基因工程与微生物
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基因工程与微生物的关系
嘿,朋友们!今天咱来聊聊基因工程和微生物这俩神奇的家伙。
有一次啊,我去参观一个生物科技展览。
一进去,就看到好多奇奇怪怪的仪器和展板。
我正瞎逛着呢,突然被一个展示基因工程和微生物关系的展板给吸引住了。
展板上写着,基因工程可以利用微生物来做很多厉害的事情。
我就纳闷了,这微生物不就是那些小不点儿的细菌啥的嘛,能有啥大作用呢?
这时候,旁边来了一个讲解员阿姨。
她看我一脸疑惑,就笑着给我解释起来。
她说,微生物虽然小,但是它们的作用可大了。
比如说,有些微生物可以生产出我们需要的药物呢。
阿姨还给我举了个例子。
她说有一种微生物,可以通过基因工程的方法,被改造得能够生产胰岛素。
哇,我一听就惊呆了。
胰岛素那可是很多糖尿病患者需要的药啊。
原来这些小小的微生物还能这么厉害呢。
阿姨接着说,基因工程还可以让微生物变得更强大。
比如说,可以让它们能够分解那些很难处理的污染物。
我就想象着,那些小小的
微生物像小战士一样,把那些脏东西都给打败了。
我又问阿姨,那基因工程会不会有啥风险啊?阿姨说,当然有啦。
如果不小心把那些改造过的微生物放出来,可能会对环境造成不好的影响呢。
所以啊,科学家们在做基因工程的时候,都特别小心。
从展览出来,我就一直在想基因工程和微生物的关系。
这俩家伙,一个是高科技,一个是小不点儿,但是它们组合在一起,就能做出这么多厉害的事情。
真是太神奇了。
以后啊,说不定基因工程和微生物还能给我们带来更多的惊喜呢。
嘿嘿。
基因工程技术在微生物基因组学研究中的应用简介:微生物基因组学是研究微生物基因组的结构、功能和进化的学科领域。
随着基因工程技术的不断发展与创新,微生物基因组学研究获得了巨大的进展。
基因工程技术为微生物基因组学研究提供了强大的工具和方法,包括基因工程、DNA测序、基因组编辑和表达调控等。
本文将介绍基因工程技术在微生物基因组学研究中的主要应用。
1. 基因工程技术在微生物基因组测序中的应用微生物基因组测序是了解微生物基因组结构与功能的重要手段。
基因工程技术为微生物基因组测序提供了高效、快速和准确的方法,包括第二代测序技术和单分子测序技术等。
这些技术能够快速测序大量微生物基因组,帮助我们更好地了解微生物的遗传信息和进化历史。
2. 基因工程技术在微生物基因组编辑中的应用基因组编辑是指通过基因工程技术对微生物基因组进行精确的编辑和改造。
例如,CRISPR-Cas9技术是一项常用的基因组编辑技术,它能够精确地剪切特定的基因序列,并引入所需的基因突变或修饰。
这种技术可以帮助研究人员揭示微生物基因功能和基因调控机制。
3. 基因工程技术在微生物基因组表达调控中的应用微生物基因组表达调控是研究微生物基因表达及其调控网络的过程。
基因工程技术可以被用于设计和构建调控元件,以达到精确控制微生物基因表达的目的。
例如,研究人员可以设计和构建特定的启动子或调控子序列,来实现对某个目标基因的高效表达或抑制。
这种技术在工业微生物生产中有重要应用价值。
4. 基因工程技术在微生物基因组功能解析中的应用功能解析是研究微生物基因组中基因功能和基因调控机制的过程。
基因工程技术可以帮助研究人员将外源基因导入微生物中,以研究其在微生物中的功能和作用机制。
例如,研究人员可以通过基因工程技术将外源基因导入大肠杆菌,然后观察该基因在细菌中的表达及其对细菌生长和代谢的影响,从而揭示该基因的功能和作用机制。
结论:基因工程技术在微生物基因组学研究中发挥了重要作用。
基因工程技术在微生物发酵生产中的应用随着生物技术的发展,基因工程技术成为了微生物发酵生产的重要手段。
利用基因工程技术可直接改变微生物的基因组,调控代谢途径,提高产物合成效率,改善发酵过程。
本文将探讨基因工程技术在微生物发酵生产中的应用现状。
1. 基因工程技术在微生物发酵生产中的应用简介微生物发酵生产技术是利用微生物代谢合成产物的过程。
在微生物发酵生产过程中,微生物代谢途径的调控及代谢产物的转化是关键。
基因工程技术在此领域的应用主要包括以下几个方面:(1)构建高效表达系统。
