氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鯝幼鱼的毒性
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几种典型有害化学品对水生生物的急性毒性
王宏;沈英娃;卢玲;朱红梅;陈宏;许永香;高世荣
【期刊名称】《应用与环境生物学报》
【年(卷),期】2003(9)1
【摘要】采用水体中 3个营养级别的水生生物 (绿藻、水和鱼 )测试卤代酚类、硝基苯类、烷基苯类典型有毒有害化学品对水生生物的急性毒性 ,同时对上述物质对水生生物的安全性进行初步评估 ,并预测了上述物质对水生生物的环境安全浓度 .研究结果表明 ,在 3类 12种有机污染物中 ,卤代酚类物质对水生生物的毒性最强 ,其中五氯苯酚对水生生物具有极高毒性 .在 3个营养级别的受试生物中 ,剑尾鱼对上述毒物具有较好的敏感性 ,结果稳定 ,重现性好 ,说明剑尾鱼是一种优良的水生毒性试验材料 .图 1表 3参
【总页数】4页(P49-52)
【关键词】生态毒理学;有害化学品;急性毒性;水生生物
【作者】王宏;沈英娃;卢玲;朱红梅;陈宏;许永香;高世荣
【作者单位】国家环境保护总局化学品登记中心;中国预防医学科学研究院
【正文语种】中文
【中图分类】R994.6
【相关文献】
1.2种典型家用消毒剂对水生生物的急性毒性影响及生态效应阈值研究 [J], 朱英;胡双庆;沈根祥;张洪昌;杨灿
2.化学品水生生物急性毒性试验的QA检查 [J], 蒋云;文锡梅;陆洋;肖子范;王波娜
3.典型性印染废水生物急性毒性水平分析 [J], 宫苏弟
4.液体化学品水生物急性毒性试验方法研究 [J], 赵前;张秀芝;张毅
5.微生物细胞工厂生产化学品的研究进展——以几种典型小分子和大分子化学品为例 [J], 郑煜堃;孙青;陈振;于慧敏
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三种常用消毒药物对牙鲆幼鱼的急性毒性试验靳晓敏;刘玉芹;王志敏;肖金奎;胡锦旗【摘要】选用二氧化氯、高锰酸钾和硫酸铜这三种常用消毒类药物对牙鲆幼鱼进行急性毒性试验,幼鱼体长6.0~9.0 cm,平均体重7.0 g.结果表明,三种药物对牙鲆幼鱼的安全浓度分别为0.876 mg·L-1、0.397 mg·L-1和0.329 mg·L-1.牙鲆幼鱼对三种药物的敏感性由强到弱依次为:硫酸铜>高锰酸钾>二氧化氯.【期刊名称】《河北渔业》【年(卷),期】2009(000)011【总页数】3页(P1-2,10)【关键词】牙鲆;幼鱼;二氧化氯;高锰酸钾;硫酸铜;毒性【作者】靳晓敏;刘玉芹;王志敏;肖金奎;胡锦旗【作者单位】河北科技师范学院,河北,秦皇岛,066000;河北科技师范学院,河北,秦皇岛,066000;河北科技师范学院,河北,秦皇岛,066000;河北科技师范学院,河北,秦皇岛,066000;河北科技师范学院,河北,秦皇岛,066000【正文语种】中文【中图分类】S9牙鲆(Paralichthys olivaceus)为鲽形目,鲽亚目,鲆科,牙鲆亚科,牙鲆属。
近十几年来,牙鲆的工厂化养殖蓬勃发展,但由于管理不善、养殖密度高、水质恶化等导致病害频发,养殖牙鲆常因细菌、真菌、寄生虫等侵袭而大批死亡[1]。
生产上常用的防治方法是用药物对鱼体进行浸浴或全池泼洒。
二氧化氯、高锰酸钾、硫酸铜等化学消毒剂以其对水产动物毒副作用小、在水中残留少和不影响养殖系统等优点,成为防治一些疾病的常用药物[2]。
但目前由于牙鲆对各种化学消毒剂耐受力的研究较少,生产中常因浓度使用不当等造成损失。
本试验旨在确定三种常用消毒类药物对牙鲆的安全浓度值,以期为牙鲆育苗和养殖中正确、合理地使用消毒剂提供理论依据。
1 材料与方法1.1 试验用鱼试验用鱼为唐山兴达水产品养殖厂当年的牙鲆幼鱼,体长6.0~9.0 cm,平均体重7.0 g。
五氯酚对稀有鮈鲫卵黄蛋白原和热应激蛋白诱导效
应的研究的开题报告
尊敬的评委们:
我在此提交我关于五氯酚对稀有鮈鲫卵黄蛋白原和热应激蛋白诱导效应的开题报告。
本研究旨在探究五氯酚(PCP)这种有机氯化合物对稀有鮈鲫的影响,包括其对其卵黄蛋白原和热应激蛋白诱导效应的影响。
研究背景:
五氯酚是一种广泛用于木材保护和杀真菌剂的化学物质,已被证明对生态系统和水生动物有害。
稀有鮈鲫(Rhynchocypris lagowskii)是一种特有于中国南部的稀有淡水鱼类,已被列入保护动物名录。
然而,关于五氯酚对稀有鮈鲫的影响的研究还很有限,尤其是它对其热应激蛋白和卵黄蛋白原的影响。
研究方法:
本研究将使用体外和体内实验方法研究五氯酚对稀有鮈鲫卵黄蛋白原和热应激蛋白诱导效应的影响。
体外实验将对五氯酚处理下的稀有鮈鲫卵黄蛋白原进行分析。
体内实验将研究五氯酚暴露对稀有鮈鲫的热应激反应的影响,并评估其对热应激蛋白表达的影响。
研究意义与预期结果:
本研究可为了解五氯酚污染对稀有鮈鲫卵黄蛋白原和热应激反应的影响提供新的数据,并为五氯酚的环境毒性评估提供科学依据。
预计的结果将有助于了解五氯酚与当前环境问题之间的关系,并提供关于保护稀有鮈鲫和其栖息地的重要信息,也为研究其他水生动物在污染环境下的适应性提供启示。
感谢您的关注!。
生态环境学报 2009, 18(2): 426-430 Ecology and Environmental Sciences E-mail: editor@基金项目:国家自然科学基金项目(20307012);广东省自然科学基金项目(7010723);中山市科技计划项目(2006A154);电子科技大学中山学院科研启动项目(2007YKQ19)作者简介:董军(1971年生)男,副教授,博士,主要从事污染生态学研究。
