乳制品中微生物的检测

乳与乳制品病原微生物检验方法金黄色葡萄球菌肠毒素的检验 YLNB4.21. 仪器及器材1.1德国必发葡萄球菌肠毒素试剂盒 （套）1.2酶标仪1.3移液器 Termo Labsystems 50 μL 、100μL 、300μL （多道）1.4低温离心机及离心管：3500转/分1.5灭菌吸管：1ml （具0.01ml 刻度）、10ml （具0.1ml 刻度）1.6 NaH2PO4。

H2O 、 Na2HPO4。

2H2O 、NaCI 、 n--庚烷2. 检验程序：室温 ，1 h样品前处理加入100 µL 样品(A---G 孔)在H 孔中，加100 µL反复洗板（至少３次）将足够标准和样品所用数量的孔条插入微孔架加100 µL酶共轭化合物室温， 1 h反复洗板（至少３次）加５0 µL的培养基和５0 µL色液体室温， 0.5 h加100 µL终止液60min内测量吸光度值分析结果出报告3. 方法3.1样品前处理3.1.1 牛奶：取10ml样品于离心管内进行低温离心（10min/3500转/10℃）后去除上层油脂层，取上清液1ml，按1：20的比例用蒸馏水稀释后无菌过滤。

3.1.2 面、米、肉、奶油及其他脂肪含量低于40%的食品：取10g样品切碎（最好进行均质），添加15mL缓冲液，调节PH值至7.4，摇匀15min后进行离心（10min/3500转/15℃），如必要去除上层油脂层，过滤。

3.1.3 脂肪含量超过40%的食品：取10g样品切碎（最好进行均质），添加15mL缓冲液，调节PH值至7.4，摇匀15min 后进行离心（10min/3500转/15℃），取5mL上层液转移到另一个离心管内，加5mL的n—庚烷，充分混匀后再离心（5min/3500转/15℃），去除上层庚烷层，过滤。

3.2测试操作3.2.1 把所有试剂在使用之前均放至室温（20—25℃）。

乳制品的检测标准一、引言乳制品是由乳汁经过加工、发酵等工艺制成的食品。

乳制品的质量和安全问题直接影响了人们的健康。

为了保护消费者的权益，确保乳制品质量安全，制定本标准。

二、术语和定义1. 乳制品：由牛奶、羊奶、山羊奶等乳液制成的食品。

2. 乳汁：来自母兽乳腺的分泌物。

3. 牛奶：来自奶牛乳腺的分泌物。

...三、质量标准1. 外观检查乳制品外观应良好，无霉菌斑点、异味，无异物，颜色均匀。

2. 物理性质检测乳制品的物理性质应符合以下要求：（1）脂肪含量：牛奶及其制品脂肪含量应符合国家标准；（2）酸度：乳制品的酸度应符合国家标准；（3）凝固性：如酸奶等乳制品应具有一定凝固性；（4）黏度：奶酪等乳制品应具有适当的黏度；...3. 化学成分检测乳制品的化学成分检测包括但不限于以下项目：（1）乳糖含量；（2）乳蛋白含量；（3）乳脂肪含量；（4）乳酸含量；（5）添加剂含量（如防腐剂、着色剂等）；...4. 微生物检测乳制品的微生物检测包括但不限于以下项目：（1）总菌落数；（2）大肠杆菌群；（3）沙门氏菌；（4）黄金色葡萄球菌；...四、安全标准乳制品的安全标准应符合以下要求：（1）重金属残留物：乳制品中的重金属残留不得超过国家标准；（2）农药残留物：乳制品中的农药残留不得超过国家标准；...五、质量控制1. 从原材料采购到生产加工过程，应执行严格的质量控制措施；2. 在生产过程中，应设立质量检测环节，随时监测乳制品的质量；3. 对农药残留物、重金属残留物等有害物质设置合理的监测措施； ...六、报告和记录1. 生产商应对每批次生产的乳制品进行检测，并保存检测报告；2. 检测报告应详细记录乳制品的检测项目、结果等信息；3. 检测报告和相关记录应妥善保存以备核查。