表达系统包括转录及翻译过程,构建高效表达系统是增强产物合成的重要手段。
常见的高效表达系统包括菌体内和菌体外表达系统。
(2)扩大代谢通路和合成代谢产物。
发酵生产产物的制备需要扩大代谢通路和增加原料供应,而基因工程技术可增加代谢途径中限速步骤的酶活性,提高产物合成效率。
(3)研究代谢途径调控机理。
代谢途径的调控可影响产物合成及发酵过程的效率,基因工程技术可研究代谢途径中的调控机理,并通过调控基因表达改善发酵过程。
2. 基因工程技术在微生物发酵生产中的应用案例基因工程技术已成功应用于微生物发酵生产中的多个领域。
以下是其中的几个应用案例:(1)蛋白质表达和摄取菌体内表达系统和菌体外表达系统是蛋白质表达和摄取的主要手段。
利用基因工程技术可引入大量表达载体,构建高效表达系统,提高蛋白质产量。
其中,重组酶是微生物发酵生产中的重要产物之一,以大肠杆菌为代表的微生物可合成多种重要酶。
(2)化学药品生产化学药品是微生物发酵生产的重要应用领域之一。
利用基因工程技术可调控代谢途径,增加代谢通路,提高产物合成效率。
例如,经基因工程改造的生产半胱氨酸的菌株可产生较高产量的半胱氨酸。
(3)生物农药制备生物农药是一种重要的环保型农药,以细菌农药为代表的生物农药已成为微生物发酵生产的热点领域之一。
利用基因工程技术,可提高生物农药的稳定性、毒力、毒谱及抗性。
例如,通过基因工程调控细菌发酵过程中的代谢途径,提高拟杆菌素等生物农药的产量和毒力。
基因工程在微生物学中的应用随着科技的发展,基因工程技术的应用越来越广泛。
在微生物学领域,基因工程技术也得到了广泛应用。
本文将详细介绍基因工程在微生物学中的应用。
1. 基因克隆技术的应用基因克隆技术是基因工程技术中的重要一环。
通过基因克隆技术,可以将某一种微生物的基因克隆到另一种微生物中,从而改变其性状。
例如,科学家们通过基因克隆技术,将可以产生抗生素的基因克隆到无法产生抗生素的微生物中,使其也能够产生抗生素。
这一技术不仅可以应用于微生物的改良和优化,也可以应用于多种人类疾病的基因治疗中。
2. 基因编辑技术的应用基因编辑技术是基因工程技术中的一种新兴技术。
它可以直接对微生物细胞的基因进行编辑和修正,从而实现微生物的定向进化。
例如,科学家们使用基因编辑技术,将可降解塑料的基因克隆到大肠杆菌中,使其能够分解塑料,为环境保护作出贡献。
3. 基因组学的应用基因组学是现代微生物学研究的重要手段。
基因组学技术可以快速地对微生物的基因进行测序和分析,从而发现微生物中新的基因和特征。
例如,应用基因组学技术可以发现某种微生物具有降解能力。
对于环境污染物的处理,这是一项重要的技术。
4. 基因工程杀虫剂的应用基因工程杀虫剂是一种新型的绿色化杀虫剂。
它采用基因工程技术,将受体细胞和毒素基因结合后进行克隆转移到微生物中,可以实现靶向滴灌、目标杀虫等方式,降低化学农药对环境和人体的危害。
5. 基因工程菌肥的应用基因工程技术可以将大肠杆菌和芽孢杆菌等微生物进行改造,使其能够产生有机肥料。
这种基因工程菌肥具备了多种生物活性成分,能够显著提高作物的抗性和生产效率,是一种新型的生物肥料。
综上所述,基因工程技术在微生物学中的应用非常广泛。
基因克隆技术、基因编辑技术、基因组学技术、基因工程杀虫剂和基因工程菌肥等都是基因工程技术在微生物学领域中的重要应用。
这些技术的应用不仅为微生物研究提供了新契机,也为人类的生活和环境保护作出了贡献。
微生物与基因工程微生物与基因工程是当今科学领域中备受瞩目的研究方向。
微生物作为一类微小生物体,具有广泛的分布和多样的功能,对人类的生活和自然界的生态系统起着重要的作用。
而基因工程则是通过改变生物体的遗传信息,以实现对其性状和功能的精确控制和改良。
本文将对微生物与基因工程之间的紧密联系以及它们在生物科技领域的应用进行探讨。
第一部分:微生物的概述微生物是一类非常广泛的生物体,主要包括细菌、真菌、病毒等,其特点是体积小、繁殖能力强、生活环境广泛。
微生物在自然界中广泛存在,在空气、水、土壤、外界物体等各个环境中都可以找到微生物的身影。
微生物对人类的生活产生了巨大的影响,比如某些细菌可以分解有机物质,参与土壤肥力的维持;真菌在食品工业中被广泛应用,用于食品的发酵和保鲜等。