E-mail: dj138********@ *通讯作者:林里,E-mail: linl@ 收稿日期:2008-12-30鱼塘沉积物氯酚污染及其生态风险评价董军1,3,陈若虹1,栾天罡1,邹世春2,林里1*1. 中山大学水产品安全教育部重点实验室,广东 广州510275;2. 中山大学海洋学院,广东 广州510275;3. 电子科技大学中山学院,广东 中山528403摘要:采用固相微萃取(SPME )与气相色谱-质谱联用,分析了3种养殖模式鱼塘沉积物中氯酚类(CPs)化合物的污染特征。
结果表明,一般四大家鱼养殖模式(A )沉积物中总CPs 质量分数(干质量)为9.91 ng·g -1,猪-鱼综合养殖模式(B )与鸭-鱼综合养殖模式(C )沉积物总CPs 质量分数分别为7.79 ng·g -1和4.84 ng·g -1。
总CPs 及15种CPs 化合物在A 、B 模式和鸭-鱼综合养殖模式(C )沉积物中的分布特征相似,质量分数由高到低的顺序为A 模式,B 模式,C 模式。
沉积物中质量分数比较高的一氯酚、二氯酚、三氯酚和四氯酚分别是4-CP 、2,4-DCP 、2,4,6-TCP 和2,3,4,6-TeCP 。
五氯酚(PCP)质量分数与4-CP 、2,5+2,6+3,5-DCP 、3,4-DCP 、2,4,5-TCP 、2,3,6-TCP 、2,3,4-TCP 、2,3,5,6-TeCP 、2,3,4,6-TeCP 、2,3,4,5-TeCP 等氯酚化合物质量分数显著正相关,显示PCP 与它们之间存在降解物与产物的关系。
4种常用渔药对云斑尖塘鳢幼鱼的急性毒性试验田田;王茂元;薛凌展;黄洪贵;赖铭勇【摘要】在室温静水条件下,测定了聚维酮碘、高锰酸钾、溴氯海因和硫酸铜等4种常用药物对平均体重为(1.61±0.57)g的云斑尖塘鳢幼鱼的急性毒性试验。
结果表明,聚维酮碘、高锰酸钾、溴氯海因和硫酸铜对云斑尖塘鳢幼鱼的安全浓度分别为9.44mg/L、1.28mg/L、12.55mg/L和1.03mg/L;4种药物对云斑尖塘鳢幼鱼的毒性大小依次为:硫酸铜>高锰酸钾>聚维酮碘>溴氯海因;4种药物的安全浓度均高于生产使用的常用剂量,在云斑尖塘鳢苗种培育过程中可以安全使用。
%The acute toxicity effects of 4 commonly-used drugs,including povidone-iodine,potassium perman-ganate,bromochloro hydantoin and copper sulfate,on juvenile of Oxyeleotris marmoratus Bleeker with body weight of(1.61 ± 0.57)g were tested in lentic condition at normal temperature. The results showed that the safe concentration of the four drugs were 9.44mg/L,1.28mg/L,12.55mg/L and 1.03mg/L,respectively;The de-scending order of drug toxicity observed was as follows: copper sulfate>potassium permanganate>povidone-iodine>bromochloro hydantoin;The safe concentration of the 4 drugs were higher than the production us-ing dosage,so they could be used safely in cultivation of juvenile of Oxyeleotris marmoratus Bleeker.【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2014(000)020【总页数】3页(P79-81)【关键词】云斑尖塘鳢;幼鱼;急性毒性试验;安全浓度【作者】田田;王茂元;薛凌展;黄洪贵;赖铭勇【作者单位】福建省淡水水产研究所,福建福州350002;福建省淡水水产研究所,福建福州 350002;福建省淡水水产研究所,福建福州 350002;福建省淡水水产研究所,福建福州 350002;福建省淡水水产研究所,福建福州 350002【正文语种】中文【中图分类】S965云斑尖塘鳢(Oxyeleotris marmoratusBleeker),俗称泰国笋壳鱼,属鲈形目(Prciformes)、虾虎鱼亚目(Gobioid⁃dei)、塘鳢科(Eleotridae)、尖塘鳢属(Oxyeleotris)。
别让您的鱼“吃”错药:鱼类敏感的26种药物鱼发病了,就得用药,但有些鱼对有些药,是敏感的,不光不治病,还会要命!就像人类用青霉素,有些敏感人群,会过敏死人的!那么鱼类敏感的药物都有哪些你知道吗?对它们又有多少了解呢?下面将为大家详细介绍鱼类敏感的26种药物:1菊酯类杀虫剂水质清瘦,水温低时(特别是20℃以下),对鲢、鳙、鲫毒性大;如沿池塘边泼洒或稀释倍数较低时,会造成鲫鱼或鲢鳙鱼死亡。
虾蟹禁用。
2阿维菌素溶液按正常用量或稍微加量或稀释倍数较低或泼洒不均匀,会造成鲢和鲫鱼的死亡。
海水贝类在泼洒不均匀的情况下,易导致死亡。
3含氯、溴消毒剂当水温高于25℃时,按正常用量将含氯、溴消毒剂用于河蟹,会造成河蟹死亡,死亡概率在20%~30%。
在水质肥沃时使用,会导致缺氧泛塘。
二氧化氯4杀虫药(敌百虫除外)或硫酸铜当水深大于2米,如按面积及水深计算水体药品用量,并且一次性使用,因药物渗水深度一般不会超过2米,如果仍按实际深度计算用药则会容易造成鱼类死亡,概率超过10%。
5氯硝柳胺用于绦虫治疗有特效,但对鱼类剧毒,注意把握好用量。