七、质量管理生产商应建立完善的质量管理体系，并根据情况及时调整及改进。

本标准自颁布之日起生效，解释权归相关主管部门所有。

牛奶微生物检测标准我国乳制品的标准
在中国，牛奶微生物检测的标准主要参考国家标准《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物检验方法》（GB 4789.5-2013）以及国家标准《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物限量》（GB 2715-2016）。

《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物检验方法》（GB 4789.5-2013）规定了牛奶及乳制品微生物检验的方法和程序，包括菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌等指标的检测方法。

《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物限量》（GB 2715-2016）规定了牛奶及乳制品中各种微生物的限量要求，以确保产品的卫生安全。

根据该标准，牛奶及乳制品中的各种微生物的限量要求如下：
1. 菌落总数：不超过1×10^5个/ml（牛奶），不超过1×10^6个/g（乳制品）；
2. 大肠菌群：不得检出；
3. 金黄色葡萄球菌：不得检出；
4. 沙门氏菌：不得检出；
5. 霉菌和酵母菌：不超过1×10^3个/ml（牛奶），不超过1×10^4个/g（乳制品）。

需要注意的是，这些标准只是基本要求，实际生产过程中，企业可以根据自身情况制定更为严格的内部标准，以确保产品质量和安全。

同时，不同地区和不同产品可能还有其他特定的标准和要求，所以在具体情况下，还需要参考相关地方性和行业性标准。

乳与乳制品微生物检验方法1.菌群总数测定方法：菌群总数测定方法是衡量乳制品中微生物质量的基础方法之一、目前常用的菌群总数测定方法有总计数平板法、液体培养法和荧光素酶法。

总计数平板法是将样品分别接种在琼脂平板上，通过平板上菌落的形成来计数。

液体培养法是将样品接种在适当的培养基中，通过测量培养液的浑浊度或菌液悬浮液中的细菌数量来计数。

荧光素酶法是通过加入荧光素酶底物，菌落会释放出荧光，通过测量荧光强度来计数。

这些方法可以快速、准确地测定样品中菌落总数，从而确定乳制品的微生物质量。

2.根据德国奶酪乳制品行业协会VDF指南的要求，共有500多种病原菌可以检测，包括沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及其他致病菌。

这些方法多是PCR技术、荧光定量PCR技术等。

以沙门氏菌检测为例，主要有传统培养法、分子生物学培养法、酶免的葡萄糖酸盐液体培养基、黄金标准法等多种方法。

其中，PCR技术可以通过扩增沙门氏菌的DNA序列，快速、准确地检测样品中的沙门氏菌。

3.酸奶产品中乳酸菌数量的测定：乳酸菌是酸奶中的一类重要菌群，其数量多少直接影响酸奶的质量。

常用的测定乳酸菌数量的方法有直接显微法、涂布法、测定菌落数量法等。

直接显微法是将样品显微镜下直接观察和计数乳酸菌的数量。

涂布法是将样品涂于适当的培养基上，通过菌落的形成来计数。

菌落数量法是将样品稀释后均匀涂布在琼脂平板上，通过菌落的形成来计数。

这些方法可以可靠地测定乳酸菌的数量，从而评估酸奶的质量。

4.冷藏和储存条件检验方法：乳制品的储存条件对其微生物质量有着至关重要的影响。

常用的储存条件检验方法包括温度检测、湿度检测、pH值检测等。

温度检测可以通过温度计或温度记录器来测量乳制品的储存温度，确保其符合相关标准。

湿度、pH值等的检测可以通过仪器设备进行测量和监控。

这些方法能够及时发现和纠正乳制品储存条件的问题，保证乳制品的微生物质量稳定。

总结起来，乳与乳制品微生物检验方法包括菌群总数测定方法、病原菌检测方法、乳酸菌数量测定方法和储存条件检验方法等。

乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌快速检测方法的研究一、本文概述乳制品作为人们日常饮食中重要的营养来源，其品质与安全性一直受到广泛关注。

