探讨CDK12及CDK13在神经分支发育过程中的功能(精)

周期蛋白依赖性激酶对线粒体功能的调控周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinase，CDK）是一类重要的蛋白激酶，在生命过程中发挥着重要的作用。

CDK不仅参与有丝分裂和无丝分裂等细胞周期过程，还参与调控DNA修复、基因转录、细胞分化等细胞生命活动。

近年来的研究表明，CDK还可以通过调控线粒体的功能来影响细胞代谢和能量供应。

本文将重点探讨CDK如何调控线粒体功能的作用机制及其生理意义。

1. CDK的结构和功能CDK是一类由蛋白激酶（protein kinase）家族中的一种特殊家族组成的激酶，在不同的细胞周期过程中扮演不同的角色。

CDK分子的结构分为两个部分，一部分是氨基酸序列高度保守的激酶结构域，另一部分是调节亚基，包括丝裂原激活蛋白（Cyclin）和CDK抑制蛋白（Inhibitor）。

在细胞周期的不同阶段，Cyclin与CDK结合形成复合物，活化CDK分子，从而启动细胞周期的不同事件。

2. CDK在线粒体功能调控中的作用线粒体是细胞中的重要能源生产器官，被广泛认为是调节能量代谢和细胞死亡的关键组织。

CDK参与线粒体生物学过程主要体现在两个方面：一是通过调节线粒体分裂、融合以及生物合成等过程，影响线粒体数量和形态；二是通过调节线粒体膜通道的打开或关闭，影响线粒体内外物质的转运和代谢。

其中，CDK1/2调控线粒体分裂与融合，CDK5调控线粒体膜通道和代谢，CDK4/6调节线粒体生物合成等。

3. CDK与线粒体疾病的关系线粒体疾病是由线粒体缺陷或线粒体功能异常引起的一类疾病，常表现为神经肌肉系统疾病、代谢性疾病、肿瘤等。

CDK参与调节线粒体功能的过程，与多种线粒体疾病的发生和发展密切相关。

例如，CDK5调节线粒体钙离子通道的打开和关闭，参与神经元的能量代谢，与阿尔茨海默病、血管性痴呆等神经退行性疾病呈正向相关关系；CDK1/2参与线粒体分裂与融合，调节线粒体数量和形态，与Parkinson病、帕金森综合症等神经肌肉系统疾病呈正相关关系。

