常见蛋白酶抑制剂
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当前位置:生物帮 > 实验技巧 > 生物化学技术 > 正文蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期:2012-06-13 来源:互联网标签:相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解。
在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。
以下列举了5种经常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对分歧蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解。
在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。
以下列举了5种经常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对分歧蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。
由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。
在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。
经常使用抑制剂PMSF1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保管一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步调中加入新鲜的PMSF。
EDTA1)抑制金属蛋白水解酶;2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;3)溶液在4℃稳定六个月以上;4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。
胃蛋白酶抑制剂(pepstantin)l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;2)1mg/ml溶于甲醇中;3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)5)在水中不溶解。
蛋白酶抑制剂P M S F This manuscript was revised on November 28, 2020
P M S F
分子式:C7H7FO2S
分子量:174.19
1)抑制(如胰蛋白酶,,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于异丙醇(或无水乙醇)中;它对异丙醇没有特殊要求,分析纯即可,它也可以用DMSO进行配置,储存浓度同样为100mM
3)在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.;
4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1mM),储存液浓度为100或200mM;
5)在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯
化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。
(见水分解,使用前加入)
注意事项
1.PMSF剧毒,严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。
凡被PMSF污染的衣物应予
丢弃。
2.PMSF在水溶液中不稳定。
应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。
3.PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。
pH值为8.0时,20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为
85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。
PMSF的储存:2-8℃可以存放数月之久。
欲长期保存,可冻存在-20℃。
蛋白酶抑制剂选择指南1 蛋白酶抑制剂选择指南抑制剂 工作浓度 分子量 抑制蛋白酶种类 稳定性AEBSF终浓度1mM MW:239.5不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制胰蛋白酶,糜蛋白酶,纤溶酶,凝血酶及激肽释放酶. 可溶于水,其pH7的水溶液在4o C可保持稳定1-2个月,在pH>8的情况下会发生缓慢水解Aprotinins 抑肽酶终浓度2ug/ ml MW:6512 可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制纤溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶,但不抑制凝血酶和Factor Xa。
非常稳定,当pH>12.8时失去活性,可溶于水(10mg/ml),-20o C下可长期保存Bestatin终浓度10uM MW:308.4 可逆的丙氨酰-氨基肽酶抑制剂, 工作液可保存一天,1mM的甲醇贮存液在-20o C可保存至少一个月E-64 Protease Inhibitor终浓度10uM MW:357.4 不可逆的半胱氨酸酸蛋白酶抑制剂,抑制半胱氨酸酸蛋白酶而不会影响其他酶的半胱氨酸残基,与小分子量的巯基醇如beta-巯基乙醇不会产生反应,具有高度特异性。
