布鲁氏菌病疫苗（S2株）免疫羊抗体消长规律的研究

布鲁氏菌疫苗A19与S2株免疫奶牛抗体消长规律与4种检测方法比较作者：乔波严平乐汉桥张健来源：《畜牧兽医科学》2019年第12期摘要：为了解奶牛免疫A19疫苗和S2疫苗后的抗体消长规律，比较目前地市级实验室常用的3种血清学检测方法的效果，研究分别按厂家说明书对分别对60头试验奶牛进行免疫，使用虎红平板凝集试验（RBT）、试管凝集试验（SAT）和竞争ELISA（cElisa）对免疫前1d 至免疫后260d的血清样品进行检测。

结果：2组奶牛血清样品经RBT、SAT、cELISA检测，抗体在28d达到峰值，且在21～56d保持较高水平，A19疫苗组260d仍未全部转阴，S2疫苗组在免疫后140d已全部转阴。

A19疫苗的阳转率明显高于S2疫苗组并且抗体持续时间更长。

关键词：布鲁氏菌病;奶牛;A19和S2疫苗;血清学检测中图分类号：S855.12文献标识码：Bdoi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.12.0010引言布鲁氏菌病（Brucellosis）是由布鲁氏菌引起的人兽共患传染病，病原是革兰氏阴性菌、兼性胞内寄生菌[1]。

该病以公畜睾丸炎、母畜流产、产奶量下降等为主要症状[2]。

布鲁氏菌进人机体被巨噬细胞吞噬，会有10%以上的细菌在巨噬细胞内定植。

该菌根据形态差异分为粗糙型（rough，R）和光滑型（smooth，S）2种，光滑型具有完整的外膜结构，能刺激机体产生针对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）中的O-侧链的抗体，粗糙型布鲁氏菌没有O-侧链抗原[3]。

常用的血清学检测方法中虎红平板凝集试验（RBT）是以布鲁氏菌细胞壁脂多糖上的O 链抗原作为诊断位点，试管凝集试验（SAT）抗原检测光滑脂多糖抗体（S-LPS），ELISA方法主要以光滑型布鲁氏菌脂多糖抗原检测布鲁氏菌抗体[4-6]。

我国常用的布病疫苗包括牛种布鲁氏菌A19疫苗、猪种S2疫苗、羊种M5疫苗，均为光滑型[7]。

试验研究 | Experimental research0 引言布鲁氏菌病（brucellosis 又称布氏菌病或布氏杆菌病，简称“布病”）是由布鲁氏菌（brucella）引起的人畜共患传染病，广泛分布于世界各地，多种动物和禽类对布鲁氏菌均有不同程度的易感性[1]。

自然感染以羊、牛和猪常见，其特征为生殖器官、胎膜及多种器官组织发炎、坏死和肉芽肿的形成，在临床上主要表现为波浪热、流产、不孕、睾丸及关节炎等症状[2]。

但近年羊布氏菌病感染率呈明显上升趋势，不但严重危害我国畜牧业（包括养羊业在内）的健康发展，还严重威胁国内部分地区人们的健康、食品安全以及全社会的公共卫生安全。

1 材料与方法1.1 疫苗 实验室制备的布氏菌病活疫苗（Rev.1株），批号为53003，布氏菌病活疫苗（S2株），批号为5393032，均由金宇保灵生物药品有限公司提供。

1.2 检测试剂 布鲁氏菌病试管凝集试验抗原、阳性对照、阴性对照、布鲁氏菌病虎红凝集试验抗原，均购自中国兽医微生物菌种保藏管理中心。

1.3 试验动物 试验动物来源于定点供应基地，经布鲁氏菌病虎红平板凝集试验检测为阴性的绵羊70只。

1.4 试验分组与免疫第1组为布氏菌活病疫苗（Rev.1株）免疫组，共计30只绵羊。

将疫苗用布氏菌活病疫苗（Rev.1株）专用稀释液溶解稀释至20头份/mL（按每头份为1滴，1滴约0.05 mL计算），用专用滴眼器进行眼结膜接种，每只羊滴眼1头份（0.05 mL），含1×109CFU/头份。

第2组为布氏菌病活疫苗（S2株）免疫组，共计30只绵羊。

将疫苗用生理盐水溶解稀释至1头份/mL，进行口服免疫，每只羊口服1头份，含1×1010 CFU/头份。

第3组为空白对照组，共计10只，不接种疫苗，相同条件下隔离饲养。

1.5 试验步骤所有试验羊分别于免疫前、免疫后14、21、28、49、60、90、120、150 d采血，分离血清，采用虎红平板凝集试验（RBT）和试管凝集试验（SAT）试验进行抗体测定。

布鲁氏菌病疫苗S2株免疫成年绵羊的抗体消长规律试验樊生平;齐守军;李连平;韩小军;曹春红【摘要】[目的]探索成年绵羊经布鲁氏菌病疫苗S2株免疫后血清抗体的消长规律.[方法]采用"灌服100亿菌""灌服200亿菌"和"肌注50亿菌"三种不同免疫方法,对试验羊进行布鲁氏菌病S2株疫苗的免疫接种.在接种前和接种后不同时间点分别采集试验羊血清样品,用虎红凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)进行血清抗体检测.[结果]肌注组抗体上升较快,于免疫后10天达到峰值,然后快速下降,90天后下降速度减缓,但在180天时RBT和SAT阳性率仍分别为63.2%和84.2%,SAT平均凝集效价为1:178.9.2个口服组均在免疫20天后抗体达到最高,以后下降,分别于90天和120天降到最低,然后有所回升并维持在低水平波动;至180天时,口服组的RBT阳性率均下降为0,SAT阳性率分别下降为40.9%和23.1%,SAT平均凝集效价分别降至1:40.9和1:18.2.[结论]对采用布鲁氏菌病S2株活疫苗口服免疫6个月以后的羊群,可用虎红凝集试验进行布鲁氏菌病检疫的初筛.【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2017(034)002【总页数】3页(P88-90)【关键词】成年绵羊;布鲁氏菌病;S2株疫苗;免疫抗体;检测;检疫【作者】樊生平;齐守军;李连平;韩小军;曹春红【作者单位】山西省大同市动物疫病预防控制中心,山西大同 037004;山西省大同市动物疫病预防控制中心,山西大同 037004;山西省大同市动物疫病预防控制中心,山西大同 037004;山西省大同市动物疫病预防控制中心,山西大同 037004;山西省灵丘县动物疫病预防控制中心,山西灵丘 034400【正文语种】中文【中图分类】S851.3布鲁氏菌病（Brucellosis，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的一种人兽共患传染病。

X u m u s h o u y i布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引发的传染性疾病，该病菌主要寄生在网状的淋巴细胞中，除了会攻击免疫系统外，还会引起菌血症，对动物的骨骼系统带来严重的损伤，导致母畜流产，生殖能力下降。

现阶段接种疫苗是控制和预防布鲁氏菌病的主要途径，因此，相关的工作人员应重视牛羊布鲁氏菌疫苗的研究工作，加强对疫苗抗体的评估，为后续疫苗的研制工作夯实基础。

一、牛羊布鲁氏菌疫苗实验分析为了准确评价牛羊布鲁氏菌疫苗的接种情况，本文以我省某市牛羊布病接种的抗体疫苗情况为例，该市接种的是哈药六厂研发的S2疫苗，生产批号为201814、201716以及201717，另外，还使用了该企业生产的A19株疫苗，实验还调查了其他6个试验点疫苗的接种情况。