第二部分:微生物与基因工程的联系微生物是基因工程研究的重要对象之一,它们具有以下几个方面的优势:1. 繁殖能力强:微生物的繁殖速度非常快,可以在短时间内获得大量的微生物种群,为基因工程实验提供了便利条件;2. 遗传信息简单:相对于高等生物,微生物的基因组结构相对简单,研究人员可以更容易地对其基因进行操作和改变;3. 可操作性好:微生物的生长条件可以比较容易地进行控制,通过改变培养基中的成分或温度、pH等环境因素,可以实现对微生物生长的精确控制;4. 改良潜力大:由于微生物的基因信息相对简单,研究人员可以利用基因工程技术,对微生物的性状和功能进行精确改良,以实现人类的特定需求。
第三部分:基因工程在微生物中的应用基因工程技术在微生物研究和应用中具有广泛的应用场景,具体包括以下几个方面:1. 转基因微生物的应用:通过导入外源基因,可以让微生物具备特定的生物合成或代谢功能,比如利用大肠杆菌表达外源蛋白,用于生产重组蛋白;2. 微生物基因组学研究:通过对微生物基因组进行测序和分析,可以揭示微生物种类、功能和进化等方面的信息,为微生物学研究提供基础数据;3. 微生物制药和生物工程:利用微生物进行药物、酶和化学品的生产,比如利用酵母菌进行乳酸和酒精的发酵;4. 环境修复和生态恢复:微生物在环境修复和生态恢复中发挥重要作用,比如利用微生物降解污染物,净化水体和土壤。
基因工程技术在微生物应用中的发展随着科学技术的不断进步,基因工程技术在微生物应用中扮演着越来越重要的角色。
实际上,这项技术在生物工程领域发挥了重要的作用,可以被用来改变微生物生长、代谢和生物合成过程。
在本文中,我们将讨论该技术如何用于微生物的应用,其发展趋势以及这些技术的未来前景。
1. 基因工程技术在微生物中的应用基因工程技术是一种能够使人类改变生命系统基因拼接方式的技术。
在微生物应用领域,该技术的应用最为广泛,主要作用在于改变微生物的生物合成过程和代谢通路,甚至改变其生长模式。
比如,某种微生物本身不擅长生产某种物质,但是通过基因工程技术可以实现该目标。
基因工程技术在微生物应用中的主要优势是,它可以帮助微生物生产各种有用的化合物,并使得这些活细胞更容易存储,运输,甚至加工。
此外,该技术还可以提高微生物对蓝藻、水藻和植物等生物的生物降解能力,从而对环境有更大的纠正作用。
2. 基因工程技术在微生物应用中的发展趋势随着基因工程技术的不断发展,它在微生物应用领域的发展也变得更为明显和多面。
尤其是基因测序技术的发展以及生物信息学技术的兴起,为基因工程技术在微生物应用中创造了更多的可能性。
这些技术允许我们更好地了解微生物基因组的序列,并可以对其进行完整、精确地预测,这对于微生物基因组改造以及大规模的代谢工程具有重大的意义。
除此之外,大规模的代谢工程、基础科研、生物材料学和合成生物学等方面的进步也为微生物应用领域的基因工程技术带来了新的可能性。
例如,在合成生物学领域中,基因工程技术可以充分利用生物发酵过程代谢内部相互作用,并通过对基因组重组、网络重建和催化功能修饰等技术实现生物材料制造。
3. 基因工程技术在微生物应用中的未来前景尽管基因工程技术在微生物应用领域已经取得了显著的进步,但它的应用范围和未来前景仍然远远没有达到极限。
未来,在传统的食品、制药和生物能源等行业以及新兴的纳米材料和农业领域,利用基因工程技术改造微生物进行生产将成为科技创新和进一步绿色环保的关键。
基因工程技术在微生物学研究中的应用实践简介:微生物学是研究微生物的结构、生理功能、生命周期及其应用的学科,也是现代生物学的重要组成部分。
随着基因工程技术的发展,它在微生物学研究中的应用越来越广泛。
本文将介绍基因工程技术在微生物学研究中的主要应用实践,包括基因克隆、基因表达、基因静默以及基因组编辑等方面。
一、基因克隆基因克隆是基因工程技术的核心内容之一。
通过基因克隆技术,研究者可以将感兴趣的基因从一个个体中提取出来,并在另外一个个体中进行表达,从而实现基因的功能研究。
在微生物学研究中,基因克隆可以用于分离、纯化和扩增微生物中的特定基因。
例如,通过基因克隆技术,研究者可以将产生重要酶类的基因从微生物中提取出来,并在其他微生物中进行表达,以实现大规模酶的生产。
二、基因表达基因表达是指基因通过转录和翻译等过程将其遗传信息转化为功能蛋白质的过程。