神经元发育和功能调控的机制神经元是神经系统中最基本的功能单位，它们根据自身的形态和连接方式，在神经网络中承担了不同的功能。

神经元的发育和功能调控是神经系统正常发育和功能维持的基础。

本文将从神经元发育和功能调控的机制两方面对神经元进行讨论。

一、神经元的发育机制神经元发育的过程是一个复杂的过程，包括神经前体细胞的分裂、细胞迁移、轴突和树突的形成以及突触的形成等多个阶段。

下面就神经元发育过程的几个方面进行简要概括。

1.细胞分裂：神经元的发育始于神经前体细胞的分裂。

在分裂过程中，细胞会重复DNA复制和核分裂，最终分裂成两个相同的细胞。

2.细胞迁移：分裂出来的神经前体细胞会向神经元祖细胞层迁移，并且在迁移的同时不断分裂。

3.突触形成：在神经元的突触形成阶段，突触蛋白会在轴突末端和突触前神经元的细胞膜之间形成黏附，并且向神经元体内部送出信号。

4.轴突和树突的形成：在神经元发育的过程中，神经元轴突和树突的形成与细胞的骨架有关。

轴突和树突在发育过程中被伸出并从周围细胞或基质中接触到特定的分子，任务是通过这些分子的引导来掌握和维持树突的精细形状。

神经元的发育过程需要精细的控制，并依靠复杂的信号传导机制来指导，确保神经元发育成为具有各种功能的成熟神经元。

二、神经元的功能调控机制神经元的功能调控机制与神经元的形态发育密切相关。

神经元的功能调控包括神经元连接的形成和神经元的兴奋性调控两个方面。

1.神经元连接的形成神经元连接的形成是神经元功能调控中的重要环节。

神经元间的连接对神经委托系统的功能具有至关重要的影响。

神经元间形成连接的基础是突触的形成，突触难以控制进程的准确性，因此，对神经元进行精确的信号传递是很困难的。

幸运的是，神经委托系统在整个发育过程中不断精细调整和调节神经元连接形成。

这种调控的方式包括分子找路、信号征宣、鉴别和强化等方法。

因此，神经元的发育和功能调控与各种分子的参与相关。

其中神经元特异性基因Nurr1、成神经细胞因子等在神经元发育过程中的重要性已被广泛研究。

基金项目㊀国家自然科学基金：８１７７１４０８；国家重点研发计划项目：２０１６ＹＦＣ１３０６２０２作者单位㊀中南大学湘雅医院儿科，湖南省儿童智力障碍研究中心㊀长沙，４１０００８通讯作者㊀尹飞，ｅｍａｉｌ：ｙｆ２３２３＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ㊃病案报告㊃ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３⁃５５０１．２０２１．０２．０１７ＣＤＫ１３相关疾病１例病例报告颜芳玲㊀尹㊀飞㊀邓小鹿㊀陈柏谕㊀彭㊀镜㊀何㊀芳１㊀病例资料㊀㊀男，２月２５ｄ，因 发作性抽搐１个月 于２０１９年５月２９日入中南大学湘雅医院（我院）㊂患儿１月２５日龄时出现眼睑抽动，随即出现肢体抽搐，表现为头向一侧偏斜，双眼向同侧凝视，躯干及双下肢向前快速屈曲，双手抱球，成串发作，每串持续４ ５ｍｉｎ后自行缓解，每天２ ３串，每串２ ３ｍｉｎ，均为醒睡期出现㊂此后每日均有抽搐，无发热，外院检查脑电图提示婴儿睡眠异常ＥＥＧ，各区可见短程尖波群，背景频率高于同月龄组；复查脑电图：可见背景散在尖波；予加用左乙拉西坦９ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１抗癫，患儿抽搐发作每天６ １０串，每串约１０ｍｉｎ㊂２周前左乙拉西坦加量至１８ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１，每天抽搐发作约５串，每串持续１０ １５ｍｉｎ，就诊我院，脑电图示，大量多灶性尖波㊁棘波㊁棘慢波㊁慢波发放，后头部稍著，监测到清醒期１次成串痉挛发作㊂１周前左乙拉西坦加量至３１．３ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１，抽搐发作每天３ ４串，每串２０ｍｉｎ，就诊我院，加用托吡酯片１．２ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１，症状无好转，以 婴儿痉挛 收住院㊂㊀㊀患儿系Ｇ１Ｐ１，足月剖宫产，出生体重３０００ｇ，否认窒息史及抢救史，Ａｐｇａｒ评分１ｍｉｎ９分（肤色扣１分），５ｍｉｎ１０分㊂生长发育落后于正常同龄儿童，２月龄仍不能追光㊁追物㊂否认家族性遗传病史，父母非近亲婚配㊂㊀㊀体格检查：体温３６．