茯苓多糖提取分离的方法共31页文档
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茯苓多糖的提取及含量测定目的:建立茯苓多糖的含量测定方法。
方法:用水提醇沉法提取茯苓多糖,酚-硫酸法紫外分光光度法测定茯苓多糖的含量。
一、仪器与试药1、仪器:UV2754 紫外分光光度计2、试剂与样品样品:云苓、葡萄糖对照品苯酚、浓硫酸(1)5 %苯酚试剂的配制取苯酚加热蒸馏收集182 ℃的馏分,吸取此馏分10ml 加水至200ml 置棕色瓶内,放冰箱备用。
(2)对照品溶液的配制精密称取105 ℃干燥恒重的葡萄糖50mg 加水溶解并定容至1000ml 量瓶中,即得。
(3)供试品溶液的配制精密称取茯苓提取物50mg ,加水溶解并定容至500ml 量瓶中,过滤,滤液备用,即得。
二、提取准确称取茯苓500g ,切成碎片,加入4~6 倍量的水,回流提取 3 次,时间分别是3 ,2 和1h。
合并 3 次提取液滤过,除去不溶性杂质,得2000ml 滤液。
取600ml减压蒸馏浓缩成76ml ,在搅拌下加入乙醇,使含醇量达到80 % ,静置12h ,离心,收集沉淀,加蒸馏水60ml 溶解煮沸,趁热滤除不溶物,滤液在搅拌下再加入乙醇,使含醇量达到80 % ,放置,析出褐色沉淀后,低温干燥,即得茯苓多糖粗品。
3、吸收波长的选择精密吸取对照品溶液1. 0ml ,和供试品溶液1. 0ml ,分别置于20ml 的试管中,各精密加入5 %的苯酚液1. 0ml ,然后缓慢精密加入 5. 0ml 浓硫酸,摇匀,放置30min后,在分光光度仪上测定波长从400~524nm之间的吸收度,两者均在490nm处有最大吸收,故选择490nm波长测定。
4、重现性实验分别吸取对照品溶液0. 5ml 5 份置试管中,同前操作,吸光度为:0. 614 ,0. 612 ,0. 614 ,0. 613 和0. 615 ,结果RSD = 0. 199 %( n = 5) 。
5 、样品含量测得吸取供试品溶液 1. 0ml 3 份,分别置于20ml 试管中,加入5 %苯酚溶液2. 0ml ,混合后加入浓硫酸6. 0ml ,放置30min ,在490nm处分别测得其吸收度 A 值:A1 =0. 871 ,A2 = 0. 872 ,A3 = 0. 876 ,根据回归方程求出百分含量为74. 16 % , 74.27 %和74. 62 % , 平均含量74. 35 %。
一、实验目的1. 掌握茯苓多糖的提取方法;2. 熟悉茯苓多糖的理化性质;3. 了解茯苓多糖的提取工艺及其影响因素。
二、实验原理茯苓多糖是一种天然高分子化合物,具有多种生物活性,如抗肿瘤、抗病毒、调节免疫等。
本实验采用水提法提取茯苓多糖,通过调节提取温度、时间、pH值等条件,提高茯苓多糖的提取率。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:茯苓菌核、蒸馏水、95%乙醇、无水硫酸钠、盐酸、氢氧化钠等;2. 实验仪器:电子天平、电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、真空干燥箱、磁力搅拌器、离心机、pH计、分光光度计等。
四、实验步骤1. 茯苓菌核预处理:将茯苓菌核粉碎,过100目筛,备用;2. 水提法提取茯苓多糖:(1)称取一定量的茯苓菌核粉末,加入适量蒸馏水,搅拌均匀;(2)调节pH值至6.0;(3)在恒温水浴锅中加热提取,温度为80℃,时间为2小时;(4)提取液过滤,取滤液;(5)将滤液加入95%乙醇,静置过夜;(6)沉淀物用蒸馏水洗涤,再用无水硫酸钠干燥;(7)干燥后的沉淀物称重,计算茯苓多糖提取率;3. 茯苓多糖纯化:(1)将干燥后的沉淀物溶解于蒸馏水中;(2)通过离心分离,去除杂质;(3)使用透析袋去除小分子物质;(4)将透析后的溶液冷冻干燥,得到纯化的茯苓多糖;4. 茯苓多糖理化性质测定:(1)测定茯苓多糖的分子量;(2)测定茯苓多糖的紫外吸收光谱;(3)测定茯苓多糖的溶解度;(4)测定茯苓多糖的抗氧化活性。
五、实验结果与分析1. 茯苓多糖提取率:根据实验结果,在提取温度80℃,时间2小时,pH值6.0的条件下,茯苓多糖的提取率为1.23%;2. 茯苓多糖纯化:经过纯化处理后,茯苓多糖的纯度达到90%以上;3. 茯苓多糖理化性质:(1)分子量:茯苓多糖的分子量为5.2×10^5;(2)紫外吸收光谱:茯苓多糖在200-400nm范围内具有较强紫外吸收;(3)溶解度:茯苓多糖在水中的溶解度为1.5mg/mL;(4)抗氧化活性:茯苓多糖的抗氧化活性较强,IC50值为25.8μmol/L。
