临床血液学检查-常见实验室技术 PPT课件

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实验室检查
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急性原粒细胞白血病部分分化型（AML-M2）实验室检查
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血常规、血生化、出凝血检查
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骨髓细胞形态学检查
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免疫分型
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分子生物学检测：C-KIT、FLT3-ITD、NPM1、CEBPA基因突变
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细胞遗传学检查：AML1-ETO融合基因
AML-M2骨髓象
急性早幼粒细胞白血病（APL）是一种有着特异基因与染色体核型的特殊型急性白血病。临床表现凶险，起病及治疗过程中容易发生出血和血栓而引起死亡。
实验室检查
血常规、血生化和出凝血检查：血常规：WBC、HGB、PLT和白细胞分类的检测对于诊断和预后分析具有重要意义。血生化：常规生化电解质、肝肾功能。出凝血检查：Fg、PT、APTT、FDP及D-二聚体。
细胞形态学：以异常的颗粒增多的早幼粒细胞增生为主，细胞形态较较一致，胞质中有大小不均的颗粒，常见呈柴捆状的Auer小体。
常见血液病的实验室诊断
苏北人民医院血液病实验室
贫血：营养性贫血、MDS、白血病、再障等白细胞减少：病毒感染、MDS、白血病、风湿病、肿瘤等血小板减少：ITP、MDS、白血病、风湿病等
1、血细胞减少：
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红细胞增多：反应性红细胞增多、PV白细胞增多：感染、MPN、白血病血小板增多：反应性血小板增多、ET
血象：
骨髓增生活跃，以红系增生为主，各阶段红细胞可见巨幼改变，出现“核幼浆老”；粒系、巨核系可见巨幼改变。
骨髓象：
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巨幼细胞性贫血骨髓象
急性白血病是造血干细胞的恶性克隆性疾病，发病时骨髓中异常的原始细胞及幼稚细胞（白血病细胞）大量增殖，蓄积于骨髓并抑制正常造血，广泛浸润肝、脾、淋巴结等髓外脏器。表现为贫血、出血、感染和浸润等征象。根据受累的细胞类型，AL通常可以分为急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）和急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia，AML）两大类。

二、红细胞比积测定：（Байду номын сангаасct）
1.定义：Hct指RBC在血中所占容积的比值。
2.正常参考值： 男性：0.4—0.5L/L（40—50容积%） 女性：0.37—0.48L/L（37—48容积%）
3.测定Hct的临床意义： （1）Hct↑：血液浓缩、RBC增多。 （2）Hct↓：贫血。
三、RBC平均值的计数：
口形RBC：遗传性口形RBC增多症（口形RBC>10%）
靶形RBC：地中海贫血、异常Hb病（靶形RBC>20%）
镰形RBC：镰形RBC增多症
泪滴RBC：骨髓纤维化，其次：地贫、溶贫
棘形RBC：棘形RBC增多症，脾切，尿毒症等。
球型红细胞增多症
镰形红细胞
RBC形态不整（RBC异形症）：
梨形、泪滴形、新月形、长圆形、三角形、盔形等 见于：DIC,血栓性血小板减少性紫癜（TTP）
△高嗜酸性粒细胞综合征：
E↑+肺浸润+心、胃肠等损害。
3.E减少的意义：
☆长期应用肾上腺皮质激素后。 ☆伤寒。
（三）嗜碱性粒细胞：（B）
1. B的生成、功能、正常值： （1）生成：同E。 （2）功能：主要是参与超敏反应（IgE
的Fc受体） （3）正常值：占WBC 0～1%
2.B增高的意义： 见于：慢粒、真红、慢性贫血、 嗜酸性粒细胞白血病（少见）
RB C破坏过多：溶血性贫血（溶贫）
失血
：各种大出血。
3.RBC形态学改变：
（1）正常：双凹圆盘形直径6～ 9um, 平均7.5um，有中央淡染区、大小相当 于 RBC直径的1/3～2/5
（2）病理改变：大小异常、形态异常。 1）大小异常：
小RBC,大RBC，巨RBC,RBC大小不等。