基因工程技术可以对微生物进行基因表达的调控和优化。
通过构建适合微生物的表达载体,将感兴趣的基因导入微生物中,可以使微生物高效地表达目标蛋白质。
这对于生物药物的生产具有重要意义。
另外,通过基因工程技术,还可以在微生物中进行异源蛋白质表达,从而实现对该蛋白质功能的研究。
三、基因静默基因静默是指通过不改变基因序列的方式,使基因表达水平降低或完全抑制的过程。
基因静默技术在微生物学研究中有着广泛的应用。
例如,通过RNA干扰技术,研究者可以选择性地静默微生物中的某些基因,从而实现对该基因的功能分析。
除此之外,基因静默技术还可以应用于微生物中一些有害基因的抑制,从而实现对微生物的病原性调控。
四、基因组编辑基因组编辑是指通过人为方式对微生物的基因组进行修饰和改造的过程。
近年来,CRISPR-Cas9技术的发展使得基因组编辑在微生物学研究中得到广泛应用。
利用CRISPR-Cas9技术,研究者可以针对微生物中特定的基因进行精准编辑,例如删除、插入、修复或替换基因序列。
这些基因组编辑技术为微生物基因功能的研究提供了强大的工具。
微生物在基因工程中的应用教学目标:●知识目标?1.举例讲出基因工程应用领域及获得的丰硕成果。
?2.关注基因工程的进展。
??●能力目标?通过引导学生网上探究,引导学生主动参与,培养收集处理信息的能力、分析和解决问题的能力及交流与合作的能力。
?●情感目标?培养理论联系实际的良好学风,培养爱国主义热情。
?2.关注科学与社会。
教学重难点:重点:基因工程在农业和医疗等方面的应用;难点:基因治疗课前预习学案学点一、植物基因工程硕果累累植物基因工程技术主要用于提高农作物的能力,以及改良农作物的和利用植物生产等方面。
1.抗虫转基因植物(1)方法:从某些生物中分离出具有,将其导入作物中,使其具有抗虫性。
(2)杀虫基因种类:基因、抑制剂基因、抑制剂基因、植物凝集素基因等。
(3)成果:抗虫植物:棉、玉米、马铃薯、番茄等。
(4)意义:增加对的采用,降低生产成本,增加环境污染,减少了对人体身心健康的侵害。
2.抗病转基因植物(1)植物的病原微生物:、真菌和细菌等。
(2)抗病基因种类①抗病毒基因:病毒____ _____基因和病毒激活酶基因。
②抗真菌基因:____ ___酶基因和抗毒素合成基因。
③成果:抗炎烟草花叶病毒的转基因烟草和抗病毒的转基因小麦、甜椒、番茄等。
3.抗逆转基因植物(1)抗御基因:调节细胞_____ ___的基因,并使作物抗炎盐碱、抗炎旱情;鱼的抗冻蛋白基因并使作物耐旱;抗炎除草剂基因,并使作物抗炎除草剂。
(2)成果:烟草、大豆、番茄、玉米等。
4.转基因改进植物品质(1)优良基因:必需______ ______的蛋白质编码基因、控制番茄果实成熟的基因和植物花青素代谢有关的基因。
(2)成果:转基因玉米、转基因延熟番茄和转基因矮牵牛。
学点二、动物基因工程前景广阔1.用作提升动物生长速度:由于外源基因的抒发可以并使转基因动物生长得更快,将这类基因引入动物体内,以提升动物的生长速率。
例如:转基因绵羊和转基因鲤鱼。
2.用于改善畜产品的品质:如:有些人对牛奶中的乳糖不能完全消化或食用后会出现过敏、腹泻、恶心等不适症状,科学家将基因导入奶牛基因组,这样所获得的牛奶其成分不受影响,但乳糖的含量大大减低。
微生物与基因编辑微生物在基因工程中的应用基因工程是一门利用生物学、遗传学等相关知识手段,对生物体的基因进行重组和编辑,达到改良和优化生物体性状的技术。
而微生物作为生物体的一种重要组成部分,其在基因工程中具有不可替代的作用。
本文将介绍微生物及其在基因工程中的应用,以及基因编辑微生物的现状和发展趋势。
一、微生物的特点及其在基因工程中的应用微生物是指肉眼无法看到的微小生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
微生物具有以下几个特点:繁殖速度快、适应性强、多样性高、基因组简单等。
这些特点使得微生物成为了基因工程的理想对象。
1.1 微生物的繁殖速度快微生物的繁殖速度非常快,可以在短时间内大量繁殖。
这为基因工程中的基因重组和编辑提供了便利,可以迅速得到大量表达目的基因的微生物种群。
