普洱茶中茶褐素含量的紫外光谱法测定
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茶叶中美术绿含量的检测方法茶叶是一种广泛流行的饮品,其中绿茶因其丰富的抗氧化物质和营养成分而备受青睐。
绿茶的品质与其中的茶多酚含量息息相关,而茶多酚中的主要成分之一就是咖啡碱。
因此,准确测定茶叶中的咖啡碱含量对于评估茶叶质量和研究茶叶的生理活性非常重要。
本文将介绍几种常见的茶叶中咖啡碱含量的检测方法。
一、高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是测定茶叶中咖啡碱含量最常用的方法之一。
该方法操作简单、准确度高,能够有效提取茶叶中的咖啡碱,并通过高效液相色谱仪进行定量分析。
首先,将茶叶样品制成细粉,并用某种溶剂提取咖啡碱。
然后,将提取物进样至高效液相色谱仪进行分离和检测。
通过比较峰面积或峰高与标准品的对照关系,可以计算出茶叶中咖啡碱的含量。
二、紫外分光光度法紫外分光光度法是测定茶叶中咖啡碱含量的传统方法之一。
该方法利用咖啡碱在紫外光下的特定吸收特性进行定量测定。
首先,将茶叶样品与适当的溶剂混合,制备茶叶提取液。
然后,使用紫外分光光度计在特定波长下测定茶叶提取液的吸光度。
根据预先建立的咖啡碱标准曲线,可以计算出茶叶中咖啡碱的含量。
三、核磁共振波谱法核磁共振波谱法(NMR)是一种非破坏性的分析方法,可以用于测定茶叶中咖啡碱的含量。
通过将茶叶样品与适当的溶剂混合,并通过核磁共振仪进行测定。
核磁共振波谱法可以提供咖啡碱分子的结构信息以及浓度。
与其他方法相比,核磁共振波谱法不需要复杂的前处理步骤,并且不会对样品造成破坏。
四、电化学法电化学法是一种灵敏度高且操作简便的方法,可用于茶叶中咖啡碱含量的测定。
该方法利用电极与咖啡碱之间的电化学反应产生的电流进行定量分析。
首先,将茶叶样品提取得到茶叶提取液。
然后,将提取液与适当的电解质混合,通过测定电流和时间的关系,可以计算出茶叶中咖啡碱的含量。
总结茶叶中美术绿含量的检测方法多种多样,通过选择适合本实验室或研究的方法,可以准确测定茶叶中的咖啡碱含量。
高效液相色谱法、紫外分光光度法、核磁共振波谱法和电化学法是常用的几种方法。
贮藏加工普洱茶主要种植生产于云南,是我国特有的一种历史悠久的名茶。
普洱茶选取的原料主要以晒青毛茶为主,一般成品为散装茶和紧压饼型茶[1]。
普洱茶的自然发酵过程所需时间较长,现代茶厂主要利用固态发酵的工艺方法进行生产制备[2]。
普洱茶色泽红亮,滋味醇厚回甘,汤色内敛浓红[3]。
具有降血糖、抗衰老、抗过敏、降血脂、防癌等效果[4]。
普洱茶成品可分为生茶和熟茶两种类型,两者的区分主要是加工工艺的不同。
生茶主要利用自然发酵的方法,将原料长时间存放。
熟茶是经过人工发酵,经过“渥堆”过程制作而成[5]。
熟茶的制备过程,主要经过“渥堆”发酵工艺,发酵过程能够决定普洱茶的品质。
发酵过程会存在大量微生物。
根据目前的研究,微生物主要有黑曲霉、酵母、根霉等[6],微生物在发酵过程中含量会有所变化,其中最多的是黑曲霉,大约占总含量的80%左右。
黑曲霉能够把多酚类物质转化为具有较强的抗氧化能力和清除自由基能力的茶色素,在普洱茶品质形成中具有重要作用[7]。
普洱茶的茶汤色主要由茶色素决定[8]。
茶色素主要由茶红素、茶黄素、茶褐素构成。
有研究表明,茶红素和茶黄素在发酵过程中含量会有所下降,并且相对含量没有茶褐素高[9]。
茶褐素作为普洱茶中的一种重要物质,研究其与普洱茶品质的关系就具有一定的探究价值[10]。
利用自动化恒温恒湿发酵方法比采用恒温非湿的方法,普洱茶发酵后品质的稳定性要强。
而目前利用黑曲霉发酵对普洱茶茶汤色品质的定量分析报道较少。
本文主要研究采用恒温恒湿的发酵环境,对原材料接种黑曲霉,测出不同发酵过程中茶褐素的含量。
对不同发酵过程中的感官评价进行打分,研究茶褐素含量与品质之间的关系,为改善发酵工艺提供技术依据。
1 材料与方法1.1 试验材料接种黑曲霉发酵的普洱茶翻堆样,晒青毛茶,由云南普洱市思茅和益茶叶有限公司代购。
2016年生产困鹿山生茶熟茶各一饼(357g/饼)、2017年板山青(生茶)、2015年和润(熟茶);发酵用黑曲霉(上海沪震生物科技有限公司)。
