葡萄糖检验

葡萄糖（GLu）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：葡萄糖（GLu）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质，也是组织细胞的主要成分。

血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖症状。

1.病理性高血糖：（1）原发性糖尿病（2）内分泌疾病：嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤；（3）胰腺疾病：急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病（血红蛋白沉着症）等；（4）抗胰岛素受体抗体与有关疾病：棘皮症、Wernicke’s脑病。

2.病理性低血糖：（1）胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏；（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少；（3）严重肝病患者，肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。

【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法，用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。

【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。

D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品：葡萄糖溶液。

*不同批号试剂盒各组分请勿混用。

【试剂准备】R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内，在2℃~8℃有效期为一年。

葡萄糖测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中葡萄糖（GLU ）的含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。

2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况。

孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。

此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。

2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂所采用的反应式如下：+--+++-−−−→−+--+--−→−+H NADH PG NAD ADPATP PDH G HK 6666磷酸葡萄糖磷酸葡糖糖葡萄糖式中：ATP 为三磷酸腺苷；ADP 为二磷酸腺苷；HK 为己糖激酶；G-6-PDH 为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；6-PG 为6-磷酸葡萄糖酸上述反应中，NADH 的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在340nm 处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C 试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）三磷酸腺苷 0.75mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 375U/LNAD 15mmol/L哌嗪-N,N ’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L试剂2（R2）己糖激酶 60KU/L哌嗪-N,N ’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。

目的：为检验葡萄糖辅料规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。

范围：适用于葡萄糖的检验。

职责：检验员，检验室主任。

规程：1．性状：本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末，无臭；味甜。

本品在水中易溶，在乙醇中微溶。

1.1 比旋度：精密称取本品约10g，置100ml量瓶中，加水适量与氨试液0.2ml溶解后用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在25℃时，按旋光度测定法（SOP-QC-310-00）测定。

比旋度应在+52.5°至+53.0°范围内为符合规定。

2．鉴别2.1 试剂与仪器2.1.1 碱性酒石酸铜试液 2.1.2 试管2.1.3 IR-470型红外光谱仪2.2 项目与步骤2.2.1 称取本品约0.2g，置试管中，加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。

2.2.2 红外分光光度法：本品按红外光光度法测定法(SOP-QC-302-00)测定,本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致为符合规定。

3．检查3.1 试剂与仪器3.1.1 酚酞指示液 3.1.2 氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)3.1.3 1号浊度标准液 3.1.4 90% 乙醇3.1.5 标准氯化钠溶液 3.1.6 标准硫酸钾溶液3.1.7 碘试液 3.1.8 磺基水扬酸溶液(1→5)3.1.9 硝酸 3.1.10 硫氰酸铵溶液(30→100)3.1.11 标准铁溶液 3.1.12 醋酸盐缓冲液3.1.13 稀硫酸 3.1.14 溴化钾溴试液,盐酸3.1.15 烧杯 3.1.16 滴管3.1.17 回流管,三角烧杯瓶 3.1.18 比色管3.1.19 电炉 3.1.20 直热式电热恒温干燥箱3.1.21 坩埚 3.1.22 小型三用水箱3.2 项目与步骤3.2.1 酸度：称取本品2.0g，置烧杯中，加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml,应显粉红色为符合规定。

葡萄糖1.目的规范葡萄糖测定的操作程序，确保葡萄糖测定结果准确。

2.检验方法氧化酶法（两点终点法） 3.检验原理 葡萄糖+O 2+H 2O 葡萄糖酸+H 2O 2H 2O 2+4-AAP+苯酚红色醌亚胺+4H 2O在波长505nm 处比色，计算出GLU 浓度。

4.临床意义临床检测GLU 浓度主要用于糖尿病诊断、昏迷鉴别诊断及糖代谢研究。

血糖增高主要见于：①生理性高血糖：可见于饭后1-2小时或情绪紧张肾上腺分泌增加时;②病理性高血糖：可见于内分泌功能障碍引起的糖尿病、颅外伤、颅内出血、脑膜炎引起的颅内高压、脱水引起的高血糖、急慢性胰腺炎、肝功能障碍等。

