蛋白酶抑制剂选择指南

蛋白酶抑制剂分类和应用在分离蛋白时，组织或细胞裂解液中充满了来自溶酶体的酶,而且原先无活性的蛋白酶原被充分激火,开始消化其周围的蛋白质. 为幸免此因素，蛋白酶抑制剂必需被加入在缓冲液内以阻止蛋白酶对细胞组织的消化作用. 来自哺乳类动物，植物, 霉菌或细菌的组织，蛋白酶成份是不同的, 并依照机体状态的进展也能够发生转变. 哺乳类动物组织分离时比细菌或其它组织分离时更需要应用蛋白酶抑制剂使组织细胞受到完全的爱惜.因此，在各类蛋白分离时，在各类蛋白电泳时蛋白酶抑制剂的适被选用就成了很重要的因素。

蛋白酶功能 :涉及到许多细胞内和细胞外的进程:o食物蛋白在消化道的消化o激活无活性酶原和多肽激素/神经转移介质的释放o调剂血凝物质和纤维素o内源性和外源性蛋白的细胞内消化o跨膜的蛋白转移o微生物对生物体解决,通过释放蛋白酶的致使毒性增加蛋白酶分类 :依照催化中心结构的不同蛋白酶可分为4类 :1. 丝氨酸蛋白酶在其活性中心含有丝氨酸和组氨酸，如: 糜蛋白酶, 弹性蛋白酶，血纤维蛋白溶酶，凝血酶，枯草杆菌蛋白酶，胰酶Chymotrypsin, Elastase, Plasmin, Subtilisin, Thrombin, Trypsin2. 半胱氨酸蛋白酶（别名 :硫醇或SH 蛋白酶）在其催化中心含有半胱氨酸，如 : Calpain, 组织蛋白酶 B,C 和L，和木瓜蛋白酶3 天(门)冬氨酸蛋白酶（羧基蛋白酶）在其活化中心含有天(门)冬氨酸，如 : 组织蛋白酶D, 木瓜蛋白酶, 肾素4. 金属蛋白酶含有金属离子，即 : 锌2+在其催化中心，如氨基肽酶，羧基蛋白酶A 和 B，嗜热菌蛋白酶机体避免蛋白酶破坏作用几种可能性 :•酶在特殊囊性小泡的分派 (溶酶体，包涵体)•内源性蛋白酶抑制剂（如 : Aprotinin，抗凝血酶，抗胰酶）SERVA 6种蛋白酶抑制剂鸡尾酒的作用:➢SERVA提供6种不同的蛋白酶抑制剂鸡尾酒，用于分离纯化各类组织的蛋白，多肽的最正确选择➢蛋白酶抑制剂混合物G含有5种水溶性的抑制剂用于抗丝氨酸- , 半胱氨酸- 和金属蛋白酶作用，而且是经常使用选择的鸡尾酒，应当幸免同时利用有机体溶剂➢蛋白酶抑制剂混合物H P含有4种水溶性抑制剂用于抗丝氨酸- , 半胱氨酸蛋白酶作用，而且有效地用于分离和提取重组蛋白，幸免金属螯合物。

当前位置：生物帮 > 实验技巧 > 生物化学技术 > 正文蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期：2012-06-13 来源：互联网标签：相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种经常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对分歧蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销！Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以坚持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种经常使用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对分歧蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

经常使用抑制剂PMSF1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保管一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步调中加入新鲜的PMSF。

EDTA1)抑制金属蛋白水解酶;2)0.5mol/L水溶液，pH8~9;3)溶液在4℃稳定六个月以上;4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);5)加入NaOH调节溶液的pH值，否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepstantin)l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋白酶D和凝乳酶;2)1mg/ml溶于甲醇中;3}储存液在4℃一周内稳定，-20℃稳定6个月;4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)5)在水中不溶解。

蛋白酶抑制剂引言蛋白酶抑制剂是一类用于抑制酶活性的化合物，其中蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶。

蛋白酶在生物体中起着重要的调控作用，参与多种生物反应的调节和控制。

然而，在某些情况下，蛋白酶的过度活化可能导致疾病的发生和发展。

因此，研发蛋白酶抑制剂成为一种重要的医药研究方向。

本文将介绍蛋白酶抑制剂的基本分类、作用机制以及在药物研发中的应用。

分类根据蛋白酶抑制剂对酶活性的抑制方式，蛋白酶抑制剂可分为两大类：1.反式抑制剂：反式抑制剂与酶结合后形成稳定的酶-抑制剂复合物，从而阻止酶催化反应的进行。

典型的例子是蛋白酶抑制剂Aprotinin，它通过与蛋白酶结合形成稳定的复合物，从而抑制蛋白酶的活性。

2.逆式抑制剂：逆式抑制剂通过与酶催化中心结合，改变酶的构象和活性。

这类抑制剂通常是模拟酶底物的分子结构，与酶催化中心发生特异性的相互作用。

逆式抑制剂的典型例子是酶的底物类似物，如硫氰酸酰胺（p-Tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone，TPCK）可以选择性地抑制胰蛋白酶的活性。