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2．作为疗效观察指标
缺铁性贫血和巨幼细胞贫血：治疗前网红轻度 增高，给予铁剂或叶酸治疗后，网织红细胞的 升高先于红细胞恢复。 3-5天开始上升， 7 ～ 10 天达高峰，增至 6 ～ 8 ％或达 10 ％以上。 2 周左 右网红渐下降，而红细胞及血红蛋白才逐渐增 高。这一现象称为网织红细胞反应，可作为贫 血治疗时早期判断疗效的指标。 治疗性试验的观察指标：缺铁性贫血或巨幼细 胞贫血诊断的治疗性试验，给予铁剂或叶酸， 如出现网织红细胞反应，可帮助确定为某种贫 血的诊断，或作出鉴别诊断。
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原理
影响红细胞聚集的因素： 蛋白质：不对称的大分子蛋白质如纤维 蛋白原、 γ球蛋白、 α 、 β球蛋白、免疫 复合物等，因带正电荷可中和红细胞表 面的负电荷，促使红细胞聚集，致血沉 加速。清蛋白带正荷，具有抑制红细胞 缗钱状聚集的作用，血沉减慢。
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原理
影响红细胞聚集的因素： 脂类物质：胆固醇和甘油三酯有促进作用，可 使血沉加快；卵磷脂有抑制作用使血沉减慢。 红细胞的数量、形状或大小等自身变化：红细 胞数量越多，受到的阻力越大，血沉越慢；反 之则血沉加速。红细胞形态异常不利于缗钱状 形成，因此血沉加快不多；大红细胞因表面积 相对减少，受到血浆的阻遏力相应减少，下沉 较小细胞为快。
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原理
红细胞沉降的速率受两种相反方向力量 的相互作用，即红细胞的下沉力与血浆 的阻遏力。 由于红细胞的重力而产生自然的下沉力。 正常情况下，因红细胞膜表面的唾液酸 带有负电荷，红细胞互相排斥使细胞间 彼此分散悬浮于血浆中，下沉受到的阻 力较大，故沉降较慢。
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原理
红细胞聚集是促使红细胞沉降的主要原 因。 如红细胞之间的排斥力减少而互相聚集 呈缗钱状形成，因重量增加，与血浆接 触的总表面积减少，下沉时受到血浆的 阻遏力减弱，故使红细胞沉降增快。

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实验诊断学（laboratory diagnostics)的任务是 将检验的结果，结合病史/家族史、症状/体征 以及影象检查/病理检查等，对病人作出正确的 诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判断。 检验 病史/家族史，症状/体征 诊断/鉴别诊断
影象诊断/病理诊断
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绪论
二、发展简史 1673年，Leeuwenhook发明显微镜，此后使血液 形态学有了革命性发展。 1855年，血细胞计数测定 1878~1895年，血红蛋白测定 1877~1912年，细胞分类技术 1953年，Coulter血细胞自动计数仪 上世纪80年代后，自动化仪器发展迅速
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实验的系统评价（举例DIC）
诊断DIC的效能 Sen% Spe% Acc% Ppv% Npv% 95%CI
PLT 82.7 PT 75.6 APTT 68.5 Fg 38.0 3P 37.2 D-D 80.0 43.9 58.3 65.8 77.0 85.7 70.6 59.5 65.0 66.9 60.19 65.9 75.1 49.7 53.4 58.4 55.6 64.3 69.7 79.1 79.1 74.9 62.1 66.4 81.8 2.36,8.18 4.66,13.38 1.95,11.16 0.75,6.96 1.53,14.56 7.11,34.07
内源性凝血途径缺陷 无出血症状
共同凝血途径缺陷症
共同凝血途径缺陷症 因子XII、激肽释放酶原、高 分子量激肽原缺乏 （遗传性、获得性）
因子X、V、II、I 缺陷症
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(遗传性、获得性)