血糖降低主要见于：①生理性低血糖：常见于饥饿和剧烈运动后。

②病理性低血糖：可见于高胰岛素血症、非胰性肿瘤、糖原累积症、自身免疫性疾病、半乳糖血症和肾脏疾病等。

5.标本采集及干扰因素 5.1标本要求空腹不抗凝静脉血2~3ml 。

5.2标本保存室温保存，及时送检。

血清ALT 在20-25℃可稳定24小时，在2-8℃储存可稳定7d ，-20℃冰冻保存可稳定30d 。

5.3注意事项推荐选用血清，避免溶血，红细胞中ALT 比血浆高约7倍，溶血时红细胞内ALT 可进入血浆，导致测定结果偏高。

标本应避免溶血、脂血、黄疸。

6.检测仪器日立7180全自动生化分析仪，使用具体要求和校准程序详见《仪器GOPOD操作规程》。

7.试剂 7.1试剂品牌美康生物 7.2包装规格200mL （R1:2×65mL+R2:1×70mL ） 7.3主要组成成分 试剂成分含量（最终反应体系） 试剂1 磷酸盐缓冲液 0.1mol/L 苯酚0.01×10-3mol/L 试剂2葡萄糖氧化酶 16000u/L 过氧化物酶 1000u/L 4-氨基安替比林0.02×10-3mol/L不同批次的试剂不推荐混合使用 7.4储存条件有效期试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。

葡萄糖含量测定计算公式葡萄糖含量测定计算公式是用于计算葡萄糖含量的公式，在食品工业、生物科学等领域广泛应用。

葡萄糖作为一种重要的能量源和碳源，其含量的测定对于食品质量控制、生物研究以及医学诊断都具有重要意义。

葡萄糖含量测定可以采用多种方法，例如酶法、光度法和高效液相色谱法等。

其中，酶法是一种常用的方法，通过葡萄糖氧化酶催化葡萄糖产生过氧化物，再用某种指示剂指示过氧化物的生成，从而实现葡萄糖含量的测定。

计算公式是将实验测得的吸光度值或发光强度值代入公式计算出葡萄糖含量。

下面是一种常用的光度法计算公式：葡萄糖浓度（mg/ml）= [(吸光度样品 - 吸光度空白) / 斜率] ×稀释倍数其中，吸光度样品为实验测得的葡萄糖样品的吸光度值，吸光度空白为测得的不含葡萄糖的空白试剂的吸光度值。

斜率是指标准曲线的斜率，用于校准样品光度值和葡萄糖浓度之间的关系。

稀释倍数是指样品在测定过程中进行的稀释倍数，用于将测得的吸光度值或发光强度值校正为原始样品的浓度。

在进行葡萄糖含量测定时，首先要制备一系列不同浓度的标准溶液，然后测量各标准溶液的吸光度或发光强度，绘制标准曲线。

通过测量待测样品的吸光度或发光强度，然后代入计算公式中，即可计算出样品中的葡萄糖含量。

需要注意的是，不同的测定方法和仪器可能有不同的计算公式。

因此，在具体的实验中，需要根据实验方法和仪器的要求，选择相应的计算公式进行计算。

此外，葡萄糖含量测定还可以采用其他方法，如高效液相色谱法。

在高效液相色谱法中，葡萄糖含量的计算公式是根据标准曲线的峰面积或峰高与葡萄糖浓度之间的线性关系进行计算的。

总结起来，葡萄糖含量测定计算公式是根据实验测得的吸光度值、发光强度值或峰面积、峰高等代入相应的计算公式，计算出样品中的葡萄糖浓度的公式。

不同的测定方法和仪器可能有不同的公式，因此在实验中需要根据具体情况选择合适的计算公式。

在葡萄糖含量测定中，光度法是一种简单、快速、准确的方法。

实验1葡萄糖的一般杂质检查（1）实验一葡萄糖的一般杂质检查一、目的要求1.了解葡萄糖中一般杂质检查的目的和意义；2.掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属等一般杂质检查的基本原理、操作方法及杂质限量计算；3.正确使用纳氏比色管。

二、实验操作试药：葡萄糖试剂：酚酞、氢氧化钠、氯化钴、重硌酸钾、硫酸铜、硝酸、硝酸银、氯化钠、氯化钡、盐酸、硫酸、硫氰酸铵、90%乙醇、无水乙醇、磺基水杨酸、硫代乙酰胺、硝酸铅仪器：石蕊试纸5盒、滴瓶5个、量筒50ml、10ml各8个，移液管5ml、2ml、1ml各8只，烧杯100ml各8只、石英比色皿3对2.1 酸度取本品2.0克，加水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20ml，应显粉红色。

2.2 溶液的澄清度与颜色取本品5g，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10ml，溶液应澄清无色，如显浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2000年二部附录IX B）比较，不得更浓；如显色，与对照液取（比色用氯化钴液3ml、比色用重硌酸钾液3ml与比色用硫酸铜6ml，加水稀释50ml）1.0ml加水稀释至10ml比较，不得更深。