作用机制蛋白酶抑制剂能够通过不同的机制来抑制蛋白酶的活性。

以下是几种常见的作用机制：1.受体拮抗作用：某些蛋白酶抑制剂能够与蛋白酶结合并阻断其与受体的相互作用，从而抑制了受体的活化。

这种机制在很多药物设计中都有重要的应用。

2.亲和力增强：一些蛋白酶抑制剂可以增强与酶的结合亲和力，从而阻止酶底物结合，进而抑制了酶的活性。

3.酶底物竞争：逆式抑制剂通过与酶催化中心竞争底物结合位点，从而阻断底物与酶的结合，进而抑制了酶活性的发生。

4.构象改变：某些蛋白酶抑制剂能够与酶发生特异性相互作用，改变酶的构象从而影响酶的活性。

应用蛋白酶抑制剂在医药领域有着广泛的应用。

以下是一些典型的应用示例：1.抗癌药物：蛋白酶在肿瘤细胞中起着重要的作用，因此蛋白酶抑制剂被广泛用于抗癌药物的研发。

例如，蛋白酶抑制剂Paclitaxel可以通过抑制肿瘤细胞内的蛋白酶活性来抑制细胞的增殖。

蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂PMSF PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride，中文名为苯甲基磺酰氟。

分子式为C7H7FO2S，分子量为174.19，纯度>99%。

常用生化试剂，用于抑制蛋白酶.【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成 1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃。

如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。

一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。

凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

PMSF在水溶液中不稳定。

应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。

pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。

蛋白水解酶抑制剂啊实验室常用的啊主要用于组织匀浆时用!!1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

蛋白质提取‎过程中常用‎的蛋白酶和‎磷酸酶抑制‎剂详细使用‎说明转自:http://www.bioas‎/html/980.html在与蛋白相‎关的检测中‎，最关键的一‎步便是蛋白‎质的提取。

在提取的过‎程中，我们要经常‎加入以防止‎。

另外在磷酸化‎蛋白的研究‎过程中，也是必不可‎少的。

本文详细总‎结了常用的‎P MSF、 Leupe‎p tin亮‎肽素、Aprot‎i nin抑‎肽酶、Pepst‎a tin胃‎、EDTA-Na2等以及NaF‎氟化钠、Na3VO‎4原矾酸钠、Beta-glyce‎r opho‎s phat‎e甘油磷酸‎钠、Na2P2‎O4焦磷酸钠等的‎溶液配制、贮存液与工‎作液浓度及‎保存条件。

一、蛋白酶抑制‎剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白‎酶抑制剂，如胰凝乳蛋‎白酶、胰蛋白酶和‎凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋‎白酶如木瓜‎蛋白酶。

溶解性：溶于异丙醇‎、乙醇、甲醇和丙二‎醇里>10mg/ml。

在水溶液中不‎稳定。

在100%异丙醇，25℃时稳定至少‎9个月。

分子量：174.2使用：贮存浓度2‎00mM，工作浓度1‎m MLeupe‎p tin 亮肽素特性‎：抑制丝氨酸‎和半胱氨酸‎蛋白酶如胰‎蛋白酶、木瓜蛋白酶‎、纤溶酶和组‎织蛋白酶B‎。

溶解性：高度溶于水‎（1mg/ml）。

4℃一周稳定，分成小份，冷冻在 -20℃至少6个月‎。

分子量：C20H3‎8N6O4‎×1/2 H2SO4‎:475.6 C20H3‎8N6O4‎x 1/2 H2SO4‎× H2O:493.6使用：贮存浓度1‎m g/ml，工作浓度0‎.5 ug/ml (1mM)。

Aprot‎i nin抑‎肽酶特性：丝氨酸蛋白‎酶抑制剂，抑制纤维蛋‎白溶酶、激肽释放酶‎、胰蛋白酶、糜蛋白酶的‎高活性。

不抑制凝血‎酶或因子X‎。

溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。

奥默生物电话：021-5096 7598 邮箱：techsupport@ 网站：产品简介：本产品是由6种独立的蛋白酶抑制剂（不含EDTA）按照优化的配比配置而成的蛋白酶抑制剂混合物。

