16尿沉渣定量检查(Addis计数)
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尿沉渣镜检尿沉渣镜检(Examination of urinary sediments),是将新鲜尿离心后,经显微镜检查尿沉淀物中各种有形成分的检查方法,尿沉渣镜检尤对泌尿系统疾病的诊断和鉴别诊断、疗效判断、预后估计等有参考价值。
但是,尿沉渣检查结果仍应与尿理学、化学检查结果相到参照,并应密切结合临床资料,才能得到客观、准确的评价[1]。
一、尿沉渣检查历史1千年前,波斯名医Ismail,已对尿液的颜色、粘稠度、透明度、尿量、臭味、泡沫及沉淀物作了观察。
显微镜发明后,Bright于1827年首次发现肾炎患者蛋白尿中出现管型,此后Bird于1854年,Purdy于1900年,进一步证明尿沉渣检查的临床价值。
Addis建立的尿沉渣物定量检查法,1948年用于肾脏疾病的病程观察[2]。
近年来,Brody采用相差显微镜鉴别红细胞与脂肪滴等。
Haber用干涉显微镜从三个方位仔细观察沉渣成分。
Rutecki等用免疫荧光技术测定颗粒管型中的血浆蛋白。
认为部分管型的颗粒是血浆多种蛋白的聚集。
有些学者用偏光显微镜鉴别尿中结晶。
Linder等结合免疫荧光技术,酸性磷酸酶染色及扫描电镜对颗粒管型进行分型。
不少学者应用巴氏染色或Sternheimer-Malbin(SM)等染色观察尿管型、脱落细胞等。
最近几年,流式细胞仪技术进入了无需离心检查的新时代[3]。
二、尿沉渣检查内容、方法及临床应用[4](一)尿沉渣检查内容正常人尿沉渣中可见少量红细胞、白细胞、上皮细胞、结晶、粘液丝等,但罕见透明管型。
在患者尿中还可见细菌、滴虫、肿瘤细胞、病毒包涵体等。
尿异形红细胞常表明与肾性疾病有关,而正常形态红细胞主要见于非肾性疾病。
尿白细胞中闪光细胞超过10%多考虑肾盂肾炎[5]。
管型为病理尿中最重要的成分,是肾损害及损害程度的证据。
根据管型的横径大小可将管型分为:①狭管型(为1~2个红细胞直径宽),②中等宽度管型(3~4个红细胞直径宽),③宽管型(5个红细胞直径宽)。
尿沉渣检查科普知识来了尿沉渣检查主要是指在基于显微镜的前提下,检查离心后尿液的沉渣物,即尿中有形成分,这一检查方法在临床中发挥着不可替代的作用,在诊断泌尿系统疾病中发挥着重要意义,如男性尿道癌、肾动脉闭塞、过敏性紫癜、尿路感染等。
那么如何开展尿沉渣检查,具体方法有哪些,你知道多少呢?尿沉渣有形成分检查在检查有形成分的过程中,临床大多会使用非染色标本的检查方法,而传统尿沉渣检查方法则为玻片法,特点主要体现于定性,抑或是半定量。
值得注意的是,定量计数池结果报告存在一定的可比性,但受显微镜、计数池本身误差的影响,就极有可能导致实时误差的出现。
相较于玻片法,定量尿沉渣分析更优,是由计数池法衍生而来。
另外,尿液自动分析仪也是常用设备,在检查红细胞、白细胞方面优势主要体现于快速、灵敏,但偏差问题较为常见,极易与显微镜检查结果不符,而显微镜检查结果则具有较高的准确性。
UF-100流式尿沉渣全自动分析仪的应用,进一步促进了尿沉渣显微镜检查的自动化发展,在一定程度上促进了精准性的提高,减少了显微镜复查的工作量,为检查效率提供了保障。
此外,为确保尿沉渣有形成分识别的准确性,临床上往往会使用活体染色法达到鉴别的目的,以涂片干燥后予以瑞氏染色常见。
尿沉渣微生物检查针对常规尿沉渣细菌检查而言,主要是在基于Gram染色前提进行,在女性尿沉渣的检查中,沙眼衣原体发挥着关键性的意义,而对于男性非淋球菌性尿道炎,在其尿沉渣标本中也可检测到沙眼衣原体,值得注意的是,展开淋球菌的检测,就要落实对尿沉渣的培养及聚合酶反应-杂交梳检。