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茯苓多糖的提取技术作者:周琳来源:《农民致富之友》2013年第22期[中图分类号] S-1 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 (2013)11-0182-01一、引言茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分,具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用,可用于医疗、保健等领域,具有广阔的开发应用前景。
二、材料与方法1.茯苓多糖的提取方法2.均匀设计实验对超声波提取茯苓多糖提取工艺2.1器材及药品茯苓,数控超声波清洗器,紫外分光光度计,电子分析天平。
葡萄糖标准品,苯酚,浓硫酸和铝片等。
2.2.方法2.2.1药材粉碎度的选择参照文献条件,取不同粒度茯苓药材,在乙醇浓度50%,提取温度45℃条件下超声提取20 min,。
实验结果表明,药材粒度为20~60目时,提取时提取率较好。
2.2.2提取次数的选择取20~60目粒度茯苓药材,在2.2.2.1条件下分别提取1,2,3次,结果表明,超声波提取1次后,茯苓多糖即已提取完全。
2.2.3 茯苓提取物中多糖含量的测定方法2.2.3.1 4%苯酚溶液的配制取苯酚100 g,加鋁片0.1 g和碳酸氢钠0.05 g,蒸馏并收集182 ℃馏分,称取4 g,在100 ml容量瓶加水溶解至刻度线,然后放冰箱内冷藏备用。
2.2.3.2制备标准曲线精密称取置五氧化二磷减压干燥器中干燥12 h以上的无水葡萄糖标准品15 mg,置25 ml容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀置室温下(约24℃)备用(浓度为0.6 mg/ml)。
精密量取对照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 ml,分别置于100 ml容量瓶中,并加水至刻度,摇匀。
精密量取上述各溶液2 ml,置具塞试管中,分别加入4%的苯酚溶液1 ml,混匀后迅速加入浓硫酸7.0 ml,摇匀,并于45℃水浴中保温30 min后取出,置冰水浴中5 min后取出。
然后以第1份为空白对照组,用分光光度计在490 nm的波长处测定其吸收度A,以吸光度(A)为纵坐标,溶液浓度C为横坐标。
茯苓酸性多糖的提取工艺及其药效学研究茯苓酸性多糖的提取工艺及其药效学研究茯苓是一种常用的中草药,被广泛用于中医药临床,具有很高的药用价值。
茯苓酸性多糖是茯苓的主要活性成分之一,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤以及免疫调节等多种药理活性。
本文将详细介绍茯苓酸性多糖提取工艺以及其药效学研究。
一、茯苓酸性多糖的提取工艺1. 原料选择:选择新鲜的茯苓干品作为原料,质量应符合中药材质量标准。
2. 去杂处理:将茯苓干品进行清洗、去皮、除杂等处理,确保干净无杂质。
3. 粉碎研磨:将去杂处理后的茯苓干品进行粉碎研磨,获得粉碎物。
4. 提取工艺:采用热水提取法或酶解法进行茯苓酸性多糖的提取。
(1)热水提取法:将茯苓粉碎物加入适量的热水中,根据比例适量进行浸泡,开启加热设备,加热2-3小时,保持提取液温度在80-90℃。
然后采用常温离心或压榨机进行离心分离,取得茯苓酸性多糖提取液。
(2)酶解法:将茯苓粉碎物加入适量的酶解液中,根据比例适量进行浸泡,振荡酶解24-48小时。
然后采用滤纸或滤膜进行过滤分离,得到茯苓酸性多糖提取液。
5. 精制提纯:将茯苓酸性多糖提取液进行过滤、沉淀、浓缩、醇沉、冷冻干燥等步骤,最终获得茯苓酸性多糖。
二、茯苓酸性多糖的药效学研究1. 抗氧化活性:茯苓酸性多糖具有显著的抗氧化活性,能清除自由基,抑制氧化过程,减少氧化损伤。
2. 抗肿瘤活性:茯苓酸性多糖能抑制肿瘤细胞的增值和扩散,诱导肿瘤细胞凋亡,具有良好的抗肿瘤活性。
3. 免疫调节活性:茯苓酸性多糖能显著促进免疫细胞增殖和活化,提高机体免疫力,调节免疫功能平衡。
4. 抗炎活性:茯苓酸性多糖能抑制炎症的发生和发展,减轻炎症反应,具有良好的抗炎作用。
5. 抗菌活性:茯苓酸性多糖对多种细菌和真菌具有明显的抑制作用,对炎症感染有一定的防治效果。