该试验中肉牛标本数量为84头，肉羊为38头，可以充分观察抗体消长规律。

另外，本试验中使用的检测试剂是PBRP。

二、牛羊布鲁氏菌免疫后抗体水平消长规律的实验方法研究1、抗体的筛查分析需要对牛羊开展布病抗体的筛查工作，本实验中主要利用布病阴性场的方式进行免疫实验，每头牛均需要先口服500亿的S2活菌疫苗，每只羊则需要口服100亿的S2活菌疫苗，而A19疫苗则需要采用皮下注射的方式，本实验中对肉牛84头、肉羊38只进行了注射。

在抗体筛查时发现，其中有50头牛对于A19疫苗免疫，36只羊对S2疫苗免疫。

另外，为了保证实验结果的科学性，本实验还在该省份其他6个地区，也进行了牛羊布鲁氏菌疫苗的免疫实验。

2、样品的采集分析在样品的采集过程中，在对肉牛采集时，除了在免疫前采集血液外，同时在接种后的15天、30天以及45天均分别采集了血液，并将血清进行分类；在对羊采集时，也采集了免疫前的血液，同时在免疫后的7天、15天、30天、45天以及135天均采集了血液，用于提取血清。

3、抗体的检测方法分析本实验根据相关的标准，采用RBPT方式对抗体进行检测，首先工作人员取用布病虎红平板凝集抗原30μL放在玻璃平面上，然后再将其和30μL的血清混合均匀，观察其在4分钟内是否存在凝结的现象，一旦出现凝集的颗粒，则表示布病的抗原体呈现阳性。

浅谈人畜共患传染病——布鲁氏菌病综合防控措施摘要：布鲁氏菌病（以下简称“布病”）是由布鲁氏菌属细菌感染引起的人畜共患传染病，又称之为波状热、地中海热，马其他热，《动物防疫法》规定其为二类疫病，《传染病防治法》规定其为乙类传染病。

牛羊感染后严重影响生产性能，造成大量牲畜流产、死胎等，给畜牧业生产带来巨大损失。

人感染后轻则引起人发热、多汗、头痛、关节疼痛、疲乏无力、单侧性睾丸炎等，重则可致不孕不育、丧失劳动力，可引起孕妇流产等，严重损害人类健康，是当前我国重点防控的人畜共患传染病之一。

此病在发病早期不易与其他发热性疾病进行鉴别，容易被误诊，因此，防控形势十分严峻。

作为一名长期在基层工作的兽医人员，本人针对当前豫西农村地区牛羊布病流行态势、临床症状和防控措施，浅谈一下自己的实践体会，以期为促进畜牧业健康发展，维护人民群众身体健康贡献力量。

关键词：布鲁氏菌；人畜共患病、防控措施一、布病传染源感染布病的牛、羊和猪，是人患布病的主要传染源，鹿、犬等其它动物居次要地位。

感染布病牛羊的流产物、阴道分泌物、乳汁、肉类、皮毛、尿、粪便及被污染的土壤、水、饲料等均含有布氏菌，布病母畜的流产物是造成布病流行的主要传播因子。

养殖、兽医、皮毛收购等直接从业人员因接触病畜多，感染和患病也多，该病具有明显的职业性。

二、布病临床症状人畜感染布病后通常会发展成肉芽肿性炎性病变，这种病变经常在淋巴组织和生殖器官、乳房、乳房上淋巴结，关节和滑膜中发现。

同时，还会出现坏死性胎盘炎、可触及的睾丸改变、坏死性睾丸炎、附睾炎、坏死性精囊炎、前列腺炎和急性乳腺炎。

羊感染后，以母羊发生流产和公羊发生睾丸炎为主要特征。

公羊主要表现为附睾和睾丸的病变，精液质量显著下降，少部分病羊发生角膜炎和支气管炎。

附睾肿大可为单侧或双侧，睾丸可能出现纤维萎缩。

母羊主要表现为流产和死胎。

流产一般发生在怀孕后的3-4个月。

患病母羊易发生关节炎和滑液囊炎而致跛行。

三、布病传播方式1、传播途径一般来说，牛羊布病主要传播途径是流产或足月分娩后受感染牛羊排出的胎盘、胎液和阴道分泌物。

试验研究 | Experimental research0 引言布鲁氏菌病是一种世界性的人畜共患病，对经济和公共健康都有重大影响。

牛、羊感染流产布鲁氏菌和羊种布鲁氏菌，是人类疾病的共同来源，该病主要危害人畜生殖系统，人与人之间几乎不传播，患病动物是主要的传染源，其中病羊感染人的比例较高。

目前疫苗免疫是布鲁氏菌病防控的重要手段之一，尤其布鲁氏菌病高发地区。

我国在《国家布鲁氏菌病防治计划（2016—2020年）》中明确提出一类地区对羊采取全面免疫措施。

我国羊使用的布鲁氏菌病疫苗主要有Rev.1羊种和S2猪种。

羊种Rev.1是应用最广泛的羊种布病活疫苗，可对羊实施有效的免疫[1]。

猪种的S2株弱毒疫苗具有良好的免疫效果，但目前仍无法判断区分野毒及接种疫苗产生的抗体，主要从抗体在体内存续时间的长短判断，存续时间短的是疫苗免疫，时间长的为野毒感染[2]。

M5菌株是一株由我国从羊种布鲁氏菌中分离并自行培育致弱的菌株，对牛、羊均可产生较好的免疫力[3]。

由于该菌株毒力较强且存在毒力返强的风险，同时因其对妊娠动物有毒力增强的现象，更不能用于怀孕羊，目前市场已经不进行生产销售[4]。

1 试验材料1.1 样品琥红平板凝集试验和试管凝集试验结果均为：阴性的健康羊血清样品212份，采自河北省境内某地区规模化养殖场，均免疫过布病疫苗S2株，但已超过18个月。

1.2 试剂布病阴性羊40只（20只/组），猪种布鲁氏菌S2弱毒疫苗（中牧）、Rev.1疫苗（国外小量购进）。

2 试验方法使用布鲁氏菌S2疫苗以口服方式对羊进行免疫，使用Rev.1疫苗以滴眼方式对羊进行免疫，免疫后分别在特定时间点使用虎红平板凝集试验（RBT）和试管凝集试验（SAT）对羊群抗体阳性率进行监测[5]。

3 结果与分析应用RBT及SAT试验方法检测羊免疫后在第14、21、28、58、90、122天的血清40份，免疫后不同天数布病特异性抗体检出率见图1、图2。

Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报收稿日期：2023-12-27作者简介：李鑫，男，本科，高级兽医师，主要从事动物疫病预防控制研究通信作者：李鑫，E-mail：139****************2024,32(1):88-95·研究论文·六种布鲁菌病疫苗对绵羊与山羊免疫效果的比较摘 要：为了比较不同布鲁菌病疫苗对乌拉特草原以放牧为主的山羊与绵羊的免疫效果，我们在乌拉特草原6个苏木/镇，随机选取80～100日龄并经过布鲁菌病检测阴性的乌拉特土种绵羊羔385只、二狼山绒山羊羔275只，用6种布鲁菌病疫苗进行免疫效果比对试验。

采用琥红平板凝集试验（RBPT ）和试管凝集试验（SA T ）分别对试验组羊接种疫苗后7、14、21、35、60、120、150、180、210、240、270 d 进行转阳率和抗体效价检测；免疫后270 d 进行攻毒试验。

RBPT 和SA T 结果显示，M5-90Δ26和S2接种绵羊与山羊后抗体产生快，持续时间长；免疫后攻毒试验结果显示，A19点眼绵羊和A19-ΔVirB12株皮下注射绵羊保护比例均为4/6；M5-90Δ26绵羊皮下注射和ReV .1山羊点眼的保护比例均为4/5；本试验为乌拉特草原建立牛羊免疫无布鲁菌病区筛选理想疫苗，以及为创建全国首个牛羊免疫无布鲁菌病区制定合理的免疫程序提供了科学依据，同时对布鲁菌病疫苗的研制及国内其他地区布鲁菌病防治具有参考价值和指导作用。