在对邻近抗原敏感性及特异性进行诊断时,DOT-ELISA法具有快速优势,完成尿沉渣显微镜检查,有利于及时的发现泌尿道真菌感染。
尿沉渣中红细胞形态检查针对脑卒中红细胞形态检查而言,在血尿来源定位方面起着积极的作用,对肾性血尿及非肾性进行有效区别时,以尿棘红细胞>5%为主要特征。
有研究指出,在对尿液中红细胞进行测定时,血小板分析仪具有明显的应用价值,在基于MCV、RDW测定结果的前提下,可实现对血尿俩元的鉴别,相较于非肾小球性血尿的MCV值,肾小球形血尿的MCV值显著较低,且通过与健康人群运动后尿MCV值的比对,也存在明显的差异。
操作人员:经批准人授权的本院专业技术人员
部门主管:彭建宏
质量控制员:唐日升
目的:
保证检测结果的准确性,为临床提供准确可靠的结果。
该SOP变动程序:
本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、质控主管、科主任。
适用仪器范围:
双目显微镜、改良Neubauer计数板、离心机
适用范围:
尿沉渣检查的手工操作。
标本采集:
1、患者在实验当日晨起,除正常饮食外,一昼夜内不可再饮水,使尿液浓
缩。
2、患者在晚上8时,排尿弃去,并记录时间,自记录时间起,留取以后12h
内全部尿液,特别是至次晨8时,必须将尿液全部排空。
3、准确测量12h尿量,按尿量0.5%的比例,加入10%的甲醛防腐。
操作步骤:
1、将12小时尿充分混匀,取10ml于刻度离心管中。
2、1500转/分钟离心5分钟,吸弃上层尿液,剩留底部1ml。
3、轻轻混匀沉淀,取1滴注入计数池。
4、细胞计数10个大方格,管型计数20个大方格。
计算公式:
N=10个大方格各类细胞总数×尿量×100
报告方式:
12小时尿沉渣计数:12小时尿量:XX毫升
管型:XX个/12小时
红细胞:XX个/12小时
白细胞:XX个/12小时
参考值:
白细胞<100万个/12小时
红细胞<50万个/12小时
管型<5000个/12小时
临床意义:
了解肾脏损害程度。
实验八尿沉渣检查Examination of urinary sediment非染色法尿沉渣显微镜检查实验原理尿液经离心沉淀后,置显微镜下观察其有形成分,如细胞、管型、结晶等。
试剂器材载玻片、盖玻片、滴管、10ml刻度离心管、离心机、普通光学显微镜操作步骤1.未离心直接涂片法(1)混匀将尿液标本混匀。
(2)制备涂片取混匀后的尿液1滴于载玻上,加盖玻片,避免产生气泡。
(3)观察计数先用低倍镜观察全片细胞、管型等成分的分布情况,再用高倍镜确认。
管型要观察计数至少20个低倍镜视野;细胞要观察计数至少10个高倍镜视野;结晶按高倍镜视野中分布范围估计报告。
(4)结果报告细胞以最低数∼最高数/HP、管型以最低数∼最高数/LP报告。
结晶以所占视野面积报告,无结晶为(-);结晶约占1/4视野为(+);约占1/2视野为(++);约占3/4视野为(+++);满视野时为(++++)。
如果细胞、管型数量过多难以计算时,则可按结晶的报告方式报告结果。
2.离心沉淀涂片法(1)离心刻度离心管,倒入混匀后的新鲜尿液10ml,相对离心力(RCF)500g离心5min。
(2)弃上清弃去上清液,留下0.2ml尿沉渣并混匀。
(3)涂片用微量吸管取混匀尿沉渣0.02ml,滴在载玻片上,用盖玻片覆盖。
(4)观察计数与未离心直接涂片法相同。
(5)结果报告与未离心直接涂片法相同。