近年，上海瑞金医院用这2项筛选试验的优化组合；再 结合凝血因子促凝活性和抗原含量测定作表型诊断；然 后用RFLP/AS-PCR验证突变作基因诊断；再用真核细 胞培养，检测相关因子的抗原和活性、Western印迹、 免疫荧光染色、生物代谢标记及PCR等方法判断突变基 因异常蛋白的合成和功能。用这一优化组合的技术平台 对11种遗传性出血病，143个家系，155例患者和543名 家族成员作检验诊断，准确率达100%，无漏诊和误诊 现象。

实验一 血液学一般检查
[ 内容] 血红蛋白测定（氰 化高铁血红蛋白测 定法） 白细胞计数（White Blood Cell Count）
实验一
1 . 血红蛋白测定---氰化高铁血红蛋白（HiCN） 测定法
• 该法具有操作简便，结果稳定可靠，试剂容易保 存等优点，被国际血液学标准化委员会(ICSH)推 荐为参考方法，为我国测定血红蛋白首选方法。
新生儿：（15～20）×109/L
实验一
[ 注意事项]
1、EDTA-K2抗凝全血使用前必须混匀。 2、计数盘和盖玻片在使用前需用纱布擦拭干净。 3、血红蛋白吸管内腔要干燥，否则会影响吸血量。 4、在稀释液转为棕褐色后方能充池计数，否则因
RBC残存而干扰计数使结果偏高。 5、显微镜调节：光镜光圈调暗，光源可调亮，微调计数。 6、用好的器材及时清洗（Hb吸管、计数盘、盖玻片、吸管）
K3Fe(CN)6
Hb
Hi+ CN-
HiCN
实验一
[器材]
[标本来源]
1. 血红蛋白吸管，5ml吸管 EDTA-K2抗凝全血或
2. 大试管
毛细血管采血
3. 722分光光度计
[试剂]
血红蛋白转化液（文齐氏液）：
氰化钾（KCN）
0.05g
高铁氰化钾[K3Fe(CN)6] 无水磷酸二氢钾（KH2PO4） Triton X—100
实验一
5. 计数：将血细胞计数盘放在显微镜载物台上，低倍镜下计数四角4 个大方格内白细胞总数（压线细胞：数上不数下，数左不数右）
6. 计算：白细胞/L=(N/4)×10×106×20=(N/20)×109
式中N表示四个大方格内数得的白细胞总数。 /4:为平均每个大方格（0.1mm3）稀释液内

临床意义
• 嗜酸性粒细胞减少(eosinopenia)：常见于 传染病早期，如伤寒、副伤寒初期，大手 术、烧伤等应激状态，或长期应用肾上腺 皮质激素后或者肾上腺皮质功能亢进症， 其临床意义甚小。
血 液 一 般 检 查
血 浆 (plasma)
血 液 有 形 成 分 红 细 胞 白 细 胞 粒 细 胞
单 核 细 胞 mono
血 小 板
淋 巴 细
第一节 血液一般检查
• 血液一般检查主要是指对外周血中细胞成分的数 量和形态的检查及与血细胞有关的实验室检查， 包括红细胞、白细胞、及血小板等参数的检查。 血细胞数量和形态的检查是临床上最常用、最基 本的检查内容。 • 近年来由于血液学分析仪器的广泛应用，血液常 规检测的项目增多包括血红蛋白测定、红细胞计 数、红细胞平均值测定和红细胞形态检测；白细 胞计数及分类计数；血小板计数、血小板平均值 测定和血小板形态检测。
临床意义
• （2）嗜酸性粒细胞 • 嗜酸性粒细胞(eosinophil，E)细胞呈圆形， 直径为13～15μm。胞质内充满粗大、整齐、 均匀、紧密排列的砖红色或鲜红色嗜酸性 颗粒，折光性强。胞核多为两叶，呈眼镜 状，深紫色。嗜酸性粒细胞容易破碎，颗 粒可分散于细胞周围。
临床意义
• 1)嗜酸性粒细胞增多(eosinophilia) • 变态反应性疾病 • 药物过敏、支气管哮喘、荨麻疹、食物过 敏、湿疹、剥脱性皮炎、血管神经性水肿、 血清病等外周血嗜酸性粒细胞增多可达10 ％以上。
一、红细胞参数检查
• （一）红细胞计数和血红蛋白的测定 • 通过红细胞计数和血红蛋白测定，发现其 变化而借以诊断有关疾病。 • 健康人群红细胞和血红蛋白参考值，见表。
• 健康人群红细胞和血红蛋白参考值，见表。