关键词：布菌病疫苗；免疫效果；比较中图分类号：S859.797文献标志码：A文章编号：1674-6422（2024）01-0088-08Comparison of the Immunization Eff ects of Six Kinds of Brucellosis VaccinesWorked on Sheep and GoatsLI Xin 1, XU Wentao 1, JI Yatu 1, DUAN Liping 1, ZHAO Bei 1, YANG Dan 2, DONG Kexue 3,DI Dongdong 4, FAN Weixing 5(1. Animal Disease Prevention and Control Center of Wulate Town, Bayannaoer 015000, China; 2. Comprehensive Support and Techonology Promotion Center of Wengeng Town, Bayannaoer 015000, China; 3. Post-immunization challenge test, Tiankang Biopharmaceutical Co., Ltd., Suzhou 215000, China ; 4. Post-immunization challenge test, Jinyu Biotechnology Co, Ltd,. Huhehaote 010000, China ; 5. China AnimalHealth and Epidemiology Research Center, Qingdao 266000, China)李 鑫1，徐文涛1，吉雅图1，段丽萍1，赵 贝1，杨 丹2，董科学3，狄栋栋4，范伟兴5（1.乌拉特后旗动物疫病预防控制中心，巴彦淖尔015000；2.乌拉特中旗温更镇综合保障和技术推广中心，巴彦淖尔015000；3.天康生物制药有限公司，苏州215000；4.金宇生物技术股份有限公司，呼和浩特010000；5.中国动物卫生与流行病学中心，青岛266000）Abstract: In order to compare immunization eff ects of diff erent Brucellosis vaccines worked on goats and sheep, 385 sheep of native species aged 80-100 days and 275 Erlang Mountain goats aged 80-100 days were randomly selected among 6 towns of the Wulate grassland, they all tested negative of brucellosis, comparative immunization eff ect tests were carried out with six kinds of brucellosis vaccines. RBPT and SA T were adopted to detect the positive conversion rate and antibody titer respectively on 7, 14, 21, 35, 60, 120, 150, 180, 210, 240 and 270 days of experimental group after vaccination. The challenge experiment was carried out 270 days after immunization. The results of RBPT and SA T showed that M5-90Δ26 and S2 were inoculated for sheep and goats obtained fast antibody production, and long duration; The results of the challenge test after immunization showed that the protection ratio of A19 dripped in sheep’s eyes and the protection ratio of A19-ΔVirB12· 89 ·李 鑫等：六种布鲁菌病疫苗对绵羊与山羊免疫效果的比较第32卷第1期with subcutaneous injection of sheep were all 4/6; The protection ratio of M5-90Δ26 with subcutaneous injection of sheep was 4/5, and ReV .1 dripped in goats’ eyes got the same result in 4/5. The ultimate purpose of this experiment is to screen out the ideal vaccine for the establishment of cattle and sheep immunization-free area without brucellosis in the Wulate grassland, and to develop a reasonable immunization program and provide scientifi c basis for the creation of the country's fi rst cattle and sheep immunization-free area without Brucellosis, at the same time, to give reference and guidance for the development, improvement and promotion of brucellosis vaccines and the prevention and treatment of Brucellosis in other regions of China.Key words: Brucellosis vaccines; immunization effect; comparison 布鲁菌病（Brucellosis）是由布鲁菌引起的人、畜共患传染病。

2021年（第42卷）第2期下半月究研S HI Y AN Y A NJ IU布鲁氏菌病是由布鲁氏菌感染引起的人或多种动物共患的急性或慢性传染病，临床上主要表现为妊娠家畜流产、关节肿大等症状。

疫苗接种是目前控制重点疫区布病流行的一种方法,但是接种活疫苗以后，布病感染的疫情被掩盖了，而不是消失了，因为疫苗接种动物与自然患病动物无法甄别，法定检疫措施严重受阻。

笔者应用荧光微球抗体检测试纸条进行了羊布鲁氏菌S2疫苗免疫与自然感染鉴别试验，随机对应用试管凝集试验结果进行复核，结合样品相应的免疫背景，经分析，效率高，准确率高，建议将该方法推广应用于羊布鲁氏菌免疫或感染的筛查、辅助诊断等。

1试验原理荧光标记物采用的是镧系元素及其螯合物经特殊包裹加工而成的荧光微球，荧光强度远高于普通荧光标记物，大大提高了检测的灵敏度。

镧系元素及其螯合物的激发波长和发射波长间有一个较大的Stokes 位移，减少了由激发光引起的特异杂散光对检测的干扰，提高荧光检测稳定性；同时荧光寿命长，消除了环境中荧光物质对待测物的干扰，而且荧光激发波长较宽，发射波长较窄，具有本底低、分辨率高、特异性强的优势。

2试验步骤样品选择：选择试管凝集试验结果阴性羊血清10份，阳性羊血清20份（结合样品采集登记表选择免疫S2疫苗羊血清10份，自然感染羊血清10份），分成阴性对照组、S2疫苗免疫组、自然感染组，每组10份羊血清。

样本稀释：用吸管取9滴样本稀释液，再吸取1滴羊血清在1.5ml 离心管中做10倍稀释并混匀。

撕开检测试纸铝箔包装袋，取出检测试纸，放于平整、洁净的台面上。

用配套吸管吸取已稀释好的样本，垂直而缓慢地滴加2~3滴（约80ul ）到加样孔内。

室温下放置15min ，读数前先将产品配套ID 卡插入便携式荧光免疫分析仪，之后将反应到时间的检测试纸加样孔朝里插入便携式荧光免疫分析仪，点击“快速检测”进行读数。

3结果判定阴性：当LPS 检测值<0.1时，判为阴性。

S2株布鲁氏菌活疫苗免疫效果实验及防控建议李艳军/内蒙古开鲁县动物疫病预防控制中心 028400摘 要：本文通过对S2株布鲁氏菌活疫苗免疫效果实验及防控建议进行了阐述，发现采用正常剂量和加强剂量免疫羊血清抗体的阳转率明显低于加倍剂量免疫羊的血清抗体的阳转率。

为此在免疫的过程中要严格按照S2株布鲁氏菌活疫苗说明书进行操作，确保免疫结果达到国家要求标准，在布病防控中，各部门加强合作，坚持以人为本，加强个人防护，对患病人员积极治疗，最大限度的减轻农牧民的经济负担。

关键词：S2株布鲁氏菌活疫苗；效果实验；防控建议为掌握S2株布鲁氏菌活疫苗对羊群的免疫效果，我市在开鲁县他拉干水库牧铺试验点（存栏羊187只）进行免疫效果试验，设定试验时间为2012年9月25日至2013年3月25日。

现将试验情况报告如下：1 材料与方法1.1 疫苗 猪S2株布鲁氏菌活疫苗（批号1207003），购置中牧实业股份有限公司，每瓶含布鲁氏菌活菌8000亿CFU，用凉水稀释疫苗，每只羊灌服剂量100亿CFU。

1.2 试剂 布病虎红平板凝集抗原：批号201204；布病试管凝集抗原：批号201201；标准阴阳性血清批号201101,2009-1均购置中国兽医药品监察所。

1.3 试验方法 免疫前采血，做虎红平板凝集试验，剔除阳性畜。

选择100只阴性羊分三组免疫，A组1-35号（每头灌服100亿CFU）；B组36-70号（每头灌服200亿CFU）；C组71-100号（每头灌服100亿CFU），于免疫21天时追加免疫100亿CFU。