1.2 微生物的适应性强微生物对环境的适应能力很强,可以生存于各种极端环境中,如高温、低温、高盐等,这使得微生物在基因工程中可以用于生产耐盐、耐酸、耐高温等产品。
1.3 微生物的多样性高微生物的多样性非常高,不同类型的微生物具有不同的特性和功能。
通过基因工程技术,可以将某些微生物的有益特性引入到其他微生物中,从而获得更多的应用。
1.4 微生物的基因组简单相比于高等生物的基因组复杂性,微生物的基因组相对较简单。
这为基因编辑和重组提供了更大的操作空间和便利。
基于以上特点,微生物在基因工程中有广泛的应用。
例如,利用微生物进行基因重组可以生产大量重要蛋白质,如胰岛素、乳酸菌等。
此外,微生物还可用于制备多种有益产品,如食品添加剂、生物农药和生物能源等。
二、微生物的基因编辑及其应用现状随着基因工程技术的发展,基因编辑方法也得到了显著的提升。
原始的基因编辑方法如基因敲除、基因替换等,已经逐渐演变为更精准、高效的基因编辑技术,如CRISPR-Cas9系统。
2.1 基因敲除基因敲除是一种最早的基因编辑方法,通过引入外源DNA片段或利用同源重组原理,使目标基因发生突变或失活。
基因工程在微生物学中的应用基因工程是一门应用生物学科学,通过技术手段对生物体的基因进行修改和调控,以达到改良个体性状或者生产特定产物的目的。
在微生物学领域,基因工程技术得到了广泛的应用,为微生物资源开发、生物农药生产、发酵工程和环境修复等提供了新的途径和手段。
本文将主要介绍基因工程在微生物学中的应用及其意义。
一、基因工程在微生物资源开发中的应用微生物资源是指从自然界中分离出来的具有一定功能的微生物,在微生物资源开发中,基因工程技术起到了关键的作用。
通过基因工程技术,科学家可以将感兴趣的基因导入到目标微生物中,使其具备新的特性或功能。
例如,利用基因工程技术,科学家们成功将抗生素耐药基因导入到某些微生物中,使其能够在抗生素环境中生存下来,为抗生素研究提供了重要的材料。
二、基因工程在微生物农药生产中的应用微生物农药是利用微生物代谢产生的活性物质对害虫进行控制的一种绿色环保农药。
基因工程技术在微生物农药生产中的应用主要是对微生物进行基因组改造,增加或突变其产生活性物质的能力。
例如,利用基因工程技术,科学家可以通过插入特定基因,使微生物具备合成特定农药的能力,从而提高生产效率,减少生产成本,实现农药生产的可持续发展。
三、基因工程在微生物发酵工程中的应用微生物发酵工程是一种利用微生物进行产物发酵的工艺,广泛应用于生物药品、食品添加剂、酒精等生产中。
基因工程技术在微生物发酵工程中的应用主要是通过修饰微生物的代谢通路,提高产物的产量和纯度。
例如,利用基因工程技术,科学家可以通过改造微生物的代谢通路,使其产生更多的目标产物,或者产生纯度更高的产物,从而提高产品的质量和市场竞争力。
四、基因工程在微生物环境修复中的应用微生物环境修复是一种利用微生物降解污染物的方法,可以有效地治理水体、土壤等环境中存在的有机污染物。
基因工程技术在微生物环境修复中的应用主要是通过修饰微生物的降解基因,提高其对污染物的降解能力。
例如,利用基因工程技术,科学家可以将某些降解基因导入到微生物中,使其具备降解某一特定污染物的能力,从而对环境进行修复和保护。
微生物在基因工程中的应用作者:张子旭来源:《知识文库》2018年第16期微生物与我们的生活息息相关,在我们的生活中占有的非常重要的地位。
微生物在当下生物技术及生物工程中均起到了至关重要的作用。
本文将重点阐述微生物在基因工程中的应用及在当下基因工程对人类发展的影响。
1前言微生物(microorganism)通常是各种的微小生物的统称,其特征为结构简单、肉眼难以观察、繁殖速度极快、分布广泛、数量极多等。
其包括细菌、真菌、放线菌、蓝细菌、古生菌、原生生物在内的一大类细胞生物群体以及病毒和亚病毒等非细胞生物群体。
在基因工程、细胞工程、发酵工程等生物工程中,微生物都充当着重要的角色。
本文将从微生物在基因工程中的作用、微生物在基因工程中的实际应用以及基因工程在生活中应用及影响几个方面进行阐述。
2微生物与基因工程2.1基因工程简介基因工程(genetic engineering)又称遗传工程,是通指重组DNA技术的产业化设计与应用的流程,强调了按照工程学的方法进行设计和操作外源DNA,构建新的分子组合,并导入到另一受体生物中。