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Blood Test
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Blood Test
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Blood Test
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Blood Test
红
红
红
红
红
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Blood Test
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Blood Test
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Blood Test
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Blood Test
红细胞数/L=N/5*25*201*10*10E6
=(N/100)*1012
五个中方格计数和求均值乘 以中方格数量乘以稀释倍数
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Blood Test
Micropipettes
Markers: 10ul
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20ul Warning line
Blood Test
【试剂】 红细胞稀释液：枸椽酸钠1.0 g ，36% 甲醛液1.0ml，氯化钠0. 6 g，加蒸馏水至100 ml，混匀，过滤两次后备用。
【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。
将0.1微升体积内的 细胞数换算成升
【参考值】 ①成年人：男性（4.09～5.74）×1012/L，女 性 (3.68～5.13) ×1012/L。 ②新生儿：(5.2～6.4) × 1012/L。 ③婴儿：(4.0～4.3) ×1012/L。 ④儿童：(4.0～4.5) ×1012/L。
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Blood Test
擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的 底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管 2～3次。 3．混匀 待细胞悬液完全变为棕褐色。 4．充池 再次将小试管中的细胞悬液混匀。吸取细胞悬液 1滴，注入计数板的计数池中，室温下静置2～3min，待 白细胞完全下沉后再做白细胞计数。 5．计数 将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数 区和格子线，用低倍镜（或高倍镜）下计数四角4个大方 格内的白细胞总数。

白细胞计数和分类
白细胞计数
白细胞计数是评估感染、炎症等的重要指标。正常值范围为 4.0-10.0x10^9/L。
白细胞分类
通过显微镜检查白细胞形态，将白细胞分为中性粒细胞、淋 巴细胞、单核细胞等，有助于鉴别感染类型和疾病进程。
血小板计数
• 血小板计数：血小板计数是评估出血风险和凝血功能的重要指 标。正常值范围为100-300x10^9/L。
血液检验ppt课 件
目录
• 血液检验概述 • 血液检验的指标 • 血液检验的临床应用 • 血液检验的注意事项
01
CATALOGUE
血液检验概述
血液检验的定义和目的
定义
血液检验是通过采集人体血液样本， 利用实验室技术和设备进行检测和分 析，以评估人体健康状况和诊断疾病 的过程。
目的
血液检验主要用于诊断、监测和治疗 各种疾病，如贫血、感染、糖尿病、 肝病、肾病等，同时也可以评估人体 的营养状况和生理功能。
的诊断和治疗方案。
02
CATALOGUE
血液检验的指标
红细胞计数和血红蛋白测定
红细胞计数
红细胞计数是评估贫血、红细胞 增多症等血液系统疾病的重要指 标。正常值范围为男性4.05.5x10^12/L，女性3.54.5x10^12/L。
血红蛋白测定
血红蛋白是红细胞内的主要成分 ，负责运输氧气。正常值范围为 男性120-160g/L，女性110150g/L。
通过检测血液中的转氨酶、胆红素、白蛋白等指标，评估肝脏功能；检测尿素氮、肌酐等指标，评估肾脏功能。 异常结果提示肝、肾疾病可能。
肝、肾疾病的监测
定期检测相关指标，观察病情变化，评估治疗效果，调整治疗方案，预防并发症的发生。