1.4 疫苗免疫效果测定 口服疫苗后21d、60d、90d、120d、150d采血检测免疫抗体的长效动态。

依据GB/T18646-2002标准检测（虎红平板凝集试验和试管凝集试验）检测血清中的抗体水平。

2 结果2.1 疫苗的安全性 三组羊群接种疫苗后，均未观察到疫苗接种反应，表明S2株布鲁氏菌活疫苗按照试验设计方法口服接种后是安全的。

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s2株布氏杆菌减毒活疫苗免疫效果观察布氏杆菌病(brucellosis)又称布鲁氏菌病，简称布病，是由布氏杆菌属细菌引起的人畜共患自然疫源性传染病。

该病可感染人类、多种家畜和野生动物，引起相似的临床症状与病理损伤，如发热、流产、死胎、不育等，造成巨大的畜牧经济损失，导致严重的公共卫生问题。

家畜布氏杆菌病常发生于牛、猪、羊，是引起人类布氏杆菌病的主要传染源。

为此，世界动物卫生组织(oIe)将布氏杆菌病列为b类动物疫病,我国将其列为二类动物疫病,是国际贸易卫生检疫中必检的传染病。

20XX年10～12月期间，xx规模养殖场先后从天津、唐山、西安引进奶牛258头，与本地奶牛混群饲养。

随着奶牛的大量异地调运，布病疫情出现快速上升的趋势。

20XX年6月至11月，布病感染阳性奶牛的比例从0.85%上升到5.89%，根据检疫结果将布病感染阳性奶牛强行扑杀，然而通过扑杀的措施并没有取得满意的效果。

在混群饲养的规模养殖场中，处于布病感染潜伏期的奶牛数量较大。

至20XX 年2月再次进行检疫时，奶牛群虎红平板凝集阳性率高达30.88%；试管凝集试验阳性率达到22.99%。

从20XX年11月10日～20XX年2月11日，在3个月的时间内感染牛群中44头奶牛发生了流产、死胎的症状，其中虎红平板凝集阳性奶牛39头，占88.64%；试管凝集阳性奶牛31头，占70.45%。

上述检疫结果证实，该规模养殖场发生了布氏杆菌野生强毒株的侵袭和蔓延。

严峻的布病疫情不仅制约了奶牛业的可持续发展，而且威胁着牛乳及其乳制品的安全，成为影响民生的一件大事。

我国对家畜布氏杆菌病采取以检疫净化为主的综合防控措施，同时包括对重点疫区的易感动物接种疫苗，待临床病例逐渐减少和疫情得到有效控制以后，再实施群体和地域的净化[1]。

羊布鲁氏菌病的防治
一.免疫措施：
1、选用S2疫苗免疫：可根据情况选择注射或口服免疫方式。

免疫一次后，免疫期至少可持续3年。

应尽可能提高群体的免疫密度，免疫密度越高，效果越好。

还应尽可能免疫3个月龄至6个月龄的羊，这样可以减少对血清学检疫的干。

二.检疫措施
1、应对羊进行定期检疫。

采用抽检方法进行检疫，但样品数量要具有统计学意义，样品范围要涵盖广泛。

选用S2疫苗免疫的地区，其检疫可在免疫后一年进行。

以后每年至少应进行一次检疫，有条件的应进行二次检疫。

2、检疫以血清学诊断技术为主，但要充分考虑流行病史、临床症状等。

3、检疫采用的血清学诊断技术和判定标准：1筛选试验：布鲁氏菌病虎红平板凝集试验(RBPT)，血清0.03ml判定为阳性反应。

2正式试验：试管凝集试验(SAT)，血清1∶50(＋＋)以上为阳性。

补体结合试验(CFT)，血清1∶10(＋＋)以上为阳性。

鉴别试验：提纯布鲁氏菌病抗原CFT，血清1∶10(＋＋)以上为阳性。

4. 病畜判定：
凡具备下列一项者判为病畜：
分离出布鲁氏菌；或正式试验中，有一项或二项试验出现阳
性，或初筛试验为阳性，并有流行病学接触史和临床症状者。

5. 其他措施：除采取免疫、检疫的技术措施外，还需结合以淘汰病畜、加强种畜管理、推广人工授精等其他防治措施。

2018—2021年甘肃省武威市羊布鲁氏菌S2疫苗免疫抗体监测王建军;张金学;方玉鹏;马金宝;董伟;李晓燕;魏晓燕【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2023(40)1【摘要】为全面了解甘肃省武威市羊布鲁氏菌S2疫苗的口服免疫效果,掌握大群体免疫的抗体变化情况,2018—2021年,通过虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT),对71个口服免疫S2疫苗的规模羊场户,采集8243份羊血液样本进行免疫抗体检测。

结果显示:口服免疫S2疫苗(1×10^(10)CFU剂量)后28d的免疫抗体转阳率为55.62%,60 d为16.72%;2018—2021年,免疫后28 d的免疫抗体转阳性率为53.21%~57.91%,60 d为15.55%~17.81%,年度间无显著差异(P>0.05);天祝县免疫后28 d的免疫抗体转阳率最高,民勤县最低,差异显著(0.010.05),县区间免疫后60 d的免疫抗体转阳率均无显著性差异(P>0.05);藏羊(59.04%)、高山细毛羊(58.06%)免疫后28 d的抗体转阳率较高,小尾寒羊最低(51.94%),差异显著(0.010.05),免疫后60 d品种间均无显著性差异(P>0.05);免疫后28 d,存栏量小于100只和大于100只的羊场户抗体转阳率无显著性差异(P>0.05),而免疫后60 d差异极显著(P<0.01)。

结果表明:武威市羊群S2疫苗口服免疫后的抗体转阳率总体不高,抗体存续时间较短;不同年度、不同县区的免疫效果基本一致;藏羊、高山细毛羊的免疫效果好于小尾寒羊,小规模羊群的免疫效果略好于大规模羊群。

结果提示,布鲁氏菌病免疫需综合考虑大群免疫影响因素,探索适宜的疫苗免疫模式和免疫剂量,确保免疫覆盖率,以提升群体的整体免疫效果。

【总页数】5页(P12-16)【作者】王建军;张金学;方玉鹏;马金宝;董伟;李晓燕;魏晓燕【作者单位】武威市畜牧兽医科学研究院;华中农业大学动物医学院【正文语种】中文【中图分类】S851.3【相关文献】1.羊免疫布鲁菌病疫苗(S2株)免疫抗体长期监测结果的试验2.布鲁氏菌S2、M5及A19疫苗免疫羊抗体消长规律研究3.布鲁氏菌S2疫苗阴道途径免疫羊的安全性初步研究4.羊布鲁氏菌S2疫苗免疫与自然感染鉴别方法5.布鲁氏菌病温敏凝胶活疫苗(S2株)对羊不同黏膜途径免疫效果的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

羊群布鲁氏菌病免疫检测比较试验作者：刘莹李洁等来源：《兽医导刊》 2019年第7期刘莹1 李洁1 孙涛1 孙玉霜1 史炳2 曹建森2 刘建文11. 天津市动物疫病预防控制中心2. 天津市西青区畜牧兽医站布鲁氏菌病（Brucellosis），又称地中海弛张热、马耳他热、波浪热，是由布鲁氏菌引起的人和牛、羊、猪等的重要人畜共患病。

羊是重要易感动物, 以母畜流产和公畜睾丸炎为主要特征。

世界动物卫生组织（OIE）将布鲁氏菌病列为B 类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。

布鲁氏菌病的流行严重影响我市畜牧业发展和公共卫生安全。

天津市属于布鲁氏菌病防控一类地区，我市采取肉羊布鲁氏菌病强制免疫和监测净化的防治策略，对种羊采取非免疫监测净化的策略。

本试验采用三种不同血清学检测方法——布鲁氏菌病抗体cELISA 检测技术、免疫胶体金快速检测技术及虎红平板凝集检测技术，在羊群经口免疫S2 疫苗后进行抗体监测，旨在了解羊群免疫布鲁氏菌S2 疫苗后的抗体阳性率消减规律及不同血清学检测方法敏感性的比较，为制定科学合理的免疫净化程序和抗体检测方法的选取提供理论依据，为我市肉羊布鲁氏菌病免疫和防控工作提供参考。