6甲苯咪唑溶液按正常用量,胭脂鱼发生死亡;淡水白鲳、斑点叉尾鮰敏感;各种贝类敏感。
无鳞鱼慎用。
7海因类含溴制剂有效成份大于20%的,在水温超过32℃时,若水体内三天累计用量超过200克/亩·米,会造成在脱壳期内的甲壳水生动物死亡。
8菊酯类和有机磷药物除生物菊酯外,其余种类不得用于甲壳类水生动物。
9辛硫磷对淡水白鲳、鲷毒性大。
不得用于大口鲇、黄颡鱼等无鳞鱼。
10碘制剂、季铵盐制剂对冷水鱼类(如大菱鲆)有伤害,并可能致死。
11一水硫酸锌用于海水贝类时应小心,有可能致死,特别注意使用后缺氧。
12代森铵和代森锰锌不可应用于鳜鱼。
代森铵用后易导致缺氧,使用后应注意增氧。
13维生素C不能和重金属盐、氧化性物质同时使用。
14硫酸铜、硫酸亚铁贝类禁用,用药后注意增氧,瘦水塘、鱼苗塘适当减少用量;30日龄内的虾苗禁用。
第30卷第6期2010年6月环 境 科 学 学 报 Acta Scientiae C ircu mstanti a eV o.l 30,N o .6Jun .,2010基金项目:环保公益性行业科研专项(No .200709034);国家自然科学基金(No .40703025);国家高技术研究发展计划(863)资助项目(No .2007AA06A405);环境模拟与污染控制国家重点联合实验室导向课题(N o .08Z01ESPCR)Supported by t h e Env i rom ental Protecti on Publi cW elfare Professi onal Ite m (N o .200709034),t he N ati on alNat u ral Science Foundati on ofCh i n a (No .40703025);t h eH i gh -Tech R esearch and Developm ent Progra m of Ch i n a (N o .2007AA06A405)and t he Speci al Fund fro m the State Key Laborat ory of E nvironm entalA quati c Che m i stry(No .08Z01E SPCR)作者简介:金小伟(1985―),男,博士研究生,E-m ai:l j xw85@;*通讯作者(责任作者),E-m ai:l w angz@j rcees .ac .cnBiography :JI N X i ao w ei(1985)),m al e ,Ph .D .cand i date ,E-m ai:l jx w 85@126.co m;*Corres ponding aut hor ,E-m ai:l w angz@j rcees .ac .cn金小伟,查金苗,许宜平,等.2010.氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鯝幼鱼的毒性[J].环境科学学报,30(6):1235-1242J i n X W,Zha J M,Xu Y P ,et a l .2010.Acu te and ch ron ic t oxici ti es of t hree ch l oroph enol s to M ylo pharyngodon p ice u s and P lag iognathopsm i crol epis at earl y lif e stage[J].A cta Scien ti ae C i rcu m s t an tiae ,30(6):1235-1242氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鯝幼鱼的毒性金小伟,查金苗,许宜平,王子健*中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室,北京100085收稿日期:2009-09-30 修回日期:2009-11-17 录用日期:2010-03-05摘要:以我国特有青鱼和细鳞斜颌鯝为受试物种,利用其生命早期阶段的急性毒性LC 50值和28d 慢性生长抑制试验所获得的最大可接受浓度(M ATC)评价了3种氯酚类化合物的毒性效应.实验结果显示,2,4-二氯酚(2,4-DCP),2,4,6-三氯酚(2,4,6-TCP)和五氯酚(PCP)对青鱼和细鳞斜颌鯝的的96h LC 50值分别为4.01(3.61~4.68)、1.22(1.12~1.31)、0.10(0.08~0.11)m g #L -1和2.48(1.94~2.89)、1.10(0.38~1136)、0.09(0.08~0.10)m g #L -1,且3种氯酚类化合物对青鱼的毒性和细鳞斜颌鲴的毒性存在良好的线性相关性.根据化学物质对鱼类毒性分级标准,PCP 对青鱼和细鳞斜颌鲴均为剧毒,2,4-DCP 和2,4,6-TCP 对青鱼和细鳞斜颌鲴均为高毒.青鱼对2,4-DCP ,2,4,6-TCP 和PCP 的M ATC 分别为0.05mg #L -1、<0.10mg #L -1和0.015m g #L -1,对应的急慢性毒性比(ACR)分别为80.2、12.2和6.67;细鳞斜颌鲴对2,4-DCP 、2,4,6-TCP 和PCP 的M ATC 分别为0.30mg #L -1、0.15mg #L -1和<0.01m g #L -1,对应ACR 分别为8.27、7.33和9.00.