血浆游离血红蛋白检测操作规程
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血液功能检查的操作流程及评分标准摘要本文旨在介绍血液功能检查的操作流程及评分标准,以帮助医务人员正确执行该检查并准确评估患者的血液功能状态。
1. 引言血液功能检查是一种常用的医学检查方法,用于评估患者的血液相关功能,包括血细胞计数、凝血功能、血红蛋白含量等。
本文将介绍血液功能检查的操作流程及评分标准。
2. 操作流程血液功能检查的操作流程包括以下步骤:步骤一:准备工作1. 确保检查设备完好并处于正常工作状态。
2. 根据需要准备相关试剂和标本。
3. 获取患者的个人信息和病史。
步骤二:准备患者1. 向患者解释检查目的和过程,并征得其同意。
2. 让患者坐或卧于检查位置,以便进行检查。
步骤三:采样1. 使用无菌技术采集患者的血液样本。
2. 根据需要采集全血、血浆或血清样本。
步骤四:检测1. 将采集的血液样本送至实验室进行检测。
2. 根据需要,使用自动化检测设备或手动操作进行相关检测。
步骤五:记录结果1. 将检测结果记录在患者的病历中。
2. 根据需要,进行数据分析和结果解释。
3. 评分标准血液功能检查的评分标准用于评估患者的血液功能状态,常见的评分标准包括以下几个方面:血细胞计数根据血细胞计数结果来评估患者的血细胞数量是否正常,常用的评分标准有正常、偏低和偏高三个等级。
凝血功能根据凝血功能检查结果来评估患者的凝血能力,常用的评分标准有正常、延长和缩短三个等级。
血红蛋白含量根据血红蛋白含量检查结果来评估患者的贫血程度,常用的评分标准有正常、轻度贫血、中度贫血和重度贫血四个等级。
4. 结论血液功能检查是一项重要的医学检查方法,本文介绍了其操作流程及评分标准。
医务人员应根据操作流程规范执行该检查,并根据评分标准准确评估患者的血液功能状态。
血液检验操作规程有哪些血液检验操作规程血液检验是临床诊断和治疗过程中必不可少的一环,合理的操作规程是确保结果准确性和患者安全性的关键。
下面是对血液检验操作规程的详细介绍,包括样本采集、标本处理、仪器操作、结果判读等方面。
一、样本采集1.准备工作:清洁工作台,确保无杂物,清洁抽屉中备有所需常用耗材和试剂。
2.选择合适的采血部位:通常使用的部位有指腹、耳垂、前臂等,根据检验项目选择合适的采血部位。
3.消毒:采用75%酒精和碘伏等消毒剂进行消毒,保持清洁。
4.采血:使用适量的血管针或浅表血管封闭器,按照技术要求进行采集,避免污染或改变血液成分。
5.采集管选择:根据检验项目选择合适的采集管,保证标本的安全和准确性。
6.采集量:根据实际需要及检验项目的要求采用适量的标本,保证结果的准确性。
7.采集后处理:密封采集管,轻轻摇匀,以充分混合抗凝剂或促凝剂等。
二、标本处理1.离心:对于全血样本,需离心分离血浆和红细胞,避免含有红细胞的血浆影响结果。
2.标本保存:按照项目要求及标本特性选择合适的保存方式,例如冷藏、冷冻或常温保存,注意避免污染或变质。
3.标本传递:严格按照标本保存和转运的规范进行传递,保证标本的安全性和可追溯性。
4.标本处理记录:记录标本的接收、固定、采集时间等信息,便于追溯和结果解读。
三、仪器操作1.仪器准备:根据需要进行仪器的开机、预热、校准、质控等准备工作,确保仪器处于正常工作状态。
2.样品装载:按照仪器要求,将标本放入仪器中进行测试,注意避免杂质或污染对结果的干扰。
3.仪器操作:根据仪器的操作流程和技术要求进行正确操作,确保测试结果的准确性。
4.质控处理:每天开始使用仪器前进行质控检测,校正仪器误差,保证结果的准确性。
5.仪器维护:定期进行仪器的维护和保养工作,确保仪器的长期稳定性和准确性。
四、结果判读1.结果记录:仪器出结果后及时记录,注意标注检测项目、日期和患者信息等,便于结果的快速、准确解读和追溯。
血浆游离血红蛋白测定试剂盒说明书(Trinder 法)【产品名称】血浆游离血红蛋白测定试剂盒 【包装规格】R1 100m l ×1 R2 100m l ×1 R3 10m l ×1 血红蛋白标准液 2.00ml ×1 【预期用途】本试剂用于体外在生化分析仪或分光光度计上测定血浆中游离血红蛋白。
【检测原理】血管内溶血时,血浆游离血红蛋白浓度增高。
血红蛋白中亚铁血红素有类似过氧化酶的作用,过氧化氢经过血红蛋白中亚铁血红素催化TBHBA 与4-氨基安替比林生成红色醌亚胺色素,吸收峰为505nm 。
根据显色深度,可测出血浆游离血红蛋白的含量。