一、材料与方法1. 实验材料试验设计1）试验动物。

随机选取某集约化肉羊养殖场60 日龄健康绵羊30 只。

肉羊的饲养场所、饲料、饲养人员等养殖情况均相同。

2）免疫疫苗。

羊群免疫所用疫苗为同一批次布鲁氏菌弱毒活疫苗（S2 株），疫苗在有效期内，购自新疆天康畜牧生物技术股份有限公司。

3）诊断试剂。

三种血清学检测试剂分别是：虎红平板凝集试验抗原及阴阳性对照血清（购自中国兽医药品监察所）、牛布鲁氏菌病抗体胶体金检测卡（购自深圳市绿诗源生物技术有限公司）、牛布鲁氏菌病抗体ELISA 试剂盒（由哈尔滨兽医研究所提供）。

4）仪器设备：移液器、离心管、离心机、酶标仪。

2. 试验方法。

对备选健康羊群经口免疫接种布鲁氏菌病（S2）弱毒苗，标准剂量为6×1010CFU 活菌。

综 述中国民间疗法C H I N A S N A T U R O P A T H Y ,J u n .2023,V o l .31N o .11җ基金项目:2019年内蒙古自治区自然科学基金面上项目(2019M S 08182);2018年内蒙古自治区应用技术研究与开发项目(2060402)通信作者:梁秀文,E -m a i l :h l b e 2018@126.c o m第一作者:梁晨,E -m a i l :l i a n gc h e n -1984@163.c o m 布鲁菌病疫苗的研究进展җ梁 晨1魏 伟2,梁秀文1德恩金1(1.内蒙古自治区呼伦贝尔市人民医院,内蒙古呼伦贝尔021008;2.内蒙古自治区呼伦贝尔市疾病预防控制中心,内蒙古呼伦贝尔021008)ʌ摘要ɔ 布鲁菌病是一种由布鲁菌感染引起的人畜共患性传染病㊂布鲁菌病疫苗的发展经历了灭活疫苗㊁减毒活疫苗和减毒粗疫苗等阶段,临床常用的减毒活疫苗包括S 19㊁R e v .1㊁S 2和R B 51,然而上述疫苗存在一定缺陷,如残留毒性和干扰常规血清学试验结果判定等㊂随着分子生物学技术的发展和医学界对布鲁菌致病机制的深入了解,新的基因工程疫苗取得了一定进展㊂该文简要回顾近年来布鲁菌病疫苗的研究进展㊂ʌ关键词ɔ 布鲁菌病;减毒活疫苗;基因工程疫苗;新型疫苗中图分类号:R 259 文献标识码:A D O I :10.19621/j.c n k i .11-3555/r .2023.1137 布鲁菌病是由布鲁菌感染引起的人兽共患传染病㊂布鲁菌为革兰阴性胞内寄生菌,以羊种布鲁菌㊁牛种布鲁菌和猪种布鲁菌较为常见[1]㊂人感染布鲁菌的临床表现多样,可见发热㊁多汗㊁乏力㊁关节肌肉疼痛等症状,治疗不当或治疗不及时可转为慢性,导致疾病迁延不愈㊂家畜感染布鲁菌可出现流产㊁不孕㊁繁殖成活率低等,使家畜数量明显减少,严重制约畜牧业发展[2]㊂疫苗接种是防治布鲁菌病的主要手段,早期以灭活疫苗为主,后期主要选用免疫效力更好的减毒活疫苗,其中用于家畜的疫苗包括S 19㊁R e v .1㊁S 2㊁M 5和R B 51等,用于人类的疫苗包括104M 和19-B A 等,然而有些疫苗存在一定缺陷,限制其广泛应用[3]㊂随着对布鲁菌致病机制研究的深入,以及相关分子生物学技术的发展,新型疫苗㊁基因工程疫苗取得了一定进展,现简述如下㊂1 传统布鲁菌疫苗目前,临床常用的动物布鲁菌疫苗有S 19㊁R e v .1㊁S 2㊁M 5和R B 51,均为减毒活疫苗,为控制布鲁菌病疫情㊁减少畜牧业经济损失发挥着重要作用[4]㊂布鲁菌减毒活疫苗通过筛选毒力较低的布鲁菌分离株或分离强毒株传代获得,与灭活疫苗相比,布鲁菌减毒活疫苗可激发动物机体的细胞免疫应答,具有免疫保护作用更持久㊁接种途径多样㊁成本低廉等优势[5]㊂1.1 牛种布鲁菌S 19疫苗 S 19疫苗是一种广泛应用于奶牛布鲁菌病防控的疫苗,是牛种布鲁菌19的全菌制剂,被印度㊁阿根廷和巴西等许多国家参考使用,于1958年被引入中国[6]㊂S 19疫苗最初是20世纪初从一头娟姗牛的乳汁中分离出的一种毒性菌株,在室温下自然衰减1年获得的光滑型突变体[7]㊂目前临床使用的S 19疫苗是美国科学家挑选出来的一种赤藓糖醇(E r y )敏感的S 19菌株㊂E r y 基因包含4个开放阅读框:E r y A ㊁E r y B ㊁E r y C 和E r y D ㊂S 19存在702b p 的核苷酸序列缺失,从而影响到E r yC (b a b 2_0370)和E r yD (b a b 2_0369)的编码区域,从而使S 19对E r y 敏感[8]㊂S 19是光滑的布鲁菌菌株表型,其脂多糖含有O -多糖,可以持续刺激动物产生抗脂多糖抗体,干扰已产生免疫动物和自然感染动物之间的常规血清学检测,此外可导致怀孕奶牛流产,引起公牛持续的睾丸炎[9]㊂S 19的免疫效果取决于接种动物的年龄㊁接种途径和剂量㊁感染途径等因素㊂改进和保持S 19疫苗良好的免疫原性和遗传稳定性,有可能通过添加标记基因提高鉴别诊断的效率和简便性㊂目前,可以使用多个候选对象作为标记基因,如B P 26和p 39基因[10]㊂此外,S 19对人类具有一定程度的致病力㊂近年来,世界各地均有报告指出,在S 19疫苗生产或接种过程中造成人员感染布鲁菌[8]㊂未来可利用缺失的702b p221 中国民间疗法2023年6月第31卷第11期Copyright ©博看网. All Rights Reserved.综 述中国民间疗法C H I N A S N A T U R O P A T H Y ,J u n .2023,V o l .31N o .11片段区分S 19和其他野毒株,并应用重组D N A 技术开发出更好的㊁安全性更高的S 19疫苗[11]㊂我国目前使用A 19疫苗替代S 19,A 19毒力介于S 2和M 5疫苗之间,对牛的免疫效果较好㊂1.2 羊种布鲁菌R e v .1疫苗 R e v .1疫苗是一种链霉素耐药的光滑型羊种布鲁菌菌株㊂20世纪60年代在希腊㊁约旦㊁塔吉克斯坦㊁蒙古和西班牙等国用于预防动物布鲁菌病㊂实验证实羊接种R e v .1疫苗后产生的免疫应答效果与S 19接近,但保护力较强[12],能有效降低母羊流产的概率㊂该疫苗通过黏膜产生免疫,主要在头颅淋巴结内进行复制,对常规血清学诊断影响较小㊂由于R e v .1带有链霉素耐药性,所以使用链霉素和四环素治疗布鲁菌病的效果不佳,应引起注意㊂R e v .1疫苗的缺点是在某些特定条件下可完全恢复R e v .1菌株毒性而导致怀孕牲畜流产,且R e v .1菌株在动物体内具有较长的存活期,可通过分泌物和乳汁传播㊂R e v .1疫苗的上述缺点可以通过减少剂量来克服,但在羊布鲁菌已被根除的国家禁止使用[7]㊂1.3 羊种布鲁菌M 5疫苗 M 5疫苗是1962年由哈尔滨兽医研究所研制,通过弱化强毒株M 28得到的弱毒株㊂应用M 5疫苗不使用佐剂,其免疫途径为气雾免疫,剂量为5ˑ109c f u ㊂1970年我国首次大规模使用M 5疫苗对绵羊和山羊进行接种实验,效果显著,接种动物产生较好的免疫保护力㊂与M 28疫苗和M 16相比,M 5疫苗的毒力明显降低[2,13]㊂M 5疫苗的研发对我国动物布鲁菌病的防控发挥了积极作用㊂然而M 5疫苗毒力强并且可以引起高血清反应,为国产疫苗中毒力最强的菌株,且较不稳定,基因组突变通常发生在培养阶段,另外无法区分感染或接种后产生的免疫应答㊂鉴于其存在以上缺点,国内布鲁菌病疫区很少使用M 5疫苗,2017年我国原农业部已下发文件停止使用M 5疫苗㊂1.4 猪种布鲁菌S 2疫苗 S 2疫苗是1952年中国兽医药品监察所在猪流产胎儿体内分离得到的猪种布鲁菌毒株,经培养基连续传代后的光滑型弱毒株㊂应用S 2疫苗不使用佐剂,通过口服方式,可有效预防猪布鲁菌感染㊂对于牛㊁绵羊㊁山羊等易感家畜,口服S 2疫苗也能提供满意的防护效果㊂与S 19和R e v .1相比,S 2疫苗具有较低的残留毒性㊁疫苗生产成本低且可以口服免疫等优点㊂然而研究显示,在大型动物中,S 2的免疫保护力低于S 19和R e v .1,刺激机体产生抗体持续时间较短㊂1.5 牛种布鲁菌R B 51疫苗 R B 51疫苗是牛种布鲁菌2308的一个自发突变株,该疫苗未使用佐剂㊂R B 51为粗糙型疫苗株,菌株中编码糖基转移酶的w h o A 基因被I S 711插入序列破坏,从而表现为粗糙型,用R B 51免疫的动物易与自然感染区分[14]㊂R B 51菌株比较稳定,与S 19相比毒力弱,美国㊁墨西哥等国家用R B 51疫苗替代S 19疫苗用于奶牛布鲁菌病的免疫㊂R B 51具有利福平抗性,易通过选择性培养基进行分离鉴定,但不利于布鲁菌病的常规治疗㊂R B 51可感染人类,多因针刺损伤意外暴露引起[15]㊂2 基因工程疫苗随着同源重组技术的发展,一些基因工程减毒菌株逐渐进入大众视野㊂通过干扰参与脂多糖(L P S )生物合成途径的必需基因如p e r ㊁p g m ㊁w b o A ㊁w b k A 等得到粗糙型突变体,其优点在于不干扰常规血常规诊断而且毒力明显降低㊂其他突变体如p u r l ㊁pu r d ㊁p u r e ㊁b a c a ㊁h e m h ㊁v i r b 或p g k 基因的破坏后得到了较好免疫保护力[2,7,16]㊂尽管前期试验结果较好,但是这些突变体在动物身上大规模的试验还有待进行㊂2.1 