关键词:毒性;青鱼;细鳞斜颌鯝;氯酚文章编号:0253-2468(2010)06-1235-08 中图分类号:X171.5 文献标识码:AA cute and chronic toxicities of three chlorophenols to My lopharyngodon p i ceusand P l agiognat hops m icrole p is at early life stageJI N X i a o w e,i Z HA Ji n m iao ,XU Y iping ,WANG Ziji a n*S t ate Key Laborat ory of E nvironm ental Aquatic Che m i s try ,Researc h C enter for E co -Environm en t al Sciences ,C h i nese Acade my of S ci ences ,Beijing 100085R ecei ved 30S epte m ber 2009; received i n revis ed f or m 17Nove m ber 2009; accepted 5M arch 2010A bs tract :In the arti cle ,acu te and 28d chron i c gro w th i nh i b ition toxici ti es of 2,4-d ichlorophenol (2,4-DCP),2,4,6-trich l orophenol (2,4,6-TCP)and pen tach l oroph enol (PCP )to M ylo pharyngodon p ice u s and P l ag io g nat h o p s m icrole p is at earl y life stage w ere tested t o assess t he tox i city of t h ree ch lorophenols .Th e res u lt s how ed t h at the 96h LC 50of 2,4-DCP ,2,4,6-TCP ,PCP t o M ylopharyngod on piceus and P l ag i ogna t hops m icrole p is w ere 4.01(3.61~4.68),1.22(1.12~1.31),0.10(0.08~0.11)m g #L -1and 2.48(1.94~2.89),1.10(0.38~1.36),0.09(0.08~0.10)m g #L -1,respecti vely .There w as good li near correlati on bet w een M ylopha ryngod on piceus tox i cit y and P l agiogna t hops m icrole p is toxici ty .Based on the T oxic Rank i ng ofC he m ical Substan ces t o F is h,PCP ranks as h i gh l y t ox i c ,w hil e 2,4-DCP and 2,4,6-TCP w ere strongl y t oxic .Th e M axi m u m Acceptab le Toxican tC oncentrati on (M ATC)for 2,4-DCP ,2,4,6-TCP and PCP w ere 0.05m g #L -1,<0.10m g #L -1and 0.015m g #L -1,and the corres pond i ng acute and chron ic tox i cit y ratios (ACR)w ere 80.2,12.2and 6.67,res p ecti vel y f or M ylo pharyngodon p ic eus .M ATC s of 2,4-DCP ,2,4,6-TCP and PCP w ere 0130m g #L -1,0.15m g #L -1and <0.01mg #L -1,and the corres pond i ng ACRs w ere 8.27,7.33and 9.00for P lag iogna t hops m icrole p is .K eywords :t oxici ty ;M ylopharyngod on p i ceus ;P lagiogna t hops m icrole p is ;ch lorophenols1 引言(Introducti o n)随着工业废水和城市生活污水排放的日益增多,鱼类所赖以生存的生态环境日趋恶化,造成对鱼类的影响明显增加.氯酚类化合物(Ch loropheno ls ,CPs)是芳香族化合物中用途最广、毒性较大、污染较严重的一类化合物.目前世界上将近有15000种CPs 被用作杀虫剂、有机溶剂和药环境科学学报30卷物,普遍存在于炼油、炼焦、石化、塑胶、煤气和纸浆等的工业废水和生活污水中(USEPA,1985).氯酚类化合物具有毒性效应,其中五氯酚(Pentachloropheno,l PCP)、2,4-二氯酚(2,4-dich l o ropheno,l2,4-DCP)和2,4,6-三氯酚(2,4,6-trich l o ropheno,l2,4,6-TCP)已被美国和欧盟列为优先监测的有机污染物之一(雷炳莉,2009;罗茜等, 2009).中国的/生活饮用水卫生标准0(GB5749-06)也将PCP、2,4-DCP和2,4,6-TCP列为常规水质监测项目(夏青等,2004).已有报道指出PCP和2,4-DCP是内分泌干扰物(Zha et al.,2006;Zhang, et al.,2008),其中国际癌症研究机构(I A RC)已将五氯酚(Pentachloropheno,l PCP)及其钠盐(Na-PCP)列为2B类致癌物.