原高铁血红蛋白的速度比美蓝快37%。

剂量每公斤体重5mg，浓度为5%。

给药途径静脉注射或腹腔注射。

选修1专题1课题3《泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定》泡菜是一种传统的韩国食品，由白菜、辣椒粉、大蒜、姜和盐等原料制成。

它具有独特的口感和风味，同时也富含维生素C和乳酸菌等有益物质。

然而，泡菜中也存在一定量的亚硝酸盐，这是一种可能对人体健康有害的物质。

因此，了解泡菜制作和亚硝酸盐含量的测定方法非常重要。

在这篇文章中，我们将介绍泡菜的制作过程，并探讨亚硝酸盐含量的测定方法。

首先，我们来看泡菜的制作过程。

制作泡菜的第一步是准备白菜。

将新鲜的白菜切成适当大小的块状，然后将块状白菜放入盐水中浸泡。

这一步的目的是使白菜变软，并去除一部分的水分。

接下来，我们需要准备泡菜的调味料。

常用的调味料包括辣椒粉、大蒜、姜和盐等。

辣椒粉是泡菜的重要调味料，它能赋予泡菜独特的辣味和红色。

大蒜和姜则能增加泡菜的风味和口感。

这些调味料需要根据个人口味适量加入，同时还需要搭配适量的盐，以保持泡菜的新鲜度和抗菌作用。

完成泡菜的准备工作后，将白菜块和调味料混合在一起，并用力搅拌均匀。

然后，将混合物放入一个容器中，并轻压使其密实。

最后，将容器盖好，放置在常温下进行发酵。

发酵时间一般为几天到几周不等，根据个人口味和所需味道决定发酵的时间。

泡菜中亚硝酸盐的含量是一个关键的问题。

亚硝酸盐是一种防腐剂和色素固定剂，常被用于肉类制品和酱菜等食品中。

然而，亚硝酸盐的摄入过量可能会对人体健康造成负面影响，如引发癌症。

因此，测定泡菜中亚硝酸盐含量的方法十分重要。

目前，常用的亚硝酸盐含量测定方法有两种：化学法和光谱法。

化学法是通过化学反应测定亚硝酸盐的含量，常用的方法包括格里萨尔法、纳米粒子法和流动注射分析法等。

光谱法则是通过测定亚硝酸盐与其他物质的吸收光谱来推导含量，常用的方法有紫外分光光度法和红外光谱法等。

无论采用哪种方法，测定亚硝酸盐含量的前提是提取泡菜中的亚硝酸盐。

可以通过水提法或酸提法来提取亚硝酸盐。

在水提法中，将泡菜样品与适量的水混合，然后通过离心等方法分离泡菜中的液相和沉淀。

食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。

过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。

因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。

本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。

实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。

- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。

- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。

实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。

取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。

2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。

得到的溶液即为10%油酸银试剂。

3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。

4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。

5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。

6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。

数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。

标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。

通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。

实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。

2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。

3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。

结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。

这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。

同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。

分光光度法：（测亚硝酸盐）一．仪器：1.天平：感量为0.1mg和1mg。

2.组织捣碎机3.超声波清洗机4.恒温干燥箱5.分光光度计二．步骤1.溶液配制：1.1亚铁氰化钾溶液（106/L）：称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000ml。

1.2乙酸锌溶液（220g/L）：称取220.0g乙酸锌，先加30ml冰醋酸溶解，用水稀释至1000ml。

1.3饱和硼砂溶液（50g/l）：称取5.0g硼酸钠，溶于100ml热水中，冷却后备用。

1.4对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100ml20%的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。

1.5盐酸奈乙二胺溶液（2g/l）：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100ml 水中，混匀后，置棕色瓶中混匀，避光保存2.实验步骤2.1试样预处理：用四分法取适量或全部，用食物粉碎机制成匀浆备用。

2.2提取：称取5g（精确至0.01g）制成匀浆的试样（如制备过程中加水，应按加水量折算），置于50ml烧杯中，加12.5ml饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70°C左右的水约300ml将试样洗入500ml容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。

2.3提取液净化在振荡上述提取液时加入5ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，加入5ml 乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30ml，滤液备用。

2.4亚硝酸盐的测定吸取40ml上述滤液于50ml带塞比色管中，另吸取0.00ml,0.20ml，0.40ml,0.60m,0.80ml,1.00ml,1.50ml,2.0ml,2.5ml亚硝酸钠标准使用液，分别置于50ml带塞比色管中。

于标准管与试样管中分别加入2ml对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3min~5min后各加入1ml盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。