【主要组成成份】 R1 TBHBA 稳定剂 R2 4-氨基安替比林 R3 过氧化氢血红蛋白标准液 100 mg/L 【储存条件及有效期】 1. 储存条件 试剂在2-8℃保存 2. 有效期 自生产日期起有效期6个月 【适用仪器】生化分析仪:F-6124;4040; 5010, 分光光度计 【样本要求】血浆 应注意采样及分离血浆过程不得发生溶血 【检验方法 (按表操作) 】 表 操作步骤测定管 标准管 空白管 血浆 (ml) 0.10 - - Hb 标准液 (ml) - 0.10 - 生理盐水 (ml) - - 0.10 R1 (ml) 1.00 1.00 1.00 R2 (ml) 1.00 1.00 1.00 R3 (ml)0.100.100.10混匀,37℃反应20分钟,于生化分析仪或分光光度计上测定,光径10mm ,波长505nm ,空白管调零比色。
计算:标准管吸光度测定管吸光度×100=血浆游离血红蛋白 ( mg/L)【参考值范围】 小于 40 mg/L 【检验结果的解释】血浆游离血红蛋白增加是血管内溶血白的指标,当血管溶血释放的血红蛋白量超过结合珠蛋白所能结合的量时,血浆中游离血红蛋白升高。
多见于较严重的血管内溶血,如阵发性睡眠性血红蛋白尿溶血性输血反应,阵发性寒冷性血红蛋白尿,行军性血红蛋白尿,运动性血红蛋白尿以及各种微血管病性溶血性贫血和一些机械损伤,如体外循环血管内溶血时血浆游离血红蛋白的浓度可达60mg/L ,阵发睡眠性血红蛋白尿可达200-2500mg/L ,血型不合输血可达150-5000mg/L 。
血浆游离血红蛋白测定[原理]血红蛋白中亚铁血红素具有类似过氧化物酶的作用,使联苯胺(或邻甲苯胺)氧化,在醋酸溶液中变成绿色、黄色,紫红色。
当血管内溶血时,血浆游离血红蛋白可明显增高。
[试剂](1)联苯胺(或邻甲苯胺)0.1g,加冰醋酸2ml,加蒸馏水3ml,溶解后加95%乙醇至10ml置于4℃冰箱内保存可用1-2周。
(2)取30%H2O2 0.5ml,加蒸馏水14.5ml(新鲜配制)。
(3)10%(v/v)醋酸溶液。
(4)Hb标准液,即用HiCN法精确测得Hb含量,然后配成100mg/L的Hb水溶液.[操作]取大试管(容量为30—50m1)3、支,依次加入下列各液见表(1—3—5)。
表1-3-5 血浆游离血红蛋白测定用波长515nm比色,以空白调零,读取各管吸光度。
[计算]游离血红蛋白(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100。
[参考值]正常人血浆游离血红蛋白<100mg/L(10mg/dl)。
换算系数:mg/L=mg/d1×10编写:孙利制定日期:2011.12.1[临床意义]血管内溶血性贫血、PNH及输不合型的血液后均明显增高,尤其后者可高达5000mg/L以上。
[附注](1)本法系测定细胞溶解,抽血后分离过程应特别注意红细胞破坏而导致结果升高。
(2)显色受温度干扰,要严格遵守测定条件,注意标准管与测定管的比色时间。
(3)由于灵敏度较高,当肉眼见到溶血现象时,标本就应稀释,必要时同时应作1管稀释5倍标本。
(4)因联苯胺具有毒性;测定时可用邻甲苯胶或四甲基联苯胺替代。
(5)纯品联苯胺为无色结晶,纯度不好但可提纯。
联苯胺10g溶于 lmol儿HCl 200ml中,加活性炭1—2g,用力振摇(可稍加热)后过滤,滤液一般无色,否则继续再振摇1—2分钟后,向滤液中加入浓HCl 30ml,混匀置于冰箱过夜即可见大量白色结晶析出,用滤纸过滤后,再用乙醇—乙醚等量混合液洗涤结晶数次,最后用乙醚洗2次即可。
人游离血红蛋白(F-Hb)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人全血样本中游离血红蛋白(F-Hb)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人游离血红蛋白(F-Hb)水平。
用纯化的人游离血红蛋白(F-Hb)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入游离血红蛋白(F-Hb),再与HRP标记的游离血红蛋白(F-Hb)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的游离血红蛋白(F-Hb)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人游离血红蛋白(F-Hb)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:540μg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