目前这3种氯酚在我国水体中普遍存在,Gao等(2008)对全国重要河流的600个采样点的监测结果显示,PCP、2,4-DCP和2,4,6-TCP的检出率分别是85.4%,51.3%和5414%,其浓度范围分别为<1.1~594ng#L-1,1.1 ~19960ng#L-1和1.4~28650ng#L-1,个别样点的浓度已经达到了较高的值.为了控制水体污染,保护和改善水环境质量,国内外普遍采用颁布安全标准控制污染物的排放,发达国家在开展化学监测的同时也进行污染物毒性监测,主要采用水生生物的急、慢性毒性测试(USEP A,2002).我国现有的鱼类标准方法中只有斑马鱼的急性毒性测试方法(GB/T13267-91),尚无其他鱼类生物的急性毒性测试方法,慢性毒性测试方法更是少见,国内有部分学者曾利用日本青鳉和稀有鮈鲫来评价污染物的毒性(查金苗等,2005;王辅明,2009),因此,关于污染物毒性的评价更多地侧重在急性毒性,通常用化合物的急性毒性值除以一个安全因子(10或者100)而得出污染物的安全浓度(范亚伟等,2009;庄平等,2009).而我国的淡水鱼类资源中,有一半以上属鲤科,其中在我国渔业生产中占有重要地位的四大家鱼、鲫鱼、鲤鱼都是鲤科鱼类,并且这种利用安全因子评估污染物毒性的方法很大程度上存在一定的片面性,可能会造成生物的/过保护0或保护不足.本文利用两种我国常见优势鲤科鱼类,通过其生命早期生长阶段急性毒性和慢性生长抑制试验,来评价3种氯酚类化合物的毒性效应.试验所选的受试生物青鱼(M y lophar yngodon p iceus)属鲤科、青鱼属,天然分布于我国的东部、南部、中部和东北部地区,为我国淡水养殖的/四大家鱼0之一,一般生活于水体底层,是重要的大型经济鱼种.细鳞斜颌鲴(P lagiognathop s m icrolep is)隶属鲤科、斜颌鲴属,广泛分布我国黑龙江、长江和珠江流域等,是喜栖息于水体中下层的中小型经济鱼类.2材料与方法(M aterials and m ethods)2.1试验材料优级纯2,4-二氯苯酚(HOC6H3C l2)(购于Aesar 公司,USA)纯度为99.0%;2,4,6-三氯苯酚(HOC6H2C l3)(购于Ne w Jersey,USA)纯度为9810%;五氯苯酚(HOC6C l5)(购于USAEPA)纯度为99.0%.试验选用丙酮作为助溶剂(<011 mL#L-1).试验过程所用稀释水为去氯自来水(曝气48h),各水质参数如下:pH=7.24,DO为11.43 mg#L-1,TOC为01017m g#L-1,硬度约为100mg#L-1.试验鱼苗购自无锡中科水质技术公司,在试验室暂养两周以上.暂养过程中水温为(23?1)e,光周期为16h(光照)B8h(黑暗).每天用丰年虫喂食两次(早晚各1次).用于试验的青鱼体长为(17.65?0.40)mm,体重为3.80@10-2g;细鳞斜颌鯝体长为(16.40?0.37)mm,体重为2.67@10-2g.2.2试验方法2.2.1急性毒性试验急性毒性方法参照OECD 关于急性毒性试验的标准方法(OECD,1992).采用半静态换水式实验,每24h更换1次试验液.预试验设置3个间隔较大的浓度梯度,每组设两个平行,观察48h,求出100%死亡和无死亡的浓度.正式试验设置5个浓度梯度,青鱼和细鳞斜颌鲴设置了相同的浓度梯度,分别为2,4-DCP: 1.00、2.00、4.00、6100、8.00m g#L-1;2,4,6-TCP:0.50、1.00、1.50、2100、2.50m g#L-1;PCP:0.05、0.10、0.15、0.20、0125mg#L-1;另外每组设置一个空白对照,一个溶剂对照(0.08mL#L-1),每组设3个平行.试验容器为1000mL烧杯,每1L水中放10条幼鱼鱼苗,试验期间不喂食,试验条件控制在:温度(23?1)e,溶解氧6m g#L-1以上,光照比为16B8.每24h观察并记录死亡情况,及时清除死亡的鱼苗和代谢物.幼鱼死亡的判断指标为将鱼苗放到清水中30s后用镊子轻微刺激其尾部无反应者认定为死亡.暴露96h后计算其LC50.2.2.2慢性毒性试验慢性毒性试验浓度设置依据前面急性毒性试验所得的数据结果,采用半静态12366期金小伟等:氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鯝幼鱼的毒性换水式实验,每24h更换1次试验液.同样设置5个浓度梯度,青鱼和细鳞斜颌鲴设置了相同的浓度梯度,分别为2,4-DCP:0.10、0.20、0.40、0.60、0.80 m g#L-1;2,4,6-TCP:0.10、0.20、0.40、0.60、0.80 m g#L-1;PCP:0.01、0.02、0.04、0.06、0.08m g#L-1,一组空白对照,一组溶剂对照(0.02mL.L-1),每组设3个平行.试验容器为1000mL烧杯,每1L水中放10条幼鱼鱼苗,试验期间每天用丰年虫喂食两次(早晚各1次),试验条件控制在:温度(23?1)e,溶解氧6m g#L-1以上,光照比为16B8.每天观察并记录幼鱼生长死亡情况,及时清除死亡的幼鱼和代谢物,暴露28d后测量幼鱼的体长体重,并计算幼鱼的生长情况.2.2.4统计分析USEPA用最大可接受浓度(MATC)来表示有毒化合物毒生物的慢性毒性值,并规定MATC为无观察效应浓度(NOEC)和最低可观察效应浓度(LOEC)值的几何平均(USEP A, 1985),NOEC是指与对照组相比不引起受试生物任何可见生物学效应的最高浓度;LOEC是指与对照组相比可引起受试生物可见生物学效应的最低浓度.本试验以生长抑制作为生命早期幼鱼毒性暴露的观察指标,规定NOEC值为与对照组相比其生长速率无显著性差异的最高浓度,LOEC值为与对照组相比其生长速率出现显著性差异的最低浓度.并用(W后-W前)/W前@100计算幼鱼的生长速率,其中W后是试验结束后幼鱼的体重,W前是试验开始前幼鱼的体重.