６ħ，Ｐ１２８次／ｍｉｎ，Ｒ３６次／ｍｉｎ，ＢＰ８７／５１ｍｍＨｇ，体重５．１ｋｇ（Ｐ１５ Ｐ５０），身长５８ｃｍ（Ｐ５０Ｐ８５），头围３７．５ｃｍ（Ｐ３ Ｐ１０）㊂前囟未闭，不追光㊁追物，面容异常（小嘴㊁宽鼻梁㊁眼距宽㊁低耳位），皮肤㊁巩膜色泽正常，双侧拇指内侧靠掌部皮肤与掌部皮肤分离不彻底㊁拇指外展受限㊂ＨＲ１２８次／ｍｉｎ，心音有力，律齐，未闻及杂音㊂腹平软，肝肋下扪及１．５ｃｍ，质中等，脾肋下未扪及㊂阴茎短小，约０．７ｃｍ㊂四肢肌力可，肌张力稍高，双膝腱反射正常，双侧巴氏征可疑㊂㊀㊀辅助检查：血常规㊁生化㊁乳酸㊁氨未见异常㊂心脏彩色超声心动图未见异常㊂ＭＲ颅脑平扫＋Ｔ２ＦＬＡＩＲ示，双侧额颞部颅板下液样信号灶，脑外围间隙增宽，胼胝体稍扁薄，意义待定㊂１５ｈ脑电图显示，大量多灶性尖波㊁棘波㊁棘慢波㊁慢波发放，后头部稍著，检测到清醒期１次成串痉挛发作㊂视觉诱发电位，双眼全视野及左右侧单眼全视野ＦＶＥＰ波引出，Ｐ１００潜伏时延长，波幅无异常㊂听觉脑干电位未见异常㊂㊀㊀全基因组拷贝数变异检测未见异常㊂全基因组外显子测序分析显示ＣＤＫ１３基因（ＮＭ＿００３７１８ｅｘｏｎ１）ｃ．４８４＿４８５ｉｎｓＧ（ｐ．Ａ１６２Ｇｆｓ∗１０８），为杂合移码突变，Ｓａｎｇｅｒ验证提示为新发变异（图１）㊂根据美国医学遗传学与基因学学会新版指南对变异进行分析，①移码突变（ＰＶＳ１），②新发变异（ＰＳ２），③在正常对照人群数据库（ＥｘｏｍｅＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇＰｒｏｊｅｃｔ㊁１０００ＧｅｎｏｍｅｓＰｒｏｊｅｃｔ㊁ｄｂＳＮＰ等数据库）中均未发现该变异（ＰＭ２）；综上所述，该变异评级符合ＰＳＶ１＋ＰＳ２＋ＰＭ２，为致病性变异㊂图１㊀患儿存在ＣＤＫ１３基因测序图注㊀患儿检测到ｐ．Ａ１６２Ｇｆｓ∗１０８突变，患儿父母均未携带该突变㊀㊀诊疗经过：住院期间，托吡酯（从１．２ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１逐渐加量至４．８ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１），左乙拉西坦加量至５０ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１，并使用ＡＣＴＨ（２Ｕ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１）冲击治疗，患儿仍有抽搐发作，表现为双手上抬抱球样动作㊁双下肢上抬，成串发作，每天２ ５串，每串２０ ５０次㊂出院后加用氨己烯酸片（逐渐加量至１３０ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１），托吡酯加量至５．５ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１，左乙拉西坦自行减停，患儿抽搐每天３ ４串，每串４至数十次㊂后于我院门诊调整抗癫用药㊂㊃２６１㊃ＣｈｉｎＪＥｖｉｄＢａｓｅｄＰｅｄｉａｔｒ㊀Ａｐｒｉｌ２０２１，Ｖｏｌ１６，Ｎｏ２目前用药，托吡酯５．６ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１，拉莫三嗪４．６ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１，氯巴占２ｍｇ㊃ｋｇ－１㊃ｄ－１㊂㊀㊀随访：电话随访至２０２０年１０月，患儿１岁７月余抽搐症状控制欠佳，成串痉挛发作，每天３ ４串，每串３０余次，伴单次发作㊂不可竖头㊁独坐及翻身，追光㊁追物差，无眼神交流，不可咿呀发音，四肢肌张力低㊂２㊀讨论㊀㊀ＣＤＫ１３相关疾病又称先天性心脏病㊁面部异常及智力障碍相关疾病（ＣＨＤＦＩＤＤ，ＯＭＩＭ：６１７３６０），是一种罕见常染色体显性遗传病，主要临床表现为智力障碍㊁喂养困难㊁面容异常及先天性心脏病，临床异质性较高㊂２０１６年Ｓｉｆｒｉｍ等［１］首次通过对１８９１例先天性心脏病患者的外显子组分析，发现７例ＣＤＫ１３基因新发突变患者㊂㊀㊀以 ＣＤＫ１３ 为关键词在中国知网㊁万方数据（建库至２０２０年１０月）未检索到相关文章，以 ＣＤＫ１３ 为关键词在ＰｕｂＭｅｄ数据库中（建库至２０２０年１０月）检索到８篇文献，共４５例ＣＤＫ１３基因变异患儿，女２９例（６４．