游离血红蛋白检测方法游离血红蛋白(free hemoglobin)指的是血浆中存在的不与红细胞结合的血红蛋白。
正常情况下,游离血红蛋白的浓度很低,但在一些疾病状态下,如贫血、溶血等,会导致血浆中游离血红蛋白的浓度增加。
因此,对游离血红蛋白进行检测对于评估一些疾病的严重程度和治疗方案的制定具有重要意义。
以下是一些常用的游离血红蛋白检测方法:1.光学法检测:光学法是一种简单但有效的游离血红蛋白检测方法。
该方法根据游离血红蛋白具有的特殊吸收光谱特性来测定其浓度。
通过测量在550至600纳米范围内的吸光度,可以推断游离血红蛋白的浓度。
2.分光光度法:分光光度法是一种利用分光光度计来测量游离血红蛋白浓度的方法。
它利用游离血红蛋白在450至700纳米波长范围内的吸收特性,通过测量吸光度来确定其浓度。
3.糖基化血红蛋白方法:糖基化血红蛋白是由于高血糖状态导致血红蛋白分子上发生糖化反应而形成的一种血红蛋白变异物。
检测糖基化血红蛋白可以间接评估血浆中游离血红蛋白的浓度。
目前,一些商业化的糖基化血红蛋白检测试剂盒已经上市,可以通过测量糖基化血红蛋白的浓度来推测游离血红蛋白的水平。
4.凝胶电泳法:凝胶电泳法可以通过将血浆样品电泳分离来检测游离血红蛋白。
在凝胶电泳过程中,血浆样品中的游离血红蛋白会沿电泳槽向阳极迁移,然后通过染色剂染色后可观察到游离血红蛋白的带状图案。
5.高效液相色谱法:高效液相色谱法是一种高灵敏度的游离血红蛋白检测方法。
该方法利用高效液相色谱仪的柱分离功能,根据游离血红蛋白与固定相之间的亲和作用,将游离血红蛋白从血浆样品中分离出来,并通过检测峰面积或峰高来测定其浓度。
除了上述方法,还有一些新兴的游离血红蛋白检测技术正在研究中。
例如,传感器技术结合了生物传感器和游离血红蛋白的特异性反应,可用于快速和准确地检测游离血红蛋白。
此外,质谱分析技术也被用于游离血红蛋白的检测,通过比较样品与标准的质谱图谱来确定游离血红蛋白的浓度。
血液检验操作规程血液检验是一种常见的医学检验方法,通过对血液样本的分析可以了解患者的身体健康状况。
为了确保检验结果的准确性和安全性,进行血液检验时需要遵循一定的操作规程。
以下是血液检验的操作规程,供参考:一、术前准备1.检查器材准备:准备好使用的血液采样管、一次性采血针、无菌棉球、酒精棉球、标本袋、标签等。
2.个人准备:佩戴好手套,保持双手清洁。
3.工作环境准备:保持工作环境的整洁与干净,确保充足的通风。
4.患者准备:告知患者检验的目的和操作过程,取得患者的配合和同意。
二、采集血液样本1.选择采样部位:一般采用手心或者肘部内侧的静脉进行采样。
2.消毒操作:使用75%酒精棉球对采样部位进行消毒,注意消毒时间至少要十五秒。
3.穿刺操作:将一次性采血针插入采样部位的静脉中,注意角度和深浅的控制。
4.填充采血管:将采血管连接到采血针上,成功进入静脉后,血液自动流入采血管中。
5.采集足够血量:根据检验项目的要求,采集足够的血液样本,一般为静脉血5-10ml。
三、标本处理1.标本编号:在标本管上使用无菌笔或标签贴上标本编号,确保标本的唯一性与追溯性。
2.标本保存:轻轻翻转标本管,使血液与抗凝剂充分混合,避免凝结。
有特殊要求的项目(如血细胞分类计数、凝血功能等)需按照相关规定进行标本处理。
3.标本保存温度:按照检验项目的要求,将标本保存在相应的温度下,如室温保存、冷藏或冷冻保存。
四、记录与传送1.记录标本信息:在病人申请单上填写清楚标本信息,包括患者的基本信息、采样时间等。
2.记录操作过程:记录血液检验的操作过程、采血量、抗凝剂类型等信息。
3.传送标本:按照规定的方式将标本送往检验科室,遇到需要特殊处理或迅速检测的标本,及时与检验科协调处理。
五、操作注意事项1.严格遵守无菌操作规范,避免污染标本。
2.穿刺时注意穿刺角度和深度,避免伤及神经、动脉等重要结构。
3.采血过程中尽量减少患者的疼痛和不适感。
4.在操作过程中确保采样集中,避免因各种原因导致标本的浓度变化。
血浆游离DNA提取标准操作规程1.目的:制定DNA提取标准操作规程,使尽可能多提取到血浆游离DNA。
2.适用范围:血浆提取。
3.术语及定义:无。
4.职责:4.1 文件编写:高通量实验室技术员。
4.2 文件审核:高通量实验室组长。
4.3 文件审批:实验室主任。