污染物安全浓度SC评价采用下列公式计算:SC=0.01(或者0.1)@LC50(EC50) (M ar i n o-Ba lsa et al.,2000).用软件DPS9.50利用简单概率单位法计算急性毒性LC50值,用SPSS13.0进行数据分析与处理,文中描述性统计值用平均值?标准误差表示,数据的相关关系用Pearson积矩相关系数来描述,显著水平设置在A=0.05,p< 0105认为具有显著相关性.试验结果中图形采用S i g m a p l o t10.0作图软件完成.3结果(Results)3.1急性毒性试验试验过程中p H保持在7.6~7.8之间,溶解氧浓度始终维持在80%以上.试验结束后,空白对照组以及溶剂对照组都没有出现明显的死亡,成活率均为100%.3种酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鲴的急性毒性结果见表1,结果显示,3种酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鲴急性毒试验的拟合方程呈良好的线性关系,其可决系数分别为0.90~0.99,0.90~0.98,说明3种氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鲴的毒性效应存在明显的剂量-效应关系.表13种氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鯝的LC50值Tab le1A cute t oxici ty of t h ree ch l oropheno l s to M ylopha ryngod on piceus and P lag iogna t hops m icrole p is化合物暴露时间青鱼LC50/(m g#L-1)R2细鳞斜颌鯝LC50/(m g#L-1)R22,4-DCP24h 5.74(5.16~6.24)0.996.11(4.98~8.32)0.95 48h 5.07(4.74~5.61)0.904.46(3.46~6.33)0.9472h 4.62(4.14~5.66)0.933.46(2.65~4.45)0.9296h 4.01(3.61~4.68)0.942.48(1.94~2.89)0.92 2,4,6-TCP24h 1.79(1.68~1.94)0.951.76(1.59~2.07)0.94 48h 1.58(1.38~1.77)0.921.28(0.88~1.58)0.9072h 1.40(1.25~1.61)0.971.17(0.45~1.52)0.9296h 1.22(1.12~1.31)0.981.10(0.38~1.36)0.90 PCP24h0.16(0.15~0.18)0.910.14(0.13~0.17)0.90 48h0.13(0.12~0.14)0.930.12(0.11~0.13)0.9572h0.11(0.10~0.12)0.990.10(0.09~0.11)0.9696h0.10(0.08~0.11)0.980.09(0.08~0.10)0.98注:括号内数据为各个LC50值的95%置信区间.从表1可以看出,PCP对青鱼和细鳞斜颌鲴的毒性远远高于2,4-DCP,2,4,6-TCP,其中青鱼96h LC50分别为0.10(0.08~0.11), 4.01(3.61~ 4168),1.22(1.12~1.31)m g#L-1;细鳞斜颌鲴96h1237环 境 科 学 学 报30卷LC 50分别为0.09(0.08~0.10),2.48(1.94~2189),1.10(0.38~1.36).国家环保局1986年制订的5生物监测技术规范(水环境部分)6中将化学物质对鱼类的毒性分级分为5个等级:LC 50<1m g #L -1为剧毒;LC 50=1~100m g #L -1为高毒;LC 50=100~1000m g #L -1为中等毒性;LC 50=1000~10000m g #L -1为低毒;LC 50>10000m g #L -1为微毒或无毒(国家环保局,1986).参照此毒性分级标准,则PCP 对青鱼和细鳞斜颌鲴均为剧毒,2,4-DCP 和2,4,6-TCP 对青鱼和细鳞斜颌鲴均为高毒.3.2 慢性毒性试验结果试验过程中p H 保持在7.6~7.8之间,溶解氧浓度始终维持在80%以上.试验结束后,空白对照组以及溶剂对照组都没有出现明显的死亡,成活率均为100%.3.2.1 3种氯酚类化合物对青鱼的生长抑制作用经过28d 慢性暴露后,在试验浓度范围内各实验组的青鱼幼鱼均未出现死亡和严重畸形的状况.其中对照组青鱼与试验前相比体重增加了55.1%,溶剂对照组与空白对照之间无显著性差异.3种氯酚类化合物对青鱼幼鱼的生长抑制作用如图1所示.从图中可以看出,0.10m g #L -12,4-DCP 的暴露对青鱼的生长有轻微的促进作用,其生长率达到55.9%,但其与对照组相比无显著性的差异.这可能与化学上所讲的毒物低剂量刺激作用有关(Calabrese et al .,2002;Carelli et al .,2002).但是其他两种化合物在低剂量暴露时并没有对青鱼的生长产生相似的刺激作用,这也说明这种低剂量刺激作用是否具有普遍性仍需要进一步的研究.随着暴露浓度的升高,从0.20m g #L -1开始,2,4-DCP 对青鱼的生长出现了明显的抑制作用,其生长率也从0.20m g #L -1时的43.9%下降到0.80m g #L -1时的1311%.与2,4-DCP 相比青鱼相对于2,4,6-TCP 毒性更为敏感,在0.10m g #L -1低浓度的暴露下青鱼的生长就出现了显著性的差异,并且随暴露浓度的升高其差异性越来越明显,其生长率也从0.10mg #L -1时的43.2%下降到0.80m g #L -1时的8190%.