3.定量尿沉渣分析板法定量尿沉渣分析板为特制的一次性使用的硬质塑料计数板(见图5-2),每块板上有10个计数池,每个计数池又有1个计数区,每个计数区有10个大方格,每个大方格又分为9或16个小方格,计数池的高度为0.1mm,每个大方格的面积为1mm2,故每个大方格的容积为0.1μl;10个大方格的总容积为1μl,每个样本用1个计数池。
(1)未离心法直接吸取混匀尿液1滴充入定量尿沉渣分析板计数池内,在低倍镜下计数10个大方格内管型总数,在高倍镜下计数10个大方格内细胞总数,此即每微升的尿液中某种有形成分的数量。
临床医学检验考试技术(师)(习题卷10)第1部分:单项选择题,共100题,每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。
1.[单选题]测定羊水中哪种物质可作为判断胎儿唾液腺成熟度的指标A)胆碱酯酶B)胆红素C)淀粉酶D)葡萄糖E)磷脂甘油答案:C解析:羊水淀粉酶>300U/L,为胎儿唾液腺成熟的指标;200~300U/L为临界值;<200U/L为胎儿唾液腺不成熟。
2.[单选题]在三糖铁培养基上,哪两种细菌表现相似A)副溶血弧菌与痢疾志贺菌B)大肠埃希菌与伤寒沙门菌C)伤寒沙门菌与痢疾志贺菌D)大肠埃希菌与痢疾志贺菌E)副溶血弧菌与伤寒沙门菌答案:C解析:3.[单选题]悉生动物的特征是A)随意交配繁殖B)亲子交配繁殖20代以上C)剖宫产D)有遗传缺陷E)无菌动物引入已知正常肠道菌丛答案:E解析:悉生动物是指给无菌动物引入已知5~17种正常肠道菌丛培育而成的动物。
4.[单选题]“无尿”是指24h尿量不超过A)1000mlB)600mlC)500mlD)400mlE)100ml答案:E解析:“无尿”是指24小时尿量少于100ml。
5.[单选题]溶血性贫血实验室诊断依据不包括A)网织红细胞计数<0.5%B)破碎红细胞增多C)粒红比缩小或倒置D)间接胆红素明显升高E)嗜多色红细胞增多答案:A解析:溶血的实验室诊断依据网织红细胞增高(正常是0.5%~1.5%),其他选项皆是。
6.[单选题]急性肝萎缩、磷中毒或白血病患者尿液中可出现下列哪项结晶( )A)尿酸结晶B)草酸盐结晶C)亮氨酸或酪氨酸结晶D)胱氨酸结晶E)磷酸盐结晶答案:C解析:亮氨酸和酪氨酸的结晶为蛋白分解产物,可见于组织大量坏死的疾病,如:急性肝坏死、急性磷中毒、糖尿病性昏迷、白血病、伤寒等。
7.[单选题]血小板黏附率参考值范围是A)71%~88%B)89%~100%C)17%~34%D)53%~70%E)35%~52%答案:D解析:8.[单选题]可以消除检测体系或样本浑浊影响的方法是A)单波长法B)单波长单试剂法C)单试剂双波长法D)双波长单试剂法E)单试剂法答案:C解析:可以消除检测体系或样本浑浊影响的方法是单试剂双波长法。
第九章尿液沉渣显微镜检查1.尿液沉渣检验方法(1)尿沉渣直接涂片法1)检测原理:此法又称混匀1滴尿法,将尿液充分混匀,直接取其中1滴尿液涂于载玻片上,用显微镜观察,依据尿液各种有形成分的形态特点报告结果。
2)方法学评价:简便、易行、快捷,适用于急诊病人的检查,但阳性率低,重复性差,易漏诊。
此法只适用于肉眼浑浊的尿液,报告时应注明“未经离心”标本。
(2)尿沉渣定量计数法1)尿沉渣定量计数板法:尿沉渣定量分析由尿沉渣定量分析板、Diosed 尿沉渣离心管组成。
取10mL尿液置于特制的离心管内,在规定离心时间和转速的条件下离心沉淀,移去上清尿液,保留一定量的尿沉淀物,取其中1滴灌入计数板内,然后计算一定体积(1.0μL)内尿液的有形成分。