4.4 执行:高通量实验室的所有工作人员。
5.操作规程:5.1准备工作5.1.1紫外杀菌:打开超净工作台内的紫外灯,杀菌30 min,关闭紫外灯,打开抽风机,通风10 min。
5.1.2实验前准备:通风结束后,根据《实验室安全防护规程》中的相关规定,换好洁净服、洁净帽、防护镜等进入实验室;将恒温金属浴打开至56℃,将恒温水浴锅打开至60℃。
5.1.3准备物品:准备1.5 mL及2.0 mL的EP管,50mL离心管,96孔双面板,1000μL、200μL、100μL、20μL、和10μL移液枪和枪头,游离核酸提取试剂盒(离心柱法)。
5.1.4试剂准备及配制:5.1.4.1无水乙醇,异丙醇。
5.1.4.2每管Carrier RNA(干粉)中各加入1550μL的洗脱液(A VE),充分混匀,溶解。
-20℃保存(Carrier RNA为白色或半透明物质,请确保其完全溶解;反复冻融不可超过三次,可分装保存避免反复冻融)。
5.1.4.3每瓶AW1加入25mL的无水乙醇,并在管盖及瓶身打勾,室温保存。
5.1.4.4每瓶AW2加入30mL的无水乙醇,并在管盖及瓶身打勾,室温保存。
5.1.4.5每瓶ACB加入200mL的异丙醇,并在管盖及瓶身打勾,室温保存。
5.1.4.6 Buffer AL与Carrier RNA进行混合,配制成裂解工作液(现配现用)5.1.5真空泵准备依次将Luer slot of the QIAvac 24 Plus (closed with luer plug)、开关阀、连接器、吸附柱、扩展管装到真空泵底座上(装紧以防止漏气)。
5.2 DNA提取流程5.2.1在50mL的离心管内加入100μL的蛋白酶K。
血红蛋白测定(Hb)标准操作程序-检验小胖的日志-网易博客血红蛋白测定(Hb)标准操作程序血液检验SOP 2009-12-08 19:41:15 阅读200 评论1 字号:大中小订阅一.目的:规范血红蛋白测定标准操作二.适用范围:适用于测定血红蛋白三.支持性文件:全国临床检验操作规程第三版四.原理:氰化高铁血红蛋白(HiCN)法五.仪器:722s分光光度计六.试剂:HiCN试剂的配法:氰化钾 50mg高铁氰化钾 200mg无水磷酸二氢钾 140mgTriton X-100 1.0ml蒸馏水加至1000ml 纠正pH至7.0~7.4七.样本要求:静脉采血使用EDTA-K2抗凝。
毛细血管采血应擦去第一滴血,以免混入组织液影响结果。
标本采集完成放置5-10分钟后测定。
八.操作步骤:1.取全血20ul,加到5ml HiCN试剂中。
充分混匀,静置5min。
2.分光光度计(常规测定时带宽应小于6nm),波长540nm处,光径(比色杯内径) 1.0cm,以HiCN试剂调零,测定吸光度(A)。
查标准曲线求血红蛋白的含量。
血红蛋白(g/L)=测定管吸光度X64458*251/44000=测定管吸光度X367.7式中:①64458是目前国际公认的血红蛋白平均分子量。
②44000是1965年国际血液学标准化委员会(1CSH)公布的血红蛋白摩尔吸光度。
③251是稀释倍数。
3、标准曲线的制备:将市售的氰化高铁血红蛋白(HiCN)参考液稀释为四种浓度(200g/L,100g/L,50g/L,25g/L)然后以HiCN试剂调零。
分别测定各自在540nm处的吸光度。
以血红蛋白浓度为横坐标其对应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
4.结果输入上海新和中文操作系统打印报告。
九.参考范围:男:120—160g/L (12—16g/d1)女:110~150g/L(11~15g/d1)新生儿:170—200g/L(17—20g/d1)十.注意事项:1.HiCN试剂不能贮存于塑料瓶中,否则会使CN-丢失,测定结果偏低。
1.目的
建立血红蛋白测定的操作步骤,以保证试验的顺利进行和结果的真实可靠。
2.适用范围
适用于血清制品血红蛋白的测定(分光光度计法)
3.职责
检验人员。
4.定义
无
5.引用标准
《中国药典》2015版四部通则3604
6.材料及设备
6.1 751分光光度计
6.21・cm光路的比色杯
6.3蒸偏水
7.流程图
无
8.内容
8. 1. 以蒸储水为空白对照。
8.2使用I-Cm光路的比色杯,直接测定牛血清样品在576nm、623nm及70Onm
波长下的吸光值。
8.3每个样品至少测定2次。
8.4计算平均测定值
8.5 按照下式计算样品中血红蛋白含量:
血红蛋白含量(mg∕d1)=[(A576×115)-(A623×102)-(A700×39.1)]×1Oo
8.6其中;A576、A623、A700是样品在576nm、623nm及70Onm波长下的平均吸光值。
9.注意事项
9.1.严格按照仪器说明书进行操作。
9. 2. 比色杯要保持清洁,定期在盐酸液中进行浸泡。
9.3. 试验完毕将所有物品放归原处。
10.附录及派生记录
10.1. 血红蛋白检测记录F-S0P-Z1004-01
11.相关文件
无
12.修订记录。
血浆游离dna定量测定方法
血浆游离DNA的定量测定方法主要包括以下步骤:
1. 样本采集:采集血液样本,离心分离出血浆,并取一定量的血浆用于后续检测。
2. DNA提取:利用特定的DNA提取试剂盒或吸附柱,从血浆中提取游离DNA。
这一步中,需要选择合适的DNA提取方法,以确保DNA的纯度和回收率。
3. 定量检测:利用荧光定量PCR(聚合酶链式反应)技术或数字PCR技术,对提取出的游离DNA进行定量检测。
这些技术可以根据DNA的浓度和扩
增情况,计算出血浆中游离DNA的含量。
4. 数据分析:对检测结果进行分析,计算出游离DNA的浓度或相对比例,并评估其与疾病或其他指标的相关性。
请注意,以上步骤仅为一般性描述,实际操作中可能因实验条件、仪器设备及试剂等不同而有所差异。
此外,为了确保检测结果的准确性和可靠性,建议在专业实验室进行血浆游离DNA定量测定,并遵循实验室的安全操作规范。
血浆游离血红蛋白检测操作规程1. 目的确保血浆游离血红蛋白检测实验过程准确、规范。
2.适用范围适用于全血及红细胞类血液制品储存末期溶血率的抽样检测过程控制。
3.职责全血及成分血抽样检测岗负责血液制品血浆游离血红蛋白的抽样检测工作。
4. 原理检测原理详见《紫外可见分光光度计操作规程》 .5.设备、材料与试剂5.1 仪器:紫外可见分光光度计、微量移液器、 37℃恒温水浴箱、台式离心机。
5.2 材料: 洁净试管、试管架、一次性吸头、一次性手套。
5.3 试剂:血浆游离血红蛋白检测试剂盒( R1、R2、R3、标准液)。
6.检测环境条件实验室温度 18 ~ 27℃、湿度 30 ~ 70%7.步骤与方法7.1 检测前准备7 . 1 .1 仪器设备准备:执行《紫外可见分光光度计操作规程》 。
7 . 1 .2 试剂准备:检查试剂盒内试剂瓶是否完好、有无渗漏,瓶内试剂有无浑 浊、沉淀、变色及异物,容量是否满足工作需要。
查看批号和有效期,确保在有准备紫外分光光度计预热 30分钟标本处理取不含红细胞血浆分析、报告加样加样完毕, 37℃孵育 20 分钟检测505nm 波长检测效期内使用。
7 . 1 . 3其他物品准备:检查 EP 管、一次性吸管、硬塑试管无破损、变形及污染,整齐摆放于实验台上;用记号笔在 3 支硬塑试管壁上分别标识测“试管”和“标准管”、“空白管”。
7.2 标本处理打开离心机,将容量相近标本试管对称放入离心机转子内,3000r/min,离心5 分钟,吸取上层血浆,将获得的血浆再次离心,吸取不含红细胞的血浆待用。
7.3 检测7.3.1 加样7.3.1.1 用微量移液器按照表 21-1 所示步骤,将试剂和标本分别加入对应的硬塑试管内。
表21-1 血浆游离血红蛋白检测加样步骤测试管标准管空白管1.血浆(μl)2.Hb 标准液(μl)3.生理盐水(μl)4.R1(μl)5.R2(μl)6.R3(μl)100--10001000100-100-10001000100--100100010001007.3.1.2加样完毕,取三支试管帽,将3支试管盖上,手持试管两端,来回颠倒3~5 次,混匀,放于试管架上;打开37℃恒温水浴箱,将试管连同试管架一起放入水浴箱中,孵育 20 分钟。
新生儿血红蛋白测定检查标准操作规程1. 检查目的和范围本操作规程适用于对新生儿进行血红蛋白测定检查,以评估其贫血程度和异常血红蛋白情况。
检查目的是为了早期发现和及时处理血红蛋白相关疾病,在儿童健康管理中起到重要作用。
2. 检查方法和步骤2.1 准备工作- 确保检查设备正常运作,并校准好血红蛋白测定仪器。
- 为新生儿准备采血所需的材料,包括一次性注射器、针头、无菌棉球等。
2.2 采集血样- 在进行采样前,向新生儿家长解释检查过程,并获取同意。
- 选择采集血样的合适部位,一般选择耳垂或足跟。
- 对采血部位进行皮肤消毒,使用一次性注射器快速采血,避免污染。
- 采集足够的血样,确保能够完成后续检测步骤。
2.3 处理血样- 将采集的血样转移到干净的试管中,并轻轻摇匀。
- 确保血样的密封性和完整性,避免外界因素对检测结果的影响。