青鱼在0.01m g #L -1PCP 暴露下的生长率为52.0%,与对照组相比其生长率略小,但并无显著性的差异,当暴露浓度升高至0.02m g #L -1其生长率明显下降达42.5%,当暴露浓度最高到0.08mg #L -1其生长率仅为14.2%.图1 3种氯酚类化合物28d 慢性暴露对青鱼生长的影响(a .2,4-DCP ;b .2,4,6-TCP ;c .PCP)Fi g .1 The effect of 28d ch ron ic expos u re t o t h ree ch l oropheno l s on M ylopharyngodon pice u s .s grow t h (a .2,4-DCP ;b .2,4,6-TCP ;c .PCP)12386期金小伟等:氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鯝幼鱼的毒性3.2.2 3种氯酚类化合物对细鳞斜颌鯝的生长抑制作用 经过28d 慢性暴露后,2,4-DCP 和2,4,6-TCP 在试验浓度范围内各实验组的细鳞斜颌鲴幼鱼均未出现死亡和严重畸形的状况.当PCP 在暴露浓度高于0.06m g #L -1出现了死亡,其死亡率在0.06m g #L -1和0.08m g #L -1时分别为16.9%和30.0%.对照组细鳞斜颌鲴与试验前相比体重增加了7312%.3种氯酚类化合物对细鳞斜颌鲴幼鱼的生长抑制作用如图2所示.从图中可以看出,低浓度的2,4-DCP 暴露对细鳞斜颌鲴的生长无显著性的影响,其生长率在0.10m g #L -1和0.20mg #L -1时分别为69.3%和69.5%.从0.40m g #L -1开始其生长率出现明显的下降,并随暴露浓度的升高,其生长率从60.5%依次下降到52.9%和49.1%.与0.10m g #L-12,4-DCP 的暴露下青鱼相似,细鳞斜颌鲴在0.10m g #L -12,4,6-TCP 的暴露下也出现一定的生长促进作用,其生长率达到74.7%,但与对照组并无显著性差异.当暴露浓度升高到0.20m g #L -1时对细鳞斜颌鲴的生长出现了明显的抑制作用,生长率为6511%,并随着2,4,6-TCP 暴露浓度的升高,生长率依次从65.1%降到60.2%,55.7%,42.9%.从0.01mg #L -1开始PCP 就对细鳞斜颌鲴的生长产生了明显的抑制作用,其生长率为67.1%,这种抑制作用随着暴露浓度的升高也逐渐增强.在高浓度PCP 的暴露下细鳞斜颌鲴出现的部分死亡,在0106m g #L -1时PCP 暴露下有16.9%的幼鱼死亡,存活的幼鱼的生长也受到了严重的影响,生长率为45%,细鳞斜颌鲴幼鱼死亡率在0.08m g #L -1时最高达到了30%,而存活的70%的幼鱼其生长率也只有3910%,为所有暴露试验最低.图2 3种氯酚类化合物28d 慢性暴露对细鳞鲴生长的影响(a .2,4-DCP ;b .2,4,6-TCP ;c .PCP)F i g .2 The effect of 28d ch ron ic expos u re t o t h ree ch l oropheno l s on P lag iogna t hops m icrole pis .s gro w th (a .2,4-DCP ; b.2,4,6-TCP ;c .PCP)4 讨论(D iscussi o ns)4.1 3种氯酚类化合物对两种鲤科鱼毒性的相关性国内外研究发现,有毒污染物对不同水生生物的毒性之间存在一定的相关性.F irth 等利用不同的生物测定造纸厂废水的毒性时发现,不同种类的生物之间测试结果具有良好的线性相关性(Firth et al .,1990).江敏等研究发现含氮杂环化合物对发光细菌的毒性试验结果与斑马鱼和大型蚤的毒性试验结果拟合度很好,相关系数达0.99以上(江敏等,2005).本试验所选的青鱼和细鳞斜颌鲴均属我国常见的重要鲤科经济鱼类,分别代表了水生态1239环 境 科 学 学 报30卷系统中生存于不同生境的大型和中小型杂食性鱼类.通过对3种氯酚类化合物关于这两种鱼的急性毒性结果的比较,发现3种氯酚类化合物对两种鱼的急性毒性存在良好的线性相关性,其回归方程为y (青鱼LC 50)=0.97x (细鳞鲴LC 50)-0.06,可决系数R 2=0.99.说明3种氯酚类化合物对同一科鱼类的致毒作用具有相似性,其生活的生境及成年后个体的大小对其生命早期阶段的毒性并无明显的影响,因此,利用生命早期阶段鱼类的毒性试验评价氯酚类化合物的毒性,可避免不同种类鱼因为个体差异而造成毒性结果的不一致性.此外,3种氯酚类化合物在青鱼和细鳞斜颌鲴之间的毒性的相关性可以为其它氯酚类化合物对这两种生物的毒性研究提供依据.图3 青鱼与细鳞斜颌鲴之间毒性相关性Fig .3R el ationsh i p of M ylo pharyng odon p ice u s tox i city to P l ag io g na t h o p sm i crol epis toxicit y4.2 3种氯酚类化合物毒性安全评估氯酚类化合物通常包括一个羟基和不同数目的氯原子取代苯环上的氢原子,其分子中氯取代基的数目直接影响了其正辛醇/水分配系数(K ow )和溶解度(S w )等特征参数.氯酚的分子结构如氯化的程度以及氯原子和羟基基团的位置对毒性都有较大影响(US EP A,2002).有研究指出,氯酚的生物毒性和生物富集能力随着氯化程度的增加而递增,且毒性也因氯原子所在位置的不同会有所差异,通常以对位的氯酚化合物毒性最高,其次为间位和邻位(Czaplicka ,2004).本试验发现,五氯酚对青鱼和细鳞斜颌鲴的毒性作用明显高于2,4-DCP 和2,4,6-TCP ,而2,4,6-TCP 对青鱼和细鳞斜颌鲴毒性则略高于2,4-DCP ,该结果符合C zaplicka 等的研究结果.