2.3 氯化物取本品0.6g，加水溶解使成25ml（如显碱性，可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应），再加稀硝酸10ml，溶液如不澄清，滤过。

臵50ml纳氏比色管中，加水适量使成约40ml，加硝酸银试液1ml，用水稀释使成50ml，摇匀，在暗处放臵5分钟，如发生浑浊，与标准氯化钠溶液一定量制成的对照液【取标准氯化钠溶液（10 μg Cl/ml）6.0ml臵50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，用水稀释使成约40ml后，加硝酸银试液1ml，再加水适量使成约40ml后，加硝酸银试液1ml，再加水适量使成50ml，摇匀，再暗处放臵5分钟】比较，不得更浓（0.01%）。

2.4 硫酸盐取本品2.0g，加水溶解使成40ml（如显碱性，可滴加盐酸使遇石蕊试纸显中性反应）。

⾎清葡萄糖测定标准操作规程葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请单独检验项⽬申请：空腹⾎清葡萄糖测定(缩写GLU)，餐后2h葡萄糖测定，各种体液葡萄糖测定；组合项⽬申请：葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。

临床医⽣根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采⾎约2 ml，不抗凝，置普通试管中。

或采⽤含分离胶的真空采⾎管。

2.1.2检验申请单和⾎标本试管标上统⼀且唯⼀的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单⼀起及时运送⾄检验科。

专⼈负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不⾜：少于0.3ml的全⾎标本，或少于0.1ml的⾎清或⾎浆。

2.1.5.2对反应吸光度有⼲扰的标本，包括严重溶⾎、严重浑浊的标本。

2.1.5.3⽆法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4抽⾎后室温放置超过4h以上的标本。

2.1.5.5静脉滴注⼤剂量维⽣素C后⽴即抽⾎的标本。

2.1.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离⼼分离出⾎清，并及时将⾎清与⾎球分离。

2.2.2标本保存时间：不抗凝⾎标本如⾎清未与⾎块分开，共存同⼀试管中，室温（15～25℃）下⾎清葡萄糖很不稳定，普通冰箱中（2～8℃）稳定1天。

加氟化钠的⾎液标本室温（15～25℃）下稳定4h。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，单独分离出⾎清后，密闭置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采⾎前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

检查空腹⾎清葡萄糖的须在禁⾷12h以上早晨抽⾎。

2.3.2餐后2h葡萄糖检查，受检者于餐后2h准时抽⾎。

2.3.3葡萄糖耐量试验检查的⾎液标本，在服⽤75克葡萄糖后，分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽⾎。

2.3.4为了避免葡萄糖被酵解，单独测定葡萄糖时，⾎标本可氟化钠-草酸钾抗凝，氟化钠⽤量为1.5mg/ml⾎。

一、实验目的1. 了解葡萄糖的化学性质和生理作用。

2. 掌握葡萄糖的测定方法，包括葡萄糖氧化酶法、还原性滴定法等。

3. 学习实验操作技能，提高实验动手能力。

二、实验原理葡萄糖是一种单糖，是人体重要的能量来源。

在生物体内，葡萄糖的代谢主要通过糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化等途径进行。

本实验采用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量，其原理如下：葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应，生成葡萄糖酸和过氧化氢。

过氧化氢在过氧化物酶的作用下，将色原性受体氧化，产生红色化合物。

在一定波长下，该化合物的吸光度与葡萄糖浓度成正比，从而可以测定葡萄糖含量。

三、实验材料1. 试剂：葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、磷酸盐缓冲液、硫酸铁溶液、硫酸铜溶液、邻苯二胺溶液等。

2. 仪器：分光光度计、移液管、试管、容量瓶等。

四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）取6支试管，分别加入不同浓度的葡萄糖标准溶液。

（2）向各试管中加入适量的磷酸盐缓冲液，混匀。

（3）向各试管中加入适量的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶，混匀。

（4）室温反应5分钟后，用分光光度计在特定波长下测定吸光度。

（5）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定（1）取一定量的待测葡萄糖溶液，按照标准曲线绘制步骤进行操作。

（2）根据标准曲线计算待测葡萄糖溶液的浓度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据，绘制标准曲线，得到线性方程：y = ax + b，其中y为吸光度，x为葡萄糖浓度。

2. 样品测定根据标准曲线，计算待测葡萄糖溶液的浓度。

六、实验讨论1. 葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点，是临床和科研中常用的测定方法。

2. 实验过程中，应注意以下几点：（1）严格控制反应时间，避免过氧化酶的活性降低。

（2）准确配制试剂，保证实验结果的准确性。

（3）使用干净、无污染的仪器和试剂。

七、实验总结本实验通过葡萄糖氧化酶法测定了葡萄糖含量，掌握了实验操作技能。

范围：葡萄糖职责：检验室对本规程的实施负责正文：1.性状——本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末，无臭，味甜。