2.4 进行血红蛋白测定- 根据血红蛋白测定仪器的操作说明,将血样放入仪器中。
- 操作仪器,启动血红蛋白测定过程,并等待结果输出。
- 检查结果应准确、清晰可读,记录下测定值以备后续参考。
3. 结果解读和处理- 根据测定结果,判断新生儿的血红蛋白水平是否正常。
- 若血红蛋白值低于正常参考范围,则需进一步评估贫血原因。
- 针对异常血红蛋白情况,根据具体情况采取相关措施,如进一步检查或治疗。
4. 记录和报告- 将血红蛋白测定结果记录在患者的病历中,并保密存档。
- 如有需要,可向相关医疗机构或家长提供相关报告。
5. 检查注意事项- 在操作过程中,确保采用无菌、消毒的器械和试剂。
- 严格按照操作规程进行操作,避免操作不当。
- 对于不合格或异常测定结果,及时进行复查或验证。
以上是新生儿血红蛋白测定检查标准操作规程的基本内容,希望能对进行该项检查的相关人员提供一定的指导和参考。
在实际操作中,请根据具体要求和实际情况进行调整。
第1篇一、总则为规范血浆站的技术操作,确保血浆质量,保障献血者的健康和用血者的安全,根据《中华人民共和国献血法》、《单采血浆站管理办法》等相关法律法规,特制定本规程。
二、血源管理1. 供血浆者管理:血浆站应对供血浆者进行严格筛选,确保其身体健康,无传染病史。
供血浆者应签署知情同意书,了解献血风险。
2. 健康询问:询问供血浆者近期健康状况,了解有无不适、感染等,如有异常,应暂时拒绝献血。
3. 体检:对供血浆者进行体检,包括血压、心率、体温、血红蛋白等指标检测,确保其身体健康。
4. 血液标本采集及化验:采集供血浆者血液标本,进行血型、RH因子、肝功能、乙肝病毒表面抗原、丙肝抗体等检测。
5. 供血浆者档案管理:建立供血浆者档案,记录其基本信息、体检结果、献血情况等。
6. 特异性免疫:对供血浆者进行疫苗接种,预防疾病传播。
7. 供血浆者服务工作:为供血浆者提供咨询、指导等服务,确保其身心健康。
8. 紧急情况处理:遇到供血浆者出现不良反应等情况,立即采取措施,确保其安全。
9. 疫情报告:发现疫情,及时报告相关部门。
10. 原料血浆检疫期管理:对采集的原料血浆进行检疫,确保无传染病传播风险。
三、实验室技术1. 实验室环境与设施要求:实验室应具备通风、防尘、防污染等条件,配备必要的实验设备。
2. 实验室人员资质要求:实验室人员应具备相应的专业知识和技能,持有相关资格证书。
3. 进入实验室人员(防护)要求:进入实验室人员应穿戴防护服、手套、口罩等,确保实验室环境安全。
4. 实验仪器、设备管理:定期对实验仪器、设备进行校准、维护,确保其正常运行。
5. 检验器具要求:检验器具应清洁、干燥、无污染,定期进行消毒、灭菌。
6. 检测试剂与实验材料的管理:对检测试剂、实验材料进行严格管理,确保其质量。
7. 检验标本的准备与存放:按照规范要求对检验标本进行准备、存放,确保其质量。
8. 检验后的清场及废弃物处理要求:对检验后的场地进行清洁、消毒,废弃物按照规定进行无害化处理。
医院检验中心血浆游离血红蛋白测定操作规程[原理]血红蛋白中亚铁血红素具有类似过氧化物酶的作用,使联苯胺(或邻甲苯胺)氧化,在醋酸溶液中变成绿色、黄色,紫红色。
当血管内溶血时,血浆游离血红蛋白可明显增高。
[试剂](1)联苯胺(或邻甲苯胺)0.1g,加冰醋酸2ml,加蒸馏水3ml,溶解后加95%乙醇至10ml置于4℃冰箱内保存可用1-2周。
(2)取30%H2O2 0.5ml,加蒸馏水14.5ml(新鲜配制)。
(3)10%(v/v)醋酸溶液。
(4)Hb标准液,即用HiCN法精确测得Hb含量,然后配成100mg/L的Hb水溶液.[操作]取大试管(容量为30—50m1)3、支,依次加入下列各液见表(1—3—5)。
表1-3-5 血浆游离血红蛋白测定用波长515nm比色,以空白调零,读取各管吸光度。
[计算]游离血红蛋白(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100。
[参考值]正常人血浆游离血红蛋白<100mg/L(10mg/dl)。
换算系数:mg/L=mg/d1×10[临床意义]血管内溶血性贫血、PNH及输不合型的血液后均明显增高,尤其后者可高达5000mg/L以上。
[附注](1)本法系测定细胞溶解,抽血后分离过程应特别注意红细胞破坏而导致结果升高。
(2)显色受温度干扰,要严格遵守测定条件,注意标准管与测定管的比色时间。
(3)由于灵敏度较高,当肉眼见到溶血现象时,标本就应稀释,必要时同时应作1管稀释5倍标本。