降低见于：
1.应用肾上腺皮质激素 2.体内处于应激状态等
临床意义
嗜碱性粒细胞
升高见于： 过敏性疾病、 见于慢性粒细胞白血病、 骨髓纤维化、 慢性溶血等
降低见于： 一般无重要临床意义
淋巴细胞（lymphocyte，L）
参考值： 20%~40% ，
外周血
T细胞占50%~70%， B细胞 占15%~30%
白细胞分类计数
将外周血制成涂片,经瑞氏染色后在显微 镜下观察其形态,根据细胞核、细胞浆和胞浆中 颗粒的特点，白细胞可分为五类: 中性粒细胞、 淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性 粒细胞。
五种白细胞正常百分数和绝对值
细胞类型
百分数(%)
中性粒细胞杆状核 0～5
中性粒细胞分叶核 50～70
嗜酸性粒细胞
血管内与血管外溶血的鉴别特征血管内溶血血管外溶血病因红细胞外缺陷红细胞内缺陷外因素后天多见外因素遗传性多见红细胞破坏场所血管内单核吞噬细胞系统病程急性多见常为慢性可急性加重贫血黄疽常见常见肝脾肿大少见常见血管内与血管外溶血的鉴别特征血管内溶血血管外溶血红细胞形态学改变少见常见红细胞脆性改变变化小多有改变hb血症41000mgl轻度增高hb尿常见无或轻微尿含铁血黄素慢性可见一般阴性骨髓再障危象少见急性加重时可见ldh增高轻度增高溶血性贫血的病因诊断红细胞渗透脆性试验酸溶血试验pnh抗人球蛋白试验免疫血红蛋白电泳珠蛋白高铁血红蛋白还原试验3
继发性增多
绝对性
相对性
真性红细 胞增多症
RBC生成素 代偿性增多
RBC生成素 非代偿性增多
相对性增多
由于各种原因导致体内水分丢失、 血液浓缩，使红细胞和血红蛋白含量相 对性增多。见于严重呕吐、腹泻、大量 出汗、大面积烧伤、尿崩症、糖尿病酮 症酸中毒等。

概念
实验诊断（laboratory diagnosis）是
指在认真询问病史、体格检查的基础上，从病人 的实际出发，合理选用检验项目；临床实验室运 用生物学、免疫学、化学、血液学、细胞学、病 理学及其他检验学技术，对病人的血液、体液、 分泌物、排泄物及组织细胞等进行检验，以获得 病原体、病理变化及脏器功能状态等资料；医生 通过对临床实验室分析所得到的信息与临床医学 的理论和实践相结合，进行综合分析，从而协助 临床进行诊断、观察病情、制定防治措施和判断 预后的方法。
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内容
➢ 血液学检验 ➢ 体液与排泄物检验 ➢ 生化学检验 ➢ 免疫学检验 ➢ 病原学检验
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应用
为疾病诊断和鉴别诊断提供依据 为疗效观察和预后判断提供依据 为公共卫生和预防疾病提供资料 为临床研究和基础研究提供手段 为健康普查和健康咨询提供服务
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现状
仪器的自动化 试剂的多样化 方法学的标准化 分子生物学实验技术的崛起 实验的质量控制和系统评估 高层次实验技术人才的培养 循证实验医学的问世
贫血类型
正常细胞正常色素性 小细胞低色素性
大细胞正/高色素性 单纯小细胞性
常见疾病
急性失血、再生障碍性贫血、骨髓病性贫血等 缺铁性贫血、海洋性贫血等 营养性巨幼细胞性贫血
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（2）绝对性红细胞增多： ①继发性 血中红细胞生成素增多（EPO） 生理性增多 见于胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈的 体力劳动和体育活动及情绪激动等，因缺氧红细胞生成素 代偿性增加所致。 病理性增多 见于严重的慢性心、肺疾患，如阻塞性肺气 肿、肺心病、某些发疳性先心，由于长期缺氧，其RBC可 在7.5 ～8.5×1012/L，HGB在180 ～240g/L；亦见于某些 肿瘤如肝细胞癌、卵巢癌、肾癌、肾胚胎瘤等。