其作用的靶点分别为丝氨酸蛋白酶，丝氨酸半胱氨酸蛋白酶，氨肽酶，半胱氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶等，广泛作用于各种蛋白酶，可称之为广谱蛋白酶抑制剂。

本产品应于-20℃环境下密封保存，产品有效期为2年。

使用时可短时间放置于常温或4℃中，用毕应立即放回-20℃中保存。

储存条件：蛋白酶抑制剂Cocktail (不含EDTA，100X DMSO储液)蛋白酶抑制剂Cocktail 使用说明书蛋白酶抑制剂通过抑制蛋白酶的活性，减少蛋白酶对蛋白的分解，从而有效地提高蛋白质得出率，而且不使细胞及组织本身的性质发生改变。

作用原理：产品组成：成分MTT法CCK法 AEBSFAprotininBestatinE-64LeupeptinPepstatin A Cysteine proteases Serine proteases Aminopeptidases Serine proteases Serine and cysteine proteases Aspartic proteases Irreversible Reversible Reversible ReversibleReversible Irreversible 靶点靶点类型运输条件： 蓝冰运输。

奥默生物使用说明：1. 本产品适用于哺乳动物细胞及组织的蛋白质提取及纯化，蛋白免疫印迹（WesternBlot）,免疫共沉淀（Co-IP），免疫荧光（IF），免疫组织化学（IHC），激酶测定（kinaseassay）和抗体，酶诊断试剂盒（Dignose Kit）等。

2. 实验时，按照1:100的容积比，将Cocktail预先加入在已准备好的实验体系中，轻轻混合均匀。

注意事项：1. 本产品不含EDTA，为100×DMSO储存液形式。

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。

溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。

分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。

溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。

4℃一周稳定，分成小份，冷冻在-20℃至少6个月。

分子量：C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。

Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。

不抑制凝血酶或因子X。

溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。

pH约7~8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。

分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。

Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。

4℃稳定一周，分装储存于-20℃时可保存1个月。

分子量：685.9使用：贮存浓度1mg/ml，使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。

EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4℃稳定至少6个月分子量：372.24使用：工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8~9时再加入。

蛋白酶抑制剂成分蛋白酶抑制剂是一种可以抑制蛋白酶活性的化合物。

蛋白酶是一种酶类，它在细胞内起着非常重要的作用，可以分解蛋白质分子，使其成为更小的分子。

但是，在某些情况下，过多的蛋白酶活性会导致细胞内的蛋白质被分解得过快，从而对细胞造成伤害。

因此，蛋白酶抑制剂成分可以在一定程度上保护细胞免受蛋白酶的伤害。

目前，已经发现了很多种蛋白酶抑制剂成分，其中一些已经被广泛应用于医学和生物学领域。

以下是一些常见的蛋白酶抑制剂成分：1. 蛋白酶抑制剂-1（Protease Inhibitor-1）蛋白酶抑制剂-1是一种天然存在于人体中的蛋白质，它可以抑制多种蛋白酶的活性。

研究表明，蛋白酶抑制剂-1可以对多种疾病有治疗作用，如心血管疾病、肿瘤、炎症等。

2. 甲基硫代咪唑（Methylthioadenosine）甲基硫代咪唑是一种天然存在于人体中的化合物，它可以抑制多种蛋白酶的活性。

研究表明，甲基硫代咪唑可以对多种疾病有治疗作用，如肿瘤、炎症等。

3. 金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂（Staphylococcus aureus Protease Inhibitor）金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂是一种可以抑制金黄色葡萄球菌产生的多种蛋白酶的化合物。

这种化合物可以用于治疗金黄色葡萄球菌感染等疾病。

4. 蛋白酶抑制剂A（Protease Inhibitor A）蛋白酶抑制剂A是一种可以抑制多种蛋白酶活性的化合物。

研究表明，蛋白酶抑制剂A可以对多种疾病有治疗作用，如肿瘤、心血管疾病等。

5. 磷酸二酯酶抑制剂（Phosphodiesterase Inhibitor）磷酸二酯酶抑制剂是一种可以抑制多种磷酸二酯酶活性的化合物。

研究表明，磷酸二酯酶抑制剂可以对多种疾病有治疗作用，如心血管疾病、哮喘等。

总之，蛋白酶抑制剂成分具有广泛的应用前景，在医学和生物学领域都有着重要的作用。

未来，随着科学技术的不断发展，相信会有更多的蛋白酶抑制剂成分被发现，并用于治疗更多的疾病。