工作液在正常pH值下可保持稳定数天,1mM的水溶液在-20o C可保存几个月EDTA, 4Na终浓度10mM MW:380.2 金属蛋白酶的可逆性螯合物,可能同时影响其他金属依赖性生物过程。
其水溶液很稳定,其贮存液(pH8.5的0.5M 水溶液)在4o C可保存数月Leupeptin, 半硫酸盐 亮抑酶肽(亮肽素) 终浓度100uM MW:493.6 可逆的丝氨酸及半胱氨酸蛋白酶制剂,可抑制胰蛋白酶样蛋白酶及一些半胱氨酸蛋白酶如:Lys-C内切蛋白酶,激肽释放酶,木瓜蛋白酶,凝血酶,Cathepsin B及胰蛋白酶。
工作液的稳定期为数小时,贮存液(10mM水溶液)在4o C时稳定期为一周,-20o C时稳定期为一个月Pepstatin A 终浓度1uM MW:685.9 可逆的天冬氨酸蛋白酶,可抑制胃蛋白酶,Cathepain B&L,血管紧张肽原酶(renin)及以1mg/ml溶于甲醇,搅拌过夜可以1mg/ml溶于乙醇,333mg/ml溶于6N的蛋白酶抑制剂选择指南2抑肽素A 很多细菌来源的天冬氨酸蛋白酶,与蛋白酶有微弱的结合。
蛋白酶体抑制剂作用机制概述说明以及解释引言部分内容:1.1 概述蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰细胞内蛋白酶体功能的化合物或分子。
蛋白酶体是细胞中主要负责蛋白质降解的细胞器,通过这一过程可以清除老化、变性或异常的蛋白质,并参与调控许多生物学过程。
因此,研究和理解蛋白酶体抑制剂的作用机制具有重要的理论和实践意义。
1.2 文章结构本文主要从以下几个方面对蛋白酶体抑制剂作用机制进行探讨:首先介绍了什么是蛋白酶体抑制剂以及其在细胞中的功能和调控;接着概述了常见的蛋白酶体抑制剂及其分类,并阐述了它们在药物研发中的应用和前景展望;然后解释了蛋白酶体抑制剂对蛋白降解途径和产生效果的机理,并探讨了其对生物学意义和影响因素;最后总结了文章的主要内容,并展望了蛋白酶体抑制剂在未来研究和应用方面的发展。
1.3 目的本文旨在对蛋白酶体抑制剂的作用机制进行综述,希望通过深入探讨蛋白酶体抑制剂对细胞内蛋白酶体的影响,加深我们对这类化合物或分子的理解,并为进一步研究和开发具有潜力的药物提供参考。
相信通过本文的阐述,读者能够更好地认识和理解蛋白酶体抑制剂在生物学领域中所扮演的关键角色。
2. 蛋白酶体抑制剂的作用机制:2.1 什么是蛋白酶体抑制剂:蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰蛋白酶体功能的化合物或药物。
蛋白酶体是细胞内起着关键作用的小囊泡结构,负责进行细胞内的蛋白质降解和回收。
2.2 蛋白酶体在细胞中的功能和调控:蛋白酶体参与了多种生物学过程,包括细胞周期调控、免疫应答、应激响应以及疾病发展等。
蛋白酶体内含有多种不同类型的蛋白水解酶(即蛋白酶),它们协同作用来降解细胞内已经老化或异常的蛋白质,并将其分解成氨基酸片段供细胞再利用。
2.3 蛋白酶体抑制剂对蛋白酶体的影响与作用机制:蛋白酶体抑制剂可以干扰或阻止蛋白酶体的正常功能。
它们通过不同的机制影响蛋白酶体,例如抑制蛋白酶体中的水解酶活性、阻止蛋白质进入蛋白酶体或干扰蛋白质在蛋白酶体内的降解过程。
P M S F
分子式:C7H7FO2S
分子量:174.19
1抑制如胰蛋白酶,,凝血酶和巯基蛋白酶如木瓜蛋白酶;
210mg/ml溶于异丙醇或无水乙醇中;它对异丙醇没有特殊要求,分析纯即可,它也可以用DMSO进行配置,储存浓度同样为100mM
3在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.;
4工作浓度:17~174ug/ml0.1~1mM,储存液浓度为100或200mM;
5在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次;见水分解,使用前加入
注意事项
1.PMSF剧毒,严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险;为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之;凡被PMSF污染的衣物应予丢弃;
2.PMSF在水溶液中不稳定;应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中;
3.PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃;pH值为8.0时,20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性pH>8.6并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃;
PMSF的储存:2-8℃可以存放数月之久;欲长期保存,可冻存在-20℃。
奥默生物电话:021-5096 7598 邮箱:techsupport@ 网站:产品简介:本产品是由6种独立的蛋白酶抑制剂(不含EDTA)按照优化的配比配置而成的蛋白酶抑制剂混合物。
其作用的靶点分别为丝氨酸蛋白酶,丝氨酸半胱氨酸蛋白酶,氨肽酶,半胱氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶等,广泛作用于各种蛋白酶,可称之为广谱蛋白酶抑制剂。
本产品应于-20℃环境下密封保存,产品有效期为2年。
使用时可短时间放置于常温或4℃中,用毕应立即放回-20℃中保存。
储存条件:蛋白酶抑制剂Cocktail (不含EDTA,100X DMSO储液)蛋白酶抑制剂Cocktail 使用说明书蛋白酶抑制剂通过抑制蛋白酶的活性,减少蛋白酶对蛋白的分解,从而有效地提高蛋白质得出率,而且不使细胞及组织本身的性质发生改变。