6. 调节血糖和血脂:茯苓酸性多糖能显著降低血糖和血脂水平,对糖尿病和高血脂等疾病有辅助治疗作用。
综上所述,茯苓酸性多糖作为茯苓的主要活性成分,具有多种药理活性,应用广泛。
茯苓多糖的提取技术作者:周琳班级:食品0931班【摘要】茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分,具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用,可用于医疗、保健等领域,具有广阔的开发应用前景。
为进一步优化茯苓多糖的提取工艺,促进其开发应用,文章参考大量国内外文献,对近几年茯苓多糖的提取及其应用作一综述。
【关键词】茯苓多糖,提取,超声波法1.引言自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖(zymosan)具有免疫增强以及抗肿瘤作用以来,人们对多糖的研究产生了极大的兴趣,尤其是其生物活性方面的研究。
茯苓多糖到底是什么呢?它有什么作用呢?茯苓多糖是近年来研究较多的一种真菌多糖,来源于多孔菌科真菌茯苓的菌核,约占整个茯苓菌核干重的70%~90%[1],其化学组成为(1→3)-β-D- 葡聚糖[2]。
茯Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核,在我国资源丰富,全国各地均自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖具有免疫增强以及抗肿瘤作用以有栽培,主产于云南、安徽、湖南等省。
茯苓是一味使用历史悠久的中药,在《神农本草经》中被列为上品,谓其“主胸胁逆气,利小便,久服安魂宁神,不饥延年。
”《本草纲目》也记载:茯苓“治头风虚眩,暖腰膝,主五劳七伤。
”历代医家均肯定茯苓既有滋补强身作用,又有渗湿利水、益脾和胃、宁心安神之功。
茯苓药性缓和,补而不峻,利而不猛,既能扶正,又可祛邪,能治疗脾胃虚弱、遗精早泄、心悸失眠、健忘多梦、小便不利、呕吐腹泻等症。
其主要有效成分茯苓多糖是一种非特异性免疫促进剂,其不仅能够提高机体的抗病能力,还有较强的抗癌作用。
其性味甘、淡、平,归脾胃肺肾经,有利水渗湿、益脾宁心之功效。
主治气虚劳伤、水肿、痰饮、呕吐、腹泻、热淋、遗精、惊悸、健忘等证。
茯苓多糖是茯苓的有效部位之一,为灰白色粉末,味微咸,无臭,略有吸湿性。
茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展一、本文概述茯苓,作为一种具有悠久药用历史的中药材,其在中医药领域的应用广泛而深入。
茯苓多糖作为茯苓的主要活性成分之一,近年来受到了越来越多的关注。
本文旨在全面综述茯苓多糖的提取方法、化学结构以及药理作用的研究进展,以期为茯苓多糖的进一步开发利用提供理论支持和实验依据。
本文将概述茯苓多糖的提取方法,包括传统的水提法、醇提法以及现代的微波辅助提取、酶解法等,并分析各种方法的优缺点。
本文将详细介绍茯苓多糖的化学结构特征,包括其分子量、单糖组成、糖苷键类型等,以及近年来在结构解析方面取得的新进展。
本文将重点综述茯苓多糖的药理作用,如免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等,并探讨其可能的作用机制。
通过本文的综述,期望能够为茯苓多糖的深入研究和应用提供有益的参考和启示。
二、茯苓多糖的提取方法茯苓多糖的提取方法对于其后续的结构研究和药理作用分析具有重要影响。
近年来,随着科学技术的发展,茯苓多糖的提取方法也在不断地优化和创新。
传统的提取方法主要包括水提法、醇提法等。
水提法是以水为溶剂,通过加热煮沸使茯苓中的多糖成分溶解于水中,然后通过浓缩、干燥等步骤得到多糖提取物。
这种方法操作简单,成本低廉,但提取效率较低,且易受到其他水溶性杂质的干扰。
醇提法则是利用醇类溶剂对多糖的溶解性进行提取,常用的溶剂有乙醇、甲醇等。
醇提法相对于水提法,提取效率较高,但成本也相应增加,且需要注意溶剂残留的问题。
随着现代提取技术的发展,出现了许多新型的提取方法,如超声波提取法、微波提取法、超临界流体提取法等。
超声波提取法利用超声波的空化作用、机械振动和热效应等,使茯苓细胞壁破裂,多糖成分更易溶出。
这种方法提取时间短,效率高,但设备成本较高。
微波提取法则是利用微波对物质分子的热效应和非热效应,使茯苓中的多糖成分快速溶出。
微波提取法具有提取速度快、提取效率高、节能环保等优点,但需要注意微波功率和时间的控制。