基因工程的出现标志着人类已经能够按照自己意愿进行各种基因操作,并且能迅速的获得人类所需的新生物类型,最终实现目标蛋白质的工程化生产以及物种的遗传改良。
2.2 微生物与基因工程的关系微生物在基因工程中的作用有如下几个方面:基因工程的大部分步骤都需要各种不同的工具酶,如在大肠杆菌中,我们通过分离纯化的方式获得了EcoRI,EcoRII[1]等常用的内切酶,为基因工程提供了便利。
②基因工程常用克隆载体为质粒载体、酵母表达载体、噬菌体表达载体等。
这些均是从病毒、噬菌体、酵母、细菌获得。
③微生物细胞是基因工程的载体及表达系统,即使对于动、植物基因工程来说,也先要利用微生物细胞将目的基因导入其中进行拼接,构建表达载体,再转移到动植物细胞中,完成之后的基因工程步骤。
④由于微生物大量存在于土壤、水体和人体表面。
基因工程与微生物基因工程(genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。
一、基因工程的概况基因工程是生物工程的一个重要分支,它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。
所谓基因工程(genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。
是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。
它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达,从而获得新物种的一种崭新技术。
它克服了远缘杂交的不亲和障碍。
1974年,波兰遗传学家斯吉巴尔斯基(Waclaw Szybalski)称基因重组技术为合成生物学概念,1978年,诺贝尔生医奖颁给发现DNA 限制酶的纳森斯(Daniel Nathans)、亚伯(Werner Arber)与史密斯(Hamilton Smith)时,斯吉巴尔斯基在《基因》期刊中写道:限制酶将带领我们进入合成生物学的新时代。
2000年,国际上重新提出合成生物学概念,并定义为基于系统生物学原理的基因工程二、基因工程的基本步骤(1)提取目的基因获取目的基因是实施基因工程的第一步。
如植物的抗病(抗病毒抗细菌)基因,种子的贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因干扰素基因等,都是目的基因。
要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因,是十分不易的。
科学家们经过不懈地探索,想出了许多办法,其中主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。
直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。
鸟枪法的具体做法是:用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞提供的DNA(即外源DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。
如许多抗虫抗病毒的基因都可以用上述方法获得。
用鸟枪法获得目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性。
又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段,一般使用人工合成的方法。
目前人工合成基因的方法主要有两条。
一条途径是以目的基因转录成的信使RNA 为模版,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需要的基因。
另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的信使RNA序列,然后按照碱基互补配对的原则,推测出它的基因的核苷酸序列,再通过化学方法,以单核苷酸为原料合成目的基因。