４％），男１６例；均有智力障碍／全面发育落后，文献［１ ７］显示，程度多为轻至中度，主要影响运动及语言功能；面部异常多见以下发现，７５％（３３／４４）宽鼻梁／鼻翼，６９％（３１／４５）畸形耳，６０％（２６／４３）小嘴／薄上唇，５８％（１９／３３）眼裂小，５２％（２３／４４）宽眼距㊁４７％（１５／３２）人中异常㊁４７％（８／１７）扁平脸；４０％（１７／４３）发现先天性心脏结构异常，以房间隔或室间隔缺损以及肺动脉瓣或动脉异常多见；７４％（２８／２８）发现行为问题，包括孤独症谱系障碍及注意力缺陷等；７８％（２８／３６例）发现喂养困难，５０％（１４／２８）发现脑结构异常，以胼胝体发育不全或缺失㊁脑室周围白质软化以及小脑扁桃体异常多见㊂７例癫发作病例报道，表现形式为肌阵挛㊁全身强直阵挛和失神发作，大脑结构异常与癫活动之间没有明显的相关性㊂文献［１ ８］还发现其他少见临床表型，包括斜视㊁眼震㊁感音性耳聋㊁脊柱侧凸㊁骶骨异常㊁关节异常㊁肾脏结构异常㊁钉状齿㊁高低肩㊁生殖系统异常及脊髓缺血等㊂㊀㊀图２显示，文献与本文病例合并后共４６例ＣＤＫ１３基因变异患儿，均为新发突变㊂发现２０种突变，其中错义变异占６８．５％，剪切变异１０．５％，无义变异１０．５％，移码变异１０．５％㊂变异集中在ＣＤＫ１３蛋白激酶结构域㊂目前尚未进行ＣＤＫ１３基因致病突变的功能分析，因此其对细胞代谢的确切影响均为推测㊂ＣＤＫ１３蛋白的功能受损可能导致ＲＮＡＰＩＩ的ＣＴＤ磷酸化水平降低，在ＲＮＡＰＩＩ的影响下可能导致转录和前ｍＲＮＡ处理失调，这可能与细胞生长信号通路有关［１３］㊂所有病例均符合常染色体显性遗传㊂图２㊀４６例患儿ＣＤＫ１３基因突变致病变异位点㊀㊀周期蛋白依赖性激酶（ＣＤＫ）是一类丝氨酸苏氨酸激酶，需要与周期蛋白（在某些情况下是非周期蛋白）的调节性亚基结合才能发挥作用［９］㊂该家族一共有２１个编码基因㊂ＣＤＫ１３基因定位于７号染色体短臂上（７ｐ１４．１），其编码的哺乳动物细胞周期蛋白ＣＤＫ１３是由单个细胞周期蛋白激活的周期蛋白依赖性激酶，不受细胞周期调节，参与基因转录的控制［９，１０］㊂ＣＤＫ参与调节细胞周期㊁转录㊁ＲＮＡ剪接㊁神经发生和凋亡［１１，１２］㊂最新报道的移码变异及无义变异病例表明单倍剂量不足为致病机制［２］㊂㊀㊀目前尚无ＣＤＫ１３基因型⁃临床表型相关研究，一项研究提出，在移码突变及无义突变中，先天性心脏结构异常及脑结构异常较多见［１４］㊂婴儿痉挛症是一种难治性的癫综合征，以成串痉挛发作㊁脑电图高度失律及精神运动发育迟滞为主要特征㊂根据英国数据，该综合征常见的病因为缺血缺氧性脑病（１０％）㊁染色体异常（８％）㊁脑结构异常（８％）㊁围生期卒中（８％）㊁结节性硬化（７％）㊁脑白质软化（５％）［１５］，仍有大多数婴儿痉挛症病因未明㊂导致婴儿痉挛症的候选基因日渐丰富，但尚无ＣＤＫ１３基因相关报道㊂本文患儿生后１月余即出现痉挛发作，表现为头向一侧偏斜，双眼向同侧凝视，躯干及双下肢向前快速屈曲，双手抱球，成串发作，癫发作控制欠佳，并伴有全面发育落后㊁面容异常（宽鼻梁㊁内眦赘皮㊁宽眼距㊁小嘴㊁薄上唇，斜视）及左侧大拇指外展受限，其智力障碍㊁面容异常等表现与既往报道的ＣＤＫ１３相关疾病病例表型相符㊂㊀㊀综上所述，ＣＤＫ１３基因变异所致的ＣＤＫ１３相关疾病临床异质性高，主要表现为发育迟缓㊁喂养困难㊁先天性心脏病㊁面容异常及脑结构异常等㊂现发现其可作为婴儿痉挛症候选基因，后续研究应探讨ＣＤＫ１３变异致病机制及其与婴儿痉挛症的具体发病机制㊂㊃３６１㊃中国循证儿科杂志㊀２０２１年４月第１６卷第２期参考文献１ ＳＩＦＲＩＭＡ ＨＩＴＺＭＰ ＷＩＬＳＤＯＮＡ ｅｔａｌ．Ｄｉｓｔｉｎｃｔｇｅｎｅｔｉｃａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅｓｆｏｒｓｙｎｄｒｏｍｉｃａｎｄｎｏｎｓｙｎｄｒｏｍｉｃｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｈｅａｒｔｄｅｆｅｃｔｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｅｘｏｍｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．