作用原理:产品组成:成分MTT法CCK法 AEBSFAprotininBestatinE-64LeupeptinPepstatin A Cysteine proteases Serine proteases Aminopeptidases Serine proteases Serine and cysteine proteases Aspartic proteases Irreversible Reversible Reversible ReversibleReversible Irreversible 靶点靶点类型运输条件: 蓝冰运输。
奥默生物使用说明:1. 本产品适用于哺乳动物细胞及组织的蛋白质提取及纯化,蛋白免疫印迹(WesternBlot),免疫共沉淀(Co-IP),免疫荧光(IF),免疫组织化学(IHC),激酶测定(kinaseassay)和抗体,酶诊断试剂盒(Dignose Kit)等。
2. 实验时,按照1:100的容积比,将Cocktail预先加入在已准备好的实验体系中,轻轻混合均匀。
注意事项:1. 本产品不含EDTA,为100×DMSO储存液形式。
常用抗病毒药物的作用机制和特点抗病毒药物是一类被广泛使用于治疗各种病毒感染的药物。
它们通过不同的作用机制来抵制病毒的复制和传播,从而达到抗病毒的效果。
本文将介绍几种常用抗病毒药物的作用机制和特点。
一、核苷类似物核苷类似物是一类通过模拟自然核苷酸入侵病毒基因组并抑制病毒复制的药物。
它们通过与病毒复制时所需的核苷酸结合,阻断病毒的核酸合成。
常见的核苷类似物药物包括阿昔洛韦、利巴韦林等。
这些药物在治疗疱疹病毒、带状疱疹病毒等病毒感染时表现出良好的疗效。
二、蛋白酶抑制剂蛋白酶抑制剂是一类能够抑制病毒蛋白酶活性的药物。
病毒蛋白酶是病毒复制过程中必需的酶类,它参与了病毒的蛋白质合成和成熟过程。
通过抑制病毒蛋白酶的活性,蛋白酶抑制剂能够阻断病毒的复制和传播。
例如,草果糖基苷和洛匹那韦等抗人免疫缺陷病毒(HIV)药物就属于蛋白酶抑制剂类药物。
三、中和剂中和剂是一类通过与病毒颗粒结合,阻断病毒与宿主细胞结合的药物。
一般来说,病毒入侵宿主细胞的过程需要先与细胞表面的受体结合,然后进入细胞内部进行复制。
中和剂能够结合病毒表面的结构蛋白,阻断病毒与受体的结合,从而抑制病毒的侵染。
例如,恩替卡韦是一种中和剂药物,常用于治疗流感病毒感染。
四、干扰素干扰素是一类具有抗病毒活性的蛋白质。
它能够刺激宿主细胞产生一系列抗病毒蛋白,从而抑制病毒的复制和传播。
干扰素还能够增强宿主细胞的免疫功能,提高机体对病毒感染的抵抗能力。
干扰素主要用于治疗乙型肝炎、丙型肝炎、乙型人类免疫缺陷病毒(HIV)感染等病毒性疾病。
总结起来,常用抗病毒药物的作用机制和特点各有不同。
核苷类似物通过干扰病毒的核酸合成来抑制病毒复制;蛋白酶抑制剂通过抑制病毒蛋白酶的活性来阻断病毒的复制和传播;中和剂通过阻断病毒与宿主细胞的结合来抑制病毒侵染;干扰素则通过增强机体的免疫功能来抵抗病毒感染。
这些药物在临床应用中具有重要的疗效,但也需要在医生的指导下合理使用,以确保疗效和安全性的平衡。
3cl蛋白酶抑制剂原理
蛋白酶抑制剂是一种特殊类型的小分子衍生物,用于抑制对转化蛋白质的解离作用,从而用于治疗、检测和研究生物系统以及蛋白质之间的相互作用和功能。
它们是化合物,其抑制蛋白质的功能是通过扰乱蛋白质的解离功能而实现的。
研究和治疗蛋白质功能和相互作用时,科学家经常使用蛋白酶抑制剂来发现新蛋白质,控制生物学反应,以及实验控制蛋白质。
蛋白酶抑制剂有助于研究蛋白质,原理是它们限制蛋白质之间的酶促反应,从而阻止蛋白质自我修复,破坏蛋白酶活性,并抑制诱导蛋白质辅助作用。
此外,蛋白酶抑制剂也可以用于治疗某些疾病,例如糖尿病和心血管疾病。
在这些疾病中,蛋白质存在不正常活性,使用蛋白酶抑制剂可以阻断它们的活性,从而控制病情的发展。
而且,由于蛋白酶抑制剂的作用是抑制部分蛋白质而不是整个细胞,它具有清洁度高、副作用小等优势,因此被广泛应用于治疗生物反应,包括炎症和免疫反应。
综上所述,蛋白酶抑制剂是一种小分子衍生物,它通过扰乱蛋白质解离功能,从而抑制部分蛋白质的活性。
它被广泛用于研究蛋白质功能和治疗许多疾病,具有可控性强、毒副作用小等优点。
来源:原创,转载请注明发布时间:2009-10-20查看次数:21在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。
蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。
另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的,本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pep stat in 胃蛋白酶抑制剂,EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4原矶酸钠,BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠,Na2P2O4焦磷酸钠等。
对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制,贮存液与工作液浓度,保存都做了详细的说明。
蛋白酶抑制剂P MSF特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆的地面处理)。
溶解性:溶于异丙醇,乙醇,甲醇和丙二醇果>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇,+25 C时稳定至少9个月分子量: 使用:贮存浓度:200mM工作浓度:1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,和组织蛋白酶B 溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。