如人的血红蛋白基因胰岛素基因等就可以通过人工合成基因的方法获得。
(2)目的基因与运载体结合基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。
将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。
如果以质粒作为运载体,首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。
然后用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端(部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。
将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处,首先碱基互补配对结合,两个黏性末端吻合在一起,碱基之间形成氢键,再加入适量DNA连接酶,催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键,从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来,形成一个重组DNA分子。
如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合,形成重组DNA分子(也叫重组质粒)的。
(3)将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。
目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后,下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。
基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌,枯草杆菌,土壤农杆菌,酵母菌和动植物细胞等。
用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。
例如,如果运载体是质粒,受体细胞是细菌,一般是将细菌用氯化钙处理,以增大细菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。
目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。
(4)目的基因的检测和表达目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。
这是基因工程的第四步工作。
以上步骤完成后,在全部的受体细胞中,真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。
因此,必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。
检测的方法有很多种,例如,大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。
重组DNA分子进入受体细胞后,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程。
三、微生物学与基因工程的关系微生物和微生物学在基因工程的产生和发展中占据了十分重要的地位,可以说一切基因工程操作都离不开微生物。
从以下六个方面可以说明:①基因工程所用克隆载体主要是用病毒、噬菌体和质粒改造而成;②基因工程所用千余种工具酶绝大多数是从微生物中分离纯化得到的;③微生物细胞是基因克隆的宿主,即使植物基因工程和动物基因工程也要先构建穿梭载体,使外源基因或重组体DNA在大肠杆菌中得到克隆并进行拼接和改造,才能再转移到植物和动物细胞中;④为大规模表达各种基因产物,从事商品化生产,通常都是将外源基因表达载体导入大肠杆菌或是酵母菌中以构建成工程菌,利用工厂发酵来实现的;⑤微生物的多样性,尤其是抗高温、高盐、高碱、低温等基因,为基因工程提供了极其丰富而独特的基因资源;⑥有关基因结构、性质和表达调控的理论主要也是来自对微生物的研究中取得的,或者是将动、植物基因转移到微生物中后进行研究而取得的,因此微生物学不仅为基因工程提供了操作技术,同时也提供了理论指导。