ＮａｔＧｅｎｅｔ ２０１６ ４８９ １０６０⁃１０６５．２ ＶＡＮＤＥＮＡＫＫＥＲＷＭＲ ＢＲＵＭＭＥＬＭＡＮＩ ＭＡＲＴＩＳＬＭ ｅｔａｌ．ＤｅｎｏｖｏｖａｒｉａｎｔｓｉｎＣＤＫ１３ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｓｙｎｄｒｏｍｉｃＩＤ／ＤＤ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｄｅｌｉｎｅａｔｉｏｎｏｆ１５ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓａｎｄａｆｕｒｔｈｅｒｒｅｖｉｅｗ．ＣｌｉｎＧｅｎｅｔ ２０１８ ９３ ５ １０００⁃１００７．３ ＵＥＨＡＲＡＴ ＴＡＫＥＮＯＵＣＨＩＴ ＫＯＳＡＫＩＲ ｅｔａｌ．ＲｅｄｅｆｉｎｉｎｇｔｈｅｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆｄｅｎｏｖｏｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓＣＤＫ１３ｖａｒｉａｎｔｓ Ｔｈｒｅｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｏｕｔｃａｒｄｉａｃｄｅｆｅｃｔｓ．ＥｕｒＪＭｅｄＧｅｎｅｔ ２０１８ ６１ ５ ２４３⁃２４７．４ ＭＣＲＡＥＪＦ ＣＬＡＹＴＯＮＳ ＦＩＴＺＧＥＲＡＬＤＴＷ ｅｔａｌ．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅａｎｄａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅｏｆｄｅｎｏｖｏｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｎｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｎａｔｕｒｅ ２０１７ ５４２ ７６４２ ４３３⁃４３８．５ ＢＯＳＴＷＩＣＫＢＬ ＭＣＬＥＡＮＳ ＰＯＳＥＹＪＥ ｅｔａｌ．ＰｈｅｎｏｔｙｐｉｃａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎｏｆＣＤＫ１３⁃ｒｅｌａｔｅｄｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｈｅａｒｔｄｅｆｅｃｔｓ ｄｙｓｍｏｒｐｈｉｃｆａｃｉａｌｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．ＧｅｎｏｍｅＭｅｄｉｃｉｎｅ ２０１７ ９ １ ７３．６ ＨＡＭＩＬＴＯＮＭＪ ＣＡＳＷＥＬＬＲＣ ＣＡＮＨＡＭＮ ｅｔａｌ．ＨｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓｍｕｔａｔｉｏｎｓａｆｆｅｃｔｉｎｇｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｄｏｍａｉｎｏｆＣＤＫ１３ｃａｕｓｅａｓｙｎｄｒｏｍｉｃｆｏｒｍｏｆｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｄｅｌａｙａｎｄｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ．ＪＭｅｄＧｅｎｅ ２０１８ ５５ １ ２８⁃３８．７ ＹＡＫＵＢＯＶＲ ＡＹＭＡＮＡ ＫＲＥＭＥＲＡＫ ｅｔａｌ．