亚单位疫苗 亚单位疫苗的合成原料为重组布鲁菌属蛋白,疫苗的佐剂为完全氟化物佐剂或不完全氟化物[7,17]㊂有学者通过研究小鼠模型发现,许多布鲁菌膜和细胞溶质蛋白可起到保护性抗原的作用,包括L 7/L 12核糖体蛋白㊁外膜蛋白(O m p )2b ㊁O m p31㊁O m p 16㊁O m p 19㊁铜锌超氧化物歧化酶(C u /Z n -S O D )㊁22.9-k d a 蛋白㊁二氧四氢蝶啶合成酶及核苷二磷酸㊂然而与S 19疫苗相比,部分重组蛋白在体内的免疫效果较差[18]㊂尽管O m p 16和O m p19自身具有佐剂特性,但大多数重组蛋白需要协同使用佐剂以增强免疫反应㊂使用佐剂往往会引起不良反应,如注射部位的局部炎症㊁肉芽肿的形成或无菌性脓肿㊂因此,今后应更加广泛地致力于开发新的重组蛋白疫苗,由多个布鲁菌抗原组成,而且具有自身佐剂特性㊂2.2 D N A 疫苗 D N A 疫苗即用表达特定抗原基因的质粒进行疫苗接种,已成为开发布鲁菌病疫苗的新方向㊂这些疫苗含有编码布鲁菌属基因的重组质粒,无须佐剂㊂D N A 疫苗可编码以下基因:L 7/L 12,B L S ㊁BC S P 31㊁C u /Z n -S OD ㊁O m p 16㊁P 39和B a b 1-0278[9,19]㊂有两种方法可以提高D N A 疫苗或使免疫321中国民间疗法2023年6月第31卷第11期 Copyright ©博看网. All Rights Reserved.综述中国民间疗法C H I N A S N A T U R O P A T H Y,J u n.2023,V o l.31N o.11反应最大化㊂一种方法是D N A疫苗中表达多种抗原,另一种方法是将细胞因子作为佐剂在D N A疫苗中共同表达,以提高免疫应答㊂尽管已有研究通过动物实验证明大多数D N A疫苗有很好的免疫效果,但在自然宿主中还需进一步的研究[20]㊂3新型疫苗3.1布鲁菌菌壳疫苗布鲁菌壳疫苗通过表达裂解基因E导致细胞壁形成跨膜通道,从而引起菌体内容物外流而形成菌壳[21]㊂疫苗的合成为布鲁菌属的全有机体,不含细胞质成分,也无需添加佐剂㊂研究发现与灭活细菌相比,猪布鲁菌S2菌壳疫苗能显著提高免疫球蛋白G和T细胞应答的产生[22]㊂这种疫苗的缺陷比较明显,如抗生素抗性基因在野生布鲁菌中的水平转移困难等㊂3.2纳米颗粒疫苗纳米颗粒疫苗是布鲁菌属抗原,通过疫苗抗原在纳米载体内或装饰在其表面压缩制成,常将脂多糖作为疫苗佐剂㊂与未结合抗原相比,纳米载体提供了一种合适的抗原给药途径,增强了细胞摄取,从而提高机体免疫效果[5,23]㊂此外,纳米载体可以作为佐剂在淋巴器官中产生免疫反应㊂纳米颗粒疫苗的抗原主要来源于布鲁菌O m p(19㊁25㊁31)㊁R L7/ L12核糖体蛋白㊁L P S或细胞溶质蛋白,可用于布鲁菌病疫苗接种[24]㊂3.3通过逆向疫苗学方法确定候选疫苗人用布鲁菌疫苗研制困难的主要原因可能在于布鲁菌存在多个种型,且保护性抗原谱复杂,单一抗原很难起到完全保护作用㊂随着组学及生物信息学的发展,逆向疫苗学逐渐成为研制新型疫苗的重要方法㊂逆向疫苗学(R V)以组学和生物信息学为基础进行抗原预测,并随后对预测的候选抗原进行验证评价,进而获得有效的保护性抗原用于新型疫苗研制㊂R V方法是基于基因组数据研究而成,一般分3个步骤:①通过计算工具和在线数据库选择基因组分析以确定可能诱导免疫反应的免疫原表位;②合成或生产相关基因克隆㊁抗原肽或蛋白质;③在实验动物模型中检测重组抗原的免疫原性和保护作用[25]㊂虽然研究人员在不同的实验条件下发现了相应的布鲁菌基因表达谱,但是如何使用这些基因设计疫苗仍然是目前面临的一个挑战㊂4小结疫苗是布鲁菌病预防和控制的关键策略,目前仍有部分国家人畜间布鲁菌病流行严重,未来期待更多国家的科研学者投入到布鲁菌病疫苗的研制中,从而减少布鲁菌病对人类㊁牲畜的危害㊂参考文献[1]WA N G Y B,X U C,Z HA N GSJ,e t a l.T e m p o r a l t r e n d sa-n a l y s i so fh u m a n B r u c e l l o s i si n c i d e n c ei n m a i n l a n d C h i n af r o m2004t o2018[J].S c iR e p,2018,8(1):15901.[2]HO U H H,L I U X F,P E N G Q S.T h e a d v a n c e si nB r u c e l l o s i s v a c c i n e s[J].V a c c i n e,2019,37(30):3981-3988.[3]E L B E H I R Y A,A L D U B A I B M,MA R Z O U K E,e ta l.T h ed e v e l o p m e n to fd i a g n o s t i ca n dv a c c i n es t r a t e g i e sf o re a r l yd e t e c t i o na n dc o n t r o lo fh u m a n B r u c e l l o s i s,p a r t i c u l a r l y i ne n d e m i c a r e a s[J].V a c c i n e s(B a s e l),2023,11(3):654.[4]G O O DW I N ZI,P A S C U A L D W.B r u c e l l o s i sv a c c i n e sf o r l i v e s t o c k[J].V e t I mm u n o l I mm u n o p a t h o l,2016,181:51-58.[5]C A R V A L HO T F,HA D D A D J P,P A I XÃO T A,e ta l.M e t a-a n a l y s i s a n d a d v a n c e m e n t o f B r u c e l l o s i s v a c c i n o l o g y[J].P L o SO n e,2016,11(11):e0166582. 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All Rights Reserved.综 述中国民间疗法C H I N A S N A T U R O P A T H Y ,J u n .2023,V o l .31N o .119:e 11679.[14]B L A S C O J M ,MO R E N O E ,MO R I Y ÓN I .E f f i c a c y of B r u c e l l a a b o r t u s S 19a n d R B 51v a c c i n e s t r a i n s:a s y s t e m a t i c r e v i e w a n d M e t a ‐a n a l y s i s [J ].T r a n s b o u n d E m e r g Di s ,2022,69(4):1670-1673.[15]WA N G Z ,WU Q M .R e s e a r c h p r o gr e s s i nl i v ea t t e n u a t e d B r u c e l l av a c c i n ed e v e l o p m e n t [J ].C u r rP h a r m B i o t e c h n -o l .2013,14(10):887-896.[16]G ÓM E Z L ,A L V A R E Z F ,B E T A N C U R D ,e t a l .B r u c e l l o s i s :i m p r o v e d d i a g n o s t i c s a n d v a c c i n e i n s i gh t s f r o m s y n t h e t i c g l y c a n s [J ].V a c c i n e ,2018,36(21):2928-2936.[17]B U N D L E D R ,M C G I V E N J .B r u c e l l o s i s :I m p r o v e dd i a g-n o s t i c s a n dv a c c i n e i n s i g h t s f r o ms y n t h e t i c g l y c a n s [J ].A c c C h e m R e s ,2017,50(12):2958-2967.[18]A V I L A -C A L D E R ÓN E D ,L O P E Z -M E R I N O A ,S R I R A N -G A N A T H A N N ,e t a l .Ah i s t o r y o f t h e d e v e l o pm e n t o fB r u -c e l l a v a c c i n e s [J ].B i o m e dR e s I n t ,2013,2013:743509.