细菌总数、酵母菌和霉菌等微生物指标是衡量乳制品卫生质量的重要参数。

然而，传统的微生物检测方法不仅耗时，而且操作繁琐，难以满足现代乳制品生产快速、准确的检测需求。

因此，研究乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌的快速检测方法具有重要意义。

本文旨在探讨乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌的快速检测方法，包括传统方法与现代生物技术的比较，以及新型快速检测技术的开发与应用。

通过综述相关文献和实验研究，本文旨在分析各种检测方法的优缺点，为乳制品行业提供一种快速、准确、可靠的微生物检测手段，以提高乳制品的品质与安全性，保障消费者的健康。

二、材料与方法本研究所用的乳制品样品包括牛奶、酸奶、奶酪等多种类型，均采自市场及乳制品生产企业，确保样品的多样性和实际应用价值。

研究所用培养基包括营养肉汤、孟加拉红培养基等，用于细菌、酵母菌和霉菌的培养。

试剂包括生理盐水、无菌水、无菌棉签等，均为实验室常用试剂。

研究所用仪器包括恒温培养箱、显微镜、菌落计数器、无菌操作台等，设备齐全，满足实验需求。

将采集的乳制品样品进行预处理，包括均质化、稀释等步骤，以便后续的检测操作。

采用平板菌落计数法，将处理后的样品接种于营养肉汤培养基，恒温培养一定时间后，观察并计数菌落数，以CFU/mL表示。

采用孟加拉红培养基，将处理后的样品接种于培养基上，恒温培养一定时间后，观察并计数酵母菌和霉菌的菌落数，以CFU/mL表示。

对实验数据进行整理、统计和分析，采用适当的统计方法进行差异比较和相关性分析，得出实验结果。

本研究采用平板菌落计数法检测乳制品中的细菌总数、酵母菌和霉菌，方法简单、快速、准确，可为乳制品的质量控制提供有效的技术支持。

通过对不同乳制品样品的检测，可以了解各类乳制品中微生物污染的状况，为乳制品的安全生产和消费提供参考依据。

低脂巴氏杀菌乳中微生物污染的检测与控制策略研究摘要：低脂巴氏杀菌乳是一种广泛消费的乳制品，而其中微生物污染一直是一个严峻的问题。

本文旨在研究低脂巴氏杀菌乳中微生物污染的检测与控制策略，以保证其产品的质量和安全性。

首先，我们探讨了低脂巴氏杀菌乳中常见的微生物污染源。

然后，我们介绍了目前常用的检测方法，包括传统的培养方法和现代的分子生物学技术。

此外，我们还分析了针对低脂巴氏杀菌乳中微生物污染的控制策略，包括原料质量控制、工艺控制和环境卫生控制。

最后，我们还提出了一些值得进一步研究和改进的方向，以期提高低脂巴氏杀菌乳的质量和安全性。

1. 引言低脂巴氏杀菌乳是一种非常受欢迎的乳制品，不仅口感好，而且富含营养。

然而，由于其高水分和低脂肪含量，低脂巴氏杀菌乳容易受到各种微生物的污染，如大肠埃希菌、沙门氏菌、乳酸杆菌等。

微生物污染不仅会降低产品的品质，还可能对消费者的健康造成潜在威胁。

因此，对低脂巴氏杀菌乳中微生物污染的检测与控制策略进行研究是至关重要的。

2. 低脂巴氏杀菌乳中微生物污染源低脂巴氏杀菌乳中微生物污染的主要源头包括原料、设备和环境。

原料污染通常是由于奶源的问题，如奶牛的健康状况和生产环境的卫生状况。

设备污染可以发生在乳制品生产过程中，主要是因为生产设备的不洁净和不适当的清洁消毒措施。

环境污染是由于生产车间周围的微生物存在或污染物进入生产车间而引起的。

3. 低脂巴氏杀菌乳中微生物污染的检测方法为了及时发现和控制低脂巴氏杀菌乳中的微生物污染，准确的检测方法是必要的。

目前常用的检测方法包括传统的培养方法和现代的分子生物学技术。

传统的培养方法主要通过对样品进行培养、分离、计数和鉴定微生物的方式来检测微生物污染。

而现代的分子生物学技术，如PCR、实时荧光定量PCR等，可以准确快速地检测微生物的存在和数量。

4. 低脂巴氏杀菌乳中微生物污染的控制策略为了控制低脂巴氏杀菌乳中的微生物污染，需要从原料质量控制、工艺控制和环境卫生控制等方面入手。

乳与乳制品病原微生物检验方法溶血性链球菌的检验YLNB4.51．仪器及器材1.1 恒温培养箱：36±1℃。

1.2 恒温水浴锅：36±1℃。

1.3 显微镜。

1.4 离心机：4000 r/min1.5 均质器或灭菌乳钵。