在有关化学品对生物毒性安全性评价中,我国还没有统一的评价标准.国内有部分的学者用安全浓度来评价一个化合物的毒性(江敏等,2005;范亚伟,2009;庄平,2009),但这种方法由于其片面性很难准确的预测化合物对鱼类的毒性作用.因此本实验通过测试对生命早期幼鱼28d 慢性暴露的结果,用最大可接受浓度(MATC)来表示3种氯酚类化合物对两种鱼类的慢性毒性作用.表2分别列出了3种氯酚类化合物的安全浓度(SC )和最大可接受浓度(MATC ).从表中可以看出,利用评估因子(10或者100)求出的安全浓度与通过试验得出的最大可接受浓度存在明显的差别,青鱼对2,4-DCP ,和PCP的最大可接受浓度分别为0.05、0.015m g #L -1,其所对应急慢性毒性比值(ACR )分别为80.2和6.67,青鱼对2,4,6-TCP 的最大可接受浓度小于0.10mg #L -1,即ACR 大于12.2;细鳞斜颌鲴对2,4-DCP 和2,4,6-TCP 的最大可接受浓度分别为0.30、0115m g #L -1,对PCP 的最大可接受浓度小于0101m g #L -1,分别对应的ACR 值为8.27,7.33和大于9.00.尹大强等(Y i n et al .,2003a ;2003b )测定了鲫鱼和草鱼对2,4-DCP 和2,4,6-TCP 的急慢性毒性数据,其中2,4-DCP 对鲫鱼和草鱼的96h LC 50值分别为7.94m g #L -1和5.25mg #L -1,而其慢性毒性值为0.35m g #L -1和0.71m g #L -1,分别为其急性毒性值的1/22.7和1/7.39;同样2,4,6-TCP 对鲫鱼和草鱼的慢性毒性值分别为其96h LC 50值1/12.3和1/5.01.由此可见,不管是统一的用10还是100作为评估因子都不能准确地预测3种氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鲴的毒性.而利用生命早期阶段幼鱼的28d 慢性暴露试验可以更加直接、具体的反映不同种类污染物对不同鱼类的毒性作用.表2 3种氯酚类化合物的毒性评估Tab le 2 Tox i cit y eval uation of t hree ch lorophenols物种化合物96h LC 50aSC (LC 50/10)aSC (LC 50/100)aMATC a ACR b 青鱼2,4-DCP 4.010.400.040.0580.22,4,6-TCP 1.220.120.01<0.10>12.2P CP0.100.010.0010.0156.67细鳞斜2,4-DCP 2.480.250.030.308.27颌鯝2,4,6-TCP 1.100.110.010.157.33P CP0.090.010.001<0.01>9.00注:a .单位为m g #L -1, b.ACR=96h LC 50/MATC5 结论(Conc l u si o ns)1)2,4-DCP 、2,4,6-TCP 和PCP 对青鱼和细鳞12406期金小伟等:氯酚类化合物对青鱼和细鳞斜颌鯝幼鱼的毒性斜颌鲴存在明显的毒性效应,且存在很明显的剂量-效应正相关性.PCP的毒性高于2,4-DCP,2,4,6-TCP.根据化学物质对鱼类毒性分级标准,PCP对青鱼和细鳞斜颌鲴均为剧毒,2,4-DCP和2,4,6-TCP 对青鱼和细鳞斜颌鲴均为高毒.2)3种氯酚类化合物对青鱼的毒性和细鳞斜颌鲴的毒性存在明显的线性相关性,3种氯酚类化合物对同一科鱼类的致毒作用具有相似性,其生活的生境及成年后个体的大小对其生命早期阶段的毒性并无明显的影响.3)利用生命早期阶段幼鱼的28d暴露试验而获得最大可接受浓度,可以弥补单纯利用评估因子获得安全浓度的片面性,能更加直接、具体的反映不同种类污染物对不同鱼类的毒性作用.责任作者简介:王子健(1953―),男,中国科学院生态环境研究中心研究员,博士生导师,主要从事环境化学、分子生物学及生态毒理学方面的研究.参考文献(R eferences):C alabrese E J,B al dw i n L A.2002.D efi n i ng hor m es i s[J].Hum an&E xperi m ental Toxicology,21(2):91)97C arelli G,Iav i co li I.2002.D efi n i ng hor m esis:the n ecessary t ool toclarify experi m entall y t h e l ow dos e-res pon se rel ati on s h i p[J].H u m an &Exp eri m en t a lTox i co l ogy,21(2):103)104C zap lickaM.2004.Sou rces and transfor mati on s of ch l orophen ol s i n thenat u ral env i ron m en t[J].Science of t he Total Environm ent,322(1-3):21)39范亚维,周启星,王媛媛,等.2009.水体BTEX污染对大型溞和霍普水丝蚓的毒性效应及水环境安全评[J].环境科学学报,29(7): 1485)1490Fan Y W,Zhou Q X,W ang Y Y,et a l.2009.Toxic effects of BTEX i n w ater on Daphn i a m agna and L i mnod ril u s h off m eisteri and safety ass ess m en t of the aquati 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