(4)因联苯胺具有毒性;测定时可用邻甲苯胶或四甲基联苯胺替代。
(5)纯品联苯胺为无色结晶,纯度不好但可提纯。
联苯胺10g溶于 lmol儿HCl 200ml中,加活性炭1—2g,用力振摇(可稍加热)后过滤,滤液一般无色,否则继续再振摇1—2分钟后,向滤液中加入浓HCl 30ml,混匀置于冰箱过夜即可见大量白色结晶析出,用滤纸过滤后,再用乙醇—乙醚等量混合液洗涤结晶数次,最后用乙醚洗2次即可。
血浆游离DNA提取方法(BIOG方法)数据操作方法1.取出洗涤液,按以下操作:a) BIODAI-洗涤液A:31.5mL加入13.5mL无水乙醇;63mL加入27mL无水乙醇。
b) BIODAI-洗涤液B:13.5mL加入31.5mL无水乙醇;27mL加入63mL无水乙醇。
c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
2.取15mL离心管,加入1500μL样本,30μL DNA Carrier混合均匀,加入1500μL 裂解液及150μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。
3.加入6000μL无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。
4.将吸附柱放入收集管内,将4590μL上述溶液转入吸附柱内,静置2 分钟,5,000 rpm 离心2分钟,弃收集管内废液;5.将吸附柱放回收集管内,将剩余4590μL溶液转移至吸附柱内,重复步骤5。
6.将吸附柱放回收集管内,加3750μL 洗涤液A至吸附柱内,5,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
7.将吸附柱放回收集管内,加3750μL 洗涤液B至吸附柱内,5,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。
8.将吸附柱放回收集管内,5,000 rpm 离心2 分钟,离去残留的洗涤液。
9.取出吸附柱,放入新的15 mL离心管内,加入250-400μL 洗脱液,静置3 分钟,5,000 rpm离心3 分钟,收集DNA溶液。
提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
如需浓缩核酸,则可继续进行后续步骤。
10.于洗脱液中加入800ul无水乙醇,轻轻颠倒混匀,5,000 rpm 离心5分钟,弃上清。
11.开盖室温放置5min,待乙醇挥发后,加入30-50ul洗脱液溶解核酸。
提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
注意事项:裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。
氯丙嗪两点法测定血浆游离血红蛋白
赵元明;刘晓钟
【期刊名称】《陕西医学检验》
【年(卷),期】1997(012)003
【摘要】用氯丙嗪作色原建立了两点法测定血浆游离血红蛋白的方法,对试剂浓度,反应条件进行了研究,确定了测定参数,在最佳条件下线性可达300mg/L,批内CV:2.1% ̄3.19%,批间CV:3.6% ̄4.2%,回收率96.4% ̄103.1%,50例健康人血浆游离Hb范围10.6 ̄59.8mg/L。
【总页数】2页(P27-28)
【作者】赵元明;刘晓钟
【作者单位】济宁医学院附属医院;济宁医学院附属医院
【正文语种】中文
【中图分类】R446.112
【相关文献】
1.邻-甲联苯胺法测定血浆游离血红蛋白的基质效应及消除方法 [J], 屠湧涛;刘清琳;徐敏敏;王莺
2.微板速率法测定血浆游离血红蛋白 [J], 杨茂;邓晓琴
3.高效液相色谱法测定人血浆中氯丙嗪的浓度 [J], 黄伟侨;陈清霞;杨威;刘伟忠
4.速率法测定血浆(尿液)游离血红蛋白 [J], 邓晓琴;杨茂
5.血浆(清)游离血红蛋白速率法测定 [J], 王明鹤
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血浆游离血红蛋白检测操作规程
1. 目的
确保血浆游离血红蛋白检测实验过程准确、规范。
2.适用范围
适用于全血及红细胞类血液制品储存末期溶血率的抽样检测过程控制。
3.职责
全血及成分血抽样检测岗负责血液制品血浆游离血红蛋白的抽样检测工作。
4. 原理
检测原理详见《紫外可见分光光度计操作规程》.