1.6 灭菌平皿：直径90mm。

1.7 灭菌试管：10mm×100mm 、16mm×160mm1.8 灭菌吸管：1mL、5mL 、10mL。

1.9 冰箱：0～4℃1.10 灭菌锥形瓶：100mL。

1.11 架盘药物天平：0g～500g,精确至0.5g。

1.12 灭菌棉签、镊子等。

2. 培养基和试剂2.1 葡萄糖肉浸液肉汤：按GB 4789.28中4.1规定，在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。

2.2 肉浸液肉汤：按GB 4789.28中4.1规定。

2.3 匹克氏肉汤：按GB 4789.28中4.62规定。

2.4 血琼脂平板：按GB 4789.28中4.6规定。

2.5 人血浆。

2.6 0.25%氯化钙。

2.7 灭菌生理盐水。

2.8 杆菌肽药敏纸片(含0.04单位)。

3. 检验程序36±1℃ 24h36±1℃ 24h36±1℃ 24h检 样 25g(ml)+225ml 灭菌生理盐水 葡萄糖肉浸液肉汤或匹克氏肉汤 血 平 板 血平板（分纯培养）链激酶试验 杆菌肽敏感试验 观 察 溶 血 革兰氏染色报告4. 方法4.1 样品处理按无菌操作称取食品检样25g （mL），加入225mL灭菌生理盐水，研成匀浆制成混悬液。

4.2 培养将上述混悬液吸取5mL，接种于50mL葡萄糖肉浸液肉汤；或直接划线接种于血平板，如检样污染严重，可同时按上述量接种匹克氏肉汤，经36±1℃培养24h，接种血平板，置36±1℃培养24h，挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落，在血平板上分纯，然后观察溶血情况及革兰氏染色，并进行链激酶试验及杆菌肽敏感试验。

乳与乳制品微生物检验方法菌落总数的测定1、术语菌落是指在因体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计的相同的细茵集合而成。

茵落总数是指食品检样经处理后，在一定条件下培养后（如营养成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1ml（g）检样中所生长的细菌菌落的总数。

本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。

所以厌氧或微需氧茵、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有的生长条件不能满足其生理要求，故难以生长。

因此菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数。

菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。

2、设备和材料培养箱：36±1℃冰箱：0～4℃恒温水浴：46±1℃天平电炉吸管广口瓶或三角瓶：容量为500ml玻璃珠：直径50mm平皿：直径约90 mm试管放大镜菌落计数器酒精灯均质器或乳钵试管架灭菌刀或剪子灭菌镊子3 培养基和试剂营养琼脂培养基：按中规定或按购买的商用培养基配方配制。

生理盐水75%乙酵溶液4 检验程序菌落总数的检验程序如下：5 操作步骤检样稀释及培养5.1.1以无菌操作将检样25g（或ml）剪碎放于装有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭玻璃瓶内，（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。

固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000～10000r/min 的速度处理1min，做成1：10的均匀稀释液。

5.1.2用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液）振摇试管，混合均匀，做成1：100的稀释液。

5.1.3另取1ml灭菌吸管，按上述操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用一支1ml灭菌吸管。