五、微生物与克隆载体外源DNA片段进行克隆,需要一个合适的载体,将其运送到细胞中并进行复制和扩增。
这种以扩增外源DNA为目的的载体,称为克隆载体(cloning vector) 。
(1)克隆载体的要求。
①能够进行独立自主复制;②具有若干限制酶的单一切割位点;③具有可供选择的遗传标记;④载体DNA易于生长和操作。
(2)微生物作为克隆载体的宿主。
对于克隆基因而讲,一个理想宿主的基本要求是:①能够高效吸收外源DNA。
②具有使外源DNA进行高效复制的酶系统。
③不具有限制修饰系统。
④不具有DNA重组系统,常用重组缺陷型菌株,是克隆载体DNA与宿主染色体DNA之间不发生同源重组。
⑤便于进行基因操作和筛选。
⑥具有安全性。
(3)载体的类型:质粒载体;λ噬菌体载体;柯斯质粒载体;M13噬菌体载体;真核细胞的克隆载体。
六、基因工程在微生物研究中的应用基因工程技术作为微生物学研究的重要手段,有力促进了微生物学基础理论研究的发展。
分子克隆和构建工程菌对了解微生物的结构与功能、微生物生理与代谢调节以及微生物生态等基本过程,提供了最好方式。
通过分子克隆、限制内切酶图谱以及DNA测序等技术,使遗传学家能够快速绘制并研究微生物的基因组。
利用克隆基因进行定位诱变、基因分裂(gene disruption)或敲除突变(knockout mutations),并使这些突变基因导入到微生物染色体中,有助于对突变微生物进行的研究。
基因工程技术使科学家能够给某个基因贴上"标签"(tag),以便于对该基因进行研究。
例如编码β-半乳糖苷酶的基因通常被用于作为一个报导基因,它的酶活性可通过含呈色物质的指示平板而被检测。
另一个例子是,将发光细菌(photobacterium)的细菌荧光素酶或者发光甲虫(beetles)的虫萤光素酶(luciferase)基因导入E.coli。
当这些基因表达时,在琼脂平板上人们可以发现E.coli工程菌的发光菌落。
测定荧光素酶需要加入ATP和荧光素。
最近从一种维多利亚水母(Aequorea victoria)分离并克隆了编码绿色萤光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的基因,GFP不需要辅助因子,在许多生物学研究中已被用作为报导者或"标签"。
七、基因工程研究展望基因工程的兴起导致生物科学发生深刻的变化,主要表现在:第一,引发了生物科学中技术上的创新和迅猛发展。
使传统生物技术,发展成以基因重组技术为核心的现代生物技术,即简称为生物技术。
生物技术用于工程实践而形成了各类生物工程,主要包括基因工程、酶工程、细胞工程、发酵工程和生化工程等,其中以基因工程发展最快,应用最广。
第二,技术上的重大突破,促使生物科学获得前所末有的高速度发展,开辟了新的研究领域,进入了新的研究深度。
发育分子生物学、神经分子生物学、分子细胞学、分子生理学、分子进化学等学科领域的蓬勃发展。
第三,为改造生物提供强有力的手段,使生物学进入创造性的新时期。
从而使得在分子水平上重新设计、改造和创建新的生物形态和新的生物物种成为可能。
基因工程能够带来的好处是十分巨大的。
以上叙述仅涉及制药、农业和医学领域的某些方面。
其实,基因工程的应用范围要广泛得多,在食品、化工、环保、采矿、冶炼、材料、能源等众多领域都有诱人的开发前景。
它将在人类实践中发挥更大作用和贡献。
当然,它也和其它所有新生事物一样,在它给人们带来巨大利益的同时也面临着严峻的挑战。
基因工程与传统生物技术的最根本的区别就在于前者是在基因水平上进行操作,改变已有的基因甚至创造新的物种,这是一项前无古人的崭新的工作。
因此,基因工程是否具有潜在的危害性,特别是转移至人体的基因是否会激活原癌基因,基因工程是否会导致出现新型病原生物等问题必然也成为人们关心和争议的焦点,也是当前的研究热点之一。
但有一点可以肯定,人们既然能发明一种新技术,必然也将会有能力掌握这门新技术,使它朝着人类进步的方向发展。