4C 一周稳定,分成小份冷冻在-20 C至少6个分子量:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度ug/ml (1mM)Ap roti nin 抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶, 激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性:易溶于水(10mg/ml )或缓冲液(例如, tris ,,)。
pH 约7-8 的溶液在4C可保存1周,分装保存在-20 C可至少保存6个月。
避免反复冻融,pH>的碱性环境可使其灭活。
分子量:6,512 使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度:-ug/ml - uM)Pep stat in胃蛋白酶抑制剂特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶,肾素,组织蛋白酶D,凝乳酶, 许多微生物酸性蛋白酶溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇,过夜溶解可达到1mg/ml ;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。
蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全
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摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。
在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。
以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度
恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!
Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统
广州赛诚生物基因表达调控专题
蛋白酶抑制剂
破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。
在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。
以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。
由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。
在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。
常用抑制剂
PMSF
1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于异丙醇中;
3)在室温下可保存一年;
4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);
5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。
EDTA
1)抑制金属蛋白水解酶;
2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;
3)溶液在4℃稳定六个月以上;
4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);
5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。
胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n)
l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;
2)1mg/ml溶于甲醇中;
3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;
4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)
5)在水中不溶解。
亮抑蛋白酶肽(leupeptin)
1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶和组织蛋白酶B;
2)lOmg/ml溶于水;
3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度0.5mg/ml。
胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)
1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;
2)lOmg/ml溶于水,pH7~8
3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);
5)避免反复冻融:
6)在pH>12.8时失活。
蛋白酶抑制剂混合使用
35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂
0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂
0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂
0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂
常用蛋白酶抑制剂表。