2)尿沉渣定量分析法:根据动力管道产生吸力的原理,蠕动泵自动把尿沉渣吸入,并重新悬浮在流动计数池内,进行形态学检查、计数。
3)方法学评价:①虽然尿沉渣定量分析板法操作繁琐、耗时,但能达到尿沉渣检验规范化、标准化,符合美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)和中国临床实验室标准化委员会(CCCLS)的要求。
②1h尿有形成分计数法较留12h尿液简便,不必加防腐剂,对有形成分影响小,不需限制饮食(但不能大量饮水),适用于门诊及住院病人的连续检查。
③Addis计数法的标本留取时间长,结晶、室温可影响准确性,因而误差大、重复性差。
故目前国内外已较少应用。
④尿结晶检查的方法有肉眼观察尿液浑浊或沉淀,部分结晶经加热、加酸等处理后变清。
也可采用显微镜观察结晶。
4)参考值:尿沉渣检验各种不同方法的参考值见表9-1。
成人1h尿液有形成分计数:①红细胞:男<3万/h,女<4万/h。
②白细胞:男<7万/h,女<14万/h。
表9-1 尿沉渣主要成分参考值方法红细胞白细胞管型上皮细胞结晶直接镜检法0~偶见/HPF 0~3/HPF 0~偶见/LPF 少见少见离心镜检法0~3/HPF 0~5/HPF 0~偶见/LPF 少见少见平均每高倍视野(个)0.4~1.0 0.6~2.1尿沉渣定量分析仪0~12/μL 0~12/μL 0~l/μL尿沉渣定量分析板法0~5/μL 0~10/μL(3)尿沉渣染色法:尿沉渣染色检验是为了进一步鉴别白细胞、闪光细胞、上皮细胞、病理管型、结晶、细菌和霉菌,防止透明管型漏检。
尿沉渣实验室检查的方法、注意事项和临床意义【关键词】尿沉渣;实验室检查;方法1尿沉渣实验室检查方法1.1直接镜检法将尿液充分混匀,取其中1滴尿直接涂于载玻片上,依据各种有形成分的形态特点,用显微镜观察作出报告。
1.2玻片画框法用标定好的滴管加混匀尿2滴涂满蜡笔画好的25.2mm×25.2mm框内,静止3min后累计20个高倍视野细胞数,结果以每微升细胞数报告。
细胞数(μL)=T×A/20BV。
式中T=细胞累计数,20=所观察的视野数,A=标本分布面积,B=高倍视野面积=π高倍视野半径2,V=标本用量(μL)。
1.3自然沉降法将尿液在室温下放置15~30min后,移去上层的尿液,保留底层大约0.2mL左右,然后混匀,取其中1滴沉淀于载玻片上,镜检同直接镜检法。
1.4离心沉淀法尿液10mL离心5min,相对离心力为400g离心5min,弃上清留沉渣尿量0.2mL,混匀后吸取20μL,滴在玻片上,用18mm×18mm盖片覆盖,先用10×10低倍镜观察全片,再用10×40高倍镜仔细观察,检查细胞至少10个视野,检查管型至少20个低倍视野,报告以高倍视野所见最低至最高数字表示。
1.5尿沉渣定量计数板法取一定量(10mL)尿液置特制的离心管内,在规定离心时间和转速的条件下离心沉淀,移去上清尿液,保留一定量的尿沉淀物,取1滴滴入计数板内,在显微镜下计数,然后换算成一定体积(1/μL)内尿有形成分的含量。
正常人尿沉渣中可见少量红细胞、白细胞、上皮细胞、结晶、黏液丝等,但罕见透明管型。
尿异形红细胞常表明与肾性疾病有关,而正常形态红细胞主要见于非肾性疾病。
尿白细胞中闪光细胞超过10%多考虑肾盂肾炎,管型是肾损害及损害程度的证据。
根据管型的横径大小可将管型分为狭管型(为1~2个红细胞直径宽),中等宽度管型(3~4个红细胞直径宽),宽管型(5个红细胞直径宽)。
宽管型提示肾功能严重受损,预后不佳。