5.设备、材料与试剂
5.1仪器:紫外可见分光光度计、微量移液器、37℃恒温水浴箱、台式离心机。
5.2材料: 洁净试管、试管架、一次性吸头、一次性手套。
5.3试剂:血浆游离血红蛋白检测试剂盒(R1、R2、R3、标准液)。
6.检测环境条件
实验室温度18~27℃、湿度30~70%
7.步骤与方法
7.1 检测前准备
7.1.1 仪器设备准备:执行《紫外可见分光光度计操作规程》。
7.1.2 试剂准备:检查试剂盒内试剂瓶是否完好、有无渗漏,瓶内试剂有无浑浊、沉淀、变色及异物,容量是否满足工作需要。
查看批号和有效期,确保在有
效期内使用。
7.1.3其他物品准备:检查EP管、一次性吸管、硬塑试管无破损、变形及污染,整齐摆放于实验台上;用记号笔在3支硬塑试管壁上分别标识“测试管”和“标准管”、“空白管”。
7.2 标本处理
打开离心机,将容量相近标本试管对称放入离心机转子内,3000r/min,离心5分钟,吸取上层血浆,将获得的血浆再次离心,吸取不含红细胞的血浆待用。
7.3 检测
7.3.1加样
7.3.1.1用微量移液器按照表21-1所示步骤,将试剂和标本分别加入对应的硬塑试管内。
表21-1 血浆游离血红蛋白检测加样步骤
测试管标准管空白管
1.血浆(μl)100 --
2.Hb标准液(μl)-100 -
3.生理盐水(μl)--100
4.R1(μl)1000 1000 1000
5.R2(μl)1000 1000 1000
6.R3(μl)100 100 100
7.3.1.2加样完毕,取三支试管帽,将3支试管盖上,手持试管两端,来回颠倒3~5次,混匀,放于试管架上;打开37℃恒温水浴箱,将试管连同试管架一起放入水浴箱中,孵育20分钟。
水浴箱内水位应高于试管内液面高度,但不得超过试管管口。
7.3.2 检测
从水浴箱中取出试管及试管架。
将“空白管”、“标准管”、“测试管”中的反应液倒入预先准备好的比色皿中,倒入量以稍超过比色皿体积的2/3为宜。
在505nm波长处进行比色。
打开样品槽,放入“空白管”比色皿调零。
然后依次放入“标准管”、“测试管”进行比色,读取各管吸光度。
检测剩余标本进行后续实验,如时间不允许,将标本连同试管架一起暂放入标本冰箱保存。
7.3.3计算
利用所测得的数据计算每袋全血或红细胞类血液制品的游离血红蛋白含量及
溶血率,计算公式如下:
(1)血浆/上清液游离血红蛋白浓度计算公式:
游离血红蛋白浓度(mg/L)=
100
⨯标准管吸光度
测定管吸光度
(2)每袋血液中血浆/上清液游离血红蛋白含量计算公式:
游离血红蛋白含量(mg )=游离血红蛋白浓度(mg/L)×血液制品容量(ml )/1000 (3)溶血率计算公式:
溶血率(%)=
容量
血红蛋白浓度
蛋白浓度
血浆或悬浮液游离血红
容量红细胞比容
⨯⨯⨯-)1(
8.结果的判定
储存末期溶血率<红细胞总量的0.8%;游离血红蛋白含量≤1g/L。
抽样检测合格率应≥75%。
9.分析和报告
将检测结果记录于《血液质量检测记录》中,分析血液制品血浆/悬浮液中游离血红蛋白含量或储存末期溶血率是否符合全血及成分血质量标准。
打印《血液质量检测报告》。
出现不符合全血及成分血质量标准的结果,质量控制部门进行原因调查分析,提出纠正、预防措施,通知相关科室实施改进,并将结果报告质量管理部门及站领导。
10.质量控制
仪器使用前应对其状态进行确认,项目检测严格执行标准操作规程 11. 相关文件
《血液常规抽检控制程序》 《紫外可见分光光度计操作规程》 12. 相关记录
《血液质量检测记录》 《血液质量检测报告》。