[19]B Y N D L O S SM X ,T S O L I SR M .B r u c e l l a s p p .v i r u l e n c e f a c t o r s a n d i m m u n i t y[J ].A n n uR e vA n i mB i o s c i ,2016,4:111-127.[20]D O R N E L E S E M ,S R I R A N G A N A T HA N N ,L A G E AP .R e c e n ta d v a n c e s i n B r u c e l l aa b o r t u sv a c c i n e s [J ].V e tR e s ,2015,46(1):1-10.[21]B E A U V A I S W ,M U S A L L A M I ,G U I T I A N J .V a c c i n a t i o nc o n t r o l p r o g r a m s f o rm u l t i p l e l i v e s t o c kh o s t s p e c i e s :a na ge -s t r a t if i e d ,s e a s o n a l t r a n s m i s s i o n m o d e l f o rB r u c e l l o s i sc o n t r o li n e n d e m i c s e t t i n gs [J ].P a r a s i tV e c t o r s ,2016,9:1-10.[22]X I EJG ,W A N G J ,L I ZY ,e t a l .O n t o l o g y -b a s e d M e t a -a n a l ys i s o f a n i m a la n dh u m a na d v e r s ee v e n t sa s s o c i a t e d w i t hl i c e n s e d B r u c e l l o s i s v a c c i n e s [J ].F r o n t P h a r m a c o l ,2018,9:503.[23]K A R E V A N G ,A HMA D I K ,T A H E R I R A ,e ta l .I mm u n o g e n i c i t y o f g l y c i n en a n o p a r t i c l e sc o n t a i n i n g ac h i m e r i ca n t i g e na s B r u c e l l av a c c i n ec a nd i d a te [J ].C l i n E x p Va c c i n eR e s ,2021,10(1):35.[24]L IS L ,HU A N G J ,WA N G K F ,e ta l .Ab i oc o n j u ga t e v a c c i n ea g a i n s tB r u c e l l aab o r t u s p r o d uc e db y e n g i n e e r ed E s c he r i c h i a c o l i [J ].F r o n t B i o e n g Bi o t e c h n o l ,2023,11:112074.[25]H E Y .A n a l y s e so fB r u c e l l a p a t h o g e n e s i s ,h o s t i mm u n i t y,a n dv a c c i n e t a r g e t s u s i n g s y s t e m s b i o l o g y an db i o i n f o r m a -t i c s [J ].F r o n tC e l l I n f e c tM i c r o b i o l ,2012,2:2.(收稿日期:2022-02-06)(上接第121页)照海支沟热秘摩方为治疗热结肠腑大便秘结者之用方㊂照海为足少阴肾经穴,又为八脉交会穴之一,通于阴跷,导肾元之气通达于八脉㊂肾开窍于二阴,血海充盈,肠腑得濡,则大便通畅㊂‘针经指南“谓照海主治大便不通 ㊂支沟为手少阳三焦经经穴,通利三焦,布津于六腑,而润肠通便㊂‘扁鹊神应针灸玉龙经“云: 大便闭塞不能通,照海分明在足中;更把支沟来泻动,方知医士有神功㊂ 足三里为足阳明胃经合穴,有健脾胃㊁调气血㊁通肠腑之功,与支沟配伍而泄热通便㊂中脘健脾和胃,消食导滞,是小儿胃肠道疾病常用穴位㊂清大肠可以荡涤下焦邪热积滞;顺时针摩腹以通便;运内八卦自乾卦经坎㊁艮㊁震㊁巽㊁离㊁坤运至兑卦,能安和五脏,通和六腑;退六腑能清热凉血解毒而通便;推下七节骨可泄热通便而治肠热便秘㊂4 小结小儿便秘为临床常见病㊁多发病,在临床上以保守治疗为主,包括饮食调整㊁排便习惯训练及手法协助治疗㊂饮食调整为增加液体和富含纤维膳食的摄入量㊂排便习惯训练为定点㊁限时㊁规律排便㊂患者每日晨起坐便盆,排便时间控制在5~10m i n ,并使用正确方法排便,养成良好的排便习惯㊂手法协助治疗为通过肛门指诊㊁栓剂或洗肠等刺激排便[4]㊂中医常用治法包括药物内服㊁药物熏洗㊁穴位贴敷及小儿推拿等,其中小儿推拿疗法具有操作方便㊁安全无毒副作用㊁患儿易于接受㊁效果好等特点,深受患儿及家长青睐,值得临床推广运用㊂此外,便秘患儿平时应合理搭配饮食,切不可乱用泻药,以防造成肠道功能紊乱㊂参考文献[1]柳少逸.小儿推拿讲稿:广意派传承录[M ].北京:中国中医药出版社,2016:108.[2]柳少逸.经络腧穴原始[M ].北京:中国中医药出版社,2015:208.[3]亢弘扬.小儿推拿辅助治疗婴幼儿功能性便秘疗效分析[J ].内蒙古中医药,2014,33(31):54.[4]中华医学会小儿外科分会肛肠外科学组.儿童功能性便秘诊断标准与治疗流程[J ].中小儿外科杂志,2011,32(8):629-630.(收稿日期:2022-03-28)521中国民间疗法2023年6月第31卷第11期 Copyright ©博看网. 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羊免疫布鲁菌病疫苗(S2株)免疫抗体长期监测结果的试验苏胜杰;马立峰;戴晓光;申捷;萨茹拉;郭少平;赵心力【摘要】为探究羊经布鲁菌病疫苗(S2株)免疫后的血清抗体长期动态消长规律,本试验于2012年9月-2015年9月选取阿拉善盟阿拉善左旗96只山羊、100只绵羊作为试验动物,经布鲁菌疫苗(S2株)100亿CFU、200亿CFU不同免疫剂量灌服,分别于免疫前和免疫后不同时间段采血分离血清,应用虎红平板凝集试验和试管凝集试验进行抗体监测.结果表明,绵羊组在一免后20 d时,血清抗体阳性率达到最高峰,之后呈下降趋势,150 d抗体阳性率降至0％,免疫后180 d ～360 d,绵羊组抗体阳性率一直处于较低水平(0％～4％),二免和三免后不同时间段免疫抗体消长规律与首次免疫基本一致;山羊组抗体阳性率在免疫后20 d时,血清抗体阳性率达到最高峰,之后呈下降趋势,免疫后90 d～360 d,免疫抗体时高时低,起伏较大,无明显规律,二免和三免后不同时间段免疫抗体消长规律与首次免疫基本一致,结果同时表明,100亿CFU和200亿CFU两个免疫剂量组的抗体阳性率无明显差异.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2019(055)003【总页数】4页(P29-32)【关键词】绵羊;山羊;布鲁菌;抗体;监测【作者】苏胜杰;马立峰;戴晓光;申捷;萨茹拉;郭少平;赵心力【作者单位】内蒙古自治区动物疫病预防控制中心,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古自治区动物疫病预防控制中心,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古自治区动物疫病预防控制中心,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古自治区动物疫病预防控制中心,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古自治区动物疫病预防控制中心,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古阿拉善盟动物疫病预防控制中心,内蒙古阿拉善750306;内蒙古自治区动物疫病预防控制中心,内蒙古呼和浩特010010【正文语种】中文【中图分类】S853.31布鲁菌病,是由布鲁菌引起人、家畜和多种野生动物共患的一种慢性细菌性传染病,简称布病。