紫外分光光度法测定茶叶中咖啡碱的研究与优化摘要:本文对用紫外分光光度法测定茶叶中最重要的生物碱咖啡碱进行了一定研究,并对实验条件进行了优化。
关键词:紫外分光光度法茶叶咖啡碱测定1.引言生物碱是茶叶中的重要成分之一,特别是咖啡碱(又称咖啡因),是茶叶嘌呤碱中含量最多,有着嘌呤环结构的一类含氮化合物。
茶叶作为饮料具有保健价值及药用功效,这在一定程度上与咖啡碱的存在和含量有关[1],咖啡碱能兴奋神经中枢和增强心脏功能,加大大脑皮质中枢的活动,因此具有提神的作用[2]。
茶叶中咖啡碱含量为2~4%(占干物质含量),可作为茶叶特征成分而与其它植物相区别[1]。
因此,快速准确地测定咖啡碱在茶叶中的含量,对评估茶叶的品质及其保健功效有着重要意义。
测定咖啡碱含量的方法主要有高效液相色谱法和紫外分光光度法,但因高效液相色谱法要求实验条件相对较高,而紫外分光光度计法则简单快速、灵敏度高、选择性好。
本文对紫外分光光度法测定茶叶中咖啡碱进行了一定研究,并对实验条件进行了优化。
2.实验和结果2.1仪器和主要试剂UV-1100紫外分光光度计(上海美谱达仪器有限公司);咖啡因标准溶液:将咖啡因用三氯甲烷配制成200μg/ml;其余所用试剂均为分析纯。
2.2实验方法2.2.1 样品处理将茶叶在研钵中充分研碎,准确称取2~3g于200ml烧杯中,加入100ml 蒸馏水,在电炉上煮沸15min,冷却过滤,在滤液中加入饱和氯化钠溶液1ml,再加入1mol/L氢氧化钠2ml,搅匀,注入250ml分液漏斗中,然后以三氯甲烷分三次提取,将三氯甲烷层经无水硫酸钠小漏斗脱水(在漏斗颈部放一小团脱脂棉,上面铺无水硫酸钠(约10克),过滤于250ml容量瓶中,再用少量三氯甲烷多次洗涤无水硫酸钠,将洗液合并于上述容量瓶中,用三氯甲烷定容至刻度,摇匀备用。
2.2.2 标准曲线绘制分别准确吸取咖啡碱标准溶液(200μg/ml),0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00 ml,于10只25ml比色管中,加三氯甲烷至刻度,以空白为参比,用1cm石英比色皿分别测其吸光度,绘制标准曲线或求回归方程。
普洱茶、红茶、绿茶中真菌毒素的检测检测茶叶中黄曲霉毒素(B1,B2,G1和G2)、伏马霉素(FB1,FB2,FB3)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇,明确茶叶中的真菌毒素含量范围并为茶叶监管提供依据。
采用有机溶剂(0.1%甲酸乙腈溶液)以及80 ℃热水2种方法提取茶叶中的真菌毒素,利用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法进行分析测定。
黄曲霉毒素B1,G1的线性范围为39.1~5 000 ng·L-1,黄曲霉毒素B2,G2的线性范围为117~15 000 ng·L-1;伏马霉素(FB1,FB2,FB3)的线性范围为2.44~313 ng·L-1;脱氧雪腐镰刀菌烯醇的线性范围为3 125~5 000 ng·L-1。
所得8种真菌毒素的回归方程均有良好的线性关系(r≥0.999 0),回收率为85.7%~99.6%,相对标准偏差99.9%)、硫酸镁(美国Fisher 公司);C18硅胶(60A级)购于美国Sorbtech公司。
本研究所检测茶叶样本为随机抽取的国际茶叶市场共20种茶叶样品,其中有8种茶叶购自日本茶商LUPICIA。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱为UPLC ACQUITY BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈(B),梯度洗脱(0~3.0 min,10%B;3.0~10 min,10%~70% B;10~10.1 min,70%~10% B;10.1~13 min,10% B),流速0.4 mL·min-1,柱温40 ℃,进样量5 μL。
2.2 质谱条件电喷雾离子源(ESI)正离子模式;多反应检测模式(MRM);毛细管电压1.0 kV;脱溶剂气温度400 ℃;锥孔流速150 L·h-1;脱溶剂气流速600 L·h-1。
其他质谱参数见表1。