本品在水中易溶，在乙醇中微溶。

1.1比旋度——取本品约10g，精密称定，置100ml量瓶中，加水适量与氨试液0.2ml,溶解,用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在25℃时依法测定并计算，比旋度为+52.5°至+53.0°。

1.1.1执行SOP-QM-419《旋光度测定标准操作规程》。

1.1.2执行SOP-EM-302《WZZ-2B型自动指示旋光仪标准操作规程》。

1.1.3计算公式旋光度×100比旋度=称样量×（1-水份）2.鉴别2.1取本品约0.2g，加水5ml溶解后，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

2.2本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集464图）一致。

2.2.1执行SOP-QM-421《红外分光光度法标准操作规程》。

2.2.2执行SOP-EM-309《TJ270-30A型红外分光光度计标准操作规程》。

3.检查3.1酸度——取本品 2.0g,加水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml，应显粉红色。

3.2溶液的澄清度与颜色——取本品5g，加热水溶解后,，放冷 , 用水稀释至10ml，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与对照液(取比色用氯化钴液 3ml，比色用重铬酸钾液3ml与比色用硫酸铜液6ml，加水稀释成50ml)1.0ml 加水稀释至10ml比较，不得更深。

3.2.1执行SOP-QM-413《澄清度检查标准操作规程》。

3.2.2执行SOP-QM-410《溶液颜色检查标准操作规程》。

3.3乙醇溶液的澄清度——取本品1.0g，加90%乙醇 30ml，置水浴上加热回流约10分钟，溶液应澄清。

3.3.1执行SOP-QM-411《澄清度检查标准操作规程》。

标题：葡萄糖检验操作规程
分发部门：总经理室、质量技术部，行政部（存档）
葡萄糖检验操作规程
1 范围
本标准规定了葡萄糖的检测方法和操作要求；适用于葡萄糖的质量检测。

2 引用标准
中华人民共和国药典2005版二部
3 责任
QC检验员对本规程实施负责，QA负责监督。

4 检验方法
4.1 打开产品包装，通过外观检查判定：本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜。

本品在水中易溶，在乙醇中微溶。

4.2 干燥失重按照公司制定的《干燥失重测定法》（QC-O-037）的方法测定。

4.3 微生物限度按照公司制定的《食品微生物检测方法》（QC-O-032）的方法测定。

初中化学葡萄糖的检验葡萄糖是一种重要的单糖，是人体内能量的主要来源之一。

在化学实验中，我们需要对葡萄糖进行检验，以确定其存在和浓度。

本文将介绍几种常见的葡萄糖检验方法。

一、费林试剂法费林试剂法是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与费林试剂（含有铜离子）反应，生成红色沉淀。

具体操作步骤如下：1. 取一定量的葡萄糖溶液，加入适量的费林试剂。

2. 在加入试剂后，将溶液加热至沸腾，持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了红色，说明葡萄糖存在。

二、本氏试剂法本氏试剂法也是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与本氏试剂（含有铜离子和碱性氢氧化物）反应，生成红色沉淀。

具体操作步骤如下：1. 取一定量的葡萄糖溶液，加入适量的本氏试剂。

2. 在加入试剂后，将溶液加热至沸腾，持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了红色，说明葡萄糖存在。

三、苏丹三试剂法苏丹三试剂法是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与苏丹三试剂（含有苏丹三染料）反应，生成红色沉淀。

具体操作步骤如下：1. 取一定量的葡萄糖溶液，加入适量的苏丹三试剂。

2. 在加入试剂后，将溶液加热至沸腾，持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了红色，说明葡萄糖存在。

四、硝酸银试剂法硝酸银试剂法是一种常用的葡萄糖检验方法。

它的原理是将葡萄糖与硝酸银试剂（含有硝酸银离子）反应，生成白色沉淀。

具体操作步骤如下：1. 取一定量的葡萄糖溶液，加入适量的硝酸银试剂。

2. 在加入试剂后，将溶液加热至沸腾，持续加热一段时间。

3. 观察溶液的颜色变化。

如果溶液变成了白色，说明葡萄糖存在。

以上四种方法都是常用的葡萄糖检验方法，它们的原理都是利用葡萄糖与试剂反应生成沉淀或颜色变化来检验葡萄糖的存在。

在实际操作中，我们可以根据需要选择不同的方法进行检验。

同时，我们还可以通过比较不同试剂的反应结果来确定葡萄糖的浓度。