Ｏｎｅ⁃ｍｏｎｔｈ⁃ｏｌｄｇｉｒｌｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｗｉｔｈｐｓｅｕｄｏｈｙｐｏａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｉｓｍｌｅａｄｉｎｇｔｏｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＣＤＫ１３⁃ｒｅｌａｔｅｄｄｉｓｏｒｄｅｒ ａｃａｓｅｒｅｐｏｒｔａｎｄｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ．ＪＭｅｄＣａｓｅＲｅｐ ２０１９ １３ １ ３８６．８ ＣＡＲＮＥＩＲＯＴＮＲ ＫＲＥＰＩＳＣＨＩＡＣＶ ＣＯＳＴＡＳＳ ｅｔａｌ．Ｕｔｉｌｉｔｙｏｆｔｒｉｏ⁃ｂａｓｅｄｅｘｏｍｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｉｎｔｈｅｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｂａｓｉｓｏｆｉｓｏｌａｔｅｄｓｙｎｄｒｏｍｉｃｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌｄｉｓａｂｉｌｉｔｙｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｖｅｃａｓｅｓ．ＡｐｐｌＣｌｉｎＧｅｎｅ ２０１８ １１ ９３⁃９８．９ ＭＡＬＵＭＢＲＥＳＭ．Ｃｙｃｌｉｎ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅｓ．ＧｅｎｏｍｅＢｉｏｌ ２０１４ １５ ６ １２２．１０ ＢＡＲＴＫＯＷＩＡＫＢ ＬＩＵＰ ＰＨＡＴＮＡＮＩＨＰ ｅｔａｌ．ＣＤＫ１２ｉｓａｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄＣＴＤｋｉｎａｓｅ ｔｈｅｍｅｔａｚｏａｎｏｒｔｈｏｌｏｇｏｆｙｅａｓｔＣｔｋ１．ＧｅｎｅｓＤｅｖ ２０１０ ２４ ２０ ２３０３⁃２３１６．１１ ＣＡＯＬ ＣＨＥＮＦ ＹＡＮＧＸ ｅｔａｌ．ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆＣＤＫａｎｄｃｙｃｌｉｎｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｐｒｅｍｅｔａｚｏａｎｌｉｎｅａｇｅｓ．ＢＭＣＥｖｏｌＢｉｏｌ ２０１４ １４ １０．１２ ＭＡＬＵＭＢＲＥＳＭ ＨＡＲＬＯＷＥ ＨＵＮＴＴ ｅｔａｌ．Ｃｙｃｌｉｎ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅｓ ａｆａｍｉｌｙｐｏｒｔｒａｉｔ．ＮａｔＣｅｌｌＢｉｏｌ ２００９ １１１１ １２７５⁃１２７６．１３ ＧＲＥＩＦＥＮＢＥＲＧＡＫ ＨＯＥＮＩＧＤ ＰＩＬＡＲＯＶＡＫ ｅｔａｌ．ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＣｄｋ１３／ＣｙｃｌｉｎＫｃｏｍｐｌｅｘ．ＣｅｌｌＲｅｐ ２０１６ １４ ２ ３２０⁃３３１．１４ ＨＡＭＩＬＴＯＮＭＪ ＳＵＲＩＭ．ＣＤＫ１３⁃ｒｅｌａｔｅｄｄｉｓｏｒｄｅｒ ＫＵＭＡＲＤ．ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＧｅｎｅｔｉｃｓ Ｖｏｌ１０３．２０１９ １６３⁃１８２．１５ ＯＳＢＯＲＮＥＪＰ ＬＵＸＡＬ ＥＤＷＡＲＤＳＳＷ ｅｔａｌ．ＴｈｅｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇｅｔｉｏｌｏｇｙｏｆｉｎｆａｎｔｉｌｅｓｐａｓｍｓＷｅｓｔｓｙｎｄｒｏｍｅＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｆｒｏｍｔｈｅＵｎｉｔｅｄＫｉｎｇｄｏｍＩｎｆａｎｔｉｌｅＳｐａｓｍｓＳｔｕｄｙＵＫＩＳＳ ｏｎｃｏｎｔｅｍｐｏｒａｒｙｃａｕｓｅｓａｎｄｔｈｅｉｒｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ２０１０ ５１ １０ ２１６８⁃２１７４．（收稿日期：２０２０⁃１１⁃２５㊀修回日期：２０２１⁃０３⁃２５）（本文编辑：张崇凡）㊃４６１㊃ＣｈｉｎＪＥｖｉｄＢａｓｅｄＰｅｄｉａｔｒ㊀Ａｐｒｉｌ２０２１，Ｖｏｌ１６，Ｎｏ２。