布鲁氏菌病活疫苗（S2株）Bu lu shijunbing Huoyimiao（S2 Zhu）Brucellosis Vaccine，Live（Strain S2）本品系用猪种布鲁氏菌S2株（CVCC 70502）接种适宜培养基培养，收获培养物，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。

用于预防羊、猪和牛布鲁氏菌病。

【性状】海绵状疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。

【纯粹检验】按附录3306纯粹检验法进行检验，应纯粹。

【变异检验】将疫苗适当稀释后接种胰蛋白䏡琼脂平板，置37℃培养至少72小时，用布鲁氏菌菌落结晶紫染色法（附录3301）检查，粗糙型菌落应不超过5.0％。

【活菌计数】按瓶签注明头份，将疫苗用蛋白胨水稀释，接种胰蛋白䏡琼脂平板进行活菌计数（附录3405），每头份含活菌数应不少于1.0×1010 CFU。

【安全检验】将疫苗稀释成每1.0 ml含0.1头份，皮下注射体重18～20 g小鼠5只，各0.25 ml，观察6日，应全部健活。

【剩余水分测定】按附录3204进行测定，应符合规定。

【真空度测定】按附录3103进行测定，应符合规定。

【作用与用途】用于预防羊、猪和牛布鲁氏菌病。

免疫期：羊为36个月，牛为24个月，猪为12个月。

【用法与用量】口服、皮下或肌肉注射接种。

口服羊，每只1头份；牛，每头5头份；猪，每头2头份，间隔1个月，再口服1次。

怀孕母畜口服后不受影响。

畜群每年口服接种1次，长期使用，不会导致血清学的持续阳性反应。

皮下或肌肉注射山羊，每只0.25头份；绵羊，每只0.5头份；猪，接种2次，每次每头2头份，间隔1个月。

【注意事项】（1）注射法不能用于孕畜、牛和小尾寒羊。

（2）疫苗开启后，限当日用完。

（3）拌水饮服或灌服时，应注意用凉水。

若拌入饲料中，应避免使用含有添加抗生素的饲料、发酵饲料或热饲料。

动物在接种前、后3日，应停止使用含有抗生素添加剂饲料和发酵饲料。

（4）采用注射途径接种时，应作局部消毒处理。

S2株、M5株布氏杆菌减毒活疫苗对山羊免疫效果比较试验鲁志平;杨晓玲;申晓莉;黄园媛;朱波;叶春;谭春青【期刊名称】《河南畜牧兽医（综合版）》【年(卷),期】2015(036)012【摘要】通过对36只不同日龄、不同性别的健康山羊(含妊娠母羊6只)随机平均分组,分别口服S2株、M5株布氏杆菌减毒活疫苗后,在7d、14d、21d、42 d、90 d对血液中布氏杆菌抗体进行检测,对S2、M5诱导的抗体消长动态进行分析及疫苗安全性评价,最终研究确定出S2可适用于不同日龄、不同性别山羊广泛使用,也适用于妊娠期间山羊的免疫,能有效预防布病的发生,减少由此导致的经济损失;M5可引起妊娠母羊免疫副反应及严重的流产症状.【总页数】4页(P7-10)【作者】鲁志平;杨晓玲;申晓莉;黄园媛;朱波;叶春;谭春青【作者单位】遂宁市动物疫病预防控制中心,四川遂宁629000;四川省大竹县动物疫病预防控制中心;四川省大竹县动物疫病预防控制中心;四川省大竹县动物疫病预防控制中心;四川省大竹县动物疫病预防控制中心;四川省大竹县动物疫病预防控制中心;遂宁市动物疫病预防控制中心,四川遂宁629000【正文语种】中文【中图分类】S858.27【相关文献】1.羊布氏杆菌病活疫苗(S2株)不同免疫方法效果观察 [J], 林怀明2.S2株布氏杆菌减毒活疫苗免疫效果观察 [J], 王天齐;史开志;肖硕;余启茂3.接种国产BRDⅡ株风疹减毒活疫苗后免疫效果的10年观察 [J], 贾冠村;秦绪文4.H_2株甲肝减毒活疫苗安全性及免疫效果观察 [J], 杨净思;陈洪波;杨晓蕾;杨伟;丁雪凤;张云昆;潘玥;张鸣5.布氏杆菌S2疫苗株特有基因trbJ的LAMP检测方法建立 [J], 穆嘉明;毛晓伟;石雅琴;秦云;王文龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。