KRAS基因第12、13位密码子突变型大肠癌患者的临床病理特征、靶向治疗疗效及生存分析目的：大肠癌的患病率呈现逐年攀升的趋势，由于大肠癌具有早期症状不明显的特点，导致大部分患者确诊时已属于中、晚期大肠癌，其中一些患者已丧失手术最佳时间，这部分大肠癌患者可能只有不足8月的生存时间。

大肠癌保持着较高的复发率，接近半数大肠癌复发时合并存在肝脏转移。

临床医务人员长期对大肠癌的治疗前景充满期待。

近几年，针对大肠癌的治疗手段及相关技术方法己有了明显进步，但化疗仍是治疗晚期大肠癌的重要手段，传统的化疗药物如亚叶酸钙、氟尿嘧啶、伊立替康等可以对患者的生存质量有一定程度的改善，增加了患者的生存期，但其治疗效果仍不令人满意，而且传统化疗的不良反应较重，患者的耐受性相对较差。

贝伐单抗是重组的人源化的抗血管内皮细胞生长因子（vascular endothelialgrowthfactor，VEGF）的单克隆抗体，可以特异性地阻断VEGF，结合血管内皮细胞生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR），抑制血管内皮细胞的生长与新血管增生，进而抑制肿瘤生长与进展。

本试验旨在对比KRAS基因第12、13密码子突变类型分布情况，同时对比KRAS基因第12、13密码子突变与大肠癌患者临床病理特征、贝伐单抗治疗效果以及生存时间的关系，从而为KRAS基因第12、13密码子突变的大肠癌患者提供更好的个体化靶向治疗方案及判定预后的指标。

方法：本课题收集我院收治的大肠癌患者共68例，时间从2011年3月至2012年9月。

入组病例已通过病理学诊断为大肠癌。

按要求摘录病例的临床病理资料（包括患者性别、年龄、肿瘤临床分期、采取的临床治疗方案及其疗效等）。

应用K-ras基因的聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增及测序法检测KRAS基因第12、13密码子突变状态，并对比KRAS基因第12、13密码子突变与大肠癌患者临床病理特征、